專利名稱：利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的方法。
背景技術(shù)：
凝乳酶屬于酸性蛋白酶，又稱天冬氨酸蛋白酶，是生產(chǎn)干酪不可缺少的制劑。凝乳 酶的傳統(tǒng)來源是哺乳期期小牛的皺胃，動(dòng)物凝乳酶及其凝乳活力與蛋白水解能力的高比值 成為制作奶酪的首選酶，但是動(dòng)物生長(zhǎng)緩慢且價(jià)格昂貴，容易增加企業(yè)成本，并且從動(dòng)物中 提取酶液程序和工藝較復(fù)雜。木瓜、無花果、菠蘿、難關(guān)、合歡樹、銀杏等植物中都含有能使 乳凝固的蛋白酶，但植物來源的凝乳酶因有太高的蛋白水解活力或本身有毒，因此很多植 物性凝乳酶沒有得到大規(guī)模商業(yè)化應(yīng)用。微生物凝乳酶來源廣泛，目前發(fā)現(xiàn)有40余種微生物可發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶，這些微生 物主要是放線菌、細(xì)菌和真菌等，由于微生物發(fā)酵的方法控制容易，成本低，且安全無毒，而 被廣泛使用。目前微生物發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的氮源主要來自大豆組織蛋白和玉米粉，生產(chǎn)成 本較高。乳酸鏈球菌素的發(fā)酵廢液中含有豐富的氮源。將乳酸鏈球菌素的發(fā)酵廢液直接排 放會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，排入污水處理池也會(huì)增加處理的難度。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決目前微生物發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的成本高，乳酸鏈球菌素的發(fā)酵廢 液直接排放污染環(huán)境的問題，提供一種利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝 乳酶的方法。本發(fā)明利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的方法，按以下 步驟進(jìn)行一、培養(yǎng)基的配制將NaH2PCV Na2HPO4、葡萄糖、高溫淀粉酶、吐溫80、玉米粉、 玉米淀粉、乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液和大豆組織蛋白溶解于水中配制培養(yǎng)基，其中NaH2PO4 3. 25g/L，Na2HPO4 3. llg/L，葡萄糖2. 14g/L，高溫淀粉酶:20g/L,吐溫 80 0. 13g/L，玉米 粉30 80g/L，玉米淀粉0 30g/L，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液150 700g/L，大豆組織蛋 白0 20g/L ；用質(zhì)量濃度為5% 6%的氫氧化鈉調(diào)pH至6. 7 6. 8，在0. 14MPa壓力下 滅菌30min ；二、米黑根毛霉種子液的制備將米黑根毛霉按體積比4%的接種量接種到種 子培養(yǎng)基中，于37 38°C條件下?lián)u床培養(yǎng)20 24h，搖床的轉(zhuǎn)速為260rpm ；三、接種將步 驟一中配制好的培養(yǎng)基裝入250ml的三角瓶中，將米黑根毛霉種子液按體積比2. 5%的接 種量接種到三角瓶中；四、培養(yǎng)將三角瓶于37 38°C條件下放在搖床上培養(yǎng)，搖床的轉(zhuǎn)速 為260 280rpm，培養(yǎng)96小時(shí)，即得到凝乳酶；步驟一中玉米粉的含氮量為1.075% (質(zhì) 量)，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液的含氮量為0. 24% (質(zhì)量)，大豆組織蛋白的含氮量為8% (質(zhì) 量)；步驟二中制得的米黑根毛霉種子液的霉菌數(shù)為2 6X IO6CfVml ；步驟三中培養(yǎng)基的 裝入量為三角瓶體積的20%。
本發(fā)明利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源來生產(chǎn)凝乳酶，做到了廢物利用， 減少了乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液直接排放對(duì)環(huán)境造成的污染，降低了發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的成 本。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的 任意組合。
