專利名稱：：鯉魚品種優(yōu)化的方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種魚類品種優(yōu)化的方法。技術背景鯉魚是我國乃至世界最大的水產(chǎn)養(yǎng)殖魚種，是我國的主要經(jīng)濟養(yǎng)殖魚種。但是目前鯉魚養(yǎng)殖存在經(jīng)濟性狀和生產(chǎn)性能下降的現(xiàn)象，其主要原因在于鯉魚的近親交配。目前采用的群體選育養(yǎng)殖和種內(nèi)雜交養(yǎng)殖都無法解決近親交配的問題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是為解決目前鯉魚選育養(yǎng)殖和種內(nèi)雜交養(yǎng)殖都存在近親交配比例高，導致群體遺傳衰退、經(jīng)濟性狀和生產(chǎn)性能下降的問題，而提供的一種鯉魚品種優(yōu)化的方法。本發(fā)明鯉魚按以下步驟進行品種優(yōu)化一、對鯉魚個體進行表型性狀挑選，符合要求的鯉魚作為繁殖親本；二、檢測親本間的遺傳信息；三、根據(jù)遺傳信息進行繁殖配組，繁殖親本至少分成2個繁殖群體，每個繁殖群體中任意一對雌雄個體間的遺傳距離應大于家系三代間的遺傳距離；四、自由交配，即得到品種優(yōu)化的鯉魚。本發(fā)明步驟一中表型性狀挑選公式為Xi^i士2S，公式中Xn為親本的表型性狀測定值，X為鯉魚群體表型性狀的平均值，S為鯉魚群體表型性狀的標準差。步驟二檢測親本間的遺傳信息a.提取繁殖親本DNA;b.繁殖親本DNA均用30對微衛(wèi)星引物分別進行PCR擴增；c.利用圖譜分析軟件對PCR擴增產(chǎn)物進行數(shù)字化處理；d.數(shù)字化數(shù)據(jù)導入親緣分析軟件分析計算，獲得遺傳信息。本發(fā)明方法可避免近親交配，因此品種能夠得到優(yōu)化，鯉魚的經(jīng)濟性狀和生產(chǎn)性能顯著提高。具體實施方式'具體實施方式一本實施方式鯉魚按以下步驟進行品種優(yōu)化一、對鯉魚個體進行表型性狀挑選，符合要求的鯉魚作為繁殖親本；二、檢測親本間的遺傳信息；三、根據(jù)遺傳信息進行繁殖配組，繁殖親本至少分成2個繁殖群體，每個繁殖群體中任意一對雌雄個體間的遺傳距離應大于家系三代間的遺傳距離；四、每個繁殖群體內(nèi)的親本自由交配，即得到品種優(yōu)化的鯉魚。本實施方式還可以根據(jù)選育目標對外觀與體型等不可量化的表型性狀進行挑選。本實施方式可以對體型、體重、體度、體色等表型性狀進行單一或綜合挑選，也可對懷卵量、飼料轉(zhuǎn)化率等綜合生產(chǎn)性狀進行選擇。本實施方式步驟三中繁殖親本所分成的繁殖群體個數(shù)越多越好，可提供更多的選擇，從而選出品種優(yōu)異的鯉魚；對于步驟三中不能配組的親本淘汰掉。本實施方式方法生產(chǎn)效率高明顯高于雌核發(fā)育方法。具體實施方式二本實施方式與具體實施方式一的不同點是步驟一中表型性狀挑選公式為Xn^C士2S，公式中Xn為親本的表型性狀測定值，又為鯉魚群體表型性狀的平均值，S為鯉魚群體表型性狀的標準差。其它步驟及參數(shù)與實施方式一相同。由選擇強度可知1倍S則選擇強度最高，2倍S則選擇強度中等，3倍S則選擇強度最低，因此本實施方式將大于表型性狀平均值+二倍標準差和小于表型性狀平均值-二倍標準差的鯉魚個體舍去。具體實施方式三本實施方式與具體實施方式一的不同點是步驟二檢測親本間的遺傳信息a.提取繁殖親本DNA;b.繁殖親本DNA均用30對微衛(wèi)星引物分別進行PCR擴增；c.利用圖譜分析軟件對PCR擴增產(chǎn)物進行數(shù)字化處理；d.數(shù)字化數(shù)據(jù)導入親緣分析軟件分析計算，獲得遺傳信息。其它步驟及參數(shù)與實施方式一相同。本實施方式中要對提取過DNA的繁殖親本進行標記，可采用電子標記、常規(guī)標記方法(剪取背鰭、系不同顏色的塑料管等其它物理標記方法)或分池飼養(yǎng)。本實施方式也可以不使用全部30對微衛(wèi)星引物，而只選用其中部分的微衛(wèi)星引物(但必須多于25對微衛(wèi)星引物)進行PCR擴增。具體實施方式四本實施方式與具體實施方式三的不同點是步驟b中每對微衛(wèi)星引物的PCR反應總體積為25pL由18pLPCR反應緩沖液、50ng繁殖親本DNA、l(iL微衛(wèi)星引物、lUTaq聚合酶和余量的無菌超純水制成；其中PCR反應緩沖液每升由0.25mmo1pH值為8.3的Tris.Cl、1.25mmo1KC1、0.0375mmolMgCl2、0.25mLGelatin、2.5mLTween、2.5mLNP-40、0.02mmoldNTP和余量的去離子水組成。其它步驟及參數(shù)與實施方式三相同。具體實施方式五本實施方式與具體實施方式三的不同點是步驟b中PCR反應程序為94""C預變性3min，94。C變性30sec，退火30s，72。C延伸30s，循環(huán)38次，最后72。C延伸5min。其它步驟及參數(shù)與實施方式三相同。具體實施方式六本實施方式與具體實施方式三的不同點是步驟b中選用的30對微衛(wèi)星引物及其退火溫度如表1所示。其它步驟及參數(shù)與實施方式三相同。