專利名稱：微膠囊的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微膠囊，該微膠囊含有包埋在新型基質(zhì)材料中的活性物質(zhì)，本發(fā)明還涉及這種微膠囊的制備方法以及含有此微膠囊的產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
據(jù)發(fā)現(xiàn)，天然存在的多糖和改性的多糖以及天然存在的水膠體(例如藻酸鹽、角叉菜膠、明膠、果膠、阿拉伯樹膠和金合歡樹膠)可以廣泛地用作食品、食品補(bǔ)劑、藥物和農(nóng)用產(chǎn)品中的敏感性活性物質(zhì)(例如維生素及香氣和風(fēng)味物質(zhì))包膠用的基質(zhì)材料，以便使它們免受氧、水分和照射的影響以及物理影響，由此使所說的活性物質(zhì)避免化學(xué)和/或物理降解并且改進(jìn)它們的儲藏穩(wěn)定性。
目前，用作基質(zhì)材料的水膠體主要來源于動(dòng)物，例如來自于哺乳動(dòng)物和魚的凝膠狀材料。
然而，以使用動(dòng)物來源的基質(zhì)材料為基礎(chǔ)的微膠囊化產(chǎn)品在某些產(chǎn)品中是不可使用的，例如用于素食食品、按猶太教規(guī)制作的食品和按穆斯林教規(guī)制作的食品。此外，將來，關(guān)于控制使用動(dòng)物來源的食品制品的法規(guī)可能會越來越嚴(yán)格。
人們曾嘗試使用果膠類物質(zhì)作為動(dòng)物來源的基質(zhì)材料的可能的替代品，但是發(fā)現(xiàn)果膠類物質(zhì)，例如柑橘類水果果膠或糖用甜菜果膠，在防止降解方面僅能給微膠囊化活性物質(zhì)提供有限的保護(hù)，由此不能提供具有理想的儲藏穩(wěn)定性的微膠囊化產(chǎn)品。
EP專利申請1 066 761公開了膠囊化組合物，該組合物含有包膠在碳水化合物基質(zhì)中的脂溶性物質(zhì)，其中所說的碳水化合物基質(zhì)由麥芽糖糖漿組成或者由低分子量碳水化合物(例如，麥芽糖糊精，非必需地與高分子量碳水化合物組合)、乳化劑和非必需的抗氧化劑的混合物組成。
US專利5 998 176公開了一種引起含果膠類物料如糖用甜菜果膠的含水介質(zhì)膠凝化或者增加其粘度的方法，該方法是通過用羧基酯水解酶和氧化酶和/或過氧化酶，在與所說氧化酶和/或過氧化酶一起使用的氧化劑的存在下，處理所說的含水介質(zhì)。據(jù)說，所得的膠凝化的或粘稠的產(chǎn)品適宜作為例如食品領(lǐng)域中的增稠劑和/或穩(wěn)定劑、醫(yī)用/藥用領(lǐng)域中的藥品包膠用材料以及醫(yī)用/藥用和農(nóng)用/園藝用領(lǐng)域中的緩慢釋放載體。
丹麥專利申請1991 01060公開了無支鏈的阿拉伯聚糖，例如得自于糖用甜菜，其是通過將糖用甜菜阿拉伯聚糖用α-L-阿拉伯糖呋喃糖苷酶處理來獲得的，該專利申請還公開了它們作為膠凝劑、乳化劑和包膠材料的用途。在該方法中作為酶底物使用的糖用甜菜阿拉伯聚糖是通過將糖用甜菜漿用堿處理獲得的，并且糖用甜菜阿拉伯聚糖原料中一般含有約70-85％阿拉伯糖、5-10％糖醛酸、8-15％D-半乳糖和百分之幾的鼠李糖和其它單糖。
WO 00/70967 A1公開了一種含有著色物質(zhì)主體的組合物，該著色物質(zhì)主體至少部分地涂敷有未改性的果膠，所說的未改性果膠選自甜菜果膠、菊苣果膠和菊芋，優(yōu)選的果膠是具有高乙?；潭鹊墓z。
WO 00/17368公開了一種水果橙果膠乙酰酯酶和方法，其中，將酯酶與底物如來自水果或蔬菜植物的果膠接觸。通過用所公開的乙酰酯酶將糖用甜菜果膠脫乙酰，可以獲得改進(jìn)的膠凝特性。
本發(fā)明的目的是提供微膠囊，其中含有非動(dòng)物來源的基質(zhì)材料，并且此基質(zhì)材料能夠有效保護(hù)包埋在基質(zhì)材料中的活性物質(zhì)不受化學(xué)和物理影響。
發(fā)明概述本發(fā)明微膠囊的特征在于基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用選自酯酶(E.C.3.1)、葡糖苷酶(E.C.3.2)、肽酶(E.C.3.4)、蛋白酶(E.C.3.4)和裂解酶(E.C.4)中的一種或多種酶處理來獲得。
通過參考以下附圖，相比含有未改性果膠的基質(zhì)材料的微膠囊，本發(fā)明的微膠囊獲得的改進(jìn)的穩(wěn)定特性將是顯而易見的，其中

圖1顯示了通過將微膠囊在25℃和60％RH下儲藏獲得的穩(wěn)定性測試結(jié)果，以及圖2顯示了通過將微膠囊在40℃和75％RH下儲藏獲得的穩(wěn)定性測試結(jié)果。
圖1和2的曲線顯示了含有包埋在各種基質(zhì)材料中的維生素A棕櫚酸酯的微膠囊的效能作為時(shí)間的函數(shù)。
從所說的曲線中明顯看出，本發(fā)明的微膠囊，即其中所含的基質(zhì)材料是經(jīng)蛋白酶處理的果膠、經(jīng)修整的β-果膠、脫乙酰化β-果膠、經(jīng)鼠李糖半乳糖醛酸聚糖酶(rhamnogalacturonase)處理的β-果膠、經(jīng)裂解酶處理的β-果膠、經(jīng)羧肽酶A或B處理的β-果膠和經(jīng)Flavourzyme500LTM處理的β-果膠以及經(jīng)裂解酶處理的橙果膠，當(dāng)在25℃、60RH％下和在40℃、75％RH下儲藏時(shí)，可以儲藏長達(dá)至少20天的時(shí)間，與含有未改性果膠作為基質(zhì)材料的微膠囊相比，其顯示出明顯更好的穩(wěn)定性。
本文中所用的術(shù)語“微膠囊”是指各自含有基質(zhì)材料的顆粒，在所說的基質(zhì)材料中包埋有許多固體或液體微粒。
果膠是通過(1＝＞4)-α-糖苷鍵連接的高分子量聚半乳糖醛酸，其中一些羧酸基團(tuán)被甲醇所酯化，并且它們由柔性區(qū)域所組成，在該區(qū)域中聚合物主鏈中富含鼠李糖，并且具有配合物性質(zhì)的側(cè)鏈，“毛狀區(qū)域”。
果膠中還含有“光滑區(qū)域”，其是剛性區(qū)域，其中主鏈基本上由半乳糖醛酸或具有非常少側(cè)鏈的半乳糖醛酸殘基組成，其中所說的側(cè)鏈如甲基或乙基。
US專利5 929 051中有關(guān)于果膠和果膠類物質(zhì)的通用結(jié)構(gòu)的詳細(xì)描述，如目前所理解的。
與本申請有關(guān)聯(lián)的術(shù)語“果膠類物質(zhì)”包括果膠、果膠酸及果膠酸的鹽和酯(果膠酸酯)，由此，果膠類物質(zhì)中的半乳糖醛酸含量大于40％。
果膠類物質(zhì)中的半乳糖醛酸含量優(yōu)選大于50％，并且更優(yōu)選大于65％。
本發(fā)明微膠囊的基質(zhì)材料優(yōu)選由果膠組成，所說的果膠經(jīng)一種或多種能夠改性毛狀區(qū)域(即，果膠的鼠李糖半乳糖醛酸聚糖主鏈的側(cè)鏈)的酶來處理。
