專利名稱：蝮蛇活肝酶及其制備工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種蝮蛇活肝酶及其制備工藝。
背景技術：
蛇毒有液體黃金之稱，醫(yī)用價值早有報道，其醫(yī)用價值概括有四大功能即抗凝溶栓、抗癌鎮(zhèn)痛、促進神經生長與止血、抗衰扶正。從事蛇毒研究的國內外科研機構較多，發(fā)表的論文也較多。由于蛇毒成份復雜，中國科學家從上世紀六十年代就開始對蛇毒進行了系統的研究，而蛇毒因含有對人體有害的神經毒和出血毒，如不能充分去除，會給人體造成危害，并且由于其成分單一，也會影響療效，而且因其分子量太大，會給用藥者帶來不安全隱患。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種用藥安全，療效高的蝮蛇活肝酶及其制備工藝。
本發(fā)明的目的是這樣實現的蝮蛇活肝酶，其組成包括復合酶，所述的復合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復合酶為溶血因子、克癌因子、神經生長因子的混合物。
上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，按上述所述的重量份數取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥基甲基甲烷鹽酸緩沖液，充分溶解，經10000轉高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過分子篩進一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經陽離子交換純化，得到分子量為2.5～3.5萬的溶血因子、克癌因子、神經生長因子三種復合酶，藥品每只含量為0.25μg，一日一次，每次0.5μg，靜脈滴注，每盒10支*0.25μg。
上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，所述的陰離子交換采用陰離子交換柱，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.5～6.8，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過濾柱，洗脫液用碳酸氫鈉溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽離子交換柱，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
本發(fā)明的優(yōu)點在于1.本發(fā)明的蝮蛇活肝酶，徹底去除了蝮蛇毒中所含有的大量有害有毒物質，保留了有效組分，其分子量嚴格控制在2.5萬～3.5萬之間，從而達到了用藥即安全、療效又高的目的。
2.本產品是從蝮蛇毒中提取的一種復合酶，經離子交換、分子篩透析、凍干等技術制備而成，主要含有三種復合酶，其中一種酶具有生物活性，本復合酶經體外、體內試驗表明，具有較強的殺死肝炎病毒及肝癌細胞的作用，并能抑制再生，而且還具有疏通微循環(huán)，改善肝細胞血液供應，保護肝細胞等功能。該產品的問世，是治療各種肝病的首選藥物。
3.本產品的制備工藝先進，科學合理，并易于掌握。
實施例1蝮蛇活肝酶及其制備工藝，其組成包括復合酶，所述的復合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復合酶包括溶血因子、克癌因子、神經生長因子，其重量份數為蝮蛇毒100。其制備工藝是按上述所述的重量份數取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥甲基氨基甲烷鹽酸(Tris-HCl)緩沖液，充分溶解，經10000轉高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過分子篩進一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經陽離子交換純化，得到分子量為2.5萬的溶血因子、克癌因子、神經生長因子三種復合酶，藥品每只含量為0.25μg，一日一次，每次0.5μg，靜脈滴注，每盒10支*0.25μg。
實施例2蝮蛇活肝酶及其制備工藝，其組成包括復合酶，所述的復合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復合酶包括溶血因子、克癌因子、神經生長因子，其重量份數為蝮蛇毒100。其制備工藝是按上述所述的重量份數取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥甲基氨基甲烷鹽酸(Tris-HCl)緩沖液，充分溶解，經10000轉高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過分子篩進一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經陽離子交換純化，得到分子量為3.5萬的溶血因子、克癌因子、神經生長因子三種復合酶，藥品每只含量為0.25μg，一日一次，每次0.5μg，靜脈滴注，每盒10支*0.25μg。
實施例3蝮蛇活肝酶及其制備工藝，其組成包括復合酶，所述的復合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復合酶包括溶血因子、克癌因子、神經生長因子，其重量份數為蝮蛇毒100。其制備工藝是按上述所述的重量份數取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥甲基氨基甲烷鹽酸(Tris-HCl)緩沖液，充分溶解，經10000轉高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過分子篩進一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經陽離子交換純化，得到分子量為3萬的溶血因子、克癌因子、神經生長因子三種復合酶，藥品每只含量為0.25μg，一日一次，每次0.5μg，靜脈滴注，每盒10支*0.25μg。
實施例4上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，所述的陰離子交換采用陰離子交換柱(DEAE-52纖維素柱)，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.5，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過濾柱(sephadex-75)，洗脫液用碳酸氫鈉(NaHCO3)溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽離子交換柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
實施例5上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，所述的陰離子交換采用陰離子交換柱(DEAE-52纖維素柱)，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.8，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過濾柱(sephadex-75)，洗脫液用碳酸氫鈉(NaHCO3)溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽離子交換柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
實施例6上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，所述的陰離子交換采用陰離子交換柱(DEAE-52纖維素柱)，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.6，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過濾柱(sephadex-75)，洗脫液用碳酸氫鈉(NaHCO3)溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽離子交換柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
權利要求
1.一種蝮蛇活肝酶，其組成包括復合酶，其特征是所述的復合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復合酶為溶血因子、克癌因子、神經生長因子的混合物。
2.一種根據權利要求1所述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，其特征是按上述所述的重量份數取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥甲基氨基甲烷鹽酸緩沖液，充分溶解，經10000轉高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過分子篩進一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經陽離子交換純化，得到分子量為2.5～3.5萬的溶血因子、克癌因子、神經生長因子三種復合酶的混合物。
3.根據權利要求2所述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，其特征是所述的陰離子交換采用陰離子交換柱，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.5～6.8，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過濾柱，洗脫液用碳酸氫鈉溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽離子交換柱，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
全文摘要
蝮蛇活肝酶及其制備工藝。蛇毒有液體黃金之稱，醫(yī)用價值早有報道，從事蛇毒研究的國內外科研機構較多。由于蛇毒成分復雜，中國科學家從上世紀六十年代就開始對蛇毒進行了系統的研究，最近才發(fā)現對病毒性肝炎及肝硬化等有較好的療效，而蛇毒因含有對人體有害的神經毒和出血毒，如不能充分去除，會給人體造成危害，并且由于其成分單一，也會影響療效，而且因其分子量太大，會給用藥者帶來不安全隱患。蝮蛇活肝酶，其組成包括復合酶，所述的復合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復合酶為溶血因子、克癌因子、神經生長因子的混合物。本產品用于治療各種類型肝炎及肝癌。
文檔編號C12N9/00GK1673363SQ20041001363
公開日2005年9月28日 申請日期2004年3月23日 優(yōu)先權日2004年3月23日
發(fā)明者王旺新, 趙鳳和 申請人:郭秀華