專利名稱：修復水生態(tài)環(huán)境的制劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種修復水生態(tài)環(huán)境的制劑及其制備方法。
背景技術：
目前我國的城市景觀水和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)用水，特別是魚蝦養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展面臨著水質(zhì)污染，水生態(tài)系統(tǒng)失衡導致蝦病蔓延，水體富營養(yǎng)化，情況嚴重。隨著人們物質(zhì)生活水平的提高和國家發(fā)展無公害食品計劃，用抗生素藥物進行蝦病防治已不適應當前對健康食品的要求。
目前淡水和海水養(yǎng)殖大多數(shù)采用“封閉半封閉內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖”(靜水封閉養(yǎng)殖)的方式，即在養(yǎng)殖季節(jié)內(nèi)不換水，因此造成餌料和養(yǎng)殖生物排泄物的積累，加之夏季炎熱使水質(zhì)惡化，魚蝦發(fā)病率高。為了減少病害損失，不得不大量使用抗生素和化學藥物，因此又會進一步污染水質(zhì)，導致魚蝦病害增多，形成惡性循環(huán)。傳統(tǒng)的養(yǎng)殖方式不僅使魚蝦養(yǎng)殖成本增高，而且嚴重影響魚蝦的質(zhì)量，污水的排放同時造成嚴重的環(huán)境污染。國內(nèi)外都在尋求能改善水環(huán)境，預防魚蝦病的有效方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種環(huán)保、高密度高活性的修復水生態(tài)環(huán)境的制劑及其制備方法。
本發(fā)明解決該技術問題所采用的技術方案是以枯草芽孢桿菌ACCC10619，Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn，和發(fā)酵乳酸桿菌AS1.1880，Lactobacillus bulgaricus(Luerssen et kuhu)Holland為主，輔以適量細黃鏈霉菌AS4.891，(Streptomyces microflavus)，并吸附固定化于麥麩上制備成菌制劑。
修復水環(huán)境的微生態(tài)菌制劑是上述枯草芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、發(fā)酵乳酸桿菌組成的優(yōu)化復合物，其中各組分的重量百分比為枯草芽孢桿菌60～80％，細黃鏈霉菌10～20％，發(fā)酵乳酸桿菌10～20％。
修復水生態(tài)環(huán)境的制劑的制備方法包括下述步驟1.保存的各斜面菌種活化，分別搖瓶培養(yǎng)。枯草芽孢桿菌和細黃鏈霉菌用可溶性淀粉培養(yǎng)基培養(yǎng)，pH7.0～7.5，115～121℃高壓滅菌20-30分鐘；發(fā)酵乳酸桿菌直接用滅菌鮮牛乳培養(yǎng)；枯草芽孢桿菌，35～40℃培養(yǎng)20～24小時；細黃鏈霉菌和發(fā)酵乳酸桿菌，28～30℃培養(yǎng)36～50小時。
2.枯草芽孢桿菌，細黃鏈霉菌和發(fā)酵乳酸桿菌的一級液體擴大培養(yǎng)；接種量10％～20％。
3.枯草芽孢桿菌，細黃鏈霉菌和發(fā)酵乳酸桿菌的二級液體擴大培養(yǎng)；接種量10％～20％。
4.以麥麩為載體分別固體擴大培養(yǎng)并固定化于麥麩上。
5.將枯草芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、發(fā)酵乳酸桿菌30～50℃熱風干燥，然后粉碎。
6.將枯草芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、發(fā)酵乳酸桿菌混合，各菌組分的重量百分比為枯草芽孢桿菌60～80％，細黃鏈霉菌10～20％，發(fā)酵乳酸桿菌10～20％。
本發(fā)明的有益效果1)復合菌固定化于麥麩上，使每克復合菌制劑的有效菌菌落數(shù)(CFU)可高達1000億個，幾乎達到了最大可能數(shù)，至今還未見如此高含菌量菌制劑的報道.麥麩不僅能為所培養(yǎng)菌提供一些營養(yǎng)成分，還由于其網(wǎng)狀結構，具有較大的比表面積，所以能在單位體積內(nèi)附著吸附固定化較多的菌體。
2)游離的NH3和NO2-是毒害魚蝦的主要有害成分，也是造成蝦死亡的主要原因.若能降低氨氮(NH4+-N)，游離的NH3也就會減少，NO2--N也會減少，pH值也就趨于穩(wěn)定.在同樣條件同樣劑量下，我們研制的產(chǎn)品(XIJ)與美國Brookside公司的Bio-culture Aq(Bio-t)相比，降低NO2--N量的效果相差不多，但是降低NH4+-N的能力卻明顯優(yōu)于Bio-t。菌制劑經(jīng)活化后灑入水體能很快形成微生態(tài)優(yōu)勢菌，能明顯降低養(yǎng)殖水的COD和亞硝態(tài)氮，能穩(wěn)定氨態(tài)氮(NH4+-N)并保持在一定水平上.使pH值穩(wěn)定在一定范圍內(nèi)。
本發(fā)明的積極效果還在于1.本發(fā)明的菌制劑經(jīng)活化，在水中能很快形成微生態(tài)優(yōu)勢菌群，發(fā)揮其降解有機物、促生、益生的作用；2.能迅速降低COD；3.降低亞硝酸態(tài)氮；4.能使氨態(tài)氮和pH值保持在一定水平上；5.抑制有害病菌的繁殖，調(diào)節(jié)水中藻類密度，促進水生生態(tài)系統(tǒng)修復和平衡；6.促進蝦胃腸道健康，與對照相比，防治成本降低80％，蝦產(chǎn)量提高近1倍，并顯著改善蝦的品質(zhì)；7.代替或減少使用抗生素和化學藥物，使養(yǎng)蝦業(yè)成為無公害綠色養(yǎng)殖業(yè)；8.本發(fā)明的微生態(tài)菌制劑具有適應性強，對水生態(tài)環(huán)境修復效果好，活菌數(shù)高等特點；9.可以應用于城市景觀用水或再生水的凈化。
具體實施例方式
實施例1按下列步驟進行1)將4℃保存的各斜面菌種活化，分別搖瓶培養(yǎng)?？莶菅挎邨U菌和細黃鏈霉菌用可溶性淀粉培養(yǎng)基培養(yǎng)，具體配方如下可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl 0.5g，K2HPO40.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，F(xiàn)eSO40.01g，蒸餾水1000ml，pH7.2，121℃高壓滅菌20分鐘。發(fā)酵乳酸桿菌直接用滅菌鮮牛乳培養(yǎng)?？莶菅挎邨U菌，37℃培養(yǎng)24小時；細黃鏈霉菌和發(fā)酵乳酸桿菌，30℃培養(yǎng)48小時。
2)一級液體擴大培養(yǎng)(枯草芽孢桿菌，細黃鏈霉菌和發(fā)酵乳酸桿菌分別單獨擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件同上)；接種量10％。
3)二級液體分別擴大培養(yǎng)；接種量10％。
4)以麥麩為載體分別固體擴大培養(yǎng)并固定化于麥麩上。
5)將上述三類菌35℃熱風干燥，然后粉碎，按各菌組分的重量百分比混合枯草芽孢桿菌600克，細黃鏈霉菌100克，發(fā)酵乳酸桿菌100克混合，即可得到本發(fā)明的制劑。
實施例2微生態(tài)菌制劑的性能測定選定5個沒有進水閘門的土池養(yǎng)蝦池進行實驗。1～4號池為實驗池，5號池為對照池。每個池塘面積近2000m2，平均水深1.8m，分別配置相同型號增氧機一臺。實驗期間不補充淡水，蝦池水溫平均17～18℃，鹽度2.0％～2.1％。加入復合菌制劑的量第一次加入劑量18000g/hm2，即1mg.L-1，以后每周補加一次，劑量為4500g/hm2.菌制劑在使用前先在于20倍水中浸泡、攪拌1～1.5h，活化菌體后，再均勻地潑灑于池塘中。對照池不加復合菌制劑。實驗期3個月。