這種酶的優(yōu)選實(shí)例是鼠李糖半乳糖醛酸聚糖酶，鼠李糖半乳糖醛酸聚糖乙酰酯酶、β-半乳糖苷酶、阿聚糖酶(arabinanase)、半乳聚糖酶和α-阿拉伯糖呋喃糖苷酶。
另一種優(yōu)選的基質(zhì)材料是經(jīng)過一種或多種能夠改性果膠光滑區(qū)域主鏈的酶處理的果膠，以便形成含有毛狀區(qū)域的單獨(dú)的組成部分。
這種酶的實(shí)例是果膠裂解酶及聚半乳糖醛酸酶與果膠甲基酯酶的組合。
大部分果膠中含有蛋白質(zhì)，例如含有約1-5％w/w的蛋白質(zhì)，并且意想不到地發(fā)現(xiàn)，如果將它們用諸如木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶的蛋白酶處理，則這種含蛋白質(zhì)的果膠的保護(hù)特性明顯得到改進(jìn)。
本發(fā)明中的欲被改性的果膠類材料優(yōu)選得自甜菜根(Betavulgaris L.Chenopodiaceae)，包括糖用甜菜、紅菜頭(紅甜菜)、厚皮菜、飼用甜菜、君達(dá)菜、白甜菜(silver beet)和飼料甜菜，或者得自橙、葡萄、大豆、亞麻籽、菊芋、芹菜和馬鈴薯。糖用甜菜果膠是特別有用的果膠類物質(zhì)。
本發(fā)明中用于改性果膠物質(zhì)的酶的定義中所用的酶分類體系可見Enzyme Nomenclature 1992，科學(xué)出版社，圣地亞哥，加利福尼亞，增刊。
構(gòu)成水解酶(E.C.3)子類的酯酶(E.C.3.1)是能夠催化果膠的酯基團(tuán)水解的酶。用于改性果膠類物質(zhì)的優(yōu)選的酯酶是脫乙酰酶，例如鼠李糖半乳糖醛酸聚糖-乙酰酯酶、果膠乙酰酯酶和果膠甲基酯酶。
另一種構(gòu)成水解酶(E.C.3)子類的葡糖苷酶(E.C.3.2)是能夠催化果膠中的糖苷鍵水解的酶。優(yōu)選的葡糖苷酶是脫支酶，例如α-阿拉伯糖呋喃糖苷酶、半乳聚糖酶、阿聚糖酶及內(nèi)-和外-聚半乳糖醛酸酶。α-阿拉伯糖呋喃糖苷酶、半乳聚糖酶、鼠李糖半乳糖醛酸聚糖酶和阿聚糖酶的混合物是特別有用的。
肽酶和蛋白酶(E.C.3.4)也構(gòu)成水解酶(E.C.3)的子類，其能夠催化肽鍵的水解。優(yōu)選的蛋白酶是木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶(內(nèi)肽酶)及羧肽酶A和B(外肽酶)，以及內(nèi)肽酶和外肽酶的組合，例如Flavorzyme 500LTM。
適宜的商業(yè)性蛋白酶的實(shí)例是購自Valley Research的木瓜蛋白酶16000和DSM Gist-Brocades Food Specialities的Collupulint。
裂解酶(E.C.4)是能夠催化加成至雙鍵的酶。優(yōu)選的裂解酶是果膠酶PL裂解酶。
術(shù)語“脫乙酰酶”是指能夠脫去乙?；鶊F(tuán)的酶，所說的乙?；鶊F(tuán)與果膠毛狀區(qū)域主鏈中的半乳糖醛酸殘基共價(jià)鍵合。
術(shù)語“修整酶”或“脫支酶”是指能夠減少果膠毛狀區(qū)域側(cè)鏈長度的酶。
術(shù)語“果膠酯酶”是指能夠從果膠主鏈中的半乳糖醛酸殘基上除去酯殘基的酶。
在實(shí)踐中，果膠類物質(zhì)的酶改性可以如下進(jìn)行將果膠制劑的溫度和pH分別調(diào)至所用酶的工作溫度和pH。將酶溶解/稀釋至經(jīng)過離子交換過的水中，并且添加至果膠制劑中。邊連續(xù)攪拌邊進(jìn)行反應(yīng)，并且如果必要的話通過滴定來控制pH。一段時(shí)間后，通過降低pH來終止反應(yīng)。為使酶不可逆地失活，將溫度提高至80℃10分鐘。將溶液的溫度降低并且將果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干，并且放入70℃干燥箱內(nèi)干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN 24)。
待用作酶處理用底物的果膠制劑可以是直接從原料中例如從糖用甜菜皮中獲得的提取物，或者可以是精制果膠產(chǎn)品的溶液。
糖用甜菜果膠的提取物可以如下制備1)將干的粒狀甜菜漿與強(qiáng)無機(jī)酸的水溶液混合，所說的酸優(yōu)選是硝酸2)通過在60-80℃和pH1.5-2.5下劇烈攪動(dòng)約1-5小時(shí)來萃取漿液。
3)將所得的混合物分離成廢料固體和含果膠的液體4)用上述的酶處理含果膠的液體。
通過將果膠粉末添加到熱(70℃)的經(jīng)過離子交換的水中制得果膠溶液。將此制劑連續(xù)攪拌，直至果膠完全溶解。
本發(fā)明的微膠囊中所含的活性物質(zhì)可以是在儲藏、運(yùn)輸、處置和使用期間需要保護(hù)例如防止受氧、水分、光照射和物理影響的任何物質(zhì)，以便避免物質(zhì)的物理和化學(xué)降解。這些活性物質(zhì)還定義為在化學(xué)或生物體系中是活性的。此外，可以使用保護(hù)性基質(zhì)來防止活性物質(zhì)與組合物中存在的其它物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，或者與使用過程中可能接觸到的并且對活性物質(zhì)的所需活性具有有害影響的物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。而且，可以使用保護(hù)性基質(zhì)來將難于處置(例如由于粘性)的液體和其它物質(zhì)轉(zhuǎn)變成適合在使用過程中處置和加工的固體形式，例如微膠囊的粉末。
適合在本發(fā)明中使用的活性物質(zhì)的實(shí)例是脂溶性物質(zhì)，例如維生素，脂肪酸(例如單和多不飽和脂肪酸，其可以是以含有(n-3)脂肪酸二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)的魚油的形式和以含有(n-6)脂肪酸γ-亞麻酸的柳葉菜油和蓖麻油的形式添加)，類胡蘿卜素，例如β-胡蘿卜素，葉黃素，番茄紅素，β-隱黃質(zhì)和玉米黃質(zhì)，油和脂肪；水溶性物質(zhì)，例如維生素C；酶，例如淀粉酶；藥劑，例如灰黃霉素、布洛芬、苯并二氮卓類、非那西汀、激素和對乙酰氨基酚以及其它營養(yǎng)補(bǔ)劑，例如礦物質(zhì)。
附加的活性物質(zhì)是香氣和風(fēng)味化合物。
