專利名稱：一種ebag9基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測方法和應(yīng)用的制作方法
一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測方法和應(yīng)
用
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種試劑盒，具體地說關(guān)于一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒及 其檢測方法和應(yīng)用
背景技術(shù)：
前列腺癌(prostatic carcinoma, prostatic cancer)是男性生殖系最常見的惡 性腫瘤，發(fā)病隨年齡而增長，其發(fā)病率有明顯的地區(qū)差異，西歐和北美地區(qū)已高過肺癌，在 男性是癌癥死亡的第1位。我國以前發(fā)病率較低，但由于人口老齡化，近年來發(fā)病率有所增 加，從1993年的每10萬人的發(fā)病率1. 7上升到2000年的10萬分之4. 55，到2005年上升到 7. 9。雖然這一發(fā)病率與其他腫瘤相比還相對較低，但對于城市男性來說，前列腺癌的發(fā)病 率已在所有腫瘤中居第十位，應(yīng)引起高度關(guān)注。前列腺癌的發(fā)病與年齡呈正相關(guān)據(jù)國外統(tǒng) 計，50歲以下男性很少發(fā)生，50 60歲發(fā)病占前列腺癌的1/3，70歲以上約占1/2，80歲以 上約占3/4。前列腺癌的病因目前尚不完全清楚，大量臨床研究提示，前列腺癌與性激素有 關(guān)，特別是雄性激素與前列腺癌的發(fā)病存在非常明顯的因果關(guān)系。雄性激素高的人群前列 腺癌的發(fā)病，要比雄性激素低的人群高；而通過辠丸切除或各種藥物減少雄性激素的合成， 阻斷雄性激素的作用可以達(dá)到治療前列腺癌的目的。專家介紹說，前列腺癌與遺傳有關(guān)，直 系親屬中如果有前列腺癌的，其本人患前列腺癌的風(fēng)險要比其他人高一倍。目前大家比較 公認(rèn)的是，前列腺癌與種族有關(guān)，前列腺癌在黑人中更為常見。也有研究提示，環(huán)境污染、淋 球菌感染、前列腺增生、過量飲用咖啡和酒類等也與前列腺癌發(fā)生有關(guān)。此外，前列腺癌與 飲食有關(guān)，長期高脂肪、高蛋白飲食與前列腺癌高度相關(guān)。專家介紹說，在2007年美國泌尿 外科年會上，與會學(xué)者在討論預(yù)防前列腺癌何種飲食最好時，大家得出的結(jié)論是中餐最好。 傳統(tǒng)中餐的特點是新鮮蔬菜多，肉食相對較少，還配有米飯和面條等主食，是一個合理的飲 食結(jié)構(gòu)。有專家認(rèn)為，之所以歐美前列腺癌成為男性泌尿系統(tǒng)發(fā)病率最高的腫瘤，其中一個 重要的原因就是與西餐的飲食結(jié)構(gòu)有關(guān)。由于前列腺癌在早期沒有任何癥狀，患者往往容易錯過最佳的治療時機，導(dǎo)致診 療難度加大。其實前列腺疾病是一種非常普通的男性疾病，發(fā)現(xiàn)得越早，治療效果就越好。 在大型義診咨詢活動中，北京大學(xué)第三醫(yī)院為100位老年男性提供了免費的前列腺特異性 抗原(PSA)檢查。PSA是前列腺腺體和導(dǎo)管細(xì)胞分泌的一種蛋白質(zhì)，正常時血中含量很少。 一旦患有前列腺癌，PSA值將升高。PSA是目前公認(rèn)有效的前列腺癌早期診斷方法，它可以 敏感地確定前列腺癌的發(fā)生。由美國和瑞典科研人員進(jìn)行的研究顯示，男性在50歲之前進(jìn) 行PSA檢測，可以提前25年預(yù)測前列腺癌的發(fā)生。與通常的直腸指診、直腸超聲檢查比較， PSA具有測定結(jié)果客觀、定量、無晝夜變化、不受檢查者技術(shù)影響，以及測定方法更易為患者 接受等優(yōu)點。在多數(shù)情況下，PSA檢測可以在前列腺發(fā)病初期就發(fā)現(xiàn)腫瘤，使更多的前列腺 癌患者獲得根治性手術(shù)的機會，提高腫瘤的治愈率。近來，PSA的診斷陽性率有所下降，許 多病理切片已證實是前列腺癌但PSA的檢測是陰性。