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>R:CTCGCTTCTGTAGGCATTHLJ383F:GGCTCCTCCTCATCCTCTR:GCACTTCTGCACCTTTCA(CA)"51HU392F:GGCTACAAGGCAACACTGR:TGCGGTTAATGAGGTCTG(CA)2254HLJ393F:TGCGGTCATTACTCATTCGR:CCCAGCACCTGTTTCCAC(CA)i。54HLJ398F:CATTACTTGAACTATCATCCAR:TGTGCTGAGGATTATTGG(CT)1654HLJ400F:AAGAAGCCTCGGTCCTCCR:AAAGCCCAAAGCACATCA(CA)2251HLJ805F:TCTGCTGAAGGGCGAACAR:ACGATCACGCTGCGACTA(CA)948HLJ806F:GGTGTCAGGCTTTAGTCCR:CATCTGAGTTTTCTCCAAGT(CA)4848HLJ809F:ATCATCACAGCCAAAGAAGTR:TACGGACATAGTGCAGACAA(CA)1248HLJ817F:GACGATCCAGCAGCAATGR:CTCTTCCTAAAGCCTCAAA(GT)2248HLJ848F:GAGAACACGGCTGGATGGR:GTGGGTGTTTGAATTGAGAT(CA)2948HLJ855F:CGACCGAACTCAGAACACR:GAGCACCGCATTAACAGA(AC)4448HLJ873F:AGTGTCGTTTATGCGTATCTTR:AGCTCGCCTACTCTTCTACT(CA)5048HLJ878F:AGTGGAGGACGTGACAGTR:AAGCAGAGCCTGATTTGA(CA)3754HLJ896F:ATCACCAGTACATTCACTR:CGTTTAGCAAAGGTTAGT(CA)3653HLJ900F:AAGGACGACGGAAGGTTTR:ACACTGACGGGTCAAGAG(CT)5(CA)3450具體實施方式七本實施方式與具體實施方式三的不同點是步驟d中使用的親緣分析軟件為POPGENEN軟件和PHYLIP軟件。其它步驟及參數(shù)與實施方式三相同。具體實施方式八本實施方式與具體實施方式三的不同點是步驟CPCR擴增產(chǎn)物先在電壓為200V的條件下凝膠電泳2h，然后GoldView染色，再以溴酚藍為凝膠上樣液進行凝膠電泳，之后用凝膠成像儀記錄電泳結果并用圖譜分析軟件進行數(shù)字化處理。其它步驟及參數(shù)與實施方式三相同。本實施方式所用的凝膠為濃度為2%的瓊脂糖凝膠。具體實施方式九本實施方式與具體實施方式三或八的不同點是步驟C中使用的圖譜分析軟件為Gel-pro4.5軟件。其它步驟及參數(shù)與實施方式三或八相同。具體實施方式十本實施方式鯉魚按以下步驟進行品種優(yōu)化步驟一、對國家換新良種場的450尾鏡鯉親魚進行體重、鱗被等表型性狀挑選，挑選公式為Xr^X士2S，公式中Xn為親本的表型性狀測定值，X為鯉魚群體表型性狀的平均值，S為鯉魚群體表型性狀的標準差，將大于表型性狀平均值+二倍標準差和小于表型性狀平均值-二倍標準差的鯉魚個體舍去，符合要求的鯉魚作為繁殖親本。步驟二、檢測親本間的遺傳信息a.提取繁殖親本DNA對繁殖親本進行常規(guī)物理標記，標記的同時一對一的剪取鰭條0.080.12克，放到有與繁殖親本標記相同的離心管(可放入冰箱待用或直接用于提取DNA);向離心管中加入0.5mL裂解液(每升裂解液中含有50mL十二垸基肌氨酸鈉、200(ig蛋白酶K和0.01molEDTA)后在5(TC條件下消化lh，消化液再放入68'C的環(huán)境中處理15min;之后用與消化液等體積的提取液(提取液由酚、氯仿和異戊醇組成，酚、氯仿與異戊醇的體積比為25:24:1)抽提2次；然后用無DNA的RNA酶消化其中含有的RNA，并用提取液(同上)抽提2次；再經(jīng)數(shù)次透析(每升透析液中含有50mmo1pH值為8.0Tris*Cl、lOmmolEDTA、lOmmolNaCl)直到OD27Q<0.05;向透析液中加入透析液體積2倍的冰預冷的無水乙醇，經(jīng)沉淀后離心除上清液，再向沉淀中加入與沉淀等體積的冰預冷的質(zhì)量濃度為70%乙醇洗滌，并離心除去上清液在室溫條件下干燥，再用(1/10)XTE緩沖液溶解。(或者按現(xiàn)有其它標準方法提取可進行PCR分析所用的DNA樣品，樣品應置于4"環(huán)境中保存?zhèn)溆?b.繁殖親本DNA均用30對微衛(wèi)星引物分別進行PCR擴增每對微衛(wèi)星引物的PCR反應總體積為25pL由18pLPCR反應緩沖液、50ng繁殖親本DNA、l(JL微衛(wèi)星引物、lUTaq聚合酶和余量的無菌超純水制成；其中PCR反應緩沖液每升由0.25mmo1pH值為8.3的Tris，Cl、1.25mmo1KC1、0.0375mmolMgCl2、0.25mLGelatin、2.5mLTween、2.5mLNP-40、0.02mmoldNTP(4種dNTP每種dNTP在PCR反應緩沖液中的濃度各為0.005mmol/L)和余量的去離子水組成；PCR反應程序為94'C預變性3min，9fC變性30sec，退火30s，72。C延伸30s，循環(huán)38次，最后72。C延伸5min;其中選用的30對微衛(wèi)星引物及其退火溫度如表1所示。c.