專利名稱：厭氧微生物發(fā)酵生產(chǎn)丁二醇的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)丁二醇，尤其涉及通過微生物發(fā)酵包含CO的基質(zhì)來生產(chǎn)2，3-丁二醇。
背景技術(shù)：
用于運(yùn)輸?shù)纳锶剂鲜蔷哂形Φ钠吞娲?，作為低濃度的混合物正迅速滲透進(jìn)燃料市場。生物燃料獲自天然植物來源，比來自化石資源的(如汽油)的那些更具有環(huán)境可持續(xù)性，它們的使用使得釋放到大氣中的由燃料燃燒產(chǎn)生的所謂化石二氧化碳(CO2) 氣體水平降低。此外，生物燃料可以在許多地理區(qū)域當(dāng)?shù)厣a(chǎn)，能夠降低對于進(jìn)口化石能量資源的依賴。適合作為生物燃料使用的醇包括乙醇、丁醇和2，3_ 丁二醇。乙醇正迅速成為世界范圍內(nèi)主要的富含氫的液體運(yùn)輸燃料。2002年全球乙醇消耗量估計108億加侖。由于在歐洲、日本、美國和幾個發(fā)展中國家對乙醇的興趣增加，預(yù)計燃料乙醇產(chǎn)業(yè)的全球市場也將在未來急劇增長。丁二醇，包括1，2-丁二醇、1，3-丁二醇、1，4-丁二醇和2，3_ 丁二醇，可能被認(rèn)為具有很多超過乙醇的優(yōu)勢。如乙醇一樣，丁二醇可直接用作汽車燃料添加劑。它們也可以比較容易地轉(zhuǎn)換成許多其他潛在的更高價值和/或更高能量的產(chǎn)品。例如，2，3- 丁二醇可以經(jīng)兩步加工容易地被轉(zhuǎn)換為八碳二聚體，所述二聚體可用作航空燃料。2，3_丁二醇多功能性來自其雙功能的骨架，即2個羥基位于相鄰的C-原子使得分子很容易地轉(zhuǎn)化成如丁二烯、丁二酮(butadione)、乙偶姻、甲基乙基酮等物質(zhì)。這些化合物被用作制造許多工業(yè)工藝的化學(xué)品的基礎(chǔ)分子。此外，2，3_丁二醇可以作為內(nèi)燃機(jī)燃料。它與汽油和乙醇比較，在一些方面更類似于汽油。由于對于環(huán)境可持續(xù)燃料的生產(chǎn)和應(yīng)用的興趣增長，對生物方法生產(chǎn)2，3_ 丁二醇 (通常被稱為生物丁醇)的興趣也已增加。2，3_ 丁二醇可以通過微生物發(fā)酵包含碳水化合物的原料生產(chǎn)(Syu MJ，Appl Microbiol Biotechnol (《應(yīng)用微生物學(xué)與生物技術(shù)》)55 10-18 Q001)，Qin 等人，Chinese J Chem Eng (《中國化學(xué)工程學(xué)報》)14 (1) 132-136 (2006))。2，3-丁二醇也可以通過微生物發(fā)酵來自農(nóng)作物(如甜菜、玉米、小麥和甘蔗)的生物質(zhì)生產(chǎn)。然而，這些碳水化合物原料的成本受其作為人類食品或動物飼料的價格影響，并且栽培用于2，3-丁二醇生產(chǎn)的產(chǎn)生淀粉或蔗糖的作物不是在所有地區(qū)都是經(jīng)濟(jì)可持續(xù)的。因此，開發(fā)將較低成本和/或較豐富的碳資源轉(zhuǎn)化為2，3- 丁二醇的技術(shù)受到人們的關(guān)注。一氧化碳(CO)是諸如煤或石油及石油衍生產(chǎn)品之類的有機(jī)物不完全燃燒的主要副產(chǎn)物。雖然包含碳的前體完全燃燒產(chǎn)生CO2和水作為僅有的終產(chǎn)物，但是一些工業(yè)工藝需要有利于一氧化碳的累積超過(X)2的升高的溫度。一個例子是鋼鐵工業(yè)，其中需要高溫來產(chǎn)生理想的鋼材質(zhì)量。例如，據(jù)報道在澳大利亞鋼鐵工業(yè)每年產(chǎn)生和釋放到大氣中的CO 超過500,000噸。此外，CO也是合成氣的主要成分，其中通過對含碳燃料進(jìn)行氣化而產(chǎn)生不同量的CO和H2。例如，可以通過對于廢木材和木料的有機(jī)生物質(zhì)進(jìn)行裂化產(chǎn)生用于生產(chǎn)燃料和更復(fù)雜的化學(xué)產(chǎn)品的前體來制備合成氣。CO釋放到大氣中可能存在嚴(yán)重環(huán)境影響。此外，可能被要求支付排放稅，增加了工廠的成本。由于CO是一種反應(yīng)能量豐富的分子，它可以被用作生產(chǎn)許多化學(xué)產(chǎn)品的前體化合物。然而，該有價值的原料還未被用來生產(chǎn)2，3-丁二醇。本發(fā)明的目的是提供至少在一定程度上克服上述缺點(diǎn)的生產(chǎn)方法或者至少為公眾提供有用的選擇
發(fā)明內(nèi)容
一方面，本發(fā)明提供了一種通過微生物發(fā)酵含一氧化碳的基質(zhì)生產(chǎn)丁二醇的方法。在具體實(shí)施方式
中，本發(fā)明提供了一種通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)丁二醇的方法，所述方法包括a.提供包含CO的基質(zhì)；b.在包含一種或更多種微生物培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中，厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)生產(chǎn)丁在某些實(shí)施方式中，所述丁二醇是2，3-丁二醇。另一方面，本發(fā)明提供了一種提高發(fā)酵生產(chǎn)2，3_ 丁二醇效率的方法，所述方法包括a.提供包含CO的基質(zhì)；b.在包含一種或更多種微生物培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中，厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)生產(chǎn) 2，3-丁二醇。本發(fā)明的另一方面，提供了一種通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)2，3_ 丁二醇的方法，所述方法包括a.提供基質(zhì)；b.在包含一種或更多種微生物培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)，其中的一種或更多種微生物包含一種或更多種2，3- 丁二醇脫氫酶基因；c.上調(diào)所述2，3_ 丁二醇脫氫酶基因，使所述微生物生產(chǎn)2，3_ 丁二醇。在具體實(shí)施方式
中，所述基質(zhì)包含CO。在各方面的具體實(shí)施方式