因此，尋找更有臨床意義的診斷指標(biāo)非常迫切。研究證明，EBAG9(雌激素受體結(jié)合片段相關(guān)基因9)在前列腺組織中可致雄激 素受體(androgen receptor, AR)激活而使ARA55表達(dá)降低，促進(jìn)細(xì)胞增殖，導(dǎo)致腫瘤發(fā) 生侵襲轉(zhuǎn)移而提高死亡率，雌激素受體結(jié)合片段相關(guān)基因9 (estrogen receptor binding fragment associated gene 9，EBAG9)在前列腺癌中高表達(dá)，并且在包膜浸潤和伴淋巴結(jié) 轉(zhuǎn)移病例中的表達(dá)率(分別為79%和100% )遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過包膜內(nèi)原位癌(54% )，可作為前列 腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的預(yù)測指標(biāo)。隨著分子生物技術(shù)日益完善，功能基因組學(xué)，癌癥基因組學(xué)等研 究的深入展開，至今，我們已有可能在基因水平上做更精確的早期診斷，在癌變前期或癌細(xì) 胞形成(單克隆時)就能做到基因水平的早期預(yù)測診斷。本發(fā)明采用核酸原位雜交技術(shù)， 檢測EBAG9基因的表達(dá)變化，對臨床上早期基因水平預(yù)測前列腺癌的發(fā)生有非常重要的臨 床意義。原位雜交技術(shù)(in situ hybridization)是將分子生物學(xué)與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)結(jié)合起 來，以標(biāo)記的核酸分子為探針，在組織細(xì)胞原位檢測特異性核酸分子的技術(shù)。其原理是使含 有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈(即探針)，在適宜條件下與組織細(xì)胞中的互補核酸單鏈 即靶核酸發(fā)生雜交，再以放射自顯影或免疫細(xì)胞化學(xué)方法對標(biāo)記探針進(jìn)行探測，從而在細(xì) 胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種EBAG9基因的原位雜交檢測試 劑盒的用途。本發(fā)明的再一的目的是，提供一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒。本發(fā)明的另一的目的是，提供一種EBAG9基因的原位雜交檢測方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒在制備檢測前列腺癌疾病藥物中的應(yīng)用， 所述的試劑盒包括雜交探針、標(biāo)記物，所述的雜交探針序列如SEQ ID NO. 1所示。EBAG9基 因序列號NM_004215，1655bp, mRNA，8q23〃，cds :397…1038bp。 所述的雜交探針序列如SEQID NO. 1所示的RNA序列。所述的標(biāo)記物選自放射性核素或非放射性標(biāo)記物。所述的放射性核素選自3H、35S、125I或32P中的一種。所述的非放射性標(biāo)記物選自生物素、地高辛、堿性磷酸酶、辣根過氧化酶或熒光素 中的一種。所述的非放射性標(biāo)記物優(yōu)選自地高辛。所述的試劑盒還包括增效劑，所述的增效劑是堿性磷酸酶抗體。為實現(xiàn)上述第二個目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒，包括雜交探針、標(biāo)記物，其中所述的雜交 探針序列如SEQ ID NO. 1所示，所述的標(biāo)記物選自放射性核素或非放射性標(biāo)記物。為實現(xiàn)上述第三個目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是一種EBAG9基因的原位雜交檢測方法，該方法包括以下步驟a、將試劑盒中的雜交探針與底物中待測RNA接觸，形成雜交復(fù)合體；
