專利名稱：：內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及包含具有4-甲基-7-烯膽留烷醇骨架的化合物作為有效成分的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑，并且涉及包含其的食品或飲料。特別地，本發(fā)明涉及能夠減少蓄積在腹腔中的脂肪量并且防止或改善被認(rèn)為是代謝綜合癥的主要因素的內(nèi)臟脂肪型肥胖的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑，并且涉及包含該內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的生理功能性食品或飲料，例如特定保健用食品。
背景技術(shù)：
：近年來，生活方式西方化涉及的肥胖迅速增加已經(jīng)成為嚴(yán)重的問題。肥胖是指其中由于卡路里過度攝取并且由鍛煉不足等造成卡路里消耗減少而因此蓄積了過多能量的狀態(tài)，并且是指“蓄積了過量的身體脂肪組織(體脂肪)的狀態(tài)”。肥胖被指出為所謂的與生活方式有關(guān)的疾病例如糖尿病、高血壓和高血脂等發(fā)病的基礎(chǔ)。肥胖表現(xiàn)出過量身體脂肪蓄積的狀態(tài)和體重增加的現(xiàn)象。據(jù)報導(dǎo)當(dāng)迅速降低體重以改善肥胖時，在能量消耗中起作用的肌肉的數(shù)量也與脂肪一起減少，并且在老年人的情況中可能出現(xiàn)一些癥狀例如血壓紊亂和髖關(guān)節(jié)損傷(非專利文獻(xiàn)1)。另外，對于在不減少體重的情況下進(jìn)行脂肪量減少的情況，據(jù)報導(dǎo)鍛煉療法預(yù)期會發(fā)揮改善肌肉組織的作用(非專利文獻(xiàn)2)。如上所述，近年來已經(jīng)注意到通過抑制身體脂肪的蓄積而不是通過減少體重而改善肥胖的方法。脂肪組織被歸類為蓄積在皮膚里面的皮下脂肪和蓄積在腹腔中的內(nèi)臟器官周圍的內(nèi)臟脂肪，其統(tǒng)稱為“體脂肪”。已知肥胖被分為兩種類型涉及皮下脂肪蓄積的皮下脂肪型肥胖和涉及內(nèi)臟脂肪蓄積的內(nèi)臟脂肪型肥胖。內(nèi)臟脂肪蓄積特別對肥胖中的并發(fā)癥(例如代謝異常以及心血管疾病)的發(fā)病率及其嚴(yán)重性有很大影響。傳統(tǒng)上，已知一個人患多種與生活方式有關(guān)的疾病的組合(即“多危險因素綜合癥”)的病態(tài)顯著增加了動脈硬化疾病發(fā)病的風(fēng)險，并且已經(jīng)提出一些概念(例如綜合癥X和代謝綜合癥)作為動脈硬化疾病的風(fēng)險因素。為了評價綜合風(fēng)險并且防止那些多危險因素綜合癥中動脈硬化疾病的發(fā)病，進(jìn)行了國際統(tǒng)一的代謝綜合癥及其診斷標(biāo)準(zhǔn)的定義(非專利文獻(xiàn)3)。在2005年4月于日本提出的用于代謝綜合癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)中，采用對應(yīng)于IOOcm2或更大的內(nèi)臟脂肪面積的腰部尺寸作為基本項(xiàng)目來代替被通常用于表示肥胖程度的身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)或體脂肪率。因此，已經(jīng)認(rèn)識到內(nèi)臟脂肪蓄積與代謝綜合癥有絕大關(guān)系。鍛煉、飲食和行為療法被推薦作為減少身體脂肪的措施。然而，在那些療法難以進(jìn)行或持續(xù)的情況中，可以進(jìn)行藥物療法或外科手術(shù)。目前，作為食欲抑制藥的氯苯咪吲哚被用作肥胖治療藥物，并且主要指定用于BMI為35或更大的的高度肥胖的人。然而，氯苯咪吲哚不僅會產(chǎn)生副作用(例如頭痛和口干)，而且還存在大量問題當(dāng)腎臟、肝臟或胰腺中存在嚴(yán)重的機(jī)能失調(diào)時氯苯咪吲哚有禁忌；并且由于其依賴性等而不能長時間用藥。已知植物甾醇例如β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇通過抑制膽甾醇的吸收而具有降低血膽留醇的作用，并且公開了包含甘油二酯和植物留醇作為有效成分的脂質(zhì)代謝促進(jìn)劑(專利文獻(xiàn)1)。另外，公開了包含膽留烯酮化合物作為有效成分的抗肥胖藥和脂質(zhì)代謝促進(jìn)劑，該膽留烯酮化合物是通過使用植物留醇例如β-谷留醇和菜油留醇或4-膽甾烯-3-酮作為原料而合成的(專利文獻(xiàn)25)。作為屬于百合科蘆薈屬的典型植物，已知的有翠葉蘆薈(AloebarbadenisisMiller)禾口木立聲菩(AloearborescenMillervar.natalensisBerger)，并且已經(jīng)報導(dǎo)了這些植物的各種作用。具體地，公開了蘆薈提取物對肥胖具有防止或改善作用(專利文獻(xiàn)6)。另外，分別公開了包含0.25%翠葉蘆薈粉末的具有減少體重作用的添加劑(專利文獻(xiàn)7)和包含翠葉蘆薈的用于控制體重的精油組合物(專利文獻(xiàn)8)。另外，報導(dǎo)了根據(jù)木立蘆薈的濃度，將木立蘆薈全葉給大鼠服用會使其體重顯著減少(非專利文獻(xiàn)4或5)。[專利文獻(xiàn)1]日本特開2005-15425公報[專利文獻(xiàn)2]日本特開平07-165587號公報[專利文獻(xiàn)3]日本特開平11-193296號公報[專利文獻(xiàn)4]日本特開2001-240544號公報[專利文獻(xiàn)5]日本特開平5-170651號公報[專利文獻(xiàn)6]日本特開2000-319190號公報[專利文獻(xiàn)7]新西蘭專利第330439號公報[專利文獻(xiàn)8]美國專利第6280751號公報[非專利文獻(xiàn)1]JournalofAppliedPhysiology，第95卷，第1728-1736頁，2003年[非專利文獻(xiàn)2]JournalofAppliedPhysiology，第99卷，第1220-1225頁，2005年[非專利文獻(xiàn)3]Adiposcience，第2卷，第11-15頁，2005年[非專利文獻(xiàn)4]MedicalandBiology，125(5)，第189-194頁[非專利文獻(xiàn)5]BulletinoftheFujitaMedicalSociety，22(2)，第153-157頁