本發(fā)明微膠囊的基質(zhì)材料中可含有常規(guī)的添加劑，例如抗氧化劑，例如叔-丁基羥基甲苯(BHT)、叔-丁基羥基茴香醚(BHA)、抗壞血酸、棕櫚酸抗壞血酸酯、抗壞血酸鈉、生育酚、TBHQ、乙氧基喹、沒食子酸丙酯和草藥提取物，如迷迭香提取物；粉末化劑，例如淀粉、改性淀粉、磷酸三鈣、乳糖、甘露糖醇、乙基纖維素、凝結(jié)清蛋白、硬化明膠、酪蛋白、硬脂酸-Ca、硬脂酸-Na、金屬皂、氫化蓖麻油、多氧化物、滑石、蠟和硅酸鹽；防結(jié)塊劑，例如磷酸三鈣和硅酸鹽，如二氧化硅和硅酸鋁鈉；增塑劑，例如碳水化合物和糖醇，其實(shí)例是蔗糖、葡萄糖、果糖、乳糖、轉(zhuǎn)化糖、山梨糖醇、甘露糖醇、麥芽糖糊精、甘油及其混合物，優(yōu)選蔗糖、乳糖、麥芽糖糊精，以及它們的混合物。
本發(fā)明還涉及微膠囊的制備方法，其中所說的微膠囊含有包埋在基質(zhì)中的活性物質(zhì)，所說的方法包括以下步驟提供果膠類物質(zhì)的含水介質(zhì)，其中所說的果膠類物質(zhì)是通過用選自酯酶(E.C.3.1)、葡糖苷酶(E.C.3.2)、肽酶(E.C.3.4)、蛋白酶(E.C.3.4)和裂解酶(E.C.4)中的一種或多種酶處理來改性的；向所說的溶液添加至少一種活性物質(zhì)；將如此獲得的混合物細(xì)分并且干燥，獲得顆粒的集合，每個(gè)顆粒中含有許多活性物質(zhì)的液體或固體微粒，其包埋在含改性果膠類物質(zhì)的基質(zhì)中。
上述方法的最后一個(gè)步驟可以用常規(guī)方法完成，例如噴霧冷卻、噴霧干燥、改良的噴霧干燥或者壓片干燥并粉碎，參看WO91/06292。
本發(fā)明還涉及含有上述微膠囊的產(chǎn)品。這種產(chǎn)品的典型實(shí)例是食品、食品補(bǔ)劑、飲料、藥物和獸藥產(chǎn)品、飼料、飼料補(bǔ)劑、個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品和家用產(chǎn)品。
下面，將參考以下實(shí)施例對本發(fā)明作更詳細(xì)描述。
實(shí)施例在實(shí)施例中，分子量(MW)通過如下毛細(xì)管法來測定測定果膠/六偏磷酸鹽溶液的出口時(shí)間，之后按照公知的公式計(jì)算分子量(參見WO 00/58367，鈣敏感性降低的果膠，第12頁)。
在兩個(gè)出口處測定出口時(shí)間。如果時(shí)間之差大于0.4秒，則重復(fù)測定，直至差值小于合適的值。用于分子量測定的出口時(shí)間是上述相等或基本上相等測定結(jié)果的平均值。
制備酶改性的果膠類物質(zhì)實(shí)施例1在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自糖用甜菜(GENU β-果膠，批號92455，CP Kelco ApS生產(chǎn)，Lille Skensved，丹麥)并且酶是木瓜蛋白酶(Collupulin木瓜蛋白酶，批號R9741，DSM Gist-Brocades Food Specialities生產(chǎn)，Delft，荷蘭)。
將1000L經(jīng)過離子交換的水加熱至70℃，溶解0.4M NaCl并且添加20kg果膠類物質(zhì)，同時(shí)連續(xù)攪拌。待果膠完全溶解后，將溫度降低至45℃；通過用2％(w/v)NH3溶液滴定，將pH調(diào)整至5.50。常溫下，將240g Collupulin溶解至大約5L經(jīng)過離子交換的水中并且添加至果膠溶液中。在實(shí)驗(yàn)過程中，通過用2％(w/v)NH3滴定將pH保持在5.50恒定。20分鐘后，加入6127ml 2％(w/v)NH3，并且通過添加10％HNO3溶液至pH 2.50，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度升至80℃。在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至50℃并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN 24)。測定經(jīng)酶處理的果膠的乙?；潭?％D(Ac))、酯化程度(％DE)、半乳糖醛酸含量(％GA)和分子量(MW)，并且結(jié)果示于下表1中。
表1
實(shí)施例2在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自糖用甜菜(GENU β-果膠，批號82899，CP Kelco ApS生產(chǎn)，Lille Skensved，丹麥)。所用的酶是α-阿拉伯糖呋喃糖苷酶(α-ARA)(批次sp 580，PPJ 4494)、阿聚糖酶(批次sp 564，PPJ 4381)和半乳聚糖酶(批次sp 518 PPJ4368)，全部由Novo Nordisk生產(chǎn)，Bagsvaerd，丹麥。
將1000L經(jīng)過離子交換的水加熱至60℃，將加入10kg果膠類物質(zhì)，同時(shí)連續(xù)攪拌。待果膠完全溶解后，將溫度降低至45℃，并且通過用2％(w/v)NH3溶液滴定，將pH調(diào)整至4.50。常溫下，將5g阿聚糖酶、35g α-阿拉伯糖呋喃糖苷酶和35g半乳聚糖酶在大約1L經(jīng)過離子交換的水中稀釋，添加至果膠溶液中。4小時(shí)后，通過添加10％(w/v)HNO3溶液至pH 3.00，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度升至80℃。在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至20℃，并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN 24)。測定經(jīng)酶處理的果膠樣品的乙?；潭?％D(Ac))、酯化程度(％ DE)、半乳糖醛酸含量(％ GA)、分子量(MW)和中性糖含量，并且結(jié)果示于下表2。
表2
實(shí)施例3在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自糖用甜菜(GENU β-果膠，批號92455 CP Kelco ApS生產(chǎn)，Lille Skensved，丹麥)并且酶是鼠李糖半乳糖醛酸聚糖乙酰酯酶(批次PPJ 4456，Novo Nordisk生產(chǎn)，Bagsvaerd，丹麥)。
將50L經(jīng)過離子交換的水加熱至70℃，并且添加1kg果膠類物質(zhì)，同時(shí)連續(xù)攪拌。將溫度降低至50℃，并且通過用2％(w/v)NH3溶液滴定，將pH調(diào)整至4.50。將10g鼠李糖半乳糖醛酸聚糖乙酰酯酶添加至果膠溶液中。在50℃下同時(shí)連續(xù)攪拌24小時(shí)之后，通過添加10％(w/v)HNO3溶液至pH2.50，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度升至80℃。在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至50℃，并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN24)。測定乙?；潭?％D(Ac))、酯化程度(％DE)、半乳糖醛酸含量(％GA)和分子量(MW)，并且結(jié)果示于下表3。