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn) 凝乳酶的方法，按以下步驟進(jìn)行一、培養(yǎng)基的配制將NaH2P04、Na2HPCV葡萄糖、高溫淀粉 酶、吐溫80、玉米粉、玉米淀粉、乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液和大豆組織蛋白溶解于水中配制培 養(yǎng)基，其中 NaH2PO4 3. 25g/L，Na2HPO4 3. llg/L，葡萄糖2. 14g/L，高溫淀粉酶:20g/L，吐溫 80 0. 13g/L，玉米粉30 80g/L，玉米淀粉0 30g/L，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液150 700g/L，大豆組織蛋白0 20g/L ；用質(zhì)量濃度為5 % 6 %的氫氧化鈉調(diào)pH至6. 7 6. 8，在0. 14MPa壓力下滅菌30min ；二、米黑根毛霉種子液的制備將米黑根毛霉按體積比 4%的接種量接種到種子培養(yǎng)基中，于37 38°C條件下?lián)u床培養(yǎng)20 24h，搖床的轉(zhuǎn)速為 260rpm;三、接種將步驟一中配制好的培養(yǎng)基裝入250ml的三角瓶中，將米黑根毛霉種子 液按體積比2. 5%的接種量接種到三角瓶中；四、培養(yǎng)將三角瓶于37 38°C條件下放在 搖床上培養(yǎng)，搖床的轉(zhuǎn)速為260 280rpm，培養(yǎng)96小時(shí)，即得到凝乳酶；步驟一中玉米粉的 含氮量為1.075% (質(zhì)量)，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液的含氮量為0.24% (質(zhì)量)，大豆組織蛋 白的含氮量為8% (質(zhì)量)；步驟二中制得的米黑根毛霉種子液的霉菌數(shù)為2 6X IO6Cfu/ ml ；步驟三中培養(yǎng)基的裝入量為三角瓶體積的20%。本實(shí)施方式步驟二中的種子培養(yǎng)基由NaH2P04、Na2HPO4、葡萄糖、高溫淀粉酶、吐 溫80、玉米粉、大豆組織蛋白和水組成；其中NaH2PO4 3. 25g/L，Na2HPO4 3. llg/L，葡萄糖 2. 14g/L，高溫淀粉酶:20g/L,吐溫80 0. 13g/L，玉米粉:70g/L，大豆組織蛋白:18g/L ；用 質(zhì)量濃度為5% 6%的氫氧化鈉調(diào)pH至6. 7 6. 8，在0. 14MPa壓力下滅菌30min。本實(shí)施方式步驟二中的米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)保藏于中國(guó)普通微生物 菌種保藏管理中心，菌種保藏編號(hào)為AS 3.4960。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是步驟一中加入的玉米 粉濃度為35 70g/L。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一或二不同的是步驟一中加入的 玉米粉濃度為50 60g/L。其它與具體實(shí)施方式
一或二相同。
具體實(shí)施方式
四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至三之一不同的是步驟一中加 入的玉米淀粉濃度為5 25g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至三之一相同。
具體實(shí)施方式
五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至四之一不同的是步驟一中加 入的玉米淀粉濃度為10 20g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至四之一相同。
具體實(shí)施方式
六本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至五之一不同的是步驟一中加 入的玉米淀粉濃度為26. 25g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至五之一相同。
具體實(shí)施方式
七本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至六之一不同的是步驟一中加 入的乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液濃度為200 600g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至六之一相同。
具體實(shí)施方式
八本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至七之一不同的是步驟一中加 入的乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液濃度為300 500g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至七之一相同。
具體實(shí)施方式
九本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至八之一不同的是步驟一中加 入的乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液濃度為160g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至八之一相同。
具體實(shí)施方式
十本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至九之一不同的是步驟一中加 入的乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液濃度為480g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至九之一相同。