發(fā)明內(nèi)容專利文獻(xiàn)1沒有描述單獨(dú)服用植物留醇的作用，并且根本沒有描述或暗示植物甾醇對內(nèi)臟脂肪的作用。另外，公開了在專利文獻(xiàn)2中公開的3-酮甾類化合物、在專利文獻(xiàn)3中公開的膽甾烯酮化合物和在專利文獻(xiàn)4中公開的24-烷基-膽留烯-3-酮化合物(例如24-甲基膽甾-5-烯-3-酮)具有減少體重、體脂肪量和血脂量的作用。然而，并沒有描述或暗示在不影響口服量和體重減少的情況下抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用。專利文獻(xiàn)5中公開的4-膽甾烯-3-酮明顯不同于本發(fā)明的有效成分。具體而言，描述于專利文獻(xiàn)5中的4-膽甾烯-3-酮的作用在于當(dāng)正常大鼠攝取卡路里時，該化合物減少過量的腹腔內(nèi)脂肪的同時，還不必要地減少了在正常范圍內(nèi)的脂肪成分。因此，4-膽甾烯-3-酮的作用明顯不同于本發(fā)明的作用，即，本發(fā)明僅僅有效地抑制了在肥胖狀態(tài)的情況中或者在攝取過量卡路里的情況中蓄積在內(nèi)臟器官周圍的所需要的量以上的脂肪組分。另外，公開了專利文獻(xiàn)6的用于防止和改善肥胖的藥物抑制了伴有體重增加的肥胖發(fā)展，并且因此有效地保持標(biāo)準(zhǔn)體重而不需要過度的飲食限制。然而，沒有描述對體脂肪的作用，并且沒有描述在不減少體重的情況下減少內(nèi)臟脂肪量的抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用。另外，專利文獻(xiàn)6中所述的有效成分是蘆薈提取物。然而，完全沒有特別指出對伴有體重增加的肥胖發(fā)展的抑制相關(guān)的組分。因此，難以預(yù)見存在在不減少體重的情況下僅僅減少內(nèi)臟脂肪的抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用，即不能從專利文獻(xiàn)6的描述中預(yù)期的作用。因此，就能夠選擇性地減少與代謝綜合癥發(fā)病強(qiáng)烈相關(guān)的內(nèi)臟脂肪或者能夠防止和抑制其蓄積的藥物而言，需要進(jìn)一步開發(fā)每天可以伴隨著盡可能少的痛苦而安全地服用并且可以有效地減少內(nèi)臟脂肪的功能材料。鑒于前述情況，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)對可以防止或改善被認(rèn)為是代謝綜合癥的主要起因的內(nèi)臟脂肪型肥胖的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑作了深入的研究。結(jié)果，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)具有有效地減少蓄積在腹腔中的脂肪作用的具有4-甲基-7-烯膽留烷醇(lophenol)骨架的化合物。另外，發(fā)現(xiàn)該化合物具有在不減少體重的情況下保持標(biāo)準(zhǔn)體重的作用，并且因此可用于抑制肥胖的發(fā)展而不需要過度的飲食限制。本發(fā)明的一個目的是提供一種包含具有4-甲基-7-烯膽留烷醇骨架的化合物作為有效成分的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑。另外，本發(fā)明的另一個目的是提供一種包含該內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的生理功能食品或飲料，例如特定保健用食品。用以解決前述問題的本申請的第一方面發(fā)明是一種內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑，其包含以下通式(1)表示的化合物作為有效成分。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(在該式中，Rl表示具有516個碳原子的直鏈或支鏈烷基、或具有1或2個雙鍵的烯基、或具有羥基和/或羰基的取代烷基或烯基，R2和R3各自獨(dú)立地表示氫原子、具有13個碳原子的烷基或取代烷基，并且R4與構(gòu)成環(huán)的碳原子形成C=0，或者表示-OH或-OCOCH3。)另外，以下1)4)是優(yōu)選實(shí)施方案。1)在前述化合物中，R2和R3中的一個是氫原子，另一個是甲基，并且R4是羥基。2)在前述1)中，Rl由下式中的任意一個表示-CH2-CH2-CH(-CH2-CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-CH=C(CH3)2-CH2-CH=C(CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-C(=CH-CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-CH(Ra)=C(CH3)Rb(其中Ra和Rb是-H、-OH或-CH3中的任一種)-CH2-CH2-CH(Re)-CH(CH3)Rd(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CH3中的任一種)。3)2)中所述的化合物選自4-甲基膽甾-7-烯_3_醇、4_甲基麥角甾_7_烯_3_醇和4-甲基豆留-7-烯-3-醇。4)1)3)中所述的化合物的含量為至少0.001質(zhì)量％。