表3
實(shí)施例4在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自糖用甜菜(GENU β-果膠，批號82899 CPKelco ApS生產(chǎn)，Lille Skensved，丹麥)并且酶是鼠李糖半乳糖醛酸聚糖酶(批次PPJ 4478，Novo Nordisk生產(chǎn)，Bagsvaerd，丹麥)。
將50L經(jīng)過離子交換的水加熱至70℃，并且添加1kg果膠類物質(zhì)，同時(shí)連續(xù)攪拌。將溫度降低至50℃，并且通過用2％(w/v)NH3溶液滴定，將pH調(diào)整至4.50。將3.125g鼠李糖半乳糖醛酸聚糖酶溶解至大約50ml經(jīng)過離子交換的水中，并且添加至果膠溶液中。在50℃下4小時(shí)之后，通過添加10％(w/v)HNO3溶液至pH 2.50，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度升至80℃。在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至50℃，并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎，最后將果膠篩分(DIN 24)。測定乙酰化程度(％ D(Ac))、酯化程度(％ DE)、半乳糖醛酸含量(％ GA)和分子量(MW)，并且結(jié)果示于下表4。
表4
實(shí)施例5在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自糖用甜菜(批號30003，類型SFH-25，CP Kelco生產(chǎn)，德國GmbH，Grossenbrode，德國)并且酶是Enzeco果膠酶PL裂解酶，來自Enzyme Development公司，批號S-11677，活度26U/ml。
將55L經(jīng)過離子交換的水加熱至70℃并且添加2.75kg果膠類物質(zhì)，同時(shí)連續(xù)攪拌。待果膠完全溶解后，將溫度降低至45℃；通過用10％(w/v)蘇打溶液滴定，將pH調(diào)整至4.50。將1.63mlEnzeco果膠酶PL裂解酶添加至果膠溶液中。在實(shí)驗(yàn)過程中，通過用5％(w/v)蘇打滴定，將pH保持在5.5恒定。6小時(shí)之后(粘度恒定，9cP)，通過添加10％(w/v)蘇打溶液至pH2.50，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度提升至80℃。在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至50℃，按以下過程蒸發(fā)至一半的量將溶液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)器中。在0.8巴的真空下施加熱量，并且使溶液達(dá)到沸點(diǎn)(大約60℃)。將溶液冷卻至50℃并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN24)。測定經(jīng)酶處理的果膠的乙?；潭?％ D (Ac))、酯化程度(％ DE)、半乳糖醛酸(％ GA)和分子量(MW)，并且結(jié)果示于表5表5
實(shí)施例6在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自糖用甜菜(GENU β-果膠，批號30003，CP Kelco生產(chǎn)，德國GmbH，Grossenbrode，德國)并且酶是購自Sigma的羧肽酶B，批號108H7406，活度176u/mg。
將40L經(jīng)過離子交換的水加熱至70℃并且添加1.6kg果膠類物質(zhì)，同時(shí)連續(xù)攪拌。待果膠完全溶解后，將溫度降低至45℃；通過用10％(w/v)蘇打溶液滴定，將pH調(diào)整至7.50。將21mg羧肽酶B添加至果膠溶液中。在實(shí)驗(yàn)過程中，通過用5％(w/v)蘇打滴定將pH保持在7.5恒定。24小時(shí)之后，通過添加10％(w/v)蘇打溶液至pH2.50，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度升至80℃。在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至50℃并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN 24)。測定經(jīng)酶處理的果膠的乙酰化程度(％ D (Ac))、酯化程度(％ DE)、半乳糖醛酸(％ GA)和分子量(MW)，并且結(jié)果示于表6。
表6
實(shí)施例7在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自糖用甜菜(GENU β-果膠，批號30003，CP Kelco生產(chǎn)，德國GmbH，Grossenbrode，德國)并且酶是來自Sigma的羧肽酶A，批號127H7445，活度50u/mg。
將40L經(jīng)過離子交換的水加熱至70℃并且添加1.6kg果膠，同時(shí)連續(xù)攪拌。待果膠完全溶解后，將溫度降低至45℃；通過用10％(w/v)蘇打溶液滴定，將pH調(diào)整至7.50。將21mg羧肽酶A添加至果膠溶液中。在實(shí)驗(yàn)過程中，通過用5％(w/v)蘇打滴定，將pH保持在7.5恒定。24小時(shí)之后，通過添加10％(w/v)蘇打溶液至pH2.50，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度升至80℃。在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至50℃并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN24)。測定經(jīng)酶處理的果膠的乙?；潭?％ D(Ac))、酯化程度(％ DE)、半乳糖醛酸(％ GA)和分子量(MW)，并且結(jié)果示于表7。
表7