b、檢測a步驟得到的雜交復(fù)合體。所述的a步驟中形成雜交復(fù)合體的條件為核酸雜交的溫度為42°C ；核酸雜交的 時間為16-24小時，所述的底物選用血液細(xì)胞標(biāo)本或組織細(xì)胞標(biāo)本。本發(fā)明的診斷試劑盒的組份是由雜交探針，雜交液，顯色劑，增效劑等組成。本試 劑盒的核酸雜交原理是分子生物學(xué)業(yè)內(nèi)人士均熟知，具體操作步驟是標(biāo)本處理、預(yù)雜交、雜 交、免疫組化染色、鏡下進(jìn)行定量分析、結(jié)果報告，其中雜交的具體步驟包括儀器操作1).將待測標(biāo)本放入反應(yīng)槽中；2).儀器自動棄去液體，自動加消化液；3).儀器自動棄去液體，自動后固定；4).儀器自動棄去液體，自動預(yù)雜交(42°C )；5).儀器自動棄去液體，自動清洗；6).儀器自動棄去液體，自動雜交(42°C )；7).儀器自動棄去液體，自動清洗；8).儀器自動棄去液體，自動與DIG抗體培養(yǎng)(室溫)；9).儀器自動棄去液體，自動清洗，顯色；10).取出封片鏡檢。本發(fā)明優(yōu)點在于1、本發(fā)明提供的試劑盒具有靈敏度高、特異性強的特點。2、本發(fā)明的檢測方法操作方便、簡單，能在區(qū)級以上醫(yī)院普遍使用和推廣。3、本發(fā)明的臨床意義是更早期跟蹤檢測前列腺癌發(fā)生動態(tài)過程，以及用于前列腺 癌預(yù)防醫(yī)學(xué)的檢測和篩選工具。本發(fā)明的診斷試劑盒與臨床上其它檢測癌胚蛋白標(biāo)志物， 以及影像醫(yī)學(xué)檢查有顯著不同。本發(fā)明可以在基因水平上檢測EBAG9異常表達(dá)，在影像醫(yī) 學(xué)檢查及其它檢查未發(fā)現(xiàn)占位性前列腺癌病灶之前，癌癥生化指標(biāo)未產(chǎn)生異常之前，亦未 形成腫塊之前，能及早做到以上基因表達(dá)異常的信息采集，給臨床前列腺癌病患一個真正 的預(yù)后早期診斷。這樣才有可能實施前列腺癌的早期診斷、早期預(yù)防、早期治療，有可能從 源頭上徹底根治前列腺癌惡疾。

圖1是本發(fā)明實施例中前列腺癌癥病人EBAG9過量表達(dá)圖。
圖2是本發(fā)明實施例中正常人EBAG9圖。
具體實施方式下面結(jié)合附圖對本發(fā)明具體實施方式
作詳細(xì)說明。實施例1一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒，包括雜交探針、標(biāo)記物、增效劑，其中，所 述的雜交探針序列如SEQ ID NO. 1所示。雜交探針用地高辛標(biāo)記。試劑盒中的其它液體和 標(biāo)本組成如下消化液100 μ 1/管 1管/盒 無色透明液體
保護(hù)液100 μ 1/管1管/盒無色透明液體
預(yù)雜交液1300 μ 1/ 管2管/盒無色透明液體
正義雜交液10μ 1/管1管/盒無色透明液體
反義雜交液10μ 1/管1管/盒無色透明液體
封閉液1000 μ 1/ 管1管/盒無色透明液體
堿性磷酸酶抗體ι μ 1/管1管/盒無色透明液體
顯色劑A175 μ 1/ 管1管/盒黃色液體
顯色劑B320 μ 1/ 管1管/盒無色透明液體
緩沖液I IOx90ml/ 瓶1瓶/盒淺黃色或無色透明液體
緩沖液II IOx80ml/ 瓶1瓶/盒淺黃色或無色透明液體
緩沖液III IOx20m/瓶3瓶/盒淺黃色或無色透明液體
緩沖液IV IOx90ml/ 瓶1瓶/盒淺黃色或無色透明液體
固定液90ml/ 瓶1瓶/盒無色透明液體
陽性對照標(biāo)本6片/盒
上述試劑成分說明(所有試劑購自SIGMA)
1、消化液20mg/ml蛋白酶K，IOOmg蛋白酶K，力口 DEPC-H2O 5ml ；
2、保護(hù)液0. 2g的glycine加入Iml的IX緩沖液I ；
3、預(yù)雜交液1 X緩沖液II 75ml
50XD 3ml
10mg/ml yest -RNA 750ul
llmg/ml SALMONTESTES DNA682ul
0. 04M EDTA 3ml
50% formamide15ml
4、封閉液0.03g的bloking(購買自羅氏公司)加入Iml IX緩沖液
5、10x緩沖液I(PH7. 1-7. 4)
NaCl 80g
Na2HPO4. 12H20360g
KCl 2g
KH2P042g