利用圖譜分析軟件對PCR擴增產(chǎn)物進行數(shù)字化處理PCR擴增產(chǎn)物先在電壓為200V的條件下凝膠電泳2h，然后GoldView染色，再以溴酚藍為凝膠上樣液凝膠電泳，之后用凝膠成像儀記錄電泳結果并用圖譜分析軟件Gel-pro4.5進行數(shù)字化處理。d.數(shù)字化數(shù)據(jù)導入親緣分析軟件分析計算使用的親緣分析軟件為POPGENEN軟件和PHYLIP軟件進行親緣分析和計算，獲得繁殖親本的遺傳信息(可以根據(jù)遺傳信息剔除劣質(zhì)個體)。步驟三、根據(jù)遺傳信息進行繁殖配組，繁殖親本分成2個繁殖群體，每個繁殖群體中任意一對雌雄個體間的遺傳距離應大于家系三代間的遺傳距離。(本實施方式中每個雌性親本在群體中平均有近親雄魚2.5個，選擇無近親關系或遺傳距離大于三代家系間近親的遺傳距離即遺傳距離〉0.20的親本進行配組，去除掉遺傳距離小于0.20且近親關系重的無法配組的個體。)步驟四、每個繁殖群體內(nèi)的親本自由交配，即得到品種優(yōu)化的鯉魚。將國家換新良種場的另外450尾鏡鯉作為對照組、興國紅鯉作為空白組與本實施方式品種優(yōu)化的鯉魚進行對比。在養(yǎng)殖條件相同的情況下，本實施方式品種優(yōu)化的鯉魚比對照組生長速度平均快18.45%，比空白組生長速度平均快131.38%;本實施方式品種優(yōu)化的鯉魚個體的體重比對照組的平均重18%，比空白組平均重130%。序列表<110>中國水產(chǎn)科學研究院黑龍江水產(chǎn)研究所<120>鯉魚品種優(yōu)化的方法<160>60<210>1<211>19<212>DNA<213>人工序列<220〉<223>根據(jù)基因座Cca04設計微衛(wèi)星引物(1)的上游引物<400>1atcccttaccgccctgtgt19<210>2<211>20<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座Cca04設計微衛(wèi)星引物(1)的下游引物<400>2agctgaaaaacgctgtcacg20<210>3<211>18<212〉DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ019設計微衛(wèi)星引物(2)的上游引物<400>3actgctggctcaggaaca18<210>4<211>19<212>DNA<213〉人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ019設計微衛(wèi)星引物(2)的下游引物<400〉4agagcaaagatggtagctc19<210>5<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ037設計微衛(wèi)星引物(3)的上游引物<400>5cgtggaggcataagggat18<210>6<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ037設計微衛(wèi)星引物(3)的下游引物<400>6acgggagcgtacagaaat18<210>7<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ038設計微衛(wèi)星引物(4)的上游引物<400>7cacag犯cgcatcsgtea18<210〉8<211>18<212>DNA<213〉人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ038設計微衛(wèi)星引物(4)的下游引物<400>8tgtaaaccttcaacctcc18<210>9<211〉18<212>f)NA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HU041設計微衛(wèi)星引物(5)的上游引物<400>9agaccaccgcagtaacaa18<210>10<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ041設計微衛(wèi)星引物(5)的下游引物<400>10gactcactcagcaccaga18<210>11<211>17<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ044設計微衛(wèi)星引物(6)的上游引物<400>11gtacagcgtgacagcat17<210〉12<211>18<212>DNA<213>人工序列<220〉<223>根據(jù)基因座HLJ044設計微衛(wèi)星引物(6)的下游引物<400>12aagttcatcggtgtcctc18<210>13<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ046設計微衛(wèi)星引物(7)的上游引物<400>13aaccctgaactcacaaac18<210>14<211〉18<212>DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ046設計微衛(wèi)星引物(7)的下游引物<400>14cacggaaactgagaagac18<210>15<211〉18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ049設計微衛(wèi)星引物(8)的上游引物<400>15<210>16<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ049設計微衛(wèi)星引物(8)的下游引物<400>16ctgtcacttctccttcca18<210>17<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ055設計微衛(wèi)星引物(9)的上游引物<400>17ggtac犯cggg犯cc3ca18<210>18<211>18<212>DNA<213〉人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ055設計微衛(wèi)星引物(9)的下游引物<400>18tgattgacaggcagtggg18<210〉19<211>18<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ058設計微衛(wèi)星引物(10)的上游引物<400>19cagatggcagacaggtaa18<210>20<211〉18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ058設計微衛(wèi)星引物(10)的下游引物<400>20gagcaagtgagggaacag18<210>21<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ060設計微衛(wèi)星引物(11)的上游引物<400>21cgatcactggcaagatta18<210>22<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ060設計微衛(wèi)星引物(11)的下游引物<400>22atggactacacctcaccc18<210>23<211>19<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ338設計微衛(wèi)星引物(12)的上游引物<400>23gaagaatgggtgagtaaga19<210>24<211〉18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ338設計微衛(wèi)星引物(12)的下游引物<400>24actaggatttggaagagc18<210>25<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ372設計微衛(wèi)星引物(13)的上游引物<400>25tctacttctaccgccact18<210>26<211>19<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ372設計微衛(wèi)星引物(13)的下游引物<400>26gactattcacctgcatctt19<210>27<211>18<212〉DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ379設計微衛(wèi)星引物(14)的上游引物<400>27ggggagacgagaagtgca18<210>28<211>18<212>DNA<213〉人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ379設計微衛(wèi)星引物(14)的下游引物<400>28agcaggtctgtgggcaag18<210>29<211〉18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ380設計微衛(wèi)星引物(15)的上游引物<400>29aggcagacgaaaggteaa18<210>30<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ380設計微衛(wèi)星引物(15)的下游引物<400>30ctcgcttctgtaggcatt18<210>31<211〉18<212>DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ383設計微衛(wèi)星引物(16)的上游引物<400〉31ggctcctcctcatcctct18<210>32<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ383設計微衛(wèi)星引物(16)的下游引物<400>32gcacttctgcacctttca18<210>33<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ392設計微衛(wèi)星引物(17)的上游引物<400>33ggctacaaggcaacactg18<210>34<211>18<212>DNA<213〉人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ392設計微衛(wèi)星引物(17)的下游引物<400>34tgcggttaatgaggtctg18<210>35<211>19<212〉DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ393設計微衛(wèi)星引物(18)的上游引物<400>35tgcggtcattactcattcg19<210>36<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ393設計微衛(wèi)星引物(18)的下游引物<400>36cccagcacctgtttccac18<210〉37<211>21<212〉DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ398設計微衛(wèi)星引物(19)的上游引物<400〉37cattacttgaactatcatcca21<210〉38<211〉18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ398設計微衛(wèi)星引物(19)的下游引物<400>38tgtgctgaggattattgg18<210>39<211〉18<212>DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ400設計微衛(wèi)星引物(20)的上游引物<400>39aagaagcctcggtcctcc18<210>40<211>18<212〉DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ400設計微衛(wèi)星引物(20)的下游引物<400>40aaagcccaasgcacatcs18<210>41<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ805設計微衛(wèi)星引物(21)的上游引物<400>41tctgctgaagggcgaaca18<210>42<211>18<212〉DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ805設計微衛(wèi)星引物(21)的下游引物<400>42acgatcacgctgcgacta18<210>43<211>18<212〉DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ806設計微衛(wèi)星引物(22)的上游引物<400>43ggtgtc鄉(xiāng)ctttagtcc18<210〉44<211>20<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ806設計微衛(wèi)星引物(22)的下游引物<400>44catctgagttttctccaagt20<210>45<211>20<212〉DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ809設計微衛(wèi)星引物(23)的上游引物<400>45atcatcacagccaaagaagt20<210>46<211>20<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ809設計微衛(wèi)星引物(23)的下游引物<400〉46tacggacatagtgcagacaa20<210>47<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ817設計微衛(wèi)星引物(24)的上游引物<400>47gacgatccagcagcaatg18<210>48<211>19<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ817設計微衛(wèi)星引物(24)的下游引物<400>48ctcttcctaaagcctcaaa19<210>49<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ848設計微衛(wèi)星引物(25)的上游引物<400>49gagaacacggctggatgg18<210>50<211〉20<212>DNA<213>人工序列<220><223〉根據(jù)基因座HLJ848設計微衛(wèi)星引物(25)的下游引物<400>50gtgggtgtttgaattgagat20<210>51<211>18<212>DNA<213〉人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ855設計微衛(wèi)呈引物(26)的上游引物<400〉51cgaccgaactcagaacac18<210>52<211>18<212>DNA<213〉人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ855設計微衛(wèi)星引物(26)的下游引物<楊>52gagcaccgcattaacaga18<210〉53<211〉21<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ873設計微衛(wèi)星引物(27)的上游引物<400>53agtgtcgtttatgcgtatct121<210>54<211>20<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ873設計微衛(wèi)星引物(27)的下游引物z/inr、《/i、，V/V/,J，agctcgcctactcttctact20<210〉55<211>18<212>DNA<213>人工序列<220〉<223>根據(jù)基因座HLJ878設計微衛(wèi)星引物(28)的上游引物<400>55agtggaggacgtgacagt18<210>56<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ878設計微衛(wèi)星引物(28)的下游引物<400>56aagcagagcctgatttga18<210>57<211>18<212>DNA<213〉人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ896設計微衛(wèi)星引物(29)的上游引物<400>57atcaccagtacattcact18<210>58z，11\1O、厶11,iu<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ896設計微衛(wèi)星引物(29)的下游引物<400>58cgtttagcaaaggttagt18<210>59<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>根據(jù)基因座HLJ900設計微衛(wèi)星引物(30)的上游引物<400>59aaggacgacggaaggttt18<210>60<211>18<212>DNA<213〉人工序列<220〉<223〉根據(jù)基因座HLJ900設計微衛(wèi)星引物(30)的下游引物<400>60acactgacgggtcaagag18權利要求1、鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于鯉魚按以下步驟進行品種優(yōu)化一、對鯉魚個體進行表型性狀挑選，符合要求的鯉魚作為繁殖親本；二、檢測親本間的遺傳信息；三、根據(jù)遺傳信息進行繁殖配組，繁殖親本至少分成2個繁殖群體，每個繁殖群體中任意一對雌雄個體間的遺傳距離應大于家系三代間的遺傳距離；四、每個繁殖群體內(nèi)的親本自由交配，即得到品種優(yōu)化的鯉魚。2、根據(jù)權利要求1所述的鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于步驟一中表型性狀挑選公式為Xi^Xi2S,公式中Xn為親本的表型性狀測定值，X為鯉魚群體表型性狀的平均值，S為鯉魚群體表型性狀的標準差。3、根據(jù)權利要求1所述的鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于步驟二檢測親本間的遺傳信息a.提取繁殖親本DNA;b.繁殖親本DNA均用30對微衛(wèi)星引物分別進行PCR擴增；c.利用圖譜分析軟件對PCR擴增產(chǎn)物進行數(shù)字化處理；d.數(shù)字化數(shù)據(jù)導入親緣分析軟件分析計算，獲得遺傳信息。4、根據(jù)權利要求3所述的鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于步驟b中每對微衛(wèi)星引物的PCR反應總體積為25pL由18pLPCR反應緩沖液、50ng繁殖親本DNA、lpL微衛(wèi)星引物、lUTaq聚合酶和余量的無菌超純水制成；其中PCR反應緩沖液每升由0.25mmo1pH值為8.3的Tris'Cl、1.25mmo1KC1、0.0375mmolMgCl2、0.25mLGelatin、2.5mLTween、2.5mLNP-40、0.02mmo1dNTP和余量的去離子水組成。5、根據(jù)權利要求3所述的鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于步驟b中PCR反應程序為94。C預變性3min，94。C變性30sec，退火30s，72。C延伸30s，循環(huán)38次，最后72。C延伸5min。6、根據(jù)權利要求3所述的鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于步驟b中選用的30對微衛(wèi)星引物及其退火溫度分別為微衛(wèi)星弓l物(1)上游弓l物ATCCCTTACCGCCCTGTGT下游引物AGCTGAAAAACGCTGTCACG退火溫度為50°C，微衛(wèi)星引物(2)上游引物ACTGCTGGCTCAGGAACA下游引物AGAGCAAAGATGGTAGCTC退火溫度為53°C，微衛(wèi)星引物(3)上游引物CGTGGAGGCATAAGGGAT退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為微衛(wèi)星引物退火溫度為微衛(wèi)星引物退火溫度為微衛(wèi)星引物退火溫度為下游引物53。C，(4)上游引物下游引物.