中，所述包含一氧化碳的基質(zhì)是包含一氧化碳的氣態(tài)基質(zhì)。所述包含一氧化碳的氣態(tài)基質(zhì)可作為工業(yè)工藝的副產(chǎn)物獲得。在某些實(shí)施方式中，工業(yè)工藝選自黑色金屬制品制造業(yè)、有色金屬制品制造業(yè)、石油煉制工藝、生物質(zhì)氣化、煤的氣化、電力生產(chǎn)、炭黑生產(chǎn)、氨生產(chǎn)、甲醇生產(chǎn)和焦炭生產(chǎn)組成的組。在一種實(shí)施方式中，所述氣態(tài)基質(zhì)包含獲自鋼鐵廠的氣體。在另一實(shí)施方式中，氣態(tài)基質(zhì)包含汽車廢氣。在具體的實(shí)施方式中，含有CO的基質(zhì)典型地含有一大部分的C0，例如，按體積計至少約20 %到約100 %的C0，按體積計40 %到95 %的C0，按體積計40 %到60 %的C0，以及按體積計45 %至55 %的CO。在具體實(shí)施方式
中，所述基質(zhì)包含按體積計約25 %、或約30 %、 或約35%、或約40%、或約45%、或約50%⑶，或約55%⑶，或者約60% CO。具有較低濃度(如6% ) CO的基質(zhì)可能也合適，尤其是在H2和(X)2也存在時。各方面的具體實(shí)施方式
中，以充足的水平提供包含CO的基質(zhì)，使產(chǎn)生2，3- 丁二
5醇。在具體實(shí)施方式
中，所提供的CO使得比攝取速率保持在至少0. 4mm0l/g/min ；或者至少 0. 5mmol/g/min ；或者至少 0. 6mmol/g/min ；或者至少 0. 7mmol/g/min ；或者至少 0. 8mmol/ g/min ；或者至少 0. 9mmol/g/min ；或者至少 1. Ommol/g/min ；或者至少 1. 2mmol/g/min ；或者至少 1. 5mmol/g/min。在各方面的某些實(shí)施方式中，所述方法包括利用產(chǎn)醇梭菌 (Clostridiumautoethanogenum)進(jìn)行的微生物發(fā)酵。另一方面，本發(fā)明提供了一種通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)2，3_ 丁二醇的方法，所述方法包括a.提供基質(zhì)；b.在包括產(chǎn)醇梭菌培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)生產(chǎn)2，3- 丁二醇。在具體的實(shí)施方式中，所述基質(zhì)是一種或更多種碳水化合物，例如果糖?？蛇x擇地，所述基質(zhì)是包含一氧化碳的基質(zhì)，如前文所述，典型地包含一氧化碳的氣態(tài)基質(zhì)。進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供了一種微生物發(fā)酵第一基質(zhì)和包含CO的第二基質(zhì)生產(chǎn)丁二醇的方法。優(yōu)選地，所述丁二醇是2，3-丁二醇。在具體的實(shí)施方式中，所述第一基質(zhì)是碳水化合物。在某些實(shí)施方式中，所述第一基質(zhì)是果糖。在某些實(shí)施方式中，如前文所述，所述第二基質(zhì)是包含一氧化碳的氣態(tài)基質(zhì)。在具體的實(shí)施方式中，所述方法包括下述步驟(a)微生物發(fā)酵所述第一基質(zhì)生產(chǎn)2，3 丁二醇(b)微生物發(fā)酵所述包含CO的第二基質(zhì)生產(chǎn)2，3- 丁二醇在某些實(shí)施方式中，步驟(a)和(b)可同時進(jìn)行。可選擇地，步驟(a)可以實(shí)質(zhì)上在步驟(b)之前或之后進(jìn)行。在具體的實(shí)施方式中，所述方法可以交替進(jìn)行步驟(a)和步驟(b)。本發(fā)明進(jìn)一步的方面，提供了一種依據(jù)前述任一方面的方法，其中所述發(fā)酵在生物反應(yīng)器中進(jìn)行。本發(fā)明進(jìn)一步的方面，提供了一種依據(jù)前述任一方面的方法，其中所述方法進(jìn)一步包括捕獲或回收丁二醇的步驟。進(jìn)一步的方面，提供了由前述任何方面的方法生產(chǎn)的丁二醇，優(yōu)選2，3-丁二醇。本發(fā)明還可以廣義地單獨(dú)地包括本申請的說明書中提到或表明的部分、要素和特征，或集合性包括兩個或更多所述部分、要素或特征的任意或全部組合。在本文提到含有本發(fā)明涉及的技術(shù)領(lǐng)域公知的等同物的特定的整體時，這些已知的等同物被視為并入本文中，如同單個陳述一樣。
具體實(shí)施例方式以下是概括給出的本發(fā)明描述，其中包括優(yōu)選的實(shí)施方式。在下文的“實(shí)施例”標(biāo)題下公開的內(nèi)容中，進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明。實(shí)施例中提供了支持本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、發(fā)明方面的特定實(shí)例以及實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的手段。此處所用的“丁二醇”是指所述二醇的所有結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，包括1，2_ 丁二醇、1，3_ 丁二醇、1，4_ 丁二醇和2，3-丁二醇及它們的立體異構(gòu)體。術(shù)語“2，3-丁二醇”應(yīng)解釋為包括所述化合物所有消旋、部分立體異構(gòu)純和/或?qū)嵸|(zhì)上立體異構(gòu)純形式的光學(xué)異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體形式，包括(R，R)、(S，S)和內(nèi)消旋形式。術(shù)語“生物反應(yīng)器”包括由一個或更多個容器和/或塔或管道裝置組成的發(fā)酵設(shè)備，該設(shè)備包括連續(xù)攪拌槽反應(yīng)器(CSTR)、固定化細(xì)胞反應(yīng)器(ICR)、滴流床反應(yīng)器(TBR)、 泡罩塔、氣升發(fā)酵槽、靜止混合器、或適于氣-液接觸的其他容器或其他設(shè)備。正如此后描述的，在一些實(shí)施方式中，生物反應(yīng)器可包括第一生長反應(yīng)器和第二發(fā)酵反應(yīng)器。