加三蒸水至11，并高壓滅菌；
6、10x緩沖液II(PH7. 0)
NaCl 175.3g
檸檬酸鈉88. 2g
HCl幾滴
加三蒸水至11，并高壓滅菌；
7、緩沖液 III (PH7. 9)
Tri s 121. Ig
NaCl 87.66g
HCl 60ml 左右
加三蒸水至11，并高壓滅菌；8、緩沖液 IV:IM Tris-HCl (PH9. 5) =Tirs 121. Ig 加 HCl 3ml 左右，加水 900ml，調(diào) PH 至 9. 5，加 水至11，并高壓滅菌；IM NaCl =NaCl 58. 44 加水至 11，并高壓滅菌；0. 5M MgCl2 101. 65g MgCl2. 6H20 加水至 11，并高壓滅菌；9、固定液多聚甲醛40g加IX緩沖液I至11，稍加熱(約50_60度)攪拌至溶 解；10、顯色劑 A =NBT Ig 加 70% DMFl 1. 44ml ；11、顯色劑 B =BCIP Ig 加 100% DMF30ml。本發(fā)明的試劑盒可以多人份使用或一人份使用。實施例2一種EBAG9基因原位雜交檢測方法及其試劑盒應(yīng)用一、標(biāo)本處理1、用IOml的離心管，裝4. 5ml淋巴細(xì)胞分離液，再將3ml抗凝血緩慢加入含有淋 巴細(xì)胞分離液(血淋巴細(xì)胞分離液=1 1.5)的離心管中，2000r/min離心IOmin ；2、吸取中間層白細(xì)胞至另一離心管中，再在此管中加入約兩倍的IX緩沖液I，混 勻，1500g/min 離心 IOmin ；3、棄上清.沉淀加入約兩倍的1 X緩沖液I，混勻，1500g/min離心IOmin ；4、棄上清，并把試管口多余的液體用擦手紙吸去。再將沉淀制成懸液，滴在玻片上 推片，自然干燥。(有條件的醫(yī)院可以用制片機制片。)3ml血，可以做4張片子；5、用40ml 4%固定液，在玻璃缸中，固定30min，再用1 X緩沖液I洗5min。每缸 可以放16片；6、標(biāo)本可保存在_20°C，或繼續(xù)做實驗。二、將試劑盒中試劑配制成使用濃度1、將1OX緩沖液I用三蒸水按1 10稀釋成IX緩沖液I ；2、將20X緩沖液II用三蒸水按1 10稀釋成2X緩沖液II ；按1 100稀釋成0. 2X緩沖液II ；按1 200稀釋成0. 1 X緩沖液II ；3、將1OX緩沖液III用三蒸水按1 10稀釋成1 X緩沖液III ；4、10 X緩沖液IV用三蒸水按1 10稀釋成X緩沖液IV (取1#，2#，3#各10ml， 加水至IOOml既可)。三、實驗步驟1、取每位待檢者標(biāo)本兩張，(另外兩張留作復(fù)查用)及陽性對照標(biāo)本兩張(每次 實驗做一對陽性對照)；2、在玻璃缸里加消化液(消化液IOOul加IX緩沖液199.9ml，即為使用濃 度)20ml。37°C水浴預(yù)熱10分鐘。放進(jìn)16張玻片，37°C處理12min，再用1 X緩沖液I洗 5min ；3、用0. 2%的保護(hù)液(保護(hù)液Iml加IX緩沖液I99ml即為使用濃度)洗1Omin, 三蒸水洗5min，以上過程都在玻璃缸進(jìn)行。玻片自然干燥；
4、將玻片放入保濕盒內(nèi)，加預(yù)雜交液20ul/片.蓋上蓋玻片，蓋緊保濕盒，放在 42°C恒溫水浴箱中3h以上；5、取出玻片，棄去蓋玻片，將玻片放入玻璃缸內(nèi)，用70%，90%，95%的乙醇各洗 2min,自然干燥；6、將玻片放入保濕盒內(nèi)，每位病人標(biāo)本兩張，一張加正義雜交液20ul/片，另一張 加反義雜交液20ul/片，蓋上蓋玻片，蓋緊保濕盒，放在42°C恒溫水浴箱中16-24h ；7、取出玻片，棄去蓋玻片，將玻片放入玻璃缸內(nèi)在42°C恒溫水浴箱中用2 X緩沖液II洗兩次，每次15min在42°C恒溫水浴箱中用0. 2X緩沖液II洗一次，每次15min在42°C恒溫水浴箱中用0. 1 X緩沖液II洗兩次，每次15min ；8、用IX緩沖液III洗30s，取出玻片，自然干燥；9、將玻片放入保濕盒內(nèi)，加0.5% 1封閉液(Iml封閉液加5ml IX緩沖液 III) IOOul/片，蓋緊保濕盒，在室溫下作用30min ；10、取出玻片，用IX緩沖液III洗30s，自然干燥；11、將玻片放入保濕盒內(nèi)，加堿性磷酸酶抗體(加入1.8ml 1 X緩沖液III) IOOul/ 片，蓋緊保濕盒在室溫下作用30min ；12、取出玻片，用IX緩沖液III洗3次，每次15min;13、IX緩沖液IV洗2min，加顯色劑(顯色劑A73. 