專(zhuān)利名稱(chēng)：石斛的dna序列及利用該序列鑒定其品種或辨別其真?zhèn)蔚姆椒?br> 技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及貴重中藥的DNA序列及利用該序列鑒定其品種和辨別其真?zhèn)蔚姆椒?，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及中藥石斛的ITS2及5.8S和28S核糖體部份DNA序列及利用該序列鑒定其品種或辨別其真?zhèn)蔚姆椒ā?br> 石斛為貴重中藥材，應(yīng)用歷史悠久，在《神農(nóng)本草經(jīng)》中列為上品，具有滋陰消熱、生津益胃、潤(rùn)肺止咳等功效，用于熱病傷津、口干煩渴、病后虛熱等多種病癥?，F(xiàn)代藥理研究表明，石斛還具有抗腫瘤、抗衰老、增強(qiáng)人體免疫力及擴(kuò)張血管的作用。因此石斛在臨床上及復(fù)方中藥制劑中被廣泛應(yīng)用。中國(guó)藥典(1995年版)收載有5種石斛，即金釵石斛(D.nobile Lindl.)，鐵皮石斛(D.candidum Wall.ex Lindl.)，束花石斛(D.chrysanthum Wall.ex.Lindl.)，美花石斛(D.loddigesii Rolfe)和流蘇石斛(D.fimbriatum Hook)。
石斛藥材的市場(chǎng)需求量甚大，每年達(dá)數(shù)千噸之多，而部份商品的售價(jià)昂貴，例如一級(jí)石斛(Herba Dendrobii)每公斤的售價(jià)達(dá)3500美元。
市售石斛的來(lái)源復(fù)雜，涉及石斛屬植物30多種，并時(shí)有其他屬的蘭花(如石仙桃屬)混作石斛藥材使用，直接影響到石斛的臨床療效及消費(fèi)者的利益。再者，石斛藥材的原植物均是瀕危品種，如鐵皮石斛列于中國(guó)受保護(hù)植物名錄的第III類(lèi)級(jí)別。
現(xiàn)行的石斛鑒定方法包括性狀鑒別、化學(xué)分析及微觀解剖。但這些方法仍未對(duì)藥典所列的石斛品種作全面和客觀的鑒定。
植物核糖體脫氧核糖核酸(rDNA)以順?lè)醋?8S-ITS1-5.8S-ITS2-26S的形式存在。植物大多擁有該順?lè)醋拥闹貜?fù)序列，其以頭尾相連的方式聚集在染色體上。目前研究顯示，18S、5.8S和26S等rDNA基因的堿基對(duì)序列非常保守，不同植物間的差別很??；而位于植物rDNA基因之間的ITS1(轉(zhuǎn)錄空隙區(qū)1)和ITS2(轉(zhuǎn)錄空隙區(qū)2)的堿基對(duì)序列則差別較大。同時(shí)由于基因轉(zhuǎn)化和交換的作用，就同一品種植物而言，其rDNA序列大致相同(Hillis和Dixon，1991)。
因此，本發(fā)明的目的是提供石斛藥材的ITS2及5.8S和28S核糖體部份DNA序列。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供利用所述DNA序列鑒定石斛的品種及辨別其真?zhèn)蔚姆椒ā?br> 為達(dá)到本發(fā)明的目的，本發(fā)明人從香港及中國(guó)大陸的不同地點(diǎn)收集了46種樣品，包括16種石斛和一種石仙桃。所有的樣品均經(jīng)過(guò)蘭科專(zhuān)家鑒定。除了羅河石斛之外，其余每一品種都有從數(shù)個(gè)不同群體獲得的樣品。所測(cè)得的46個(gè)樣品的ITS2及5.8S和28S核糖體部份DNA序列如下1.鉤狀石斛(Dendrobium aduncum Lindl.)樣品1的ITS2及5.8S和28S核糖體部分RDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAACCGGCTAA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG CATTTTATCGCTCCGT GCCTAATC TCCCATCC ATGTATGT GTTGCAAAGGCTCGGA TGTGCACG GTGGCTCC TCGTGCCC CTTGGTGCGGCGGGCT GAAGGCCG GGTCATCT TCTCGTTG GTTGCCAACAATAAGG GGTGGATT AAACAAGG CCTATGCT GTTGTGATATGCGCGC CCGAGAGA TGATCATA CTTTTTAG GTGATCCCAATTCATG CGCTGATC CATGGATG GCGTATCG AATGCGACCCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC TGAGTTTA AGCATATC
AATAAGCG GAGGAAAA GAAACTTA CGAGGATT CCCCTAGTAACGGCGA GT2.鉤狀石斛(Dendrobium aduncum Lindl.)樣品2的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCGCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGTAT GTGTTGCAAAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGC CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAACAA GGCCTATG CTGTTGTGATATGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATTCA TGCGCTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGG鉤 AAAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT3.鉤狀石斛(Dendrobium aduncum Lindl.)樣品3的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCGCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGTAT GTGTTGCAAAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGC CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAACAA GGCCTATG CTGTTGTGATATGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATTCA TGCGCTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTA ACGGC GAGT