由此，應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)提及添加基質(zhì)(例如包含一氧化碳的基質(zhì))至生物反應(yīng)器或發(fā)酵反應(yīng)時，需要時包括添加至這些反應(yīng)器中的一個或兩個。應(yīng)當(dāng)理解，術(shù)語“包含一氧化碳的基質(zhì)”和類似術(shù)語包括例如其中一氧化碳可用于一株或更多株細(xì)菌生長和/或發(fā)酵的任何基質(zhì)?！鞍谎趸嫉臍鈶B(tài)基質(zhì)”包括含有一定水平的一氧化碳的任何氣體。氣態(tài)基質(zhì)典型地含有一大部分C0，優(yōu)選地按體積計至少約15%至約95%的CO。除非上下文需要，否則本文所用的短語“發(fā)酵”、“發(fā)酵方法”或“發(fā)酵反應(yīng)”以及類似詞，意在包括工藝的生長階段以及產(chǎn)物生物合成階段。發(fā)明人令人驚訝地證實(shí)，可以通過利用產(chǎn)醇梭菌的微生物發(fā)酵來生產(chǎn)2，3_ 丁二醇。他們發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵產(chǎn)物包括許多醇，借此，乙醇和2，3-丁二醇是重要的替代物。2，3-丁二醇過去并未被確定為使用產(chǎn)醇梭菌的發(fā)酵產(chǎn)物。具體地，發(fā)明人已經(jīng)確定，產(chǎn)醇梭菌可以用來由包含碳水化合物的基質(zhì)生產(chǎn)2，3_ 丁二醇和其他產(chǎn)品。特別是，果糖可以轉(zhuǎn)化成包括乙酸鹽、乙醇以及2，3-丁二醇在內(nèi)的產(chǎn)品。2，3-丁二醇可以通過產(chǎn)醇梭菌由包含CO的基質(zhì)、特別是包含CO的氣態(tài)基質(zhì)生產(chǎn)也得到令人驚訝的證明。在發(fā)酵過程中利用氣態(tài)碳源、 特別是包含CO的碳源過去并未曾導(dǎo)致2，3- 丁二醇的產(chǎn)生。在本發(fā)明具體的實(shí)施方式中，可以通過提供使得生產(chǎn)2，3_ 丁二醇的充足水平的所述基質(zhì)來提高2，3- 丁二醇生產(chǎn)的效率。已經(jīng)認(rèn)識到，提高提供給微生物培養(yǎng)物的基質(zhì)的量，增加了培養(yǎng)物產(chǎn)生的2，3_ 丁二醇的量。在本發(fā)明具體的實(shí)施方式中，提供使得生產(chǎn)2，3- 丁二醇的充足水平的包含CO的基質(zhì)。已經(jīng)表明，包含產(chǎn)醇梭菌(C.autoethanogenum)的微生物培養(yǎng)物能夠以高達(dá)約1. 5 至2mmol/g干重微生物細(xì)胞/min (比CO攝取速率)的速率攝取CO。在本發(fā)明具體的實(shí)施方式中，提供給包含產(chǎn)醇梭菌的微生物培養(yǎng)物包含CO的基質(zhì)，使比攝取速率實(shí)質(zhì)維持在或者至少 0. 4mmol/g/min ；或至少 0. 5mmol/g/min ；或至少 0. 6mmol/g/min ；或至少 0. 7mmol/ g/min ；或至少 0. 8mmol/g/min ；或至少 0. 9mmol/g/min ；或至少 1. Ommol/g/min ；或至少 1. 2mmol/g/min ；或至少1. 5mmol/g/min。在這些實(shí)施方式中，2，3-丁二醇是重要的發(fā)酵產(chǎn)品，至少0. 5g/L ；或至少lg/L ；或至少2g/L ；或至少5g/L。在具體的實(shí)施方式中，以至少 0. 5g/L/天或至少lg/L/天的速率生產(chǎn)2，3- 丁二醇。在本發(fā)明具體的實(shí)施方式中，用于實(shí)施本發(fā)明的方法的裝置能夠測量和/或控制諸如CO供應(yīng)、CO攝取、生物質(zhì)水平、2，3-丁二醇產(chǎn)量之類的參數(shù)。例如，可以從生物反應(yīng)器中取樣品來測定一個或更多個上述參數(shù)，且任選地調(diào)整生物反應(yīng)器條件以提高2，3-丁二醇產(chǎn)量。比如，在生物反應(yīng)器中，其中微生物培養(yǎng)物不生產(chǎn)或生產(chǎn)微不足道量的2，3_ 丁二醇，可以增加CO供應(yīng)使生產(chǎn)2，3- 丁二醇。一般認(rèn)為，諸如乙酸鹽和乙醇之類的產(chǎn)品是由CO經(jīng)過乙酰輔酶A循環(huán)和THF循環(huán)的組合[如 Phillips，J. R，等人，1994，Applied Biochemistry andBiotechnology (《應(yīng)用生物化學(xué)和生物技術(shù)》)，45/46:145描述]來生產(chǎn)的。然而，令人驚訝地，2，3_ 丁二醇可以根據(jù)本發(fā)明所述的方法生產(chǎn)，特別是其中提供CO使得比CO攝取速率保持在至少0. 4mmol/ g/min ；或者至少 0. 5mmol/g/min ；或者至少 0. 6mmol/g/min ；或者至少 0. 7mmol/g/min ；或者至少0. 8mmol/g/min ；或者至少0. 9mmol/g/min ；或者至少1. Ommol/g/min ；或者至少 1. 2mmol/g/min ；或者至少1. 5mmol/g/min。不希望被理論約束，認(rèn)為通過提供足夠的或升高的水平的C0，在發(fā)酵過程中能產(chǎn)生較高的能量產(chǎn)品，如2，3_ 丁二醇。認(rèn)為，諸如2，3_ 丁二醇之類的產(chǎn)物前體用作電子受體，減輕微生物細(xì)胞NAD(P)H形式的過剩的還原能力，由此恢復(fù)有利的NAD (P) =NAD(P)H平衡。進(jìn)一步認(rèn)為，培養(yǎng)物發(fā)酵的碳水化合物也可以通過相似的方式轉(zhuǎn)化為2，3-丁二醇。已經(jīng)推斷性鑒定了產(chǎn)醇梭菌中的下述基因[α]_乙酰乳酸合成酶(ALS)， [α]-乙酰乳酸脫羧酶(ALDC)和2，3_ 丁二醇脫氫酶Q，3BDH)。推測的產(chǎn)醇梭菌(菌株保藏在DSMZ，保藏編號為19630)2,3-丁二醇脫氫酶基因(0RF 1283)顯示出與諾維氏梭菌(Clostridium novyi) (ΝΤΟICX 0344) 2，3BDH的高度同源性，73 %的氨基酸同一性062/357)，84 %陽性(300/357)。