專利名稱：采用埃坡霉素和卡鉑的聯(lián)合治療的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用埃坡霉素和卡鉑的聯(lián)合治療及其給藥方法。
背景技術(shù)：
埃坡霉素是強效的微管形成穩(wěn)定劑，其作用機制類似于紫杉醇抑制微管蛋白解聚和阻斷細胞周期的G2/M期。尤其感興趣的是埃坡霉素B(1)及其衍生物，例如埃坡霉素B內(nèi)酰胺和21-氨基埃坡霉素B、以及埃坡霉素D(2，也稱為“KOS-862”)及其衍生物。
埃坡霉素B(1) 埃坡霉素D(2)與紫杉醇不同，埃坡霉素D在體內(nèi)外都能維持其針對紫杉醇耐受的人癌細胞株的效力。埃坡霉素D已進入多個單一療法2期臨床試驗，并顯示了治療各種癌癥的明顯潛力。
聯(lián)合療法在癌癥治療中非常重要，具有不同作用機制的試劑的組合可使得細胞毒性提高。由于埃坡霉素(微管穩(wěn)定作用)和卡鉑(DNA烷化作用)具有不同的抗腫瘤活性機制，埃坡霉素/卡鉑組合可能具有超過紫杉烷/卡鉑組合的非重疊毒性和提高的效力。本發(fā)明提供采用埃坡霉素D和卡鉑(ParaplatinTM，Bristol-MyersSquibb)的聯(lián)合療法，預(yù)期該療法對各種特征為細胞過度增殖的癌癥和疾病具有顯著改善的治療效果。
卡鉑發(fā)明概述本發(fā)明提供了治療以細胞過度增殖為特征的疾病的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者埃坡霉素和卡鉑的組合。在一個優(yōu)選的實施方式中，所述埃坡霉素是埃坡霉素D。在另一個優(yōu)選的實施方式中，所述細胞過度增殖疾病是癌癥，尤其是非小細胞肺癌。在優(yōu)選的實施方式中，在給予卡鉑之前或在給予卡鉑的同時給予埃坡霉素。
在另一個實施方式中，提供了一種藥物組合物，所述組合物包含埃坡霉素與卡鉑以及藥學(xué)上可接受的載體。例如，所述載體可以是注射用水(WFI)。
在另一個實施方式中，提供了一種試劑盒，所述試劑盒包括含埃坡霉素的第一藥物組合物和含卡鉑的第二藥物組合物。
附圖簡要說明

圖1顯示了埃坡霉素與卡鉑組合的體外試驗數(shù)據(jù)。
圖2a和2b顯示了與兩種單獨的藥物相比，埃坡霉素-卡鉑聯(lián)合治療的小鼠異種移植數(shù)據(jù)。
圖3顯示了與兩種單獨的藥物相比，埃坡霉素-卡鉑聯(lián)合治療的細胞周期數(shù)據(jù)。
發(fā)明詳述一方面，本發(fā)明提供了治療以細胞過度增殖為特征的疾病的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者(尤其是人)埃坡霉素與卡鉑的組合。
本發(fā)明藥物組合物中使用的埃坡霉素可以是埃坡霉素，更具體地是具有有用的治療性質(zhì)的任何埃坡霉素?？刹捎糜袡C化學(xué)、藥物化學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)人員已知的全化學(xué)合成、部分化學(xué)合成或化學(xué)生物合成方法和材料的任意組合，獲得這些埃坡霉素。具有有用治療性質(zhì)的埃坡霉素的具體例子包括但不限于埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、4-去甲基-埃坡霉素D、埃坡霉素B內(nèi)酰胺、21-氨基埃坡霉素B、9，10-脫氫埃坡霉素D、9，10-脫氫-26-三氟-埃坡霉素D、11-羥基埃坡霉素D、19-噁唑基-埃坡霉素D、10，11-脫氫-埃坡霉素D和19-噁唑基-10，11-脫氫-埃坡霉素D。在本發(fā)明具體實施方式
中，埃坡霉素選自下組埃坡霉素B、埃坡霉素B內(nèi)酰胺、21-氨基埃坡霉素B、埃坡霉素D和反-9，10-脫氫埃坡霉素D。文獻中已公開了許多合適的埃坡霉素及其制備方法的詳細例子，這些例子是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟悉的。
在本發(fā)明的某些實施方式中，所述疾病是癌癥。本發(fā)明包括治療以下癌癥的方法頭頸部癌癥，包括頭部、頸部、鼻腔、鼻旁竇、鼻咽、口腔、口咽、喉、咽下部、唾液腺腫瘤和神經(jīng)節(jié)細胞瘤；肝和膽道系統(tǒng)癌癥，尤其是肝細胞癌；腸癌，尤其是結(jié)腸直腸癌；治療卵巢癌；小細胞和非小細胞肺癌；乳腺癌肉瘤，例如纖維肉瘤、惡化纖維組織細胞瘤、胚胎橫紋肌肉瘤(rhabdomysocarcoma)、平滑肌肉瘤(leiomysosarcoma)、神經(jīng)纖維肉瘤、骨肉瘤、滑膜肉瘤、脂肪肉瘤和泡狀軟組織肉瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)贅生物，尤其是腦癌；淋巴瘤，例如何杰金氏淋巴瘤、淋巴漿細胞樣淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、粘膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、B-譜系大細胞淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤和T-細胞間變性大細胞淋巴瘤等。在本發(fā)明的具體實施方式
中，所述疾病是選自下組的癌癥乳腺癌、結(jié)腸直腸癌和非小細胞肺癌。
臨床上，實施本發(fā)明方法和應(yīng)用本發(fā)明組合物將導(dǎo)致癌性生長的大小或數(shù)量的降低和/或相關(guān)癥狀的降低(可適用時)。病理學(xué)上，實施本發(fā)明方法和應(yīng)用本發(fā)明組合物可產(chǎn)生病理學(xué)相關(guān)效應(yīng)，例如，抑制癌細胞增殖、減小癌或腫瘤的大小、防止進一步轉(zhuǎn)移和抑制腫瘤血管發(fā)生。治療這些疾病的方法包括將治療有效量的本發(fā)明組合給予對象。需要時可重復(fù)該方法。
另一方面，本發(fā)明提供治療疾病的方法，所述方法包括以某種給藥方案將上述組合給予對象，如本文所述。埃坡霉素可與卡鉑同時給予。或者可在給予埃坡霉素之前給予卡鉑。此外，在分別給予兩種藥物的實施方式中，可延遲給予第二種藥物，以提供更大的聯(lián)合療法治療效果。藥理學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員將熟悉適用于確定給予非同時療法中的暫時因素的概念、方法和材料。相關(guān)因素的例子包括但不限于患者的生理節(jié)律、與待治療疾病相關(guān)的細胞周期特征(例如，腫瘤細胞類型)、以及所用藥物的藥動學(xué)參數(shù)。
另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物，所述組合物包含埃坡霉素與卡鉑以及藥學(xué)上可接受的載體。埃坡霉素和卡鉑以合適的比例存在，以提供兩種藥物的有效治療劑量。
另一方面，本發(fā)明提供了試劑盒，使用單獨藥物形式的埃坡霉素和卡鉑以使聯(lián)合療法更為便利。在一個實施方式中，該試劑盒包括兩種藥物獨立的藥物組合物，即包含埃坡霉素的第一藥物組合物和包含卡鉑的第二藥物組合物。這些藥物組合物可以是濃縮物或凍干物，其包含適當(dāng)量的埃坡霉素或卡鉑以及所需的輔料，備用于注射入患者之前用水性介質(zhì)稀釋，或者它們可以是備用于直接注射入患者的脂質(zhì)乳劑。
下面的實施例僅僅闡述了本發(fā)明的某些方面，以幫助本領(lǐng)域技術(shù)人員實施本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
實施例1-埃坡霉素D和卡鉑在培養(yǎng)的NSCLC細胞株中的協(xié)同作用將人NSCLC(非小細胞肺癌)細胞株A549、H23、H226、H358、H460和H522接種于96孔板(5000個細胞/孔)中；孵育過夜，然后單用埃坡霉素D或卡鉑，或用埃坡霉素D與卡鉑的組合處理細胞。一旦獲得各種藥物的IC50值，以兩種藥物的恒定比例設(shè)計組合藥物治療，治療方案可變先給予埃坡霉素D或卡鉑，24小時后給予第二種藥物。以MTS分析法分析細胞存活力(viability)。在所有受試細胞株中，先給予卡鉑時觀察到輕度拮抗作用，而先給予埃坡霉素D再給予卡鉑時可測得顯著的協(xié)同作用。如表1所示，埃坡霉素D具有對抗多種培養(yǎng)的非小細胞肺癌(NSCLC)人癌細胞株的強細胞毒作用，而卡鉑在10,000nM濃度下基本上無活性。用不同濃度的埃坡霉素D或卡鉑處理細胞，從1pM到10μM，持續(xù)3天。采用MTS分析法(Promega)測定細胞存活力。IC50定義為抑制50％細胞生長所需的藥物濃度。
圖1顯示了組合試驗的結(jié)果。在所有六種細胞株中，先用埃坡霉素D再用卡鉑處理導(dǎo)致強的協(xié)同作用，而先用卡鉑再用埃坡霉素D處理則導(dǎo)致輕度拮抗作用。由于表1所示卡鉑對抗NSCLC細胞株基本上無活性，與埃坡霉素在聯(lián)合治療中產(chǎn)生的協(xié)同作用是意想不到的。