4.束花石斛(Dendrobium chrysanthum Lindl.)樣品1的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGCCAACCTGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTTTGTTGCTC CGTGTCTC GTCACCCA TCAATGGA TGTGCTGGCGAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CCCGTCGT GCCCCTCGGTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC GCCATCTC GTTGGTTGCGAACAAT AAGGGGTG GATTAAAT GGAGGCCT ATGCTATTGTGTCGTG CATGCCTA AGAGATTAAA TTTTTTAG GTGATCCCAAATCACG CGTCGATC CACGGATG ATGCTTTG AATGCGACCCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC CGAGTTTA AGCATATCAATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CAAGGATT CCCCTAGTAACGGCGA GT5.束花石斛(Dendrobium chrysanthum Lindl.)樣品2的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AA GTT GCG CCCGAGGCCAACCTGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTTTGTTGCTC CGTGTCTC GTCACCCA TCAATGGA TGTGCTGGCGAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CCCGTCGT GCCCCTCGGTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC GCCATCTC GTTGGTTGCGAACAAT AAGGGGTG GATTAAAT GGAGGCCT ATGCTATTGTGTCGTG CATGCCTA AGAGATTA AATTTTTT AGGTGATCCCAAATCA CGCGTCGA TCCACGGA TGATGCTT TGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACAAGGA TTCCCCTAGTAACGG CGAGT6.鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl.)樣品1的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAATCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTACGTCGCTCC GTGTCCAG CCACCCGT CGATGGAT GGGCTGGCGATGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCCTCGTG CCCCTCGGCACGGCGG GCTTAAGA GCGGGTAA TCATCTCG TTGGCTGCGAACAATA TGGGGTGG ATAAATGC GATGCTTA TGATATTGTGCCGTGC ATGCCCGA GAGATGAT CATACTTA TTCAGGTGATCCCAAA CCATGCGT CGATCCAT GGATGGCG TTTTGAATGCGACCCC AGGACAGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGCATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT7.鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl.)樣品2的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAATCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTACGTCGCTCC GTGTCCAG CCACCCGT CGATGGAT GGGCTGGCGATGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCCTCGTG CCCCTCGGCACGGCGG GCTTAAGA GCGGGTAA TCATCTCG TTGGCTGCGAACAATA TGGGGTGG ATAAATGC GATGCCTA TGATATTGTGCCGTGC ATGCCCGA GAGATGAT CATACTTA TTCAGGTGATCCCAAA CCATGCGT CGATCCAT GGATGGCG TTTTGAATGCGACCCC AGGACAGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGCATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT8.鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl.)樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCC
AATCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGGTTACGTCGCTCCG TGTCCAGC CACCCGTC GATGGATG GGCTGGCGATGGCTCG GATGTGCAC AGTGGCTC CTCGTGCC CCTCGGCACGGCGGGC TTAAGAGC GGGTAATC ATCTCGTT GGCTGCGAACAATATG GGGTGGAT AAATGCGA TGCTTATG ATATTGTGCCGTGCAT GCCCGAGA GATGATCA TACTTATT CAGGTGATCCCAAACC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTT TTGAATGCGACCCCAG GACAGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT9.玫瑰石斛(Dendrobium crepidatum Lindl.ex Paxt.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCG AGGCCAATCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCATTTTGTTGCT CCGTGTCT ACTCACAC CCATCGAT GGATGTGCTGGTGTAG GCTCGGAT GTGCATGC TGGCTCGT CGTTCTCCCAGGTGCG GCGGGCTG AAGAGCGG GTCATCCT CTCGTTTGCGGCGAAC AATAAGGG GTGGATTG AAGAGAGG TCTATGCTATTGTGTC GTGCATGC CTGAGAGA TGATTAAC TTTTTTGTGATCCTAA ATCATGCA TCGATCCA TGGATGAT GCTTTGAATGTGACCC CAGGATGG GCGA GGCT ACCCGCTG AGTTTAAGCATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCCCCTAGTAA CGGCGAGT10.玫瑰石斛(Dendrobium crepidatum Lindl.ex Paxt.)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAATCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCATTTTGTTGCTCC GTGTCTAC TCACACCC ATCGATGG ATGTGCTG