ORF 1283還顯示出與枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)YdjL(bdhA)基因顯著的同源性(47%氨基酸同一性，63%陽性且;3e-89的 E-值。LZ1560的ORF 1283是2，!3BDH的進(jìn)一步證據(jù)來自與釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 2, 3BDH (YAL060W)的同源性(E = 2e_53)。不希望被理論約束，認(rèn)為2，3- 丁二醇以如下方式產(chǎn)生自丙酮酸(產(chǎn)生自乙酰輔酶 A的合成代謝中間產(chǎn)物)丙酮酸-—[α ]-乙酰乳酸-—乙偶姻-—2，3- 丁二醇ALS ALDC 2，3BDH對產(chǎn)醇梭菌中2，3- 丁二醇脫氫酶的實(shí)時PCR研究表明，在產(chǎn)生大量2，3_ 丁二醇的培養(yǎng)物中該酶實(shí)質(zhì)上上調(diào)。因此，2，3_ 丁二醇脫氫酶可按照本發(fā)明的方法上調(diào)。例如，當(dāng)以足夠水平提供CO時，2，3- 丁二醇脫氫酶上調(diào)。特別地，當(dāng)提供CO使得微生物培養(yǎng)物的比CO攝取速率至少0. 4mmol/g/min ；或者至少0. 5mmol/g/min ；或者至少0. 6mmol/g/min ； 或者至少0. 7mmol/g/min ；或者至少0. 8mmol/g/min ；或者至少0. 9mmol/g/min ；或者至少 1. 0mmol/g/min ；或者至少 1. 2mmol/g/min ；或者至少 1. 5mmol/g/min ;2，3-丁二醇脫氫酶上調(diào)。因此，本發(fā)明提供了一種通過上調(diào)2，3- 丁二醇脫氫酶而微生物發(fā)酵基質(zhì)生產(chǎn)2，3- 丁二醇的方法。發(fā)明人進(jìn)一步證明不同基質(zhì)，例如碳水化合物基質(zhì)和包含CO的氣態(tài)基質(zhì)，在微生物生產(chǎn)2，3_ 丁二醇過程中能夠被切換，而無有害的影響。此外，他們預(yù)計基質(zhì)能夠被更替 (例如，一種基質(zhì)不可用時)，并能夠繼續(xù)生產(chǎn)2，3- 丁二醇。根據(jù)得到的結(jié)果，在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，通過微生物發(fā)酵包含碳水化合物的基質(zhì)生產(chǎn)2，3_ 丁二醇。在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，包含一氧化碳的基質(zhì)，優(yōu)選包含CO 的氣態(tài)基質(zhì)，被產(chǎn)醇梭菌轉(zhuǎn)化為包括2，3_ 丁二醇在內(nèi)的多種產(chǎn)品。本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方式中，包含碳水化合物(優(yōu)選果糖)的第一基質(zhì)可以被用在發(fā)酵反應(yīng)的起始階段，所述基質(zhì)被完全耗盡后，基質(zhì)能夠被切換成包含CO的第二基質(zhì)。 另外，發(fā)明人驚訝地確定，在包含碳水化合物的第一基質(zhì)作為唯一碳源的起始階段產(chǎn)生2， 3- 丁二醇，并且在包含CO的基質(zhì)作為唯一碳源的后期也產(chǎn)生2，3- 丁二醇。
發(fā)明人證實(shí)2，3_ 丁二醇在許多條件下生產(chǎn)，包括培養(yǎng)基中含有可選擇的緩沖液， 如乙酸鹽緩沖液和檸檬酸鹽緩沖液。發(fā)明人還提出，在PH不加控制且可以變化的實(shí)施方式中，仍然生產(chǎn)2，3_ 丁二醇。適于進(jìn)行理想的發(fā)酵的培養(yǎng)基實(shí)例描述在此后的實(shí)施例部分。發(fā)明人預(yù)期這些方法生產(chǎn)的2，3- 丁二醇可以利用本領(lǐng)域已知的分離技術(shù)容易地回收。此外，2，3-丁二醇可以容易地轉(zhuǎn)化成諸如丁二烯、丁二酮、乙偶姻、甲基乙基酮等之類的物質(zhì)。這些化合物是用于制造大部分化工產(chǎn)品的有價值的基礎(chǔ)分子。因此，發(fā)明人預(yù)計， 本文所披露的方法中生產(chǎn)的2，3_ 丁二醇可以用于制造許多眾所周知的工業(yè)產(chǎn)品。在此，就本發(fā)明利用產(chǎn)醇梭菌和/或生產(chǎn)2，3- 丁二醇的優(yōu)選實(shí)施方式，概括地描述本發(fā)明。但是，應(yīng)該明白，可選的微生物可以取代產(chǎn)醇梭菌。類似地，所述方法可用于生產(chǎn)和回收除了 2，3-丁二醇外的丁二醇。相應(yīng)地，除非上下文需要，提及“2，3-丁二醇”可被一般術(shù)語“丁二醇”取代。^^一種實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)丁二醇的方法。在一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述方法至少包括厭氧發(fā)酵包含CO的基質(zhì)、優(yōu)選包含CO的氣態(tài)基質(zhì)而獲得2，3-丁二醇的步驟。在本發(fā)明的一種具體實(shí)施方式
中，所述方法包括下述步驟(a)提供包含CO的基質(zhì)，優(yōu)選包含CO的氣態(tài)基質(zhì)；(b)在包含一種或更多種微生物培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中，厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)生產(chǎn) 2，3-丁二醇。在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種提高通過發(fā)酵生產(chǎn)2，3_ 丁二醇的效率的方法，所述方法包括(a)提供包含CO的基質(zhì)；(b)在包含一種或更多種微生物培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中，厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)生產(chǎn) 2，3-丁二醇。在具體的實(shí)施方式中，以足夠生產(chǎn)大量2，3- 丁二醇的水平提供所述包含CO的基質(zhì)，例如至少0. 