用以解決前述問題的本申請的第二方面發(fā)明是一種內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑，其包含含有以下通式(1)表示的化合物的百合科植物的有機(jī)溶劑提取物或熱水提取物或者它們的級分，并且其中前述百合科植物的有機(jī)溶劑提取物或熱水提取物或它們的級分包含下述組合物作為有效成分，所述組合物含有至少0.001干質(zhì)量％的以下通式(1)表示的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(在該式中，Rl表示具有516個碳原子的直鏈或支鏈烷基、或具有1或2個雙鍵的烯基、或者具有羥基和/或羰基的取代烷基或烯基，R2和R3各自獨(dú)立地表示氫原子、具有13個碳原子的烷基或取代烷基，并且R4與構(gòu)成環(huán)的碳原子形成C=O或者表示-OH或-OCOCH3。)另外，以下5)-7)是優(yōu)選實(shí)施方案。5)在前述化合物中，R2和R3中的一個是氫原子，另一個是甲基，并且R4是羥基。6)在前述5)中，Rl由下式中的任意一個表示-CH2-CH2-CH(-CH2-CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-CH=C(CH3)2-CH2-CH=C(CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-C(=CH-CH3)-CH(CH3)2-CH2-CH2-CH(Ra)=C(CH3)Rb(其中Ra和Rb是-H、-OH或-CH3中的任一種)-CH2-CH2-CH(Re)-CH(CH3)Rd(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CH3中的任一種)。7)6)中所述的化合物選自4-甲基膽甾-7-烯-3-醇、4_甲基麥角甾_7_烯_3_醇和4-甲基豆留-7-烯-3-醇。用以解決前述問題的本申請的第三方面發(fā)明是包含第一方面發(fā)明或第二方面發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的食品或飲料。另外，以下8)是優(yōu)選實(shí)施方案。8)該食品或飲料包含0.0001質(zhì)量％或更多的前述通式(1)所示的化合物。用以解決前述問題的本申請第四方面發(fā)明是前述通式(1)表示的化合物、或者含有至少0.001干質(zhì)量％該化合物的百合科植物的有機(jī)溶劑提取物或熱水提取物或者它們的級分在制備內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑中的用途。用以解決前述問題的本申請第五方面發(fā)明是抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的方法，其包括對要抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的患者施與前述通式(1)表示的化合物、或者含有至少0.001干質(zhì)量％該化合物的百合科植物的有機(jī)溶劑提取物或熱水提取物或它們的級分。在本發(fā)明的前述用途和方法中，前述通式(1)表示的化合物的優(yōu)選實(shí)施方案與本申請第二方面發(fā)明的那些相同。本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑和包含其的食品或飲料可以安全地服用或攝取，并且具有有效地抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用。另外，本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的有效成分可以被安全地攝取并且可以由容易獲得的百合科植物例如翠葉蘆薈(AloebarbadensisMiller)容易地制備。具體實(shí)施例方式接下來，詳細(xì)描述本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。然而，本發(fā)明并不限于以下優(yōu)選的實(shí)施方案，在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以自由地進(jìn)行改進(jìn)。注意本文中使用的百分比表示質(zhì)量百分比，除非另外說明。在本發(fā)明中，抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用是指減少蓄積在腹腔中的脂肪量的作用。因此，可以通過測量腹腔中的脂肪量(例如腸系膜脂肪的重量)來評價抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用。用作本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑(下文中也稱為“本發(fā)明的藥物”)的有效成分的化合物是具有前述通式(1)表示的結(jié)構(gòu)的化合物，并且該化合物的任何衍生物等也作為有效成分包括在內(nèi)，只要它們是具有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積作用的化合物(下文中也稱為“本發(fā)明的化合物”)。最優(yōu)選的是，用作本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的有效成分的本發(fā)明的化合物的純度為100%。然而，該純度可以適當(dāng)設(shè)定在該化合物發(fā)揮抑制內(nèi)臟脂肪蓄積作用的范圍內(nèi)。另外，用作本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的有效成分的組合物(下文中也稱為“本發(fā)明的組合物”)是包含至少0.001干質(zhì)量％，優(yōu)選0.01干質(zhì)量％或更多，更優(yōu)選0.1干質(zhì)量％或更多的前述化合物的百合科植物的提取物或其級分。本發(fā)明的化合物含量的上限為，但不特別限于并且優(yōu)選為例如10干質(zhì)量％、50干質(zhì)量％、70干質(zhì)量％，或90干質(zhì)量％。