專(zhuān)利名稱(chēng)：一種用于體外細(xì)胞共培養(yǎng)的復(fù)合微囊模型的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種動(dòng)物細(xì)胞體外共培養(yǎng)模型。
背景技術(shù)：
在體內(nèi)，細(xì)胞處于一個(gè)高度信息化的微環(huán)境中，其間充斥著各種復(fù)雜的物理化學(xué)信號(hào)，細(xì)胞對(duì)各種信號(hào)刺激做出響應(yīng)，以實(shí)現(xiàn)其特定的生物學(xué)功能。細(xì)胞與這種微環(huán)境間的相互作用包括來(lái)自周?chē)?xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)和可溶性因子的各種復(fù)雜的生物化學(xué)、生物力學(xué)和生物電學(xué)信號(hào)。其中，細(xì)胞與細(xì)胞之間是通過(guò)直接接觸或旁分泌可溶性因子而發(fā)生相互作用。這種細(xì)胞間的通訊作用是維持細(xì)胞、組織及器官結(jié)構(gòu)與功能的重要環(huán)節(jié)，同時(shí)也是調(diào)節(jié)體內(nèi)外組織修復(fù)與重建的關(guān)鍵因素，而缺少這種通訊作用則是某些細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)功能喪失以及分化異常、腫瘤發(fā)生的潛在原因。在細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中，如何有效模擬體內(nèi)微環(huán)境、調(diào)控細(xì)胞與外界微環(huán)境間的相互作用，對(duì)于細(xì)胞形態(tài)與功能的維持以及體外組織的仿生重建至關(guān)重要。細(xì)胞共培養(yǎng)(cell co-culture)技術(shù)是將多種細(xì)胞(可以來(lái)自同一組織，也可以來(lái)自不同的組織)進(jìn)行共同培養(yǎng)，從而使目的細(xì)胞的形態(tài)與功能穩(wěn)定表達(dá)，并維持較長(zhǎng)的時(shí)間和較高的水平。該技術(shù)能夠有效地模擬體內(nèi)微環(huán)境，是目前體內(nèi)外組織結(jié)構(gòu)及其功能重建的常用手段之一。傳統(tǒng)共培養(yǎng)方式主要有接觸式和非接觸式共培養(yǎng)。接觸式共培養(yǎng)是在合適的培養(yǎng)條件下，將多種細(xì)胞按照一定比例混合接種到同一培養(yǎng)環(huán)境中進(jìn)行共同培養(yǎng)。非接觸式共培養(yǎng)主要是指用一種細(xì)胞的培養(yǎng)上清液(含有不同生長(zhǎng)因子等)直接或間接的與另外一種細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，從而達(dá)到研究細(xì)胞的分泌或代謝產(chǎn)物對(duì)目的細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移、增殖、分化等生物學(xué)行為影響的目的。然而，傳統(tǒng)接觸式共培養(yǎng)很難調(diào)控體系中同型與異型細(xì)胞間相互作用比例，且后期深入研究時(shí)也很難有效的把不同種細(xì)胞分離開(kāi)。而非接觸式共培養(yǎng)體系僅能部分模擬體內(nèi)細(xì)胞間的相互作用，缺乏由異種細(xì)胞間直接接觸而導(dǎo)致的胞間作用。近年來(lái)，隨著工程學(xué)、材料學(xué)等相關(guān)學(xué)科的發(fā)展，出現(xiàn)了一些新的用于調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)微環(huán)境的細(xì)胞共培養(yǎng)方法。其中，一種具有突破性的調(diào)控方法是進(jìn)行圖案化細(xì)胞共培養(yǎng)。