5g/L發(fā)酵培養(yǎng)基，或至少lg/L，或至少2g/L，或至少5g/L。某些實(shí)施方式中，以足夠產(chǎn)生2，3-丁二醇的水平以至少0. 5g/L/天或至少lg/L/天的速率提供CO。在具體的實(shí)施方式中，提供CO使得比攝取速率保持在至少0. 4mmol/g/min ；或者至少0. 5mmol/ g/min ；或者至少 0. 6mmol/g/min ；或者至少 0. 7mmol/g/min ；或者至少 0. 8mmol/g/min ；或者至少0. 9mmol/g/min ；或者至少1. Ommol/g/min ；或者至少1. 2mmol/g/min ；或者至少 1. 5mmol/g/min0本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該知曉提供CO、特別是氣態(tài)CO的方法，以達(dá)到需要的攝取率。然而，通過舉例的方式，諸如增加發(fā)酵培養(yǎng)基中氣體滯留量之類的因素將增加被微生物培養(yǎng)物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的可利用的CO量。氣體滯留量能夠典型地通過機(jī)械手段提高，如提高 CSTR中的攪拌速度。此外，以較快的速率或較高的分壓提供CO也將增加發(fā)酵液中CO的可用性。在另一實(shí)施方式中，所述方法包括通過產(chǎn)醇梭菌發(fā)酵包含碳水化合物的基質(zhì)生產(chǎn)丁二醇，優(yōu)選地，2，3-丁二醇。在另一實(shí)施方式中，所述方法包括下述步驟(a)微生物發(fā)酵所述第一基質(zhì)生產(chǎn)2，3- 丁二醇；
(b)微生物發(fā)酵所述包含CO的第二基質(zhì)生產(chǎn)2，3- 丁二醇。在某些實(shí)施方式中，所述第一基質(zhì)是碳水化合物，在某些實(shí)施方式中，所述基質(zhì)是果糖。優(yōu)選地，所述第二基質(zhì)是包含⑶的氣態(tài)基質(zhì)。在具體實(shí)施方式
中，步驟(a)和(b) 可同時進(jìn)行?？蛇x擇地，步驟(a)可以實(shí)質(zhì)上在步驟(b)之前或之后進(jìn)行。優(yōu)選地，所述方法可以交替進(jìn)行步驟(a)和(b)。在本發(fā)明某些實(shí)施方式中，所述方法進(jìn)一步包括捕獲或回收產(chǎn)生的2，3_ 丁二醇的步驟。微牛物在本發(fā)明的實(shí)施方式中，用于發(fā)酵的一種或更多種微生物是產(chǎn)醇梭菌。在一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述產(chǎn)醇梭菌是具有在德國生物材料資源中心(DSMZ)儲藏的儲藏編號 19630菌株的鑒定特征的產(chǎn)醇梭菌。在另一實(shí)施方式中，所述產(chǎn)醇梭菌是具有DSMZ儲藏編號為DSMZ10061的鑒定特征的產(chǎn)醇梭菌。培養(yǎng)用在本發(fā)明的方法中的細(xì)菌可以采用本領(lǐng)域已知的任何用厭氧細(xì)菌培養(yǎng)和發(fā)酵基質(zhì)的方法進(jìn)行。示例性的技術(shù)在本申請文件“實(shí)施例”部分提供。通過進(jìn)一步的舉例的方式，可以使用在下列文章中概述的那些利用氣態(tài)基質(zhì)發(fā)酵的方法K. T. Klasson, M.D.Ackerson, E. C.Clausen 以及 J. L Gaddy(1991). Bioreactors for synthesis gas fermentations resources ( ☆貞氣 /[本發(fā)_源用生· β ) · Conservation and Recycling(《轉(zhuǎn)化和循環(huán)》)，5 ；145-165 ；K. Τ. Klasson, Μ. D. Ackerson, Ε. C. Clausen 以及 J. L. Gaddy (1991). Bioreactordesign for synthesis gas fermentations (用于合成氣體發(fā)酵的生物反應(yīng)器設(shè)計)· Fuel (《燃料》)· 70. 605-614 ；K. T. Klasson, M. D. Ackerson, E. C. Clausen 以及 J. L Gaddy(1992). Bioconversion of synthesis gas into liquid or gaseous fuels (合成氣體向液體或氣體燃料的生物轉(zhuǎn)化).Enzyme and Microbial Technology (《酶和微生物技術(shù)》)· 14 ；602-608 J. L Vega, G. Μ. Antorrena, Ε. C. Clausen 以及 J. L Gaddy (1989). Study ofGaseous Substrate Fermentation (氣態(tài)基質(zhì)發(fā)酵研究)Carbon Monoxide Conversion to Acetate ( 一氧化碳轉(zhuǎn)化成乙酸鹽)· 2. Continuous Culture (連續(xù)培養(yǎng))· Biotech. Bioeng(《生物技術(shù)與工程》)· 34. 6. 785-793 J. L. Vega, Ε. C. Clausen 以及 J· L Gaddy(1989). Study of gaseoussubstrate fermentations ( ^SM^^ff^) :Carbon monoxide conversion toacetate ( ^ M it Wl ^ it ^J ZjM ife ). 1. Batch culture (分批i音養(yǎng))· Biotechnologyand Bioengineering (〈〈生物技術(shù)與工程》)· 34. 6. 774-784 ；和 J. L Vega, Ε. C. Clausen 以及 J. L Gaddy (1990) · Design of Bioreactors for Coal Synthesis GasFermentations (