GTGTAGGC TCGGATGT GCATGCTG GCTCGTCG TTCTCCCAGGTGCGGC GGGCTGAA GAGCGGGT CATCCTCT CGTTTGCGGCGAACAA TAAGGGGT GGATTGAA GAGAGGTC TATGCTATTGTGTCGT GCATGCCT GAGAGATG ATTAACTT TTTTGTGATCCCAAAT CATGCATC GATCCATG GATGATGC TTTGAATGTGACCCCA GGATGGGC GAGGCTAC CCGCTGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT11.玫瑰石斛(Dendrobium crepidarum Lindl.ex Paxt.)樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGCCCGAGGCCAATCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTTTGTTGCTC CGTGTCTA CTCACACC CATCGATG GATGTGCTGGTGTAGG CTCGGATG TGCATGCT GGCTCGTC GTTCTCCCAGGTGCGG CGGGCTGA AGAGCGGG TCATCCTC TCGTTTGCGGCGAACA ATAAGGGG TGGATTGA AGAGAGGT CTATGCTATTGTGTCG TGCATGCC TGAGAGAT GATTAACT TTTTTGTGATCCCAAA TCATGCAT CGATCCAT GGATGATG CTTTGAATGTGACCCC AGGATGGG CGAGGCTA CCCGCTGA GTTTAAGCATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAC GGCGAGT12.密花石斛(Dendrobium densiflorum Lindl.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC A AG TTG CGC CCG AGGCCAACCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCGTTATGTCGCT CCGTGTTA ACTCCATC CCATCGAT GTATGGGCTGGCGAAG GCTCGGAT GTGCAGTG TGGCTCGT CGTGCCCCTTGGTGCG GCGAGCTG AAAAGCGG GTAATCAT CTCGTTGG
CTGCGAAC GATAAGGG GTGGATTA AAGCGAGA CCTATGTTATTGTGTC GTGTATGC CCGAGAGA AGATTATA CATACTCAGGTGATCC TGAATCAT GCGTCGAT CAAAGGAC GGCGCTTGGAATGCGA CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTTAAGCATAT TAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT ACGAGGATTCCCCTAG TAACGGCG AGT13.密花石斛(Dendrobium densiflorum Lindl.)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTGA ACGCAAGT TGCGCCCG AGGCCAACCGGCCAAG GGCACGTC TGCCTGGG CGTCAAGC GTTATGTCGCTCCGTG TTAACTCC ATCCCATC GATGTATG GGCTGGCGAAGGCTCG GATGTGCA GTGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGAG CTGAAAAG CGGGTAAT CATCTCGT TGGCTGCGAACGATAA GGGGTGGA TTAAAGCG AGACCTAT GTTATTGTGTCGTGTA TGCCCGAG AGAAGATT ATACATAC TCAGGTGATCCTGAAT CATGCGTC GATCAAAG GACGGCGC TTGGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATTAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCC CTAGTAACG GCGAGT14.密花石斛(Dendrobium densiflorum Lindl.)樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCG AGGCCAACCGGCCA AGGGCACG TCTGCCTG GGCGTCAA GCGTTATGTCGCTCCG TGTTAACT CCATCCCA TCGATGTA TGGGCTGGCGAAGGCT CGGATGTG CAGTGTGG CTCGTCGT GCCCCTTGGTGCGGCG AGCTGAAA AGCGGGTA ATCATCTC GTTGGCTGCGAACGAT AAGGGGTG GATTAAAG CGAGACCT ATGTTATTGTGTCGTG TATGCCCG AGAGAAGA TTATACAT ACTCAGGT
GATCCTGA ATCATGCG TCGATCAA AGGACGGC GCTTGGAATGCGACCC CAGGATGG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAGCATATTAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCCCCTAGTAA CGGCGAGT15.流蘇石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAACAGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG TGTTATGTCGCTCCAT GCCAAGTC ACCCATCG ATGGATGG GCCGGCGAAGGCTCGG ATGTGCAC AGTGGCTC GCCGTGCC CCTCGGTGCGGCGGGC TGAAGAGC GGGTCATT ATCTTGTT GGCTGCAGGCAATAAT GGGTGGAT AAACGCGA GGCCTTTG TTATTGTGTCGTGCAT GCCTAAGA TATGATTA AACTTTTT AGGTGATCCCAAATC ATGCGTCG ATCCACGG ATGGCGTT TTGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT16.流蘇石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)樣品2ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAACAGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGTGTTATGTCGCTCC ATGCCAAG TCACCCAT CGATGGAT GGGCCGGCGAAGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCGCCGTG CCCCTCGGTGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TTATCTTG TTGGCTGCAGGCAATA ATGGGTGG ATAAACGC GAGGCCT TTGTTATTGTGTCGTG CATGCCTA AGATATGA TTAAACTT TTTAGGTGATCCCAAA TCATGCGT CGATCCAC GGATGGCG TTTTGAATGCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGC
ATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT17.流蘇石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)樣品3ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAACAGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGTGTTATGTCGCTCC ATGCCAAG TCACCCAT CGATGGAT GGGCCGGCGAAGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCGCCGTG CCCCTCGGTGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TTATCTTG TTGGCTGCAGGCAATA ATGGGTGG ATAAACGC GAGGCCTT TGTTATTGTGTCGTGC ATGCCTAA GATATGAT TAAACTTT TTAGGTGATCCCAAAT CATGCGTC GATCCACG GATGGCGT TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT1 8.重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AA CCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CG CCTGAGGCCAACCGGC TGAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCGCTC CGTGCCTA GTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGCCAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGTGTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTC ATACTTAT TAGGTGATCCCAATTC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGTGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT
19.重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CG CCT GAGGCCAACCGGC TGAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCGCTC CGTGCCTA GTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGCCAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGTGTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTCA TACTTATT AGGTGATCCCAATTCA TGCGTCGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT20.小黃花石斛(Dendrobium jenkinsii Lindl.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAATCGGCCAA GGGCACGT TCGCCTGG GCGTCAAG CATTACGTCGCTCCAT GTCAACTC CATCC CTTCTTTTGA TGGGCTGGTAAAAGGCT TGGACGTG TAAAGTGG CTCGTCGT GCCCCTCGGTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC ATCATCTC GTTGGCTACGAACAAT TACGTGTG GATTAAAG TGCGGCCT ATCTTATTGTGTCATG TATGCCTG AGAAGATT ATGCATTT TTAGGTGATCCCAAAT CATGCGTC GATCCATG GATGACGT TTGGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGTCAC CCGCTGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT21.小黃花石斛(Dendrobium jenkinsii Lindl.)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAATCGGCC AAGGGCAC GTTCGCCT GGGCGTCA AGCATTACGTCGCTCC ATGTCAAC TCCATCCC TTCTTTTG ATGGGCTGGTAAAAGG CTTGGACG TGTAAAGT GGCTCGTC GTGCCCCTCGGTGCGG CGGGCTTA AGAGCGGG TCATCATC TCGTTGGCTACGAACA ATTACGTG TGGATTAA AGTGCGGC CTATCTTATTGTGTCA TGTATGCC TGAGAAGA TTATGCAT TTTTAGGTGATCCCAA ATCATGCG TCGATCCA TGGATGAC GTTTGGAATGCGACCC CAGGATGG GCGAGGTC ACCCGCTG AGTTTAAGCATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCCCCTAGTAA CGGCGAGT22.聚石斛(Dendrobium lindleyi Stendel)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAATCGGCCAG GGCACGTT CGCCTGGG CGTCAAGC ATTATGACGCTCCCTG TCAACTCC ATCCCATC TTTTAATG GGCTGGCGAAGGCTCG GATGTGCA AAGTGGCT CGTCGTGC CTCTCAGTGCGGCGGG CTTAAGAG CGGGTCAT CATCTCGT TGGCTACGAACAATTA CGGGTGGA TTAAAGTG AGGCCTAT ATTATATTGTCGTGTA TGCCTGAG AGAAGATT ATTCATTT TTTGGTTATCCCAAAT CATGCGTC GATCCATA GATCACGT TTGGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGTCAC CCGCTGAG TTTAAGCATATCACTA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT23.聚石斛(Dendrobium lindleyi Stendel)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAA
TCGGCCAA GGGCACGT TCGCCTGG GCGTCAAG CATTATGACGCTCCCT GTCAACTC CATCCCAT CTTTTAAT GGGCTGGCGAAGGCTC GGATGTGC AAAGTGGC TCGTCGTG CCTCTCAGTGCGGCGG GCTTAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTACGAACAATT ACGGGTGG ATTAAAGT GAGGCCTA TATTATATTGTCGTGT ATGCCTGA GAGAAGAT TATTCATT TTTTGGTTATCCCAAA TCATGCGT CGATCCAT AGATCACG TTTGGAATGCGACCCC AGGATGGG CGAGGTCA CCCGCTGA GTTTAAGCATATCACT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT24.美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCG AGGCCAACCGG CCAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAGTCATTTTATCGCT CTGTGCCA AGCTACCC ATCGATTG ATGTGTTGGCGAAGGC TTGGATGT GCATTATG GCTCATCG TGCCCCTGGGCGCGGC GGGCTGAA GAGCGGGT CATCATCT CGTTGGCTGCGAACAA TAAGGGGT GGACTGAA GGGAGACC TATGCTATTGTGTCGT GCATGCCT AAGAGTTG ATCATACC TTTGAGGAGATCCCAA ATCATGCG TCGATCTA TGGACGGC GCTTTGAATGCGACCC CAGGATGG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAGCATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCCCCTAGTAA CGGCGAGT25.美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTT GCGC CCGAG GCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA GTCATTTTATCGCTCT GTGCCAAG CTAACCAT CGATTGAT GTGTTGGC
GAAGGCTT GGATGTGC ATTATGGC TCATCGTG CCCCTGGGCGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTGCGAACAATA AGGGGTGG ACTGAAGG GAGACCTA TGCTATTGTGTCGTGC ATGCCTAA GAGTTGAT CATACCTT TGAGGAGATCCCAAAT CATGCGTC GATCTATG GACGGCGC TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGCATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT26.美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA GTCATTTTATCGCTCT GTGCCAAG CTACCCAT CGATTGAT GTGTTGGCGAAGGCTT GGATGTGC ATTATGGC TCATCGTG CCCCTGGGCGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTGCGAACAATA AGGGGTGG ACTGAAGG GAGACCTA TGCTATTGTGTCGTGC ATGCCTAA GAGTTGAT CATACCTT TGAGGAGATCCCAAAT CATGCGTC GATCTATG GACGGCGC TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT27.羅河石斛(Dendrobium lohohense T.Tang et F.T.Wang)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAACCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CATTACATCGCTCCAT GTCAAGTC ACCCTTCG ATGGATGG GCTGGCGAAGGCTTGG ATGTGCAC AGTGGCTC GTCGTGCC ACTTGGTGCGGCGGGC TGAAGAGC GGGTCGTC ATCCTCTT GGCCGCGA
ACAATAAT GGGTGGAT TAAAGCGA TGCCTAAG TTATTGTGTGTGCATG CCTAAGAG ATGATTAT ACTTTTTA AGTGATCCCAATTCAT GCGTCGAT CCATGGAT GACGTTTT GAATGCGACCCCAGGA TAGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTT AAGCATATCAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT ACGAGGAT TCCCCTAGTAACGGCG AGT28.細(xì)莖石斛(Dendrobium moniliforme(L.)Sw.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGGCCAACCGGCT GAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCACTCC GTGCCTAC TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTGCTAAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAATAA GGCCTATG CTATTGTGTCAAGCGC GCCCGAGA GATGGTCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATTCA TGCGTTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT29.細(xì)莖石斛(Dendrobium moniliforme(L.)Sw.)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGGCCAACCGGCT GAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCACTCC GTGCCTAC TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTGCTAAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAATAA GGCCTATG CTATTGTGTCAAGCGC GCCCGAGA GATGGTCA TACTTTTT AGGTGATC