測定結果CODCr相對于對照池去除率達84.7％，(重鉻酸鉀法)。
氨氮實驗池先增加后減少，三天后穩(wěn)定在4mg.L-1以下(納氏試劑法)。對照池，氨氮是逐漸升高的趨勢，一周后氨氮達6～8mg.L-1亞硝酸態(tài)氮對照池亞硝酸態(tài)氮快速升高并維持在高水平，第10天時達10mg.L-1，實驗池開始也略有升高，但一直維持在很低水平，第10天時僅在2mg.L-1以下，相對對照池亞硝酸態(tài)氮的去除率達80％以上。
成本核算對照池獲蝦產(chǎn)量為5400kg.hm2，投放治蝦病、防病藥物費用達2500～3000元。而實驗池的蝦產(chǎn)量平均10500kg.hm2，單位產(chǎn)量增加近1倍。實驗池由于僅投放了菌制劑，每池約合500元，沒有再加任何藥物，所以成本大大降低，約是對照池的1/5～1/6。
權利要求
1.一種修復水生態(tài)環(huán)境的微生物制劑，其特征在于該菌制劑主要是由枯草芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、發(fā)酵乳酸桿菌組成的優(yōu)化復合物，其中各菌組分的重量百分比為枯草芽孢桿菌60～80％，細黃鏈霉菌10～20％，發(fā)酵乳酸桿菌10～20％。
2.如權利要求1所述的修復水生態(tài)環(huán)境的制劑的制備方法，其特征在于它包括下述步驟1)將保存的各斜面菌種活化，分別搖瓶培養(yǎng)；枯草芽孢桿菌和細黃鏈霉菌用可溶性淀粉培養(yǎng)基培養(yǎng)，pH7.0～7.5，115～121℃高壓滅菌20～30分鐘；發(fā)酵乳酸桿菌直接用滅菌鮮牛乳培養(yǎng)；枯草芽孢桿菌，35～40℃培養(yǎng)20～24小時；細黃鏈霉菌和發(fā)酵乳酸桿菌，28～30℃培養(yǎng)36～50小時；2)枯草芽孢桿菌，細黃鏈霉菌和發(fā)酵乳酸桿菌的一級液體擴大培養(yǎng)(20L罐)；接種量10％～20％；3)枯草芽孢桿菌，細黃鏈霉菌和發(fā)酵乳酸桿菌的二級液體擴大培養(yǎng)(200L罐)；接種量10％～20％；4)以麥麩為載體分別進行固體擴大培養(yǎng)并固定化于麥麩上；5)將枯草芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、發(fā)酵乳酸桿菌30～50℃熱風干燥，然后粉碎；6)將枯草芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、發(fā)酵乳酸桿菌混合，各菌組分的重量百分比為枯草芽孢桿菌60～80％，細黃鏈霉菌10～20％，發(fā)酵乳酸桿菌10～20％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種修復水生態(tài)環(huán)境的制劑及其制備方法。修復水環(huán)境的微生態(tài)菌制劑是枯草芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、發(fā)酵乳酸桿菌組成的優(yōu)化復合物，其中各組分的重量百分比為枯草芽孢桿菌60～80％，細黃鏈霉菌10～20％，發(fā)酵乳酸桿菌10～20％。本發(fā)明的積極效果在于菌制劑經(jīng)溫水活化，在水中能很快形成微生態(tài)優(yōu)勢菌群，發(fā)揮其降解有機物、促生、益生的作用；具有適應性強，對水生態(tài)環(huán)境修復效果好，活菌數(shù)高等特點。
文檔編號C12R1/125GK1831112SQ20061001336
公開日2006年9月13日 申請日期2006年3月24日 優(yōu)先權日2006年3月24日
發(fā)明者張清敏, 王蘭, 侯樹宇, 朱琳, 鐘歡 申請人:南開大學