實(shí)施例8在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自糖用甜菜(GENU β-果膠，批號30003，CP Kelco生產(chǎn)，德國GmbH，Grossenbrode，德國)并且酶是Flavorzyme 500LTM，來自Novozymes，丹麥，批號HPN01200，活度500 LAPU/g。
將50L經(jīng)過離子交換的水加熱至70℃，并且添加2kg果膠類物質(zhì)，同時(shí)連續(xù)攪拌。待果膠完全溶解后，將溫度降低至45℃；通過用10％(w/v)蘇打溶液滴定，將pH調(diào)整至5.50。將15mlFlavorzyme 500L添加至果膠溶液中。在實(shí)驗(yàn)過程中，通過用5％(w/v)蘇打滴定，將pH保持在5.5恒定。4小時(shí)之后，通過添加10％(w/v)蘇打溶液至pH 2.50，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度升至80℃。在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至50℃并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN 24)。測定經(jīng)酶處理的果膠的乙?；潭?％ D (Ac))、酯化程度(％ DE)、半乳糖醛酸(％ GA)和分子量(MW，毛細(xì)管法)，并且結(jié)果示于表8。
表8
實(shí)施例9在本實(shí)施例中，果膠類物質(zhì)得自橙(批號1001-69-1，CP Kelco生產(chǎn)，Limeira，巴西)并且酶是Enzeco果膠酶PL裂解酶，Enzyme Development公司出品，批號S-11677，活度26U/ml。
將55L經(jīng)過離子交換的水加熱至70℃并且添加940g果膠類物質(zhì)，同時(shí)連續(xù)攪拌。待果膠完全溶解后，將溫度降低至45℃；通過用10％蘇打溶液滴定，將pH調(diào)整至4.50。將0.55ml Enzeco果膠酶PL裂解酶添加至果膠溶液中。在實(shí)驗(yàn)過程中，通過用5％(w/v)蘇打滴定，將pH保持在5.5恒定。1.5小時(shí)之后，通過添加10％(w/v)蘇打溶液至pH2.50，將反應(yīng)停止。為使酶不可逆地失活，將溫度升至80℃，在80℃下10分鐘之后，將溶液冷卻至50℃，按以下過程蒸發(fā)至一半的量將溶液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)器。在0.8巴的真空下施加熱量，并且使溶液達(dá)到沸點(diǎn)(大約60℃)。將溶液冷卻至50℃并且將改性的果膠在80％2-丙醇中沉淀(1∶3)。將沉淀的果膠在壓帶機(jī)上瀝干并且放入70℃干燥箱中干燥24小時(shí)。干燥后，將果膠磨碎并且篩分(DIN24)。測定經(jīng)酶處理的果膠的乙?；潭?％D(Ac))、酯化程度(％DE)、半乳糖醛酸(％GA)和分子量(MW)，并且結(jié)果示于表9
表9
制備微膠囊按照以下配方制備微膠囊1000.00g水92.9g(改性)果膠797.0g糖12.6g抗壞血酸鈉400.0g維生素A棕櫚酸酯油20.4gα-生育酚對比實(shí)施例在乳液罐中，將92.9g糖用甜菜果膠(GENU β-果膠，類型BETA，批號HF 72097-0，CP Kelco ApS出品，Lille Skensved，丹麥)和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4gDL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(Ultra Turrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。將最終乳液用975ml65℃水稀釋至粘度為150cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為1.40μm(Malvern Mastersizer Long bed Ver.2.19，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為105,000IU/g(將樣品用50％KOH、96％乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化，并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorb CN-5.5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)，并且在25℃/60％ R.H.和在40℃/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能。
所得結(jié)果如下給出效能 25℃/60％R.H. 40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％ 100％7天 70％ 17％14天 51％ 0.3％21天 43％ 0％實(shí)施例10在乳液罐中，將92.9g實(shí)施例1所述制備的Collupulin改性的糖用甜菜果膠和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(Ultra Turrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。將最終乳液用1000ml65℃水稀釋至粘度為155cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為1.09μm(Malvern MastersizerLong bed Ver.2.19，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為278,000IU/g(將樣品用50％ KOH、96％乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorbCN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能。所得結(jié)果如下給出效能25℃/60％R.H.40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％100％7天 96％ 100％14天100％77％21天93％ 0.1％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