器設(shè)計)· Resources，Conservation and Recycling (《資源、轉(zhuǎn)化和再循環(huán)》)· 3. 149-160。 在包含碳水化合物的基質(zhì)上培養(yǎng)細(xì)菌的方法也是本領(lǐng)域眾所周知的。 本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，利用產(chǎn)醇梭菌微生物發(fā)酵包含碳水化合物的基質(zhì)生產(chǎn) 2，3-丁二醇。應(yīng)當(dāng)理解的是，現(xiàn)有技術(shù)中有許多適于發(fā)酵的碳水化合物的例子，和許多用于發(fā)酵碳水化合物基質(zhì)的各類型方法的實(shí)例。通過舉例的方式，合適的基質(zhì)可包括，但不限于，諸如葡萄糖和果糖之類的單糖，諸如蔗糖或乳糖之類的寡糖，諸如纖維素或淀粉之類的多糖。雖然預(yù)計任何這些碳水化合物基質(zhì)(及其混合物)適用于本發(fā)明，優(yōu)選的碳水化合物基質(zhì)是果糖和蔗糖(及其混合物)。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可發(fā)酵的糖可以通過例如US20070031918描述的預(yù)處理和糖化方法從纖維素的生物質(zhì)和木質(zhì)纖維的生物質(zhì)中獲得。生物質(zhì)指任何纖維素或木質(zhì)纖維材料，包括包含纖維素的材料和任選地進(jìn)一步包含半纖維素、木質(zhì)素、淀粉、寡糖和/ 或單糖的材料。生物質(zhì)包括但不限于生物能源作物、農(nóng)業(yè)殘余物、市政固體廢物、工業(yè)固體廢物、紙生產(chǎn)的淤泥、庭園廢物、木材和森林廢物。然而，在本發(fā)明示例性的實(shí)施方式中，用市場上可獲得的果糖作為發(fā)酵碳源和能量來源。在一種具體實(shí)施方式
中，包含一氧化碳的基質(zhì)、優(yōu)選包含一氧化碳的氣態(tài)基質(zhì)用于本發(fā)明的方法。所述氣態(tài)基質(zhì)可以是作為工業(yè)工藝的副產(chǎn)物獲得的廢氣，或者獲自其他一些來源，如內(nèi)燃機(jī)(如汽車)廢氣。在某些實(shí)施方式中，工業(yè)工藝選自黑色金屬制品制造業(yè)(如鋼鐵廠)、有色金屬制品制造業(yè)、石油煉制過程、煤的氣化、電力生產(chǎn)、炭黑生產(chǎn)、氨生產(chǎn)、甲醇生產(chǎn)和焦炭生產(chǎn)組成的組。在這些實(shí)施方式中，包含CO的氣體可以在其排放到大氣之前使用任何方便的方法從工業(yè)工藝捕獲。根據(jù)包含一氧化碳的氣態(tài)基質(zhì)的組合物，在將其引入發(fā)酵之前進(jìn)行處理以去除諸如塵埃顆粒之類任何不受歡迎的雜質(zhì)也是有利的。例如，可利用已知的方法進(jìn)行過濾或凈化氣態(tài)基質(zhì)。在本發(fā)明的其他實(shí)施方式中，所述包含一氧化碳的氣態(tài)基質(zhì)可來自生物質(zhì)的氣化。所述氣化方法包括限量供給空氣或氧氣的條件下生物質(zhì)的部分燃燒。得到的氣體典型地主要包括CO和H2,和很小體積的CO2、甲烷、乙烯和乙烷。例如，在諸如甘蔗的糖、或玉米或谷物的淀粉之類的食品材料的提取和加工過程中獲得的生物質(zhì)副產(chǎn)物，或者由森林產(chǎn)業(yè)生成的非食品生物質(zhì)廢物，可被氣化以制備適合用于本發(fā)明的含CO氣體。所述含CO的基質(zhì)典型地包含一大部分的C0，例如按體積計至少約20%至約100% 的⑶，按體積計40 %至95 %的⑶，按體積計40 %至60 %的⑶，和按體積計45 %至55 %的 CO。在具體實(shí)施方式
中，所述基質(zhì)包含按體積計約25%、或約30%、或約35%、或約40%、 或約45%、或約50%、或約55%或約60%的CO。具備較低濃度(如6% )CO的基質(zhì)可能也合適，尤其是當(dāng)H2和(X)2也存在時。在具體的實(shí)施方式中，以足以進(jìn)行2，3-丁二醇生產(chǎn)的水平提供CO。在具體的實(shí)施方式中，提供CO使得比CO攝取速率保持在至少0. 4mmol/g/min ；或者至少0. 5mmol/g/min ； 或者至少0. 6mmol/g/min ；或者至少0. 7mmol/g/min ；或者至少0. 8mmol/g/min ；或者至少 0. 9mmol/g/min ；或者至少 1. Ommol/g/min ；或者至少 1. 2mmol/g/min ；或者至少 1. 5mmol/ g/min。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該知曉提供CO、特別是氣態(tài)CO的方法，以達(dá)到需要的攝取率。然而，通過舉例的方式，諸如提高發(fā)酵培養(yǎng)基中氣體滯留量之類的因素，將增加被微生物培養(yǎng)物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的可利用的CO量。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該知曉提高氣體滯留量的方法。然而， 通過非限制性舉例，氣態(tài)滯留量典型地通過機(jī)械手段提高，如提高CSTR中的攪拌速度。此外，以較快的速率或較高的分壓提供CO也將提高發(fā)酵液中的CO可利用量。氣態(tài)基質(zhì)包含任何的氫氣雖然沒有必要，但是不認(rèn)為其對2，3-丁二醇的生產(chǎn)不利。氣態(tài)基質(zhì)也可包含一些CO2，例如按體積計約1 %至約80%，或按體積計1 %至約30%。 在一種實(shí)施方式中，其包含按體積計約5%至約10%體積。在另一實(shí)施方式中，所述氣態(tài)基質(zhì)包含按體積計約20%的C02。典型地，以氣態(tài)將一氧化碳加入發(fā)酵反應(yīng)。然而，本發(fā)明不應(yīng)被認(rèn)為是限于以這種
11狀態(tài)加入基質(zhì)。例如，可以以液體提供一氧化碳。例如，可以使用包含一氧化碳的氣體飽和液體，然后將該液體加入生物反應(yīng)器。這可采用標(biāo)準(zhǔn)方法實(shí)現(xiàn)。通過舉例的方式，微泡分布發(fā)生器(Hensirisak 等人，Scale-upofmicrobubble dispersion generator for aerobic fermentation(微泡分布發(fā)生器用于需氧發(fā)酵的放大試驗(yàn)Applied Biochemistry and Biotechnology (《應(yīng)用牛物化學(xué)和牛物技術(shù)》)，第101卷，Number 3/0ctober, 2002)可被使用。在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，發(fā)明人確定2，3_ 丁二醇可以通過發(fā)酵第一基質(zhì)和第二基質(zhì)生產(chǎn)。在本發(fā)明的一種具體實(shí)施方式