本發(fā)明中使用的“干質(zhì)量”是指在通過由“干燥損耗試驗(yàn)”定義的干燥方法將化合物干燥后測量的質(zhì)量，該試驗(yàn)描述于JapanesePharmacopoeia，第14版，(2001年3月30日，日本厚生勞動省，告示第111號)中的一般試驗(yàn)法。例如，可以這樣的方式確定本發(fā)明化合物的質(zhì)量量取約Ig本發(fā)明的化合物并且在105°C下干燥4小時；通過在保干器中靜置將所得物冷卻；用天平稱量化合物的質(zhì)量。在前述通式⑴中，Rl表示具有516個碳原子的直鏈或支鏈烷基或具有1或2個雙鍵的烯基。注意前述的烷基和烯基可以分別是具有羥基和/或羰基的取代烷基和烯基。R2和R3各自獨(dú)立地表示氫原子、具有13個碳原子的烷基或取代烷基，并且R4與構(gòu)成環(huán)的碳原子形成C=O或者表示-OH或-0C0CH3。作為前述具有13個碳原子的烷基，優(yōu)選甲基、乙基等，并且特別優(yōu)選甲基。前述Rl優(yōu)選是由下式表示的基團(tuán)中的任意一種。(i)-CH2-CH2-CH(-CH2-CH3)-CH(CH3)2(ii)-CH2-CH2-CH=C(CH3)2(iii)-CH2-CH=C(CH3)-CH(CH3)2(iv)-CH2-CH2-C(=CH-CH3)-CH(CH3)2(v)-CH2-CH2-CH(Ra)=C(CH3)Rb(其中Ra和Rb是-H、-OH或-CH3中的任一種)(vi)-CH2-CH2-CH(Re)-CH(CH3)Rd(其中Rc和Rd是-H、-OH或-CH3中的任一種)。進(jìn)一步地，優(yōu)選R2或R3中一個是氫原子，另一個是甲基。進(jìn)一步地，優(yōu)選R4是羥基。作為前述化合物的最優(yōu)選化合物是由下式表示的那些4_甲基膽留-7-烯-3-醇(式(2))、4_甲基麥角甾-7-烯-3-醇(式(3))和4-甲基豆甾-7-烯-3-醇(式⑷)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>即，4-甲基膽留-7-烯-3-醇是前述通式(1)表示的化合物其中R2和R3中的一個是氫原子、另一個是甲基，R4是羥基，Rl是前述式(vi)表示的基團(tuán)(Re表示-H，Rd表示-CH3)。進(jìn)一步地，4-甲基麥角留-7-烯-3-醇是前述通式(1)表示的化合物其中R2和R3中的一個是氫原子、另一個是甲基，R4是羥基，Rl是前述式(vi)表示的基團(tuán)(Re和Rd均表示-CH3)。進(jìn)一步地，4-甲基豆留-7-烯-3-醇是這樣的前述通式(1)表示的化合物其中R2和R3中的一個是氫原子、另一個是甲基，R4是羥基，Rl是前述式(i)表示的基團(tuán)。本發(fā)明的藥物、食品或飲料可以包含一種、兩種或多種任意類型的前述化合物。已知在植物中包含4-甲基-7-烯膽留烷醇，并且本發(fā)明的化合物可以根據(jù)用于制備4-甲基-7-烯膽甾烷醇的已知方法(山田晃弘，“生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)法”，第24卷，脂肪脂質(zhì)代謝實(shí)驗(yàn)法，第174頁，學(xué)會出版中心，1989)而制備。本發(fā)明的化合物例如可以通過以下方式獲得使用例如用有機(jī)溶劑提取或用熱水提取并且將得到的提取物純化的方法從包含該化合物的植物中提取該化合物。在本發(fā)明中，盡管可以將本發(fā)明的化合物純化，但也可以使用組合物、例如植物提取物或它們的級分，只要其包含有效量的該化合物即可。本發(fā)明的化合物或包含其的組合物可以下述方式制備例如，從包含本發(fā)明化合物的屬于百合科的植物，其部分或粉碎產(chǎn)物中，用有機(jī)溶劑或熱水將包含該化合物的級分提取并濃縮。前述屬于百合科的植物的例子包括屬于蘆薈或蔥屬的植物。蘆薈屬植物的例子包括翠葉蘆薈(AloebarbadensisMiller)、開普蘆薈(AloeferoxMiller)、非洲蘆薈(AloeafricanaMiller).νΓ^^(AloearborescenMi1Iervar.natalensisBerger)薈(AloespicataBaker)等。在本發(fā)明的化合物或者包含其的組合物的制備中，盡管可以使用前述植物的整體，但優(yōu)選使用其葉肉(透明凝膠部分)。優(yōu)選通過使用均化器等使該植物或其部分破碎并且由此液化，并且本發(fā)明的化合物或包含其的組合物是通過使用有機(jī)溶劑或熱水從破碎品中提取的。有機(jī)溶劑的例子包括醇例如甲醇、乙醇和丁醇；酯例如乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯和乙酸丁酯；酮例如丙酮和甲基異丁酮；醚例如乙醚和石油醚；烴例如己烷、環(huán)己烷、甲苯和苯；鹵代烴例如四氯化碳、二氯甲烷和氯仿；雜環(huán)化合物例如吡啶；二醇例如乙二醇；多元醇例如聚乙二醇；腈溶劑例如乙腈，這些溶劑的混合物等。另外，這些溶劑可以是無水或含水的。在這些溶劑當(dāng)中，特別優(yōu)選使用乙酸乙酯/丁醇混合物(31)和氯仿/甲醇混合物(2:1)。作為提取方法，可以使用常規(guī)用于提取植物成分的方法。常規(guī)使用的例如將1300質(zhì)量份有機(jī)溶劑與1質(zhì)量份新鮮植物或干燥植物在低于溶劑沸點(diǎn)的溫度下一邊攪拌或振蕩一邊加熱回流的方法，或者通過在室溫下超聲提取的方法。通過采用合適的方法例如過濾或離心分離從提取液中分離不溶物質(zhì)，可以獲得粗提取物。可以通過各種色譜法例如正相或反相硅膠柱色譜法將粗提取物純化。當(dāng)在正相硅膠柱色譜法中使用梯度的氯仿/甲醇混合物作為洗脫溶劑時，本發(fā)明的化合物是用氯仿甲醇=約251的混合比洗脫的。另外，當(dāng)在反相硅膠柱色譜法中將己烷/乙酸乙酯混合物(41)用作洗脫溶劑時，本發(fā)明的化合物洗脫在早期階段的洗脫流分中。得到的流分可以進(jìn)一步通過HPLC等純化。另外，用于本發(fā)明的化合物還可以通過化學(xué)合成方法或者使用微生物、酶等的生物或酶方法制備。