專利名稱：生產(chǎn)食用菌液體菌種所需的專用母種的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及生產(chǎn)食用菌液體菌種所需的專用母種及其生產(chǎn)方法。
背景技術：
目前，食用菌的生產(chǎn)已由傳統(tǒng)的固體菌種向液體菌種方向轉變，而已知的液體菌種生產(chǎn)均采用“一級斜面母種→一級搖瓶種→二級搖瓶種→培養(yǎng)罐培養(yǎng)(液體菌種)”的方法生產(chǎn)，但用這樣的方法生產(chǎn)液體菌種周期長、成本高、投資大、易污染、成功率低；而采用“液體專用母種”→培養(yǎng)罐培養(yǎng)(液體菌種)”的方法進行生產(chǎn)，同已知方法比周期短、成本低、技術簡單、成功率高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了解決現(xiàn)有液體菌種生產(chǎn)存在的問題而提供生產(chǎn)食用菌液體菌種所需的專用母種。
本發(fā)明的目的可以通過以下技術方案來實現(xiàn)一、專用母種1、一級搖瓶種培養(yǎng)基按重量百分比①木腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、葡萄糖1.0-1.5、麩皮3、蛋白胨0.15-0.3、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升、余量為水，PH值6.5-7.0②草腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、麩皮3.0-5.0、蛋白胨0.1-0.25、酵母膏0.1-0.2、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升，余量為水，PH值7.0-7.52、專用母種配方按重量百分比
①木腐菌配方硬雜木屑67-77、麩皮20-30、紅糖2、石膏1，PH值自然②草腐菌配方硬雜木屑42-52、谷粒30-40、麩皮15、紅糖2、石膏1，PH值6.5-7.5。
二、生產(chǎn)專用母種的方法1、生產(chǎn)一級搖瓶種①分裝把配制好的培養(yǎng)基按每瓶200-400毫升的裝量裝入1000毫升的三角瓶中，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，②滅菌在121-126℃的條件下滅菌30分鐘，③接種待培養(yǎng)基溫度降至30℃以下時，即可接入經(jīng)篩選、提純、活化處理的一級斜面母種，每瓶接入2-3塊0.5-1.0cm2的菌塊，④培養(yǎng)將接完種的菌瓶在130-200轉/分的回旋式搖床上振蕩培養(yǎng)，在23℃-28℃條件下5-10天后制得一級搖瓶種，⑤菌種的篩選、提純、活化將普通的一級斜面母種接在搖瓶中振蕩培養(yǎng)7-10天，挑取懸浮在菌液上層、活力強壯、大小在2-3毫米左右的菌球接在斜面培養(yǎng)基上，待其長到試管的1/3-2/3即可使用，2、生產(chǎn)專用母種①原料處理將顆粒狀木屑和麩皮過20目和40目篩，選用兩種篩子之間的顆粒為原料，②拌料把原料按配比加水拌勻，含水量在60-63％，③裝瓶把上述培養(yǎng)料裝入500毫升的三角瓶中，壓緊、壓平，每瓶裝料約450毫升或干料150克，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，在121-126℃的條件下滅菌90分鐘，待溫度降至30℃以下時備用，④接種用滅好菌的吸管把培養(yǎng)好的一級搖瓶種接入到盛裝在三角瓶內(nèi)滅好菌的固體培養(yǎng)基中，
⑤培養(yǎng)在23-25℃的條件下避光培養(yǎng)，菌絲長滿后即可。
三、液體專用母種的使用(1)無菌水的制備取1000ml三角瓶裝750-780ml的水在121-126℃的條件下滅菌40分鐘。
(2)專用種的并瓶把長好的專用母種用接種鉤在無菌條件下倒入無菌水瓶中制成菌懸液。
(3)接種把制備好的種子菌懸液在火圈的保護下接入到培養(yǎng)罐中，2-4天可制得液體菌種。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點1、菌種質量好、純度高、顆粒均勻、便于檢測，便于保藏運輸，接種后萌發(fā)吃料快。
2、使用本菌種生產(chǎn)液體菌種可節(jié)省一次投資10000元左右，且每生產(chǎn)60升菌種節(jié)省成本144.56元。
3、使用專用母種生產(chǎn)液體菌種，其生產(chǎn)周期為已知生產(chǎn)方法的1/4。
4、使用專用母種生產(chǎn)液體菌種難度小、成功率高、風險性低。
5、液體專用母種的使用促進了液體菌種技術的推廣和普及，有很強的實用價值，這一技術的使用，對促進食用菌的工廠化、規(guī)?；a(chǎn)提供了保證。


圖1是本發(fā)明的液體專用母種生產(chǎn)工藝流程圖，表示液體菌種兩種不同生產(chǎn)工藝。
①用搖瓶種的生產(chǎn)工藝一級斜面母種→一級搖瓶種→二級搖瓶種→二級搖瓶種并瓶→培養(yǎng)罐培養(yǎng)(液體菌體)，②用液體專用母種的生產(chǎn)工藝液體專用母種→培養(yǎng)罐培養(yǎng)(液體菌種)。
具體實施例方式