實(shí)施例11在乳液罐中，將92.9g實(shí)施例2所述制備的α-ARA、阿聚糖酶和半乳聚糖酶改性的糖用甜菜果膠和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過U1tra Turrax(UltraTurrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。將最終乳液用1050ml 65℃水稀釋至粘度為155cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均液滴大小經(jīng)測定為1.28μm(MalvernMastersizer Long bed Ver.2.19，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為224,000IU/g(將樣品用50％KOH、96％乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化，并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorb CN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40℃/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14天和21天后，分析樣品的效能。所得結(jié)果如下給出效能 25℃/60％R.H. 40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％ 100％7天 101％ 102％14天 97％96％21天 89％0.4％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
實(shí)施例12在乳液罐中，將92.9g實(shí)施例3所述制備的鼠李糖半乳糖醛酸聚糖乙酰酯酶改性的糖用甜菜果膠和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(UltraTurrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。將最終乳液用800ml65℃水稀釋至粘度為150cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為1.59μm(MalvernMastersizer Long bed Ver.2.19版，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為252,000IU/g(將樣品用50％ KOH、96％ 乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorb CN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40℃/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能。所得結(jié)果如下給出效能25℃/60％R.H.40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％100％7天 100％98％14天96％ 93％21天86％ 0.1％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
實(shí)施例13在乳液罐中，將92.9g實(shí)施例4所述制備的鼠李糖半乳糖醛酸聚糖酶改性的糖用甜菜果膠和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(UltraTurrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。將最終乳液用980ml 65℃水稀釋至粘度為150cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為1.64μm(MalvernMastersizer Long bed Ver.2.19，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為218,000IU/g(將樣品用50％ KOH、96％ 乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化并且用庚烷萃取。通過HPLC，HichromLiChrosorb CN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40℃/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能。所得結(jié)果如下給出效能 25℃/60％R.H. 40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％ 100％7天 102％ 100％14天 97％91％21天 91％0.5％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
實(shí)施例14在乳液罐中，將92.9g實(shí)施例5所述制備的果膠酶PL裂解酶改性的糖用甜菜果膠和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(Ultra Turrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。最終乳液的粘度顯示為155cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為0.83μm(Malvern Mastersizer Long bed Ver.2.19，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為349,000IU/g(將樣品用50％ KOH、96％乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorb CN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40℃/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能。所得結(jié)果如下給出效能 25℃/60％R.H. 40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％ 100％7天 99％92％14天 96％1.1％21天 94％0.8％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