可以通過例如質(zhì)譜(MS)、核磁共振(NMR)譜等證實(shí)如上所述得到的化合物或包含其的組合物是本發(fā)明的化合物或者包含本發(fā)明的化合物。本發(fā)明的化合物具有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用，因此可以防止內(nèi)臟脂肪型肥胖。因此，本發(fā)明的化合物可以用作內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑、食品或者飲料的有效成分。此外，由于翠葉蘆薈的葉皮包含具有緩瀉作用的蘆薈苷和蘆薈大黃素，因此這些組分被認(rèn)為是不利于用于不希望具有緩瀉作用的藥物或食品或者飲料中。因此，優(yōu)選包含本發(fā)明的化合物的組合物不包含前述組分。另外，可以將翠葉蘆薈的葉肉或其粉碎品用作內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的有效成分。本發(fā)明的化合物具有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用，因此可以防止內(nèi)臟脂肪型肥胖。因此，本發(fā)明的化合物本身可用作本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑和包含該藥物的食品或飲料的有效成分。另外，包含本發(fā)明化合物的植物的有機(jī)溶劑提取物或熱水提取物或者它們的級分(下文中稱為“提取物等”)也可以用作所述藥物或食品或飲料的有效成分。在該情況中，包含在所述藥物中的前述提取物等優(yōu)選包含至少0.001干質(zhì)量％、更優(yōu)選0.011干質(zhì)量％、特別優(yōu)選0.051干質(zhì)量％的本發(fā)明化合物。另外，包含在所述食品或飲料中的前述提取物等優(yōu)選包含至少0.0001干質(zhì)量％、更優(yōu)選0.0011干質(zhì)量％、特別優(yōu)選0.0051干質(zhì)量％的本發(fā)明化合物。前述提取物等可以包含兩種或多種本發(fā)明的化合物。另外，前述提取物等可以是溶液，或者也可通過常規(guī)方式凍干或噴霧干燥，作為粉末儲存或使用。作為本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑，可以將包含本發(fā)明的化合物或包含其的組合物直接，或?qū)⒈景l(fā)明的化合物或者包含本發(fā)明化合物的組合物與藥物可接受的載體組合口服或非口服地施與哺乳動物(包括人)。在本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑中，本發(fā)明的化合物可以是藥物可接受的鹽。藥物可接受的鹽的例子包括金屬鹽(無機(jī)鹽)和有機(jī)鹽，例如在“Remington，sPharmaceuticalSciences”，第17版，第1418頁，1985中列出的那些。其具體例子包括但不限于，無機(jī)酸鹽例如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、二磷酸鹽和氫溴酸鹽；和有機(jī)酸鹽例如蘋果酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、雙羥萘酸鹽(pamoate)、水楊酸鹽和硬脂酸鹽。此外，該鹽可以是與金屬例如鈉、鉀、鈣、鎂和鋁的鹽或者與氨基酸例如賴氨酸的鹽。此外，溶劑化物例如前述化合物或其藥物可接受的鹽的水合物也落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。對本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的劑型沒有特別限制，并且可以根據(jù)治療目的而適宜地選擇。其具體例子包括片劑、丸劑、散劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、膠囊、糖漿、栓劑、注射劑、軟膏、貼劑、滴眼劑、滴鼻劑等。對于制劑而言，可以使用在用于抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的常用預(yù)防劑中通常作為藥物載體使用的添加劑，例如賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑齊U、穩(wěn)定劑、矯味劑、稀釋劑、表面活性劑和注射劑用溶劑等。此外，只要本發(fā)明的效果不會變差，可以將本發(fā)明的化合物或包含其的提取物等與具有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積作用的其它藥物并用。盡管本發(fā)明化合物或包含其的提取物等在本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑中的含量沒有特別限制并且可以合適地選擇，但本發(fā)明化合物的量例如可以為至少0.001質(zhì)量％，優(yōu)選0.01-1質(zhì)量％，特別優(yōu)選0.05-1質(zhì)量％。本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑具有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用，并且因此可以防止內(nèi)臟脂肪型肥胖。內(nèi)臟脂肪型肥胖通常是指內(nèi)臟脂肪面積為IOOcm2或更大的狀態(tài)，并且根據(jù)用于代謝綜合癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，內(nèi)臟脂肪型肥胖是指日本男性具有85cm或更大的腰圍或日本女性具有90cm或更大的腰圍的情況(InternalMedicine，第94卷，第188-203頁，2005)。另外，本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑優(yōu)選用于治療與健康人相比具有更大量的蓄積內(nèi)臟脂肪的患者。另外，本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑可以改善或防止由內(nèi)臟脂肪蓄積造成的疾病、并發(fā)癥等，例如脂質(zhì)代謝異常和心血管疾病，并且還可以降低這些疾病、并發(fā)癥等的風(fēng)險。由內(nèi)臟脂肪蓄積造成的各種疾病的例子包括肥胖(特別是內(nèi)臟脂肪型肥胖)、高血脂、糖尿病、高血壓和動脈硬化。由這些疾病造成的并發(fā)癥的例子包括由糖尿病造成的糖尿病性視網(wǎng)膜病、腎病、神經(jīng)病和糖尿病性壞疽；由高血壓造成的腦卒中、腎硬化和腎衰竭；和由動脈硬化疾病造成的腦卒中、腦梗塞、心絞痛、心肌梗塞等心血管病，以及腎病如尿毒癥、腎硬化和腎衰竭。另外，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)通過降低血紅蛋白Alc水平，本發(fā)明的化合物具有改善高血糖的作用(W02005/094838)。優(yōu)選的是使用本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的疾病并不伴隨著高于健康人血紅蛋白Alc水平的狀態(tài)。另外，本發(fā)明的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑可用于防止代謝綜合癥的發(fā)病。如上所述的抑制或減少內(nèi)臟脂肪蓄積的藥物的作用用于防止代謝綜合癥和代謝綜合癥相關(guān)的動脈硬化疾病以及象征著其風(fēng)險因素的與生活方式有關(guān)的疾病，例如糖尿病、高血壓和高血脂，以及與這些疾病有關(guān)的并發(fā)癥的發(fā)病非常有效。此外，本發(fā)明中使用的“代謝綜合癥”是指容易發(fā)生動脈硬化，有被看作是多危險因素綜合癥的病態(tài)風(fēng)險因素例如高胰島素血癥、異常葡萄糖耐量或高血糖、異常脂質(zhì)代謝、高血脂(高甘油三酯血癥和低-HDL-膽留醇血癥)、高血壓、肥胖和內(nèi)臟脂肪蓄積的癥狀并發(fā)的狀態(tài)。本發(fā)明的藥物的服用時間沒有特別限制并且可以根據(jù)用于治療目標(biāo)疾病的方法而適宜地選擇。此外，優(yōu)選根據(jù)劑型、患者的年齡、性別和其他條件、患者癥狀嚴(yán)重性等來確定給藥途徑。根據(jù)用法、患者的年齡、性別、疾病的嚴(yán)重性、患者的其他條件等來選擇本發(fā)明藥物的劑量。作為有效成分的本發(fā)明化合物的量通常從優(yōu)選0.001-50mg/kg/天、更優(yōu)選0.01-lmg/kg/天的范圍內(nèi)選擇。此外，當(dāng)使用包含本發(fā)明化合物的提取物等時，對于試驗(yàn)劑量，提取物等的干重量從優(yōu)選0.l-1000mg/kg/天，更優(yōu)選l-100mg/kg/天的范圍內(nèi)選擇。在任何情況中，該劑量可以在一天內(nèi)一次或分成幾次施與?？梢詫⒈景l(fā)明的化合物或包含其的組合物加入食品或飲料(飲料或食品)中以制得具有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積作用的食品或飲料。對食品或飲料的形式和性能沒有特別限制，只要有效成分的作用不會變差，并且食品或飲料可以由口攝取即可，并且其可以通過除加入前述有效成分之外，使用通常用于食品或飲料的原料以常規(guī)方式制備。對包含在本發(fā)明的食品或飲料中的本發(fā)明化合物或者包含其的提取物等的含量沒有特別限制并且可以適宜地選擇。例如，以本發(fā)明化合物的量計(jì)，本發(fā)明化合物或包含其的提取物等以至少0.0001質(zhì)量％、優(yōu)選0.001-1質(zhì)量％、特別優(yōu)選0.005-1質(zhì)量％的量包含在食品或飲料中。本發(fā)明的食品或飲料可用于利用減少內(nèi)臟脂肪作用的各種用途。例如，其可以用作適用于開始擔(dān)心其腰部尺寸的人的食品或飲料、適用于開始擔(dān)心血脂的人的食品或飲料、和用于降低或消除代謝綜合癥的危險因素的食品或飲料等。對于本發(fā)明的食品或飲料，所使用的“抑制內(nèi)臟脂肪蓄積”是指改善或防止了由內(nèi)臟脂肪蓄積引起的對健康的各種負(fù)面影響。在本發(fā)明中，“改善內(nèi)臟脂肪型肥胖”、“防止內(nèi)臟脂肪型肥胖”、“減少內(nèi)臟脂肪”、“防止內(nèi)臟脂肪蓄積”等也可以被例舉為與前述術(shù)語“抑制內(nèi)臟脂肪蓄積”具有相同的含義。另外，本發(fā)明的食品或飲料可用于改善或防止由內(nèi)臟脂肪蓄積造成的疾病，例如以高血脂為代表的異常脂質(zhì)代謝、心血管疾病等。本發(fā)明的食品或飲料也可用于防止內(nèi)臟脂肪型肥胖、代謝綜合癥等的發(fā)病。另外，本發(fā)明的食品或飲料可以治療或預(yù)防由內(nèi)臟脂肪蓄積造成的各種疾病、并發(fā)癥等，并且可以減小如上面對于本發(fā)明藥物所提及的那些疾病、并發(fā)癥等的風(fēng)險。本發(fā)明的食品或飲料優(yōu)選作為附有該食品或飲料用于抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的標(biāo)識的食品或飲料而銷售，例如“被標(biāo)識為‘用于抑制內(nèi)臟脂肪蓄積’的包含具有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積作用的化合物的食品或飲料”，或“被標(biāo)識為‘用于抑制內(nèi)臟脂肪蓄積’的包含植物提取物的食品或飲料”等。另外，由于本發(fā)明的化合物或者包含其的組合物等具有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的作用，因此該食品或飲料用于抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的標(biāo)識也可以具有改善內(nèi)臟脂肪型肥胖的意思。因此，本發(fā)明的食品或飲料也可被標(biāo)識為“用于改善內(nèi)臟脂肪型肥胖”。換句話說，前述的食品或飲料用于抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的標(biāo)識可以被“用于改善內(nèi)臟脂肪型肥胖”的標(biāo)識代替。用于如上所述的這些標(biāo)識的用語并不限于用語“用于抑制內(nèi)臟脂肪蓄積”或“用于改善內(nèi)臟脂肪型肥胖”，并且無需指出其他用語也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，只要這些用語表明抑制內(nèi)臟脂肪蓄積，或者防止或改善內(nèi)臟脂肪型肥胖的效果即可。作為這類用語，也可以是使消費(fèi)者認(rèn)識到抑制內(nèi)臟脂肪蓄積或改善內(nèi)臟脂肪型肥胖作用的各種基于用途的標(biāo)識。標(biāo)識的例子包括“適用于開始擔(dān)心腰部尺寸的人”、“適用于有成為內(nèi)臟脂肪型肥胖趨勢的人”和“可用于減少或消除代謝綜合癥的風(fēng)險因素(風(fēng)險)”。前述術(shù)語“標(biāo)識”包括使消費(fèi)者知曉前述用途的所有行為，并且提醒或類推前述用途的任何標(biāo)識都落入本發(fā)明的“標(biāo)識”的范圍內(nèi)，與標(biāo)識的目的、內(nèi)容、客觀物體、介質(zhì)等無關(guān)。然而，優(yōu)選使用使消費(fèi)者能夠直接認(rèn)識到前述用途的表述進(jìn)行標(biāo)識。具體例子包括將前述用途標(biāo)識在與本發(fā)明的食品或飲料相關(guān)的商品或商品包裝上的行為，用于轉(zhuǎn)讓或交付或進(jìn)口這類用前述用途標(biāo)識的商品或商品包裝的目的的轉(zhuǎn)讓、交付、展示的行為，展示或散發(fā)與用前述用途標(biāo)識的商品相關(guān)的廣告、價格表或商業(yè)文件，或者通過電磁方法(互聯(lián)網(wǎng)等)提供包括用前述用途標(biāo)識的內(nèi)容等的信息的行為。另一方面，該標(biāo)識優(yōu)選為被行政機(jī)構(gòu)等批準(zhǔn)的標(biāo)識(例如以基于批準(zhǔn)的形式進(jìn)行標(biāo)識，其基于由行政機(jī)構(gòu)規(guī)定的各種制度而得到許可)，并且特別優(yōu)選在銷售點(diǎn)的廣告材料例如包裝、容器、目錄、小冊子和POP、其他文本等上的標(biāo)識。標(biāo)識的例子進(jìn)一步包括作為健康食品、功能食品、腸營養(yǎng)食品、特殊用途食品、具有營養(yǎng)功能說明的食品、準(zhǔn)藥物等的標(biāo)識以及被健康、勞動和福利部門批準(zhǔn)的標(biāo)識，例如基于特定保健用食品體系和類似體系而批準(zhǔn)的標(biāo)識。后者的例子包括作為特定保健用食品的標(biāo)識、作為具有限制的健康說明的特定保健用食品的標(biāo)識、影響人體結(jié)構(gòu)和功能的標(biāo)識、減少疾病風(fēng)險說明的標(biāo)識，并且更詳細(xì)地，典型例子包括在健康增進(jìn)法實(shí)施規(guī)則(日本厚生勞動省令第86號，2003年4月30日)中規(guī)定的作為用于特定保健用食品的標(biāo)識(尤其是保健用途標(biāo)識)和類似的標(biāo)識。將參照以下實(shí)施例更具體地解釋本發(fā)明。然而，本發(fā)明的范圍不限于以下實(shí)施例。首先，制備例描述了本發(fā)明的化合物或組合物可由屬于百合科的植物制備。[制備例1]通過使用均化器將IOOkg的翠葉蘆薈葉肉(透明凝膠部分)液化，添加100L乙酸乙酯/丁醇混合物(31)并攪拌。將混合物靜置過夜，然后將乙酸乙酯/丁醇混合物和水層分離，回收乙酸乙酯/丁醇混合物。通過在減壓下將該乙酸乙酯/丁醇混合物濃縮而獲得的乙酸乙酯/丁醇混合物提取物重13.5g。將13g該提取物溶于ImL氯仿/甲醇混合物(11)中得到的溶液裝在裝有400gSilicaGel60(Merck公司)的柱上，將組分吸附到柱上，然后通過梯度方法用氯仿/甲醇混合物洗脫組分，其中甲醇濃度逐步增加(氯仿甲醇的混合比=1001、251、101、51和11)，并且對上述混合物的每一混合比，將洗脫液分離。通過正相和反相薄層色譜(Merck公司，SilicaGel60F254和RP-18F2543)證實(shí)，在這些流分當(dāng)中，在用氯仿甲醇=251的混合物洗脫的流分中存在本發(fā)明的化合物。含有本發(fā)明化合物的該粗純化物質(zhì)(粗純化物1)重3g。另外，以上述操作由用氯仿甲醇=101和11的混合物洗脫的流分中得到的粗純化物的產(chǎn)量分別為1.17和2.27g。去除這些流分的溶劑，然后將各提取物溶于ImL氯仿/甲醇混合物(11)中，裝在裝有l(wèi)OOgSilicaGel60的柱上，將組分吸附在柱上，并且然后用IlOOmL己烷/乙酸乙酯混合物(41)洗脫這些組分。洗脫的流分以300mL(流分A)、300mL(流分B)和500mL(流分C)的順序依次分開收集。在從流分A、B和C中除去溶劑之后得到的產(chǎn)量分別為0.6g、1.35g和0.15g。通過正相和反相薄層色譜證實(shí)本發(fā)明的化合物濃縮在流分A(粗純化物2)中。借助于氯仿/己烷混合物(8515)使用C0SM0SILC18(NacalaiTesque,Inc.)通過HPLC將該粗純化物2進(jìn)一步分離，得到1.3mg化合物3(4-甲基膽甾-7-烯-3-醇)、1.2mg化合物4(4-甲基麥角甾-7-烯-3-醇)和Img化合物5(4-甲基豆甾-7-烯-3-醇)。這些化合物的結(jié)構(gòu)通過MS和NMR確認(rèn)。實(shí)施例1在實(shí)施例1中，使用作為肥胖糖尿病動物模型的ZDF(ZuckerDiabeticFatty)大鼠來研究具有4-甲基-7-烯膽留烷醇骨架的化合物對內(nèi)臟脂肪蓄積的抑制作用。(1)樣品的制備將在制備例1中制備的化合物3(4-甲基膽留-7-烯-3-醇)、化合物4(4-甲基麥角甾-7-烯-3-醇)和化合物5(4-甲基豆甾-7-烯-3-醇)分別用作試驗(yàn)樣品1、2和3。將各試驗(yàn)樣品溶于DMSO中，并且用蒸餾水將各試驗(yàn)樣品中的各化合物的濃度調(diào)節(jié)至10μg/ml,由此制備試驗(yàn)樣品1-1、2-1和3-1。制備具有1μg/ml的化合物濃度的試驗(yàn)樣品1-2,2-2和3-2。另外，將DMSO的最終濃度調(diào)節(jié)至0.2%。另外，制備不含試驗(yàn)樣品的溶液作為陰性樣品。(2)試驗(yàn)方法預(yù)先用高脂肪食物(ResearchDietInc.)喂養(yǎng)6周大的雄性ZDF大鼠(從CharlesRiverLaboratories,Inc.，US購得)1個月，然后將這些大鼠分成分別為6只大鼠的組。使用探針每天一次分別將陰性樣品、試驗(yàn)樣品1-1、1_2、2-1、2-2、3-1和3_2的溶液以每400g大鼠體重1ml、連續(xù)44天經(jīng)口施與各組的大鼠。在給藥開始第45天，測定腸系膜脂肪重量作為內(nèi)臟脂肪。(3)試驗(yàn)結(jié)果表1示出了在給藥開始第45天的腸系膜脂肪重量。施與陰性樣品的大鼠組具有6.83士1.IOg的腸系膜脂肪重量，施與化合物濃度為10μg/ml的試驗(yàn)樣品1_1、2_1和3_1的組分別具有4.48士1.34g、3.78士0.26g和3.36士1.67g的腸系脂肪重量，這些重量為施與陰性樣品的組的65.0%,54.9%和48.7%。因此，證實(shí)試驗(yàn)樣品1_1、2_1和3_1具有顯著的抑制內(nèi)臟脂肪蓄積作用。另一方面，分別施與化合物濃度為1μg/ml的試驗(yàn)樣品1-2、2-2和3-2使內(nèi)臟脂肪有減少的趨勢，但沒有觀察到顯著的作用。此外，從病理觀點(diǎn)出發(fā)沒有觀察到副作用。另外，表1中的P值表示Tukey-Kramer檢驗(yàn)的顯著性概率。[表1]<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>在該表中，“*”表示在統(tǒng)計(jì)上有抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的顯著作用。實(shí)施例2在實(shí)施例2中，研究具有4-甲基-7-烯膽留烷醇骨架的化合物對大鼠食物攝取量(攝食量)和體重增加(體重增加量)的影響。(1)樣品的制備將用于實(shí)施例1中的試驗(yàn)樣品1-1、2-1和3-1用作試驗(yàn)樣品。另外，制備不含試驗(yàn)樣品的溶液作為陰性樣品。(2)試驗(yàn)方法預(yù)先用高脂肪食物(ResearchDietInc.)喂養(yǎng)6周大的雄性ZDF大鼠(從CharlesRiverLaboratories,Inc.，US購得)1個月，測量這些大鼠的體重，然后將這些大鼠分成分別為6只大鼠的組。使用探針每天一次將試驗(yàn)樣品1-1、2-1、3-1以及陰性樣品的溶液以每400g大鼠體重1ml、連續(xù)44天經(jīng)口施與各組的大鼠。在給藥開始后第42天測量大鼠的體重，并且將第42天時的體重與在給藥開始前測量的那些之間的差值作為體重增加量。另外，從開始的那天起大約一周一次地測量每天攝取的食物量，并且將重量平均值作為每天的食物攝取量。(3)試驗(yàn)結(jié)果表2示出了每只大鼠每天的食物攝取量和在42天期間的體重增加量。觀察到與施與陰性樣品的組相比，分別施與試驗(yàn)樣品1-1、2_1和3-1的組沒有表現(xiàn)出食物攝取量的顯著增加或減少。另外，分別施與試驗(yàn)樣品1-1、2-1和3-1的組的體重增加量(體重增加)幾乎與施與陰性樣品的組相同。因此，發(fā)現(xiàn)具有4-甲基-7-烯膽留烷醇骨架的化合物不會影響大鼠的食物攝取量和體重增量。[表2]<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>產(chǎn)業(yè)實(shí)用性根據(jù)本發(fā)明，可以提供能夠在不減少體重的情況下保持標(biāo)準(zhǔn)體重并且有效用于抑制肥胖發(fā)展而沒有過度飲食限制等的內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑，和包含該內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑的生理功能食品或飲料(例如特定保健用食品)。因此，可以改善或防止由內(nèi)臟脂肪蓄積造成的疾病、并發(fā)癥等(例如異常脂質(zhì)代謝和心血管疾病)，并且還可以減少這些疾病、并發(fā)癥等的風(fēng)險。另外，本發(fā)明還具有防止代謝綜合癥和被認(rèn)為是代謝綜合癥的風(fēng)險因素的與生活方式有關(guān)的疾病(例如糖尿病、高血壓和高血脂)發(fā)病的作用。權(quán)利要求百合科植物的有機(jī)溶劑提取物或熱水提取物或它們的級分在制備內(nèi)臟脂肪蓄積抑制劑中的用途，其中前述提取物或級分含有至少0.001干質(zhì)量％選自4-甲基膽甾-7-烯-3-醇、4-甲基麥角甾-7-烯-3-醇和4-甲基豆甾-7-烯-3-醇的化合物。2.百合科植物的有機(jī)溶劑提取物或熱水提取物或它們的級分在制備抑制內(nèi)臟脂肪蓄積的食品或飲料中的用途，其中前述提取物或級分含有至少0.0001干質(zhì)量％選自4-甲基膽甾-7-烯-3-醇、4-甲基麥角留-7-烯-3-醇和4-甲基豆留-7-烯-3-醇的化合物。3.權(quán)利要求1或2所述的用途，其中百合科植物是翠葉蘆薈。全文摘要為了減少蓄積在腹腔中的脂肪量并且防止或改善被認(rèn)為是代謝綜合癥的主要因素的內(nèi)臟脂肪型肥胖，本發(fā)明提供包含具有4-甲基-7-烯膽甾烷醇骨架的化合物或者包含該化合物作為有效成分的百合科植物的有機(jī)溶劑提取物或熱水提取物或它們的級分的藥物、食品或者飲料。文檔編號A23L1/30GK101804144SQ20101016437公開日2010年8月18日申請日期2006年9月21日優(yōu)先權(quán)日2005年9月22日發(fā)明者三澤江里子,田中美順申請人:森永乳業(yè)株式會社