其原理是通過(guò)在基質(zhì)材料表面不同區(qū)域進(jìn)行特定修飾而形成細(xì)胞粘附生長(zhǎng)的圖案化區(qū)域，使不同細(xì)胞選擇性地粘附在材料表面的不同區(qū)域，或通過(guò)可移除的物理障礙將不同細(xì)胞限制在圖案化的不同區(qū)域內(nèi)生長(zhǎng)而實(shí)現(xiàn)共培養(yǎng)。該共培養(yǎng)方法可以將細(xì)胞精確地定位在基質(zhì)材料表面，更好的調(diào)控細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中的空間分布和更加精確的控制同型和異型細(xì)胞間的相互作用比例，維持目的細(xì)胞的生物學(xué)活性，為揭示細(xì)胞與細(xì)胞以及細(xì)胞與基底相互作用基本機(jī)理提供有力工具，是一種用于研究細(xì)胞間相互作用和工程化組織重建的有效途徑。然而，該共培養(yǎng)方法操作較為復(fù)雜，基底材料制備工藝較為繁瑣，且只限于貼壁細(xì)胞的共培養(yǎng)，極大的限制了其應(yīng)用范圍。同時(shí)，細(xì)胞在該體系中仍處于二維培養(yǎng)環(huán)境中，而二維細(xì)胞培養(yǎng)方式不能提供類(lèi)似于體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的三維空間微環(huán)境，對(duì)細(xì)胞形態(tài)、功能表達(dá)等許多生物學(xué)特征產(chǎn)生不利影響。研究表明，在三維培養(yǎng)體系中細(xì)胞的生長(zhǎng)方式更接近體內(nèi)，能夠更為真實(shí)的模擬復(fù)雜的體內(nèi)細(xì)胞微環(huán)境。因而，模擬體內(nèi)微環(huán)境，開(kāi)發(fā)新型的用于調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)微環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)方法，對(duì)于體外研究細(xì)胞行為、揭示細(xì)胞與基質(zhì)微環(huán)境間的相互作用至關(guān)重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是克服以上現(xiàn)有的細(xì)胞體外共培養(yǎng)中存在的缺點(diǎn)與不足，提供一種新型的細(xì)胞體外三維共培養(yǎng)模型，即用于體外細(xì)胞共培養(yǎng)的復(fù)合微囊模型。本發(fā)明為模擬體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)微環(huán)境，利用微囊技術(shù)，以天然多糖海藻酸鈉為基質(zhì)材料，構(gòu)建海藻酸鈉微囊化細(xì)胞體外三維培養(yǎng)模型。本發(fā)明提供的用于體外細(xì)胞共培養(yǎng)的復(fù)合微囊模型，是以天然多糖海藻酸鈉為基質(zhì)材料，經(jīng)過(guò)兩次將多糖海藻酸鈉滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中凝膠化處理，形成由內(nèi)外兩層海藻酸鈉凝膠微球構(gòu)成的球包球式復(fù)合微囊模型，其中在一層凝膠微球中包含或不包含一種細(xì)胞，如細(xì)胞A，在另一層凝膠微球中包含或不包含另一種細(xì)胞，如細(xì)胞B。其中所述的多價(jià)陽(yáng)離子是鈣、鋅、鋇、銅、鎂、鐵、錳離子。所述的內(nèi)層凝膠微球的粒徑范圍在50-600 μ m，外層凝膠微球的粒徑范圍在 100-3000 μ m0本發(fā)明所述的復(fù)合微囊模型的構(gòu)建方法，包括
第1、將經(jīng)過(guò)濾滅菌的海藻酸鈉溶液滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中凝膠化處理，形成海藻酸鈉凝膠微球；所述的海藻酸鈉溶液中選擇性添加或不添加細(xì)胞A ；
第2、收集凝膠化的海藻酸鈉凝膠微球，用生理鹽水(0. 9%NaCl溶液)洗滌，將海藻酸鈉凝膠微球再次分散到經(jīng)過(guò)濾滅菌的海藻酸鈉溶液中，然后將含有海藻酸鈉凝膠微球的海藻酸鈉溶液滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中再次凝膠化處理，形成球包球式復(fù)合微囊模型；所述的海藻酸鈉溶液中選擇性添加或不添加細(xì)胞B ；