具體實(shí)施方式
十一本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十之一不同的是步驟一中 加入的大豆組織蛋白濃度為5 15g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至十之一相同。
具體實(shí)施方式
十二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十一之一不同的是步驟一 中加入的大豆組織蛋白濃度為10g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至十一之一相同。
具體實(shí)施方式
十三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十二之一不同的是步驟一 中加入的大豆組織蛋白濃度為3.6g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至十二之一相同。
具體實(shí)施方式
十四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十三之一不同的是步驟一 中加入的大豆組織蛋白濃度為9g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至十三之一相同。
具體實(shí)施方式
十五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十四之一不同的是步驟一 中加入的大豆組織蛋白濃度為18g/L。其它與具體實(shí)施方式
一至十四之一相同。
具體實(shí)施方式
十六本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十五之一不同的是步驟四 中搖床的轉(zhuǎn)速為270rpm。其它與具體實(shí)施方式
一至十五之一相同。
具體實(shí)施方式
十七本實(shí)施方式利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn) 凝乳酶的方法，按以下步驟進(jìn)行一、培養(yǎng)基的配制將NaH2P04、Na2HPCV葡萄糖、高溫淀粉 酶、吐溫80、玉米粉和乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液溶解于水中配制培養(yǎng)基，其中NaH2PO4 3. 25g/ L，Na2HPO4 3. llg/L，葡萄糖:2· 14g/L，高溫淀粉酶:20g/L，吐溫 80 :0· 13g/L，玉米粉:70g/ L,乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液600g/L ；用質(zhì)量濃度為5% 6%的氫氧化鈉調(diào)pH至6. 7 6. 8，在0. 14MPa壓力下滅菌30min ；二、米黑根毛霉種子液的制備將米黑根毛霉按體積比 4%的接種量接種到種子培養(yǎng)基中，于37 38°C條件下?lián)u床培養(yǎng)20 24h，搖床的轉(zhuǎn)速為 260rpm ；三、接種將步驟一中配制好的培養(yǎng)基裝入250ml的三角瓶中，將米黑根毛霉種子 液按體積比2. 5%的接種量接種到三角瓶中；四、培養(yǎng)將三角瓶于37 38°C條件下放在 搖床上培養(yǎng)，搖床的轉(zhuǎn)速為260rpm，培養(yǎng)96小時(shí)，即得到凝乳酶；步驟一中玉米粉的含氮量 為1.075% (質(zhì)量)，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液的含氮量為0.24% (質(zhì)量)，大豆組織蛋白的 含氮量為8% (質(zhì)量)；步驟二中制得的米黑根毛霉種子液的霉菌數(shù)為2 6X 106CfU/ml ； 步驟三中培養(yǎng)基的裝入量為三角瓶體積的20%。本實(shí)施方式制備的凝乳酶經(jīng)檢測(cè)活力為53IMCU/ml。
具體實(shí)施方式
十八本實(shí)施方式利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn) 凝乳酶的方法，按以下步驟進(jìn)行一、培養(yǎng)基的配制將NaH2P04、Na2HPCV葡萄糖、高溫淀粉 酶、吐溫80、玉米粉、乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液和大豆組織蛋白溶解于水中配制培養(yǎng)基，其中 NaH2PO4 3. 25g/L，Na2HPO4 3. llg/L,葡萄糖2. 14g/L，高溫淀粉酶:20g/L，吐溫 80 0. 13g/ L，玉米粉70g/L，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液480g/L，大豆組織蛋白3. 6g/L ；用質(zhì)量濃度為 5% 6%的氫氧化鈉調(diào)pH至6. 7 6. 8，在0. 14MPa壓力下滅菌30min ；二、米黑根毛霉 種子液的制備將米黑根毛霉按體積比4%的接種量接種到種子培養(yǎng)基中，于37 38°C條件下?lián)u床培養(yǎng)20 24h，搖床的轉(zhuǎn)速為260rpm ；三、接種將步驟一中配制好的培養(yǎng)基裝入 250ml的三角瓶中，將米黑根毛霉種子液按體積比2. 5%的接種量接種到三角瓶中；四、培 養(yǎng)將三角瓶于37 38°C條件下放在搖床上培養(yǎng)，搖床的轉(zhuǎn)速為270rpm，培養(yǎng)96小時(shí)，即 得到凝乳酶；步驟一中玉米粉的含氮量為1. 075% (質(zhì)量)，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液的含氮 量為0.24% (質(zhì)量)，大豆組織蛋白的含氮量為8% (質(zhì)量)；步驟二中制得的米黑根毛霉 種子液的霉菌數(shù)為2 6X106cfu/ml ；步驟三中培養(yǎng)基的裝入量為三角瓶體積的20%。本實(shí)施方式制備的凝乳酶經(jīng)檢測(cè)活力為75IMCU/ml。