CCAATTCA TGCGTTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT30.細(xì)莖石斛(Dendrobium moniliforme(L.)Sw.)樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCT GAGGCCAACCGGCTGA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG CATTTTATCACTCCGT GCCTACTC TCCCATCC ATGGATGT GTTGCTAAGGCTCGGA TGTGCACG GTGGCTCG TCGTGCCC CTTGGTGCGGCGGGCT GAAGGGCG GGTCATCT TCTCGTTG GCTGCCAACAATAAGG GGTGGATT AAATAAGG CCTATGCT ATTGTGTCAAGCGCGC CCGAGAGA TGGTCATA CTTTTTAG GTGATCCCAATTCATG CGTTGATC CATGGATG GCGTATCG AATGTGACCCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC TGAGTTTA AGCATATCAATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATT CCCCTAGTAACGGCGA GT31.杓唇石斛(Dendrobium moschatum(Buch.-Ham.)Sw.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTG AGGCCAACCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCGATATGTCGCT CTGTGCTA AGTTAACC ATCGATGG ATGGGTTGGCGAAGGC TCGGATGT GCATAATG GCTCGTTG TGCCCCTCAGCGTGGC GGGCTGAA GAGGGGGT CATCATCT TGTTAGTCGCAAACAA TAAGGGGT GGATAAAT ATGAGGCC TATGTTATTGTGTTGT GCATGCCC AAGAGATG ATTAAACC TTTTTTGTGATCCTAA ATCATGCG TCAATCCA TGTATGGC GTTTTGAATGCGACCC CAGGATGG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAG
CATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACA AGGATTCCCCTAGTAA CGGCGAGT32.杓唇石斛(Dendrobium moschatum(Buch.-Ham.)Sw.)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGGCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGATATGTCGCTCT GTGTTAAG TTAACCAT CGATGGAT GGGTTGGCGAAGGCTC GGATGTGC ATAATGGC TCGTTGTG CCCCTCAGCGTGGCGG GCTGAAGA GGGGGTCA TCATCTTG TTAGTCGCAAACAATA AGGGGTGG ATAAATAT GAGGCCTA TGTTATTGTGTTGTGC ATGCCCAA GAGATGAT TAAACCTT TTTTGTGATCCTAAAT CATGCGTC AATCCATG TATGGCGT TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGTGG AGAAGAAA CTTACAAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT33.杓唇石斛(Dendrobium moschatum(Buch.-Ham.)Sw.)樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCT GAGGCCAACCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGATATGTCGCTCTGT GCTAAGTT AACCATCG ATGGATGG GTTGGCGAAGGCTCGG ATGTGCAT AATGGCTC GTTGTGCC CCTCAGCGTGGCGGGC TGAAGAGG GGGTCATC ATCTTGTT AGTCGCAAACAATAAG GGGTGGAT AAATATGA GGCCTATG TTATTGTGTTGTGCAT GCCCAAGA GATGATTA AACCTTTT TTGTGATCCTAAATCA TGCGTCAA TCCATGTA TGGCGTTT TGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACAAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT
34.金釵石斛(Dendrobium nobile Lindl.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GA ACGCAAGT TGCGCCTG AGGCCAATCGGT TGAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCGC TCCGTGCC TAGTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGCCAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCGTCGTG CCCGTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGTGTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTC ATACTTTT TAGGTGATCCCAATTC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGTGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT35.金釵石斛(Dendrobium nobile Lindl.)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTG AGGCCAACCGG CTGAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATTTTATCGCT CCGTGCCT AGTCTCCC ATCCATGG ATGTGTTGCCAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CTCGTCGT GCCCCTTGGTGCGGCG GGCTGAAG GGCGGGTC ATCTTCTC GTTGGCTGCCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAT AAGGCCTA TGCTATTGTGTCAAGC GCGCCTGA GAGATGGT CATACTTA TTAGGTGATCCCAATT CATGCGTC GATCCATG GATGGCGT ATCGAATGTGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT36.金釵石斛(Dendrobium nobile Lindl.)樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGGCCAACCGG CTGAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATTTTATCGCT CCGTGCCT AGTCTCCC ATCCATGG ATGTGTTGCCAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CTCGTCGT GCCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGTGTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTC ATACTTAT TAGGTGATCCCAATTC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGTGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT37.鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCA AGGCCAACCGG CTAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATTTTATCTCT CCGTGCCT AATCTCCC ATCCATGG ATGTGTTACTAAGGCT CGGATGTG CATGGTGG CTCCTCGT GCCCCTTGGTGCGGCG GGCTGAAG GGCGGGTC ATCTTCTC GTTGGTTGCCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAA AAGGCCTA TGCTATTGTGATAAGC GCGCCCGA GAGATGAT CATACTTT TTAGGTGATCCCAATC CATGCGCT AATCCATG GATGGCGT ATCGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CTGCTGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AAAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT38.鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCC
AACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACTAAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTGATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATCCA TGCGCTAA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCT GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT39.鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCCAACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACTAAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTGATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATCCA TGCGCTAA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCT GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT40.鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)樣品4的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCCAACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACT
AAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTGATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATCCA TGCGCTAA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCT GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT41.鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)樣品5的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCCAACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACTAAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTGATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATCCA TGCGCTAA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCT GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAA AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT42.鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)樣品6的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCAAGGCCAACCGGCT AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCTCTCC GTGCCTAA TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTACTAAGGCTCG GATGTGCA TGGTGGCT CCTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGTTGCC
AACAATAA GGGGTGGA TTAAAAAA GGCCTATG CTATTGTGATAAGCGC GCCCGAGA GATGATCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATCCA TGCGCTAAT CCATGGAT GGCGTATC GAATGCGACCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCTG CTGAGTTT AAGCATATCAATAAGC GGAGGAAA AGAAACTT ACGAGGAT TCCCCTAGTAACGGCG AGT43.黑毛石斛(Dendrobium williamsonii Day et Rchb.f.)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AA GTT GCG CCT GAG GCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTACGTCACTCC GTGCCAAC TCCATTCC ATCGATGG ATGGGCCGGTGAAGGC TCGGATGT GTAGAGTG GCTCGTCG TGCCCGTCGGTGCGGC GGGTTGAA GAGTGGGT CATCATCTC GTTGGCTGCGAACAAT AAGGGGTG GAATAAAG TGAGACCT ATGTTATTGTGTCGTG TATGCCTG AGAGAAGA CCATTATC AGGAGATCCCAