專利名稱：用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡檢查的陪替氏培養(yǎng)皿的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡檢查的陪替氏培養(yǎng)皿，其能夠用于培養(yǎng)細(xì)胞以及用于在顯微鏡下觀察所培養(yǎng)的細(xì)胞，并且其尤其適合用于執(zhí)行激光解剖顯微鏡檢查。
背景技術(shù)：
目前，將涂覆硅樹脂的玻璃陪替氏培養(yǎng)皿和覆蓋鉬的金屬環(huán)狀物的結(jié)合體被用于活細(xì)胞的顯微解剖。細(xì)胞被在膜狀環(huán)狀物中培養(yǎng)，然后將環(huán)狀物放置于陪替氏培養(yǎng)皿中并插入顯微鏡中。待提取的細(xì)胞被通過顯微解剖在其外周周周切開，隨后將環(huán)狀物從陪替氏培養(yǎng)皿移出。已切口的細(xì)胞留在陪替氏培養(yǎng)皿中然后在那里被進(jìn)一步培養(yǎng)。在DE20 2004 001 703 Ul中公開的環(huán)狀物將作為覆蓋有薄膜的環(huán)狀物的示例被提及，該環(huán)狀物此外可能包括設(shè)置在薄膜的下面并且由例如特氟龍制成的保護(hù)性膜。具有環(huán)狀物并且插入到用于激光顯微解剖的顯微鏡中的陪替氏培養(yǎng)皿底部的總厚度為大約2mm，該數(shù)值即使對于長距離物鏡(20x，40x)來說也是臨界值。此外，由玻璃制成的標(biāo)準(zhǔn)的陪替氏培養(yǎng)皿呈現(xiàn)大的幾何公差，因此底部厚度變化很大。此外，還沒有用于填充有硅樹脂的玻璃陪替氏培養(yǎng)皿的、能夠提供精確的限定的硅樹脂插入件并因此具有可預(yù)定的光學(xué)特性的可控的制造工序。因此，這將導(dǎo)致填充有硅樹脂的玻璃陪替氏培養(yǎng)皿的顯微性能非常差，以至于這些或者根本不能用于現(xiàn)代顯微方法如相差顯微鏡檢查、熒光顯微鏡檢查或DIC，或者僅能夠在對質(zhì)量進(jìn)行有力地限制的情況下使用。能夠更容易地并且更精確地制造的塑料陪替氏培養(yǎng)皿由于其差的UV透明性而不能用于激光顯微解剖。最后，另外的問題包括膜在硅樹脂填充物上的粘附，這或者不存在或者不在整個(gè)表面上存在。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是提供一種用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡檢查的培養(yǎng)皿，該培養(yǎng)皿提供其基部的可嚴(yán)格限定的光學(xué)特性并且既適用于細(xì)胞培養(yǎng)也適用于激光解剖顯微鏡檢查。該目的通過根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求8所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡檢查的培養(yǎng)皿實(shí)現(xiàn)。進(jìn)一步優(yōu)選的光學(xué)特性在從屬權(quán)利要求中加以限定。


圖1示出了具有環(huán)狀物和凸起的粘合劑填充物的本發(fā)明的培養(yǎng)皿；圖2示出了具有環(huán)狀物和凹入的粘合劑填充物的培養(yǎng)皿；圖3示出了具有環(huán)狀物和平的粘合劑填充物的培養(yǎng)皿；圖4示出了根據(jù)本發(fā)明的培養(yǎng)皿，其中插入了激光顯微解剖膜環(huán)狀物；圖5示出了根據(jù)本發(fā)明的可替代實(shí)施例的培養(yǎng)皿，其包括全寬度基部和凸起的表
具體實(shí)施例方式在圖1中，圖示了根據(jù)本發(fā)明的第一實(shí)施例的發(fā)明性陪替氏培養(yǎng)皿1。培養(yǎng)皿包括環(huán)狀物2，該環(huán)狀物2形成基部的連接培養(yǎng)皿的外凸脊或邊緣3的部分，所述外凸脊或邊緣3在外側(cè)上并且沿軸向方向向上延伸。環(huán)狀物和外凸脊優(yōu)選地由光學(xué)透明材料制成，如硅石玻璃(熔凝的石英玻璃)或光學(xué)透明塑料，并且可以以一件的形式(一體地)制造或者分開地制造然后接合。特別地，如果環(huán)狀物和/或外凸脊由塑料制成，則可以通過例如注塑成型的方法來實(shí)現(xiàn)高的制造精度和恒定的產(chǎn)品質(zhì)量，這是用于在顯微鏡檢查中使用培養(yǎng)皿的首要事。環(huán)狀物的厚度優(yōu)選地為大約1mm，這與常規(guī)的顯微鏡載玻片的厚度一致。在環(huán)狀物2的底側(cè)處附接底部膜4，該底部膜4的厚度大致小于底部環(huán)狀物2的厚度，并且該底部膜4可以從下方封閉環(huán)狀物開口。底部膜由對于UV輻射來說透明的材料制成，例如聚苯乙烯和聚丙烯的特定組合物。優(yōu)選地，膜也可以是由例如超純硅石玻璃(熔凝的石英玻璃)制成的蓋玻片。膜4或蓋玻片的厚度優(yōu)選地小于500μπι，并且優(yōu)選地是 100 μ m0環(huán)狀物的內(nèi)側(cè)5與底部膜4 一起形成凹部，該凹部的深度與環(huán)狀物的厚度相一致并因此為大約1mm。凹部填充有對于UV輻射來說是透明的并且優(yōu)選地由硅樹脂制成的粘合劑填充物6，從而形成優(yōu)選地稍微凸的表面7。這樣，形成透明的底表面，該底表面一方面與顯微鏡載玻片的厚度相適應(yīng)，光學(xué)上高度透明，并且同時(shí)由于其凸起的構(gòu)造使具有待放置于培養(yǎng)皿中的膜環(huán)狀物的粘接表面最大化。由于粘合劑填充物6被通過凹部空間地確定， 所以保證了容易的制造。此外，底層的厚度可以以此方式與標(biāo)準(zhǔn)化的顯微鏡載玻片的厚度相適應(yīng)，從而使發(fā)明的培養(yǎng)皿可以直接與常規(guī)的顯微鏡物鏡使用。特別的，填充物和膜或蓋玻片的UV透明性對于通過UV激光從保持在培養(yǎng)皿中的樣品切割出已解剖的物體的過程來說是必要的。圖2和圖3示出了具有發(fā)明的陪替氏培養(yǎng)皿的可替代實(shí)施例，其中圖2中的粘合劑填充物的表面7’是凹入的，并且圖3中的表面7”是平的。盡管凹入的填充物特別適用于必需少量緩沖液的應(yīng)用，但是平的填充物自身適于下述應(yīng)用，在該應(yīng)用中，僅允許淺的(窄的)的領(lǐng)域，優(yōu)選地是在大的顯微放大率下，并且樣品的曲率因此不利。在圖1-圖3的實(shí)施例中，填充物的厚度與凹部中的一個(gè)大致一致，即大約1mm，雖然該厚度僅對于圖3的平的實(shí)施例來說是嚴(yán)格正確的，并且對于圖1和圖2的實(shí)施例來說， 該厚度在培養(yǎng)皿的徑向方向上由于表面形狀(凸起的或凹入的)的變化而需要考慮，從而將考慮到在500 μ m至1200 μ m之間的變化范圍。在圖4中，示出的發(fā)明的培養(yǎng)皿具有凸起的填充物和放置在其中的激光顯微解剖 (LMD)膜環(huán)狀物8。從圖中可以看出，LMD膜9在粘合劑填充物6的凸起形狀的表面7上是張緊的(跨接的)，因此在凸起形狀的表面7的整個(gè)表面上粘接至該凸起形狀的表面7。因此，由于粘接作用，在激光切割后呈現(xiàn)在已切割的LMD膜上的細(xì)胞不會(huì)被移位，從而實(shí)現(xiàn)較高的可參考度。最后，圖5示出的實(shí)施例中，陪替氏培養(yǎng)皿10包括基部(底部)12和培養(yǎng)皿的外凸脊或邊緣13，該外凸脊或邊緣13在其邊緣處沿軸向方向向上延伸。在此，基部和外凸脊由塑料制成，外凸脊對于基部來說是透明的，并且根據(jù)具體應(yīng)用，外凸脊透明或不透明?；亢屯馔辜沟膬?nèi)側(cè)15—起因此形成凹部，與上述實(shí)施例相似，該凹部填充有對于UV輻射來說透明的粘合劑填充物16，并且優(yōu)選地由硅樹脂制成，從而產(chǎn)生優(yōu)選地稍微凸的表面17。基部和填充物一起的厚度小于大約1mm。以這種方式形成的透明底表面提供與圖1的實(shí)施例相同的優(yōu)點(diǎn)，但能夠更加簡單地制造。 上述實(shí)施例中描述的培養(yǎng)皿尤其適用于干涉差顯微鏡檢查、相差顯微鏡檢查、熒光方法和激光顯微解剖。
權(quán)利要求