具體實(shí)施方式
十九本實(shí)施方式利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn) 凝乳酶的方法，按以下步驟進(jìn)行一、培養(yǎng)基的配制將NaH2P04、Na2HPCV葡萄糖、高溫淀粉 酶、吐溫80、玉米粉、乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液和大豆組織蛋白溶解于水中配制培養(yǎng)基，其中 NaH2PO4 3. 25g/L，Na2HPO4 3. llg/L，葡萄糖2. 14g/L，高溫淀粉酶:20g/L，吐溫 80 0. 13g/ L，玉米粉70g/L，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液300g/L，大豆組織蛋白9g/L ；用質(zhì)量濃度為 5% 6%的氫氧化鈉調(diào)pH至6. 7 6. 8，在0. 14MPa壓力下滅菌30min ；二、米黑根毛霉 種子液的制備將米黑根毛霉按體積比4%的接種量接種到種子培養(yǎng)基中，于37 38°C條 件下?lián)u床培養(yǎng)20 24h，搖床的轉(zhuǎn)速為260rpm ；三、接種將步驟一中配制好的培養(yǎng)基裝入 250ml的三角瓶中，將米黑根毛霉種子液按體積比2. 5%的接種量接種到三角瓶中；四、培 養(yǎng)將三角瓶于37 38°C條件下放在搖床上培養(yǎng)，搖床的轉(zhuǎn)速為260rpm，培養(yǎng)96小時(shí)，即 得到凝乳酶；步驟一中玉米粉的含氮量為1. 075% (質(zhì)量)，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液的含氮 量為0.24% (質(zhì)量)，大豆組織蛋白的含氮量為8% (質(zhì)量)；步驟二中制得的米黑根毛霉 種子液的霉菌數(shù)為2 6X106cfu/ml ；步驟三中培養(yǎng)基的裝入量為三角瓶體積的20%。本實(shí)施方式制備的凝乳酶經(jīng)檢測(cè)活力為93IMCU/ml。
具體實(shí)施方式
二十本實(shí)施方式利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn) 凝乳酶的方法，按以下步驟進(jìn)行一、培養(yǎng)基的配制將NaH2P04、Na2HPCV葡萄糖、高溫淀粉 酶、吐溫80、玉米粉、玉米淀粉、乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液和大豆組織蛋白溶解于水中配制培 養(yǎng)基，其中 NaH2PO4 3. 25g/L，Na2HPO4 3. llg/L，葡萄糖2. 14g/L，高溫淀粉酶:20g/L，吐溫 80 0. 13g/L，玉米粉35g/L，玉米淀粉26. 25g/L，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液160g/L，大豆組 織蛋白18g/L ；用質(zhì)量濃度為5% 6%的氫氧化鈉調(diào)pH至6. 7 6. 8，在0. 14MPa壓力下 滅菌30min ；二、米黑根毛霉種子液的制備將米黑根毛霉按體積比4%的接種量接種到種 子培養(yǎng)基中，于37 38°C條件下?lián)u床培養(yǎng)20 24h，搖床的轉(zhuǎn)速為260rpm ；三、接種將步 驟一中配制好的培養(yǎng)基裝入250ml的三角瓶中，將米黑根毛霉種子液按體積比2. 5%的接 種量接種到三角瓶中；四、培養(yǎng)將三角瓶于37 38°C條件下放在搖床上培養(yǎng)，搖床的轉(zhuǎn)速 為280rpm，培養(yǎng)96小時(shí)，即得到凝乳酶；步驟一中玉米粉的含氮量為1.075% (質(zhì)量)，乳 酸鏈球菌素發(fā)酵廢液的含氮量為0.24% (質(zhì)量)，大豆組織蛋白的含氮量為8% (質(zhì)量)； 步驟二中制得的米黑根毛霉種子液的霉菌數(shù)為2 6X 106CfU/ml ；步驟三中培養(yǎng)基的裝入 量為三角瓶體積的20%。本實(shí)施方式制備的凝乳酶經(jīng)檢測(cè)活力為97. 5IMCU/ml。
權(quán)利要求
