專利名稱：一種應(yīng)用于微生物肥料的枯草芽孢桿菌深層發(fā)酵培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種枯草芽孢桿菌工業(yè)化液體形成芽孢的工藝技術(shù)，具體涉及到一種應(yīng)用于微生物肥料的枯草芽孢桿菌深層發(fā)酵培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
枯草芽孢桿菌在促進作物生長、增強作物抗病能力等方面具有重要作用，且是使用安全的微生物，因此被廣泛地用于微生物肥料生產(chǎn)中。因為芽孢具有抗逆性強的優(yōu)點，所以微生物肥料中含有的微生物多以芽孢形式存在。用固體發(fā)酵法容易制得枯草芽孢桿菌芽孢，但勞動強度大，且芽孢濃度不高，一般為0. 1 億-1.0億CFU/g。而中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準NY/T 798-2004 (復(fù)合微生物肥料)中規(guī)定粉劑和顆粒肥料的有效菌含量不低于每克0. 2億，液體肥料的有效菌含量每毫升不低于0. 5億。利用液體深層發(fā)酵法培養(yǎng)枯草芽孢桿菌，菌體濃度高，但不易形成芽孢，必須嚴格控制培養(yǎng)條件，才能提高芽孢形成率。芽孢的形成受到PH、碳源物質(zhì)濃度、氮源物質(zhì)濃度、 溶解氧等各方面的影響，因此如何提高發(fā)酵液中芽孢數(shù)量就成為枯草芽孢桿菌發(fā)酵的關(guān)鍵技術(shù)。一般液體培養(yǎng)枯草芽孢桿菌芽孢的培養(yǎng)基(以重量比計)為淀粉洲，玉米漿 0. 1%，磷酸氫二鉀0. 5%，硫酸銨0. 1%，碳酸鈣0. 25%，硫酸錳0. 2-0. 5%，pH 7. 2-7. 4。培養(yǎng)條件37士2°C，罐壓0. 05MPa,通氣量1 1. 0-1. 2體積/體積/分，接種量1_10%，發(fā)酵 48-72h,芽孢形成率90%。這種發(fā)酵培養(yǎng)基的缺點主要是培養(yǎng)基配制較為復(fù)雜，且原料成本較高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基，改進了培養(yǎng)基配方，降低生產(chǎn)成本。本發(fā)明通過研究發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)培養(yǎng)基中添加的離子可通過改變培養(yǎng)基組成而不需另外添加。本發(fā)明所采用的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基配方的主要營養(yǎng)成分為小麥粉、麩皮， 不需添加其他無機鹽或微量元素。一種用于微生物肥料的枯草芽孢桿菌深層發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于以重量百分比計，小麥粉0. 8-1. 5%，麩皮粉1. 5-4%，余量為水。小麥粉細度不低于60目，麩皮粉細度不低于40目。麩皮為面粉加工副產(chǎn)品，價格低廉。小麥粉可是小麥直接磨粉，也可是次面粉，本發(fā)明培養(yǎng)基不含豆餅粉，泡沫較少，不必使用消泡劑，降低了生產(chǎn)成本。本發(fā)明的培養(yǎng)基pH值約為6. 0 (滅菌后)，枯草芽孢桿菌在pH5. 5_pH8. 5范圍內(nèi)生長良好，因此本培養(yǎng)基在滅菌前無需用酸堿調(diào)節(jié)PH，簡化了操作。
本發(fā)明培養(yǎng)基中的碳氮比比較合理，整個發(fā)酵過程的酸堿度變化不大在到穩(wěn)定期時，PH約為5. 3-5. 5，有利于芽孢的形成。采用本發(fā)明的培養(yǎng)基，使發(fā)酵時間從傳統(tǒng)的48-60小時，縮短到40-48小時，lm3發(fā)酵罐的芽孢濃度為20-50億CFU/ml，提高了產(chǎn)品質(zhì)量，降低了生產(chǎn)成本。
具體實施例方式下面通過實施例對本發(fā)明做更詳細的描述，這些實施例僅僅是對本發(fā)明最佳實施方式的描述，并不對本發(fā)明的保護范圍有限制。實施例1
采用如下配比的(以重量計)培養(yǎng)基小麥粉8千克，麩皮16千克，用水定容至0.8M3。 攪拌均勻后，121°C滅菌25分鐘，冷卻至25-40°C，按5%(重量比)接入枯草芽孢桿菌種子液， 發(fā)酵條件37士2°C、通氣比1 1. 0體積/體積/分，轉(zhuǎn)速200-250轉(zhuǎn)/分，發(fā)酵40小時，殘?zhí)?蒽酮-硫酸法測定)是接種前的5%，菌濃度(平板稀釋法測定，平行三次)平均為38. 5億 CFU/ml，芽孢形成率約為90%。實施例2
采用如下配比的(以重量計)培養(yǎng)基小麥粉12千克，麩皮14千克，用水定容至0.8M3。 攪拌均勻后，121°C滅菌25分鐘，冷卻至25-40°C，按5%(重量比)接入枯草芽孢桿菌種子液， 發(fā)酵條件37士2°C、通氣比1:1. 0體積/體積/分，轉(zhuǎn)速280-320轉(zhuǎn)/分，發(fā)酵48小時，殘?zhí)?蒽酮-硫酸法測定)是接種前的8%，菌濃度(平板稀釋法測定，平行三次)平均為42. 4億 CFU/ml，芽孢形成率約為95%。通氣比1 1. 0體積/體積/分什么意思？ 實施例3
采用如下配比的(以重量計)培養(yǎng)基小麥粉7. 2千克，麩皮17千克，用水定容至0. 8M3。 攪拌均勻后，121°C滅菌25分鐘，冷卻至25-40°C，按5%(重量比)接入枯草芽孢桿菌種子液， 發(fā)酵條件37士2°C、通氣比1:1. 0體積/體積/分，轉(zhuǎn)速300-350轉(zhuǎn)/分，發(fā)酵38小時，殘?zhí)?蒽酮-硫酸法測定)是接種前的3%，菌濃度(平板稀釋法測定，平行三次)平均為45. 6億 CFU/ml，芽孢形成率約為90%。
權(quán)利要求
1.一種用于微生物肥料的枯草芽孢桿菌深層發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于以重量百分比計，小麥粉0. 8-1. 5%，麩皮粉1. 5-4%，余量為水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于小麥粉細度不低于60目，麩皮粉細度不低于40目。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于滅菌后所述的培養(yǎng)基PH值約為6.0。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于復(fù)合微生物肥料的枯草芽孢桿菌深層發(fā)酵培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基包括麩皮粉和小麥粉，重量百分含量分別為小麥粉0.8%-1.5%，麩皮粉1.5-4%。本發(fā)明培養(yǎng)基組成簡單，配置時不需另外調(diào)節(jié)pH，并能促進菌體生長和芽孢形成，從而提高了產(chǎn)品質(zhì)量，降低了生產(chǎn)成本。
文檔編號C12R1/125GK102199569SQ20111009958
公開日2011年9月28日 申請日期2011年4月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月21日
發(fā)明者唐旺全, 楊柳, 楊紅兵 申請人:馬鞍山科邦生態(tài)肥有限公司