第3、收集凝膠化處理后的復(fù)合微囊模型，生理鹽水洗滌，置入細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，加入細(xì)胞培養(yǎng)基，置于二氧化碳培養(yǎng)箱(37°C、5% C02、100%濕度)靜置培養(yǎng)。以上第1步、第2步中所述的海藻酸鈉溶液采用高壓靜電滴液、氣流吹噴滴液或手工注射器滴液的方法滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中凝膠化處理，所述的多價(jià)陽(yáng)離子是鈣、鋅、 鋇、銅、鎂、鐵、錳離子。第1步制備內(nèi)層凝膠微球的海藻酸鈉溶液的質(zhì)量體積濃度為0. 5%_5%，內(nèi)層凝膠微球的粒徑控制在50-600 μ m范圍；
第2步制備外層凝膠微球的海藻酸鈉溶液的質(zhì)量體積濃度為0. 1%_3%，外層凝膠微球的粒徑控制在100-3000 μ m范圍。本發(fā)明還可以在第1步、第2步凝膠化處理后得到的海藻酸鈉凝膠微球表面選擇性包覆一層半透性膜，具體方法是
將生理鹽水洗滌后的海藻酸鈉凝膠微球分散到質(zhì)量濃度為0. 01%-2%的陽(yáng)離子型高分子溶液中處理l-30min分鐘即可；所述的陽(yáng)離子型高分子溶液是多聚賴(lài)氨酸溶液或殼聚糖溶液。本發(fā)明所述的復(fù)合微囊模型可以應(yīng)用于考察細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)以及細(xì)胞-可溶性因子間的相互作用，體外構(gòu)建腫瘤模型、組織工程化各類(lèi)組織器官類(lèi)似物或等同物。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果
1.本發(fā)明采用的基質(zhì)材料天然多糖海藻酸鈉是一種廉價(jià)、無(wú)毒、生物相容性好的聚陰離子型生物材料，在常溫、酸堿中性的生理?xiàng)l件下，可以不使用存在細(xì)胞毒性的交聯(lián)劑，而是利用多價(jià)陽(yáng)離子，使海藻酸鈉溶液發(fā)生相變形成凝膠態(tài)；利用微囊化技術(shù)仿生構(gòu)建細(xì)胞體外三維培養(yǎng)模型。本發(fā)明具有設(shè)備簡(jiǎn)易，操作簡(jiǎn)單，對(duì)細(xì)胞物理傷害小的優(yōu)點(diǎn)，適于進(jìn)一步的體內(nèi)移植及體外組織再生研究；構(gòu)建的微囊模型一方面使囊內(nèi)細(xì)胞與外界免疫分子隔離，保護(hù)囊內(nèi)細(xì)胞，另一方面諸如氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、電解質(zhì)、有生物活性的分泌物以及細(xì)胞代謝產(chǎn)物等低分子量物質(zhì)可自由穿過(guò)而進(jìn)行物質(zhì)傳遞，保證了囊內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)存活，并延長(zhǎng)了其形態(tài)和功能的維持時(shí)間。2.本發(fā)明首次報(bào)道通過(guò)球包球復(fù)合微囊模型實(shí)現(xiàn)細(xì)胞體外三維共培養(yǎng)。該共培養(yǎng)模型具備更為仿生的特點(diǎn)，可同時(shí)克服傳統(tǒng)接觸式共培養(yǎng)體系很難調(diào)控同型與異型細(xì)胞間相互作用比例和難于在后期研究中把不同種細(xì)胞分離開(kāi)、非接觸式共培養(yǎng)體系缺乏由異種細(xì)胞間直接接觸而導(dǎo)致的胞間作用以及圖案化共培養(yǎng)存在細(xì)胞依賴(lài)性的諸多缺點(diǎn)，在溫和、可調(diào)控的條件下實(shí)現(xiàn)各種目的細(xì)胞的三維仿生共培養(yǎng)。3.本發(fā)明中所涉及的實(shí)驗(yàn)器材均可經(jīng)高溫高壓滅菌，可重復(fù)使用，大大降低了實(shí)驗(yàn)成本，利用本發(fā)明構(gòu)建的共培養(yǎng)模型可更為仿生的觀察細(xì)胞在三維培養(yǎng)體系中的生長(zhǎng)、 遷移、增殖與分化等生物學(xué)行為，揭示細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞-可溶性因子間的相互作用。