利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的方法，按以下步驟進(jìn)行一、培養(yǎng)基的配制將NaH2PO4、Na2HPO4、葡萄糖、高溫淀粉酶、吐溫80、玉米粉、玉米淀粉、乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液和大豆組織蛋白溶解于水中配制培養(yǎng)基，其中NaH2PO43.25g/L，Na2HPO43.11g/L，葡萄糖2.14g/L，高溫淀粉酶20g/L，吐溫800.13g/L，玉米粉30～80g/L，玉米淀粉0～30g/L，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液150～700g/L，大豆組織蛋白0～20g/L；用質(zhì)量濃度為5％～6％的氫氧化鈉調(diào)pH至6.7～6.8，在0.14MPa壓力下滅菌30min；二、米黑根毛霉種子液的制備將米黑根毛霉按體積比4％的接種量接種到種子培養(yǎng)基中，于37～38℃條件下?lián)u床培養(yǎng)20～24h，搖床的轉(zhuǎn)速為260rpm；三、接種將步驟一中配制好的培養(yǎng)基裝入250ml的三角瓶中，將米黑根毛霉種子液按體積比2.5％的接種量接種到三角瓶中；四、培養(yǎng)將三角瓶于37～38℃條件下放在搖床上培養(yǎng)，搖床的轉(zhuǎn)速為260～280rpm，培養(yǎng)96小時(shí)，即得到凝乳酶；步驟一中玉米粉的含氮量為1.075％(質(zhì)量)，乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液的含氮量為0.24％(質(zhì)量)，大豆組織蛋白的含氮量為8％(質(zhì)量)；步驟二中制得的米黑根毛霉種子液的霉菌數(shù)為2～6×106cfu/ml；步驟三中培養(yǎng)基的裝入量為三角瓶體積的20％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的 方法，其特征在于步驟一中加入的玉米粉濃度為35 70g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶 的方法，其特征在于步驟一中加入的玉米淀粉濃度為26. 25g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的 方法，其特征在于步驟一中加入的乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液濃度為200 600g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或4所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳 酶的方法，其特征在于步驟一中加入的乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液濃度為300 500g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的 方法，其特征在于步驟一中加入的乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液濃度為160g/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、2、4或6所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝 乳酶的方法，其特征在于步驟一中加入的乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液濃度為480g/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的 方法，其特征在于步驟一中加入的大豆組織蛋白濃度為5 15g/L。
9.根據(jù)權(quán)利要求1、2、4、6或8所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn) 凝乳酶的方法，其特征在于步驟一中加入的大豆組織蛋白濃度為3. 6g/L。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的 方法，其特征在于步驟一中加入的大豆組織蛋白濃度為18g/L。
全文摘要
利用乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液作部分氮源發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的方法，它涉及一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的方法。本發(fā)明解決了目前微生物發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的成本高，乳酸鏈球菌素的發(fā)酵廢液直接排放污染環(huán)境的問題。本方法一、培養(yǎng)基的配制；二、米黑根毛霉種子液的制備；三、將米黑根毛霉種子液接種到三角瓶中；四、于37～38℃條件下培養(yǎng)96h，即得到凝乳酶。本發(fā)明做到了廢物利用，減少了乳酸鏈球菌素發(fā)酵廢液直接排放對(duì)環(huán)境造成的污染，降低了發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶的成本。應(yīng)用于微生物發(fā)酵領(lǐng)域。
文檔編號(hào)C12N9/58GK101914512SQ20101028193
公開日2010年12月15日 申請(qǐng)日期2010年9月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月15日
發(fā)明者張欽革, 王貴元, 郭坤, 馬之霄, 馬莉, 黃亦存 申請(qǐng)人:安泰生物工程股份有限公司