-53°C，(5)上游引物下游引物53°C，(6)上游引物下游引物53°C，(7)上游引物下游引物-53°C，(8)上游引物下游引物54°C，(9)上游引物下游引物54°C，(10)上游引物:下游引物:53°C，(11)上游引物:下游引物::54°C，(12)上游引物:下游引物::51°C，(13)上游引物:下游引物::54°C，ACGGGAGCGTACAGAAATCACAGAACGCATCAGTAATGTAAACCTTCAACCTCCAGACCACCGCAGTAACAAGACTCACTCAGCACCAGAGTACAGCGTGACAGCATAAGTTCATCGGTGTCCTCAACCCTGAACTCACAAACCACGGAAACTGAGAAGACGATTTGTGCTCCTCAACCCTGTCACTTCTCCTTCCAGGTACAACGGGAACCACATGATTGACAGGCAGTGGGCAGATGGCAGACAGGTAAGAGCAAGTGAGGGAACAGCgATCACTGGCAAGATTAATGGACTACACCTCACCCGAAGAATGGGTGAGTAAGAACTAGGATTTGGAAGAGCTCTACTTCTACCGCCACTGACTATTCACCTGCATCTT微衛(wèi)星引物(14)上游引物:下游引物:退火溫度為54°C，微衛(wèi)星引物(15)上游引物:下游引物:退火溫度為54°C，微衛(wèi)星引物(16)上游引物:下游引物退火溫度為51°C，微衛(wèi)星引物(17)上游引物下游引物退火溫度為54°C，微衛(wèi)星引物(18)上游引物下游引物退火溫度為54°C，微衛(wèi)星引物(19)上游引物下游引物-退火溫度為54°C，微衛(wèi)星引物(20)上游引物下游引物退火溫度為51°C，微衛(wèi)星引物(21)上游引物:下游引物:退火溫度為48°C，微衛(wèi)星引物(22)上游引物:下游引物-退火溫度為48°C，微衛(wèi)星引物(23)上游引物-下游引物退火溫度為48°C，微衛(wèi)星引物(24)上游引物:下游引物:GGGGAGACGAGAAGTGCAAGCAGGTCTGTGGGCAAGAGGCAGACGAAAGGTAAACTCGCTTCTGTAGGCATTGGCTCCTCCTCATCCTCTGCACTTCTGCACCTTTCAGGCTACAAGGCAACACTGTGCGGTTAATGAGGTCTGTGCGGTCATTACTCATTCGCCCAGCACCTGTTTCCACCATTACTTGAACTATCATCCATGTGCTGAGGATTATTGGAAGAAGCCTCGGTCCTCCAAAGCCCAAAGCACATCATCTGCTGAAGGGCGAACAACGATCACGCTGCGACTAGGTGTCAGGCTTTAGTCCCATCTGAGTTTTCTCCAAGTATCATCACAGCCAAAGAAGTTACGGACATAGTGCAGACAAGACGATCCAGCAGCAATGCTCTTCCTAAAGCCTCAAA退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為:微衛(wèi)星引物退火溫度為.-48°C，(25)上游引物:下游引物:48°C，(26)上游引物:下游引物:48。C，(27)上游引物:下游引物:48°C，(28)上游引物:下游引物:54°C，(29)上游引物:下游引物:53。C，(30)上游引物:下游引物-50°C。GAGAACACGGCTGGATGGGTGGGTGTTTGAATTGAGATCGACCGAACTCAGAACACGAGCACCGCATTAACAGAAGTGTCGTTTATGCGTATCTTAGCTCGCCTACTCTTCTACTAGTGGAGGACGTGACAGTAAGCAGAGCCTGATTTGAATCACCAGTACATTCACTCGTTTAGCAAAGGTTAGTAAGGACGACGGAAGGTTTACACTGACGGGTCAAGAG7、根據(jù)權利要求3所述的鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于步驟d中使用的親緣分析軟件為POPGENEN軟件和PHYLIP軟件。8、根據(jù)權利要求3所述的鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于步驟cPCR擴增產(chǎn)物先在電壓為200V的條件下凝膠電泳2h，然后GoldView染色，再以溴酚藍為凝膠上樣液進行凝膠電泳，之后用凝膠成像儀記錄電泳結果并用圖譜分析軟件進行數(shù)字化處理。9、根據(jù)權利要求3或8所述的鯉魚品種優(yōu)化的方法，其特征在于步驟c中使用的圖譜分析軟件為Gelpro4.5軟件。全文摘要鯉魚品種優(yōu)化的方法，它涉及一種魚類品種優(yōu)化的方法。它解決了目前鯉魚選育養(yǎng)殖和種內(nèi)雜交養(yǎng)殖都存在近親交配比例高，導致群體遺傳衰退、經(jīng)濟性狀和生產(chǎn)性能下降的問題。選育步驟一、表型性狀挑選；二、檢測親本間的遺傳信息；三、根據(jù)遺傳信息進行群體繁殖配組；四、每個繁殖群體內(nèi)的親本自由交配，即得到品種優(yōu)化的鯉魚。本發(fā)明方法可避免近親交配，因此品種能夠得到優(yōu)化，鯉魚的經(jīng)濟性狀和生產(chǎn)性能顯著提高。文檔編號C12Q1/68GK101120667SQ20071014436公開日2008年2月13日申請日期2007年9月26日優(yōu)先權日2007年9月26日發(fā)明者匡友誼,孫效文,曹頂臣,梁利群,魯翠云申請人:中國水產(chǎn)科學研究院黑龍江水產(chǎn)研究所