實(shí)施例15在乳液罐中，將92.9g實(shí)施例6所述制備的羧肽酶B改性的糖用甜菜果膠和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(Ultra Turrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。將最終乳液用1151ml 65℃水稀釋至粘度為155cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為0.83μm(Malvern MastersizerLong bed Ver.2.19，焦距45，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為222,000IU/g(將樣品用50％KOH、96％乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorbCN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40℃/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能。所得結(jié)果如下給出效能 25℃/60％R.H.40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％100％7天 97％ 96％14天 96％ 93％21天 90％ 0.0％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
實(shí)施例16在乳液罐中，將92.9g實(shí)施例7所述制備的羧肽酶A改性的糖用甜菜果膠和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(Ultra Turrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。最終乳液的粘度顯示為100cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為1.77μm(Malvern Mastersizer Long bed Ver.2.19，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為331,000IU/g(將樣品用50％ KOH、96％ 乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorb CN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性大約0.2g產(chǎn)品稱重并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40℃/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能。
所得結(jié)果如下給出效能 25℃/60％R.H. 40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％ 100％7天99％98％14天 95％94％21天 84％2.0％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
實(shí)施例17在乳液罐中，將實(shí)施例8所述制備的92.9g Flavorzyme改性的糖用甜菜果膠和797.0g蔗糖溶解于1.0L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(Ultra Turrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。將最終乳液用1093ml 65℃水稀釋至粘度為155cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為1.50μm(Matvern MastersizerLong bed Ver.2.19，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品，其效能為203,000IU/g(將樣品用50％KOH、96％乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorbCN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能。所得結(jié)果如下給出效能 25℃/60％R.H.40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％100％7天 100％100％14天 82％ 90％21天 68％ 0.0％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
實(shí)施例18在乳液罐中，將92.9g實(shí)施例9所述制備的果膠酶PL裂解酶改性的橙果膠和797.0g蔗糖溶解于1.08L 65℃水中，并且添加12.6g抗壞血酸鈉。將400.0g維生素A棕櫚酸酯(1.7百萬IU/g)和20.4g DL-α-生育酚的混合物在燒杯中加熱至65℃。將此油狀混合物在緩慢攪動(dòng)條件下添加至改性的果膠、糖和抗壞血酸鈉的水溶液中，然后于65℃下通過Ultra Turrax(Ultra Turrax T50)在10,000rpm下劇烈攪拌60分鐘。將最終乳液用37ml65℃水稀釋至粘度為155cP(通過Brookfield粘度計(jì)測定，HAT型，錠子HA1)。平均油滴大小經(jīng)測定為1.84μm(Malvern MastersizerLong bed Ver.2.19，焦距45mm，射束長度2.4mm)。隨后，將乳液在噴霧塔中霧化，在其中液滴被淀粉覆蓋并且干燥。只有部分乳液被噴霧。在30/120目篩網(wǎng)上篩選后，得到大約1kg粒狀產(chǎn)品其效能為313,000IU/g(將樣品用50％KOH、96％乙醇和10％抗壞血酸鈉溶液皂化并且用庚烷萃取。通過HPLC，Hichrom LiChrosorb CN-5，5μl，250mm×4.0mm，以外標(biāo)作對照，測定維生素A的量)。
如下研究產(chǎn)品的穩(wěn)定性稱重大約0.2g產(chǎn)品并且放入小的開口玻璃容器中(15×10mm)并且在25℃/60％R.H.和在40℃/75％R.H.下保持3周。在開始時(shí)、7、14和21天后，分析樣品的效能.所得結(jié)果如下給出效能 25℃/60％R.H. 40℃/75％R.H.