黑木耳、雙孢菇液體菌種的生產(chǎn)過程一、液體菌種的配方1、黑木耳土豆10％、紅糖1.5％、葡萄糖1％、麥麩4％、蛋白胨0.2％、KH2PO40.2％、MgSO40.1％、VB10mg/l、泡敵0.03％、酵母膏0.1％，余量為水，PH值7.5。
2、雙孢菇土豆10％、紅糖1.5％、葡萄糖1％、麥麩4％、蛋白胨0.2％、KH2PO40.2％、MgSO40.1％、VB10mg/l、泡敵0.03％、酵母膏0.1％，余量為水，PH值7.5。
二、培養(yǎng)基的配制1、土豆挖芽、去皮洗凈后切0.2-0.4cm的條或片煮至酥而不爛時，用6-8層紗布過濾取濾液。
2、麥麩加水攪拌自煮沸持續(xù)20分鐘后用6-8層紗布過濾取濾液。
3、紅糖、葡萄糖溶水后過濾取濾液。
4、KH2PO4、MgSO4直接加水攪拌溶化。
5、蛋白胨直接加入或在其它容器中溶后加入。
6、VB1碾成細末加入攪勻。
7、泡敵直接加入。
三、上料關閉進氣閥和接種閥，將漏斗插入進料口，用小鍋將料液分批分次倒入或用水泵抽入處理好的培養(yǎng)罐中，之后加入自來水調整料液至標準線(55～75升之間)，55升約在空氣分布器上面4～5cm處，最多可加料至距上封頭焊烽15-17cm的水平線，約75升，擰緊接種蓋，即可滅菌。
四、滅菌啟動加熱棒加熱開關，當溫度達到121-126℃時維持35分鐘，在維持溫度的35分鐘的開始、中間、最后時間點分別放料一次，每次放料3-5分鐘，三次共排料3-5升。當滅菌時間到，報警器自動報警，接上進氣管。
五、降溫當滅菌時間到，馬上通過冷水管向夾層內(nèi)通冷水降溫，當溫度降到30℃以下時，即可準備接種。
六、專用種的并瓶用1000ml的三角瓶盛裝750ml的水，在121-126℃的條件下滅菌40分鐘，待水溫降至30℃以下時在無菌室內(nèi)將專用母種在無菌條件下?lián)v碎并倒入到無菌水瓶中，制成菌懸液。
七、接種將火圈浸足酒精套在接種口上，點燃火圈，把接種口打開，在火焰上方撥掉菌種瓶棉塞，把菌懸液倒入到培養(yǎng)罐內(nèi)，蓋好接種蓋，調整罐壓在0.02-0.03MPa即可。
八、培養(yǎng)接種后即可進入培養(yǎng)狀態(tài)，一般說來2-4天可長好。
九、接種將培養(yǎng)好的液體菌種通過接種管接種槍注入式接種，菌袋表面噴灑一薄層，每袋接入15-20ml菌種。
權利要求
1.生產(chǎn)食用菌液體菌種所需的專用母種，其特征是I、一級搖瓶種培養(yǎng)基按重量百分比①木腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、葡萄糖1.0-1.5、麩皮3、蛋白胨0.15-0.3、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升、余量為水，PH值6.5-7.0②草腐菌培養(yǎng)基土豆20、紅糖1.0-1.5、麩皮3.0-5.0、蛋白胨0.1-0.25、酵母膏0.1-0.2、磷酸二氫鉀0.2、硫酸鎂0.1、維生素B110毫克/升，余量為水，PH值7.0-7.5II、專用母種配方按重量百分比①木腐菌配方硬雜木屑67-77、麩皮20-30、紅糖2、石膏1，PH值自然②草腐菌配方硬雜木屑42-52、谷粒30-40、麩皮15、紅糖2、石膏1，PH值6.5-7.5
2.生產(chǎn)專用母種方法，其特征是；I、生產(chǎn)一級搖瓶種①分裝把配制好的培養(yǎng)基按每瓶200-400毫升的裝量裝入1000毫升的三角瓶中，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，②滅菌在121-126℃的條件下滅菌30分鐘，③接種待培養(yǎng)基溫度降至30℃以下時，即可接入經(jīng)篩選、提純、活化處理的一級斜面母種，每瓶接入2-3塊0.5-1.0cm2的菌塊，④培養(yǎng)將接完種的菌瓶在130-200轉/分的回旋式搖床上振蕩培養(yǎng)，在23-28℃條件下5-10天后制得一級搖瓶種，⑤菌種的篩選、提純、活化將普通的一級斜面母種接在搖瓶中振蕩培養(yǎng)7-10天，挑取懸浮在菌液上層、活力強壯、大小在2-3毫米左右的菌球接在斜面培養(yǎng)基上，待其長到試管的1/3-2/3即可使用。II、生產(chǎn)專用母種①原料處理將顆粒狀木屑和麩皮過20目和40目篩，選用兩種篩子之間的顆粒為原料，②拌料把原料按配比加水拌勻，含水量在60-63％，③裝瓶把上述培養(yǎng)料裝入500毫升的三角瓶中，壓緊、壓平，每瓶裝料約450毫升或干料150克，蓋上棉塞，綁上牛皮紙，在121-126℃的條件下滅菌90分鐘，④接種用滅好菌的吸管把培養(yǎng)好的一級搖瓶種接入到盛裝在三角瓶內(nèi)滅好菌的固體培養(yǎng)基中，⑤培養(yǎng)在23-25℃的條件下避光培養(yǎng)，菌絲長滿后即可。
全文摘要
生產(chǎn)食用菌液體菌種所需的專用母種及生產(chǎn)方法。它以木屑、麩皮等分散性好，大小均勻的顆粒性營養(yǎng)物質制成培養(yǎng)基，裝在500ml的三角瓶里經(jīng)滅菌后，將搖瓶種接入培養(yǎng)基而制得的。它用于生產(chǎn)食用菌液體菌種周期短、成本低、成功率高、易操作。
文檔編號C12N1/14GK1440636SQ0311135
公開日2003年9月10日 申請日期2003年4月1日 優(yōu)先權日2003年4月1日
發(fā)明者劉永昶 申請人:劉永昶