實施例2-埃坡霉素D與卡鉑在小鼠異種移植瘤中的協(xié)同作用在荷有人肺癌異種移植物MV522和SK-MES的裸小鼠中也進行了藥物組合試驗。皮下植入從裸小鼠宿主皮下生長腫瘤中收集的人腫瘤癌碎片。當(dāng)腫瘤大小約為60-75mg(植入后10-14天)時，將小鼠配對分成治療組和對照組。腹膜內(nèi)給予埃坡霉素D，每天2次，持續(xù)7天(6-14mg/kg/天)；腹膜內(nèi)給予卡鉑，每天1次，持續(xù)5天(10-40mg/kg/天)；埃坡霉素D(首先)和卡鉑(其次)的各種組合；或介質(zhì)(vehicle)對照。單用的埃坡霉素D和卡鉑以劑量依賴的方式產(chǎn)生抗增殖活性(以腫瘤大小測定)。在動物重量損失耐受性良好且可逆的條件下，無一藥物組合產(chǎn)生拮抗作用，而多種組合可產(chǎn)生加合或協(xié)同作用。圖2顯示了用介質(zhì)、單用埃坡霉素D(MV522，8mg/kg；SKMES，14mg/kg，每天2次，持續(xù)7天)、單用卡鉑(10mg/kg，每天一次，持續(xù)5天)、先用埃坡霉素D再用卡鉑處理動物的試驗結(jié)果。在MV522和SKMES移植瘤模型中，在明顯低于單一藥物治療劑量的劑量下，埃坡霉素D和卡鉑的聯(lián)合治療產(chǎn)生強的腫瘤抑制作用。動物總的體重損失耐受良好且可逆。
實施例3-埃坡霉素D和卡鉑對細胞周期的作用單用埃坡霉素D(8nM)、單用卡鉑(15uM)，或用埃坡霉素D(8nM)再用卡鉑(15uM)處理細胞。用碘化丙錠對細胞進行染色，用流式細胞儀分析。結(jié)果如圖3所示。用埃坡霉素D和卡鉑的組合處理細胞可使得亞-G1群增加，表明誘導(dǎo)了凋亡。
本發(fā)明的上述詳細說明包括主要地或排他性地涉及本發(fā)明具體部分或方面的段落。應(yīng)理解，這是為了清楚和方便，具體特征可不僅僅涉及對其進行揭示的段落，并且本文所述內(nèi)容包括不同段落中信息的所有適當(dāng)組合。類似地，雖然各圖和說明涉及本發(fā)明的具體實施方式
，應(yīng)理解，當(dāng)具體的圖或?qū)嵤┓绞絻?nèi)容中公開了具體特征，這些特征也可在適當(dāng)?shù)某潭壬嫌糜诹硪粋€圖或?qū)嵤┓绞降膬?nèi)容中，與另一個特征組合，或通用于本發(fā)明中。
而且，雖然以某些優(yōu)選實施方式的形式具體描述了本發(fā)明，本發(fā)明并不限于這些優(yōu)選的實施方式。而是，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求書所限定。
權(quán)利要求
1.一種治療以細胞過度增殖為特征的疾病的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者埃坡霉素與卡鉑的組合。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述埃坡霉素是埃坡霉素D。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述疾病是癌癥。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述疾病是非小細胞肺癌。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述疾病是癌癥。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述疾病是非小細胞肺癌。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，先用埃坡霉素治療，然后用卡鉑治療所述患者。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，同時用埃坡霉素和卡鉑治療所述患者。
9.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含埃坡霉素與卡鉑以及藥學(xué)上可接受的載體。
10.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述埃坡霉素是埃坡霉素D。
11.一種試劑盒，所述試劑盒包括含埃坡霉素的第一藥物組合物和含卡鉑的第二藥物組合物。
12.如權(quán)利要求11所述的試劑盒，其特征在于，所述埃坡霉素是埃坡霉素D。
全文摘要
埃坡霉素與卡鉑的聯(lián)合治療可有效治療腫瘤。
文檔編號C12Q1/48GK1934269SQ200580009437
公開日2007年3月21日 申請日期2005年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月26日
發(fā)明者周憶清, R·G·小約翰遜 申請人:高山生物科學(xué)股份有限公司