開始時(shí) 100％ 100％7天99％ 97％14天 98％ 87％21天 93％ 1％從這些結(jié)果中明顯看出，本發(fā)明組合物的效能和穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對比實(shí)施例的現(xiàn)有技術(shù)組合物。
權(quán)利要求
1.微膠囊，含有包埋在基質(zhì)材料中的活性物質(zhì)，其特征在于基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用選自酯酶(E.C.3.1.)、葡糖苷酶(E.C.3.2.)、肽酶(E.C.3.4.)、蛋白酶(E.C.3.4.)和裂解酶(E.C.4.)中的一種或多種酶處理來獲得。
2.權(quán)利要求1的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用一種或多種能夠改性毛狀區(qū)域的酶處理來獲得。
3.權(quán)利要求1或2的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用一種或多種能夠改性光滑區(qū)域主鏈以便形成含有毛狀區(qū)域的單獨(dú)的組成部分的酶處理來獲得。
4.權(quán)利要求1的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或胰蛋白酶處理來獲得。
5.權(quán)利要求4的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用木瓜蛋白酶如Colltuputin處理來獲得。
6.權(quán)利要求1的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用外肽酶如羧肽酶處理來獲得。
7.權(quán)利要求1-3的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用脫乙酰酶處理來獲得。
8.權(quán)利要求1-3的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用脫支酶處理來獲得。
9.權(quán)利要求1-3的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用α-阿拉伯糖呋喃糖苷酶、半乳聚糖酶和阿聚糖酶的混合物處理來獲得。
10.權(quán)利要求1-3的微膠囊，其中基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用裂解酶例如果膠酶PL裂解酶處理來獲得。
11.權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的微膠囊，其中果膠類物質(zhì)得自蔬菜植物。
12.權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的微膠囊，其中果膠類物質(zhì)得自橙、葡萄、糖用甜菜、大豆、亞麻籽、菊芋、芹菜、馬鈴薯和甜菜根。
13.微膠囊的制備方法，其中所說的微膠囊含有包埋在基質(zhì)材料中的活性物質(zhì)，所說的方法包括以下步驟提供果膠類物質(zhì)的含水介質(zhì)，其中所說的果膠類物質(zhì)已通過用選自酯酶(E.C.3.1)、葡糖苷酶(E.C.3.2)、肽酶(E.C.3.4)、蛋白酶(E.C.3.4)和裂解酶(E.C.4)中的一種或多種酶處理來改性；向所說的溶液添加至少一種活性物質(zhì)；將如此獲得的混合物細(xì)分并且干燥，獲得顆粒的集合，每個(gè)顆粒中含有許多活性物質(zhì)的液體或固體微粒，其包埋在含改性果膠類物質(zhì)的基質(zhì)中。
14.含有權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)的微膠囊的產(chǎn)品。
15.權(quán)利要求14的產(chǎn)品，其特征在于所說的產(chǎn)品是食品、食品補(bǔ)劑、飲料、藥物和獸藥產(chǎn)品、飼料、飼料補(bǔ)劑、個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品和家用產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明涉及微膠囊，含有包埋在基質(zhì)材料中的活性物質(zhì)，其特征在于基質(zhì)材料可通過將果膠類物質(zhì)用選自酯酶(E.C.3.1.)、葡糖苷酶(E.C.3.2.)、肽酶(E.C.3.4.)、蛋白酶(E.C.3.4.)和裂解酶(E.C.4.)中的一種或多種酶處理來獲得；本發(fā)明還涉及這種微膠囊的制備方法以及含有這種微膠囊的產(chǎn)品。
文檔編號A23L1/22GK1501776SQ02808088
公開日2004年6月2日 申請日期2002年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月10日
發(fā)明者A·V·彼得森, M·M·漢森, S·L·麥德森, N·M·簡森, C·L·漢森, A·斯特拉魯普克里斯坦森, K·M·漢森, A V 彼得森, 乩 稱湛死鎪固股, 漢森, 簡森, 麥德森 申請人:巴斯福健康與營養(yǎng)學(xué)有限公司, Cp凱爾科公司