中，2，3_ 丁二醇將在提供第一基質(zhì)(如諸如果糖之類的碳水化合物)以及第二基質(zhì)(優(yōu)選包含CO的基質(zhì))時生產(chǎn)。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，發(fā)明人確定2，3_ 丁二醇由第一基質(zhì)產(chǎn)生，當(dāng)完全耗盡時，所述第一基質(zhì)可被第二基質(zhì)取代，繼續(xù)產(chǎn)生2，3- 丁二醇。在一種具體實(shí)施方式
中，所述第一基質(zhì)是果糖，當(dāng)果糖完全耗盡時，可提供包含CO的基質(zhì)。發(fā)明人驚訝地發(fā)現(xiàn)，2，3- 丁二醇繼續(xù)產(chǎn)生。發(fā)明人進(jìn)一步預(yù)期，如果需要，所述第一基質(zhì)和所述第二基質(zhì)可以被替換。例如，如果第一基質(zhì)不可用時，可以利用可選擇的基質(zhì)直至所述第一基質(zhì)的可利用量提高。培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)理解，為了進(jìn)行細(xì)菌生長和基質(zhì)到丁二醇的發(fā)酵，除基質(zhì)外，還需將合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基加入生物反應(yīng)器。營養(yǎng)培養(yǎng)基將含有諸如維生素和礦物質(zhì)之類足以容許所使用的微生物生長的組分。適合產(chǎn)醇梭菌生長的厭氧培養(yǎng)基在本領(lǐng)域是公知的，例如Abrini等人’ (Clostridium autoehtanogenum, sp. Nov. , An Anaerobic Bacterium That Produces Ethanol From Carbon Monoxide (產(chǎn)醇梭菌新種-—種由一氧化碳產(chǎn)生乙醇的厭氧菌)； Archives ofMicrobiology 161，第 345-351 頁(1994)(《微生物學(xué)文獻(xiàn)集》，第 161 期， 345-351頁(1994))描述的。此后的“實(shí)施例”部分提供了合適培養(yǎng)基的進(jìn)一步實(shí)例。發(fā)酵條件應(yīng)當(dāng)在進(jìn)行基質(zhì)到丁二醇發(fā)酵的合適條件下理想地進(jìn)行發(fā)酵。應(yīng)當(dāng)考慮的反應(yīng)條件包括溫度、培養(yǎng)基流速、PH值、培養(yǎng)基氧化還原電位、攪拌速度(如果使用連續(xù)攪拌槽反應(yīng)器)、接種物水平、最大基質(zhì)濃度，以及確?；|(zhì)水平不會成為限制的將基質(zhì)引入生物反應(yīng)器的速率，和避免產(chǎn)物抑制作用的最高產(chǎn)物濃度。W02007/117157、W02008/115080、 W02009/022925和W02009/064200中詳細(xì)描述了適合厭氧發(fā)酵包含CO的基質(zhì)的發(fā)酵條件的實(shí)例，它們公開的內(nèi)容在此通過引用并入本文。認(rèn)識到，根據(jù)本發(fā)明的方法能夠容易地改變其中報道的發(fā)酵條件。發(fā)明人確定，在一種pH未控制的實(shí)施方式中，未看出對2，3- 丁二醇生產(chǎn)的有害影響。生物反應(yīng)器發(fā)酵反應(yīng)可以在如本文之前描述的任何合適的生物反應(yīng)器中進(jìn)行。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，所述生物反應(yīng)器可以包含在其中培養(yǎng)微生物的第一生長反應(yīng)器，和第二發(fā)酵反應(yīng)器，來自所述生長反應(yīng)器的發(fā)酵液被供給到該第二發(fā)酵反應(yīng)器，且其中產(chǎn)生大部分的發(fā)酵產(chǎn)物(比如2，3-丁二醇)。產(chǎn)物回收發(fā)酵將得到營養(yǎng)培養(yǎng)基中包含需要的產(chǎn)品(例如丁二醇)和/或一種或更多種副產(chǎn)物(例如乙醇、乙酸鹽和丁酸鹽)以及細(xì)菌細(xì)胞的發(fā)酵液。在一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，發(fā)酵產(chǎn)物包括2，3-丁二醇。2,3- 丁二醇，或包含2，3- 丁二醇和一種或更多種其他醇的混合醇流，可以通過本領(lǐng)域公知的方法從發(fā)酵液中回收，所述方法如分餾或蒸發(fā)、滲透汽化、萃取發(fā)酵。諸如包括乙酸鹽和丁酸鹽的酸類副產(chǎn)物也可以用本領(lǐng)域公知的方法從發(fā)酵液中回收。例如，可以使用包含活性炭過濾器的吸收體系或電滲析。在本發(fā)明的某些實(shí)施方式中，從發(fā)酵液回收2，3_ 丁二醇和副產(chǎn)物通過下述步驟連續(xù)進(jìn)行從生物反應(yīng)器中去除部分發(fā)酵液、從發(fā)酵液(如通過過濾方便地)分離微生物細(xì)胞以及從發(fā)酵液回收2，3- 丁二醇和任選其他醇和酸。醇可以通過例如蒸餾方便地回收，酸可以通過例如活性炭吸附回收。優(yōu)選地將分離出的微生物細(xì)胞返回發(fā)酵生物反應(yīng)器中。還優(yōu)選將醇和酸去除之后剩下的無細(xì)胞滲透液返回發(fā)酵生物反應(yīng)器中。在返回生物反應(yīng)器之前，可加入另外的營養(yǎng)素(例如維生素B)至無細(xì)胞滲透液中，以補(bǔ)充營養(yǎng)培養(yǎng)基。另外，如果在回收2，3- 丁二醇和/或副產(chǎn)物過程中調(diào)整發(fā)酵液的pH，在返回生物反應(yīng)器之前，應(yīng)該將PH重新調(diào)整到與發(fā)酵生物反應(yīng)器中的發(fā)酵液相似的pH。在此將結(jié)合下列非限制性的實(shí)施例更詳細(xì)地描述本發(fā)明。實(shí)施例材料和方法
權(quán)利要求
1. 一種通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)丁二醇的方法，所述方法包括a.提供包含CO的基質(zhì)；b.在包含一種或更多種微生物培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中，厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)來生產(chǎn)丁
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述丁二醇是2，3-丁二醇。
3.一種提高發(fā)酵生產(chǎn)2，3- 丁二醇的效率的方法，所述方法包括a.提供包含CO的基質(zhì)；b.在包含一種或更多種微生物培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中，厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)來生產(chǎn)2， 3-丁二醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其中以充足的水平提供所述包含CO的基質(zhì)，以便生產(chǎn)2，3-丁二醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4中任一項所述的方法，其中提供所述包含CO的基質(zhì)，使培養(yǎng)物的比CO攝取速率保持在至少0. 4mmol CO/克細(xì)菌細(xì)胞干重/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中提供所述基質(zhì)使比攝取速率保持在至少0.6mmol C0/g/mino
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其中提供所述基質(zhì)使比攝取速率保持在至少 0. 8mmol C0/g/mino
8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一項所述的方法，其中提供所述基質(zhì)使比攝取速率保持在至少 0. 8mmol C0/g/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求5-8中任一項所述的方法，其中提供所述基質(zhì)使比攝取速率保持在至少 1. Ommol C0/g/min。
10.一種通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)2，3-丁二醇的方法，所述方法包括a.提供基質(zhì)；b.在包含一種或更多種微生物培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)，其中的一種或更多種微生物包含一種或更多種2，3-丁二醇脫氫酶基因；c.上調(diào)所述2，3-丁二醇脫氫酶基因，使所述微生物生產(chǎn)2，3- 丁二醇。
11.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述基質(zhì)包含Co。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中以充足的水平提供所述包含CO的基質(zhì)，以便生產(chǎn) 2，3-丁二醇。
13.根據(jù)權(quán)利要求12-14中任一項所述的方法，其中提供所述包含CO的基質(zhì)使培養(yǎng)物的比CO攝取速率保持至少0. 4mmol CO/克細(xì)菌細(xì)胞干重/min。
14.根據(jù)以上任一權(quán)利要求所述的方法，其中一種或更多種微生物是產(chǎn)醇梭菌 (Clostridium autoethanogenum)0
15.根據(jù)權(quán)利要求1-9或11-14中任一項所述的方法，其中所述包含CO的基質(zhì)是氣態(tài)的。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述包含CO的基質(zhì)包含按體積計至少約15% 到約100%的C0。
17.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的方法，其中所述包含CO的基質(zhì)包含作為副產(chǎn)物獲自工業(yè)工藝的氣體。
18.根據(jù)權(quán)利要求15-17中任一項所述的方法，其中所述包含CO的基質(zhì)包含獲自鋼鐵廠的氣體。
19.一種通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)2，3- 丁二醇的方法，所述方法包括a.提供基質(zhì)；b.在包括產(chǎn)醇梭菌培養(yǎng)物的生物反應(yīng)器中厭氧發(fā)酵所述基質(zhì)來生產(chǎn)2，3-丁二醇。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述基質(zhì)包含一種或更多種碳水化合物。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述方法在提供包含一種或更多種碳水化合物基質(zhì)的步驟之前、同時或之后包括另外的提供包含CO的基質(zhì)的步驟。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其中所述方法包括交替進(jìn)行提供包含CO的基質(zhì)的步驟和提供包含一種或更多種碳水化合物的基質(zhì)的步驟。
23.通過權(quán)利要求2-22中任一項所述的方法生產(chǎn)的2，3-丁二醇。
全文摘要
本發(fā)明提供了通過厭氧發(fā)酵來生產(chǎn)2，3-丁二醇的方法。根據(jù)本發(fā)明的具體方法，通過厭氧發(fā)酵包含碳水化合物和一氧化碳的基質(zhì)生產(chǎn)2，3-丁二醇。
文檔編號C12P7/18GK102317463SQ200980121712
公開日2012年1月11日 申請日期2009年6月5日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月9日
發(fā)明者C·D·米哈爾切亞, F·M·廖, J·M·Y·馮, P·L·陳, S·D·辛普森 申請人:藍(lán)瑟科技紐西蘭有限公司