圖1是用復(fù)合微囊模型進(jìn)行細(xì)胞共培養(yǎng)的示意圖。圖2是傳統(tǒng)微囊化細(xì)胞三維體外培養(yǎng)光鏡圖。圖3是內(nèi)部區(qū)域含細(xì)胞而外層區(qū)域不含細(xì)胞的復(fù)合微囊模型光學(xué)顯微照片。圖4是用復(fù)合微囊模型進(jìn)行異種細(xì)胞共培養(yǎng)的光學(xué)顯微照片。圖1中，1內(nèi)部微囊內(nèi)細(xì)胞A，2外部微囊內(nèi)細(xì)胞B，3微囊的選擇性半透膜，4可自由透過(guò)膜的低分子量物質(zhì)，如氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及一些低分子量活性因子和細(xì)胞代謝產(chǎn)物，5 不能透過(guò)膜的高分子量物質(zhì)，如抗體、免疫細(xì)胞、免疫球蛋白等。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
如圖1所示，本發(fā)明通過(guò)兩步微囊化將異種細(xì)胞分別培養(yǎng)在復(fù)合微囊模型的內(nèi)、外區(qū)域。復(fù)合微囊模型的構(gòu)建方法包括
第1、將經(jīng)過(guò)濾、滅菌的海藻酸鈉溶液滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中凝膠化處理，形成海藻酸鈉凝膠微球；所述的海藻酸鈉溶液中添加有細(xì)胞A并分散均勻；海藻酸鈉溶液的質(zhì)量體積濃度為0. 5%-5%，內(nèi)層凝膠微球的粒徑控制在50-600 μ m范圍；
第2、收集凝膠化的海藻酸鈉凝膠微球，用生理鹽水(0. 9%NaCl溶液)洗滌，將海藻酸鈉凝膠微球再次分散到經(jīng)過(guò)濾滅菌的海藻酸鈉溶液中，然后將含有海藻酸鈉凝膠微球的海藻酸鈉溶液滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中再次凝膠化處理，形成球包球式復(fù)合微囊模型；所述的海藻酸鈉溶液中添加有細(xì)胞B并分散均勻；海藻酸鈉溶液的質(zhì)量體積濃度為0. 1%_3%，外層凝膠微球的粒徑控制在100-3000 μ m范圍；
第3、收集凝膠化處理后的復(fù)合微囊模型，生理鹽水洗滌，置入細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，加入細(xì)胞培養(yǎng)基，置于二氧化碳培養(yǎng)箱(37°C、5% C02、100%濕度)靜置培養(yǎng)。以上第1步、第2步中所述的海藻酸鈉溶液采用高壓靜電滴液、氣流吹噴滴液或手工注射器滴液的方法滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中凝膠化處理，所述的多價(jià)陽(yáng)離子是鈣、鋅、 鋇、銅、鎂、鐵、錳離子。本發(fā)明還可以在第1步、第2步凝膠化處理后得到的海藻酸鈉凝膠微球表面選擇性包覆一層半透性膜，具體方法是
將生理鹽水洗滌后的海藻酸鈉凝膠微球分散到質(zhì)量濃度為0. 01%-2%的陽(yáng)離子型高分子溶液中處理l-30min分鐘即可；所述的陽(yáng)離子型高分子溶液是多聚賴(lài)氨酸溶液或殼聚糖溶液。本發(fā)明利用微囊化技術(shù)，不僅可以為細(xì)胞的生存提供三維立體微環(huán)境，還可以利用復(fù)合微囊模型中半透膜的分子截?cái)嘧饔檬辜?xì)胞與宿主免疫系統(tǒng)隔離，在治療相關(guān)疾病時(shí)，減少甚至避免免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生；另一方面，復(fù)合微囊模型的半透膜可以允許諸如氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、電解質(zhì)、有生物活性的分泌物以及細(xì)胞代謝產(chǎn)物等低分子量物質(zhì)的順利通過(guò)而進(jìn)行物質(zhì)傳遞，保證了囊內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)存活，并延長(zhǎng)了其形態(tài)和功能的維持時(shí)間。本發(fā)明可有效的克服傳統(tǒng)共培養(yǎng)方式中存在的同種與異種細(xì)胞間相互作用不可控、后期研究時(shí)異種細(xì)胞難于分離以及存在細(xì)胞依賴(lài)性等缺點(diǎn)，可在三維立體環(huán)境下研究細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、遷移及胞間作用等生物學(xué)行為。圖2所示為利用現(xiàn)有技術(shù)該構(gòu)建的傳統(tǒng)微囊化細(xì)胞模型，該模型可用于細(xì)胞的三維體外培養(yǎng)，也可通過(guò)多種細(xì)胞的共同微囊化實(shí)現(xiàn)細(xì)胞三維體外共培養(yǎng)。該體系用于共培養(yǎng)時(shí)，異種細(xì)胞在空間上處于同一微囊內(nèi)，具有傳統(tǒng)接觸式共培養(yǎng)的許多缺點(diǎn)，如同型與異型細(xì)胞間相互作用在空間與比例上均不可調(diào)控，后期研究時(shí)異種細(xì)胞難于分離等。
實(shí)施例2
如圖3所示，本實(shí)施例提供的是僅復(fù)合微囊模型內(nèi)部包裹OTH3T3細(xì)胞的情況下光學(xué)顯微照片。復(fù)合微囊模型的構(gòu)建方法同實(shí)施例1。利用本發(fā)明構(gòu)建的三維復(fù)合微囊模型形狀規(guī)整，表面光滑，粒徑均勻，基本上可保證復(fù)合微囊模型體系中每個(gè)大囊內(nèi)包裹一個(gè)小微囊，且該培養(yǎng)體系可將細(xì)胞分別固定在復(fù)合微囊模型的特定區(qū)域。實(shí)施例3
如圖4所示，利用本發(fā)明構(gòu)建的復(fù)合微囊模型(構(gòu)建方法同實(shí)施例1)將異種細(xì)胞進(jìn)行體外共培養(yǎng)。復(fù)合微囊模型的中心區(qū)域與外層區(qū)域分別為NIH3T3細(xì)胞和HepG2細(xì)胞，從中可以看出，兩種細(xì)胞均勻的分布在復(fù)合微囊模型的不同區(qū)域內(nèi)，彼此相鄰且相互分開(kāi)，可用于研究異種細(xì)胞間的相互作用及細(xì)胞分泌產(chǎn)物對(duì)其它細(xì)胞行為的影響，同時(shí)可更為仿生的模擬體內(nèi)組織或器官細(xì)胞在三維空間上的分布和異種細(xì)胞彼此間相互作用。
權(quán)利要求
1.一種用于體外細(xì)胞共培養(yǎng)的復(fù)合微囊模型，其特征在于該模型是以天然多糖海藻酸鈉為基質(zhì)材料，經(jīng)過(guò)兩次將多糖海藻酸鈉滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中凝膠化處理，形成由內(nèi)外兩層海藻酸鈉凝膠微球構(gòu)成的球包球式復(fù)合微囊模型，在其中一層凝膠微球中包含或不包含一種細(xì)胞，在另一層凝膠微球中包含或不包含另一種細(xì)胞。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合微囊模型，其特征在于所述的多價(jià)陽(yáng)離子是鈣、鋅、鋇、 銅、鎂、鐵、錳離子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的復(fù)合微囊模型，其特征在于所述的內(nèi)層凝膠微球的粒徑范圍在50-600 μ m,外層凝膠微球的粒徑范圍在100-3000 μ m。