3ul，顯色劑B157. 5ul加到30ml 1 X緩沖液IV中，混勻)，室溫避光12h以上；14、用三蒸水洗5min，自然干燥，(用甘油加10%的IX緩沖液I混勻)封片鏡檢。四、結(jié)果判斷在光鏡下計數(shù)100-300個細(xì)胞，計算染上紫色細(xì)胞的百分比。陽性對照標(biāo)本加反義雜交液的應(yīng)該80%以上染上紫色。所有加正義雜交液的陰性內(nèi)對照應(yīng)無色。地高辛標(biāo)記的cDNA、RNA和寡核苷酸探針，不但探針的具有生物素標(biāo)記優(yōu)點，還克 服了生物素標(biāo)記的探針在原位雜交過程中受組織內(nèi)源性生物素干憂等缺點)，將該雜交探 針與人體血液白細(xì)胞的待測RNA核酸進(jìn)行雜交，再用免疫組化的方法顯色，在光鏡下觀察 mRNA的存在和定位，根據(jù)染色的細(xì)胞數(shù)，判斷目的基因的表達(dá)量。本發(fā)明方法是目前常用的核酸原位雜交技術(shù)，該方法通過檢測底物細(xì)胞中的 EBAG9基因表達(dá)量，用來確定前列腺癌是否發(fā)生，因為EBAG9基因在正常人中低表達(dá)，如果 EBAG9基因表達(dá)高，說明癌癥已經(jīng)發(fā)生，從而獲得癌癥的診斷信息。具體結(jié)果請見圖1和圖 2。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員，在不脫離本發(fā)明方法的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和補充，這些改進(jìn)和補充也應(yīng)視為 本發(fā)明的保護(hù)范圍。SEQUENCE LISTING<110>芮屈生物技術(shù)(上海)有限公司<120> 一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測方法和應(yīng)用<130>/
<160>1<170>PatentIn version 3.3<210>1<211>1655<212>DNA<213> 智人(Homo sapiens)<400>1gacctccctc gacgcccgac agctgctctg ggtactgttt ccgggtcagg gtgacctctg 60gggtgaggaa actgcgactg ggagcgggac ccaggcgtgc agcattcgcc atgctccgct 120cBcgcgtggg agactgggct gtggggtacc ggcccggaaa gcacgcagcc tccaaagccg 180ccttcctcag ggaaatttgc gtgaccttac tgccctccgt ctacaggcct tgtacctctc 240caggccgatt tttccacaat ttaaatctca gttcacctgg tatccagctc cagcaactta 300gagcgtttca cgtcacgccg ggcgccaggc gtcggcttgt ataacctgaa aacgctcctg 360tttttctcat ctgtgcagtg ggttttgatt cccaccatgg ccatcaccca gtttcggtta 420tttaaatttt gtacctgcct agcaacagta ttctcattcc taaagagatt aatatgcaga 480tctggcagag gacggaaatt aagtggagac caaataactt tgccaactac agttgattat 540tcatcagttc ctaagcagac agatgttgaa gagtggactt cctgggatga agatgcaccc 600accagtgtaa agatcgaagg agggaatggg aatgtggcaattctttggaa 660caactggaac ctgactattt taaggacatg acaccaacta ttaggaaaac tcagaaaatt 720gttattaaga