1.一種用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡檢查的培養(yǎng)皿(1)，包括環(huán)狀物(2)和從所述環(huán)狀物( 向上地且軸向地突出的外凸脊(3)，其中所述環(huán)狀物在所述環(huán)狀物的底側(cè)覆蓋有透明膜G)，由此形成由所述環(huán)狀物的內(nèi)側(cè)( 和所述膜界定的凹部，其特征在于所述凹部填充有粘合劑填充物(6)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述膜(4)是蓋玻片。
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述膜(4)在紫外線中是透明的。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述膜(4)的厚度小于500μ m。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述填充物(6)和所述膜(4) 一起的厚度小于大約1mm。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述環(huán)狀物O)的厚度是大約Imm。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述環(huán)狀物⑵和所述外凸脊 (3)由透明材料制成，優(yōu)選地由透明塑料制成。
8.一種用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡檢查的培養(yǎng)皿(10)，包括基部(1 和在所述基部(1 的邊緣處向上地且軸向地突出的外凸脊(13)，其中所述基部和所述外凸脊由透明塑料制成，所述基部和所述外凸脊的內(nèi)側(cè)(1 一起形成凹部，所述凹部填充有粘合劑填充物(16)，所述基部和所述填充物一起的厚度小于大約1mm。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述凹部中的所述粘合劑填充物(6)的表面(7’ )是凹入的。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述凹部中的所述粘合劑填充物(6,16)的表面(7,17)是凸起的。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，其中所述凹部中的所述粘合劑填充物(6)的表面(7”)是平的。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1、10)，其中所述填充物(6、16)是聚合物材料，特別地是硅樹脂或橡膠，或凝膠。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1、10)，其中所述粘合劑填充物(6、16) 在所述紫外線中是透明的。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)皿(1)，進(jìn)一步包括環(huán)狀插入件(8)，所述環(huán)狀插入件(8)覆蓋有膜(9)并且能夠放置在所述培養(yǎng)皿中。
全文摘要
提供一種用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡檢查的培養(yǎng)皿，包括環(huán)狀物和從環(huán)狀物向上地且軸向地突出的外凸脊，其中環(huán)狀物在其底側(cè)覆蓋有透明膜，因此形成由環(huán)狀物的內(nèi)側(cè)和膜界定的凹部，其特征在于該凹部填充有粘合劑填充物?？商娲?，提供一種用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡檢查的培養(yǎng)皿，包括基部和在其邊緣處向上地且軸向地突出的外凸脊，其中基部和外凸脊由透明塑料制成，基部和外凸脊的內(nèi)側(cè)一起形成凹部，凹部中填充有粘合劑填充物，并且基部和填充物一起的厚度小于大約1mm。
文檔編號(hào)C12M1/22GK102203235SQ200980143166
公開日2011年9月28日 申請日期2009年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月31日
發(fā)明者斯特凡·尼耶倫 申請人:Mmi股份有限公司