4.一種權(quán)利要求1所述的復(fù)合微囊模型的構(gòu)建方法，其特征在于包括第1、將經(jīng)過(guò)濾滅菌的海藻酸鈉溶液滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中凝膠化處理，形成海藻酸鈉凝膠微球；所述的海藻酸鈉溶液中選擇性添加或不添加細(xì)胞A ；第2、收集凝膠化的海藻酸鈉凝膠微球，用生理鹽水洗滌，將海藻酸鈉凝膠微球再次分散到經(jīng)過(guò)濾滅菌的海藻酸鈉溶液中，然后將含有海藻酸鈉凝膠微球的海藻酸鈉溶液滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中再次凝膠化處理，形成球包球式復(fù)合微囊模型；所述的海藻酸鈉溶液中選擇性添加或不添加細(xì)胞B;第3、收集凝膠化處理后的復(fù)合微囊模型，生理鹽水洗滌，置入細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，加入細(xì)胞培養(yǎng)基，置于二氧化碳培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于第1步、第2步中所述的海藻酸鈉溶液采用高壓靜電滴液、氣流吹噴滴液或手工注射器滴液的方法滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中凝膠化處理，所述的多價(jià)陽(yáng)離子是鈣、鋅、鋇、銅、鎂、鐵、錳離子。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于第1步制備內(nèi)層凝膠微球的海藻酸鈉溶液的質(zhì)量體積濃度為0. 5%-5%，制備外層凝膠微球的海藻酸鈉溶液的質(zhì)量體積濃度為 0. 1%-3%。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于第1步制備的內(nèi)層凝膠微球的粒徑控制在 50-600 μ m范圍，第2步制備的外層凝膠微球的粒徑控制在100-3000 μ m范圍。
8.根據(jù)權(quán)利要求4至7中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于將第1步、第2步凝膠化處理后得到的海藻酸鈉凝膠微球表面選擇性包覆一層半透性膜，具體方法是將生理鹽水洗滌后的海藻酸鈉凝膠微球分散到質(zhì)量濃度為0. 01%-2%的陽(yáng)離子型高分子溶液中處理l_30min分鐘即可。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于所述的陽(yáng)離子型高分子溶液是多聚賴(lài)氨酸溶液或殼聚糖溶液。
10.一種權(quán)利要求1所述的復(fù)合微囊模型的應(yīng)用，其特征在于用于考察細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)以及細(xì)胞-可溶性因子間的相互作用，體外構(gòu)建腫瘤模型、組織工程化各類(lèi)組織器官類(lèi)似物或等同物。
全文摘要
一種用于細(xì)胞體外共培養(yǎng)的復(fù)合微囊模型。該模型以天然多糖海藻酸鈉為基質(zhì)材料，將多糖海藻酸鈉滴入到多價(jià)陽(yáng)離子溶液中經(jīng)兩次凝膠化處理，形成由內(nèi)外兩層海藻酸鈉凝膠微球構(gòu)成的球包球式復(fù)合微囊模型，其中一層凝膠微球中可包含一種細(xì)胞，另一層中可包含另一種細(xì)胞。該模型可用于各種細(xì)胞間的體外共培養(yǎng)研究，克服了傳統(tǒng)共培養(yǎng)模型中同種與異種細(xì)胞間相互作用不可控、后期研究時(shí)異種細(xì)胞難于分離以及存在細(xì)胞依賴(lài)性等諸多缺點(diǎn)，可在三維立體仿生條件下模擬細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)以及細(xì)胞-可溶性因子間的相互作用，為體外構(gòu)建腫瘤模型、優(yōu)化細(xì)胞體外培養(yǎng)方式和組織工程化構(gòu)建各類(lèi)組織器官類(lèi)似物或等同物提供理論和技術(shù)支持。
文檔編號(hào)C12N11/10GK102286422SQ20111016887
公開(kāi)日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月22日
發(fā)明者楊軍, 毛宏理, 鄭俊坤 申請(qǐng)人:南開(kāi)大學(xué)