agagagaacc attgaatttt ggcatcccag atgggagcac aggtttctct 780agtagattag cagctacaca agatctgcct tttattcatc agtcttctga attaggtgac 840ttagatacct ggcaggaaaa taccaatgca tgggaagaag aagaagatgc agcctggcaa 900gcagaagaag ttctgagaca gcagaaacta gcagacagag aaaagagagc agccgaacaa 960 caaaggaaga aaatggaaaa ggaagcacaa cggctaatga agaaggaaca aaacaaaatt
權(quán)利要求
一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒在制備檢測前列腺癌疾病藥物中的應(yīng)用，所述的試劑盒包括雜交探針、標(biāo)記物，所述的雜交探針序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的雜交探針序列如SEQID NO. 1所 示的RNA序列。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的標(biāo)記物選自放射性核素或非 放射性標(biāo)記物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述的放射性核素選自3H、35S、125I或32P 中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述的非放射性標(biāo)記物選自生物素、地高 辛、堿性磷酸酶、辣根過氧化酶或熒光素中的一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述的非放射性標(biāo)記物優(yōu)選自地高辛。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的試劑盒還包括增效劑，所述的 增效劑是堿性磷酸酶抗體。
8.一種EBAG9基因的原位雜交檢測試劑盒，包括雜交探針、標(biāo)記物，其特征在于，所述 的雜交探針序列如SEQ ID NO. 1所示，所述的標(biāo)記物選自放射性核素或非放射性標(biāo)記物。
9.一種EBAG9基因的原位雜交檢測方法，其特征在于，該方法包括以下步驟a、將權(quán)利要求8所述試劑盒中的雜交探針與底物中待測RNA接觸，形成雜交復(fù)合體；b、檢測a步驟得到的雜交復(fù)合體。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的檢測方法，其特征在于a步驟中形成雜交復(fù)合體的條件為 核酸雜交的溫度為42°C ；核酸雜交的時間為16-24小時，所述的底物選用血液細(xì)胞標(biāo)本或 組織細(xì)胞標(biāo)本。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種EBAG9(estrogen receptor binding fragment associated gene 9)基因的原位雜交檢測試劑盒，包括雜交探針、標(biāo)記物，所述的雜交探針序列如SEQ ID NO.1所示。本發(fā)明還提供了一種EBAG9基因原位雜交檢測方法。另外，本發(fā)明還提供了試劑盒在制備檢測前列腺癌疾病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明優(yōu)點在于本發(fā)明提供的試劑盒具有靈敏度高、特異性強的特點。本發(fā)明的檢測方法操作方便、簡單，能在區(qū)級以上醫(yī)院普遍使用和推廣。
文檔編號C12Q1/68GK101988107SQ20091005609
公開日2011年3月23日 申請日期2009年8月7日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月7日 公開號200910056097.發(fā)明者張云福, 裘建英 申請人:芮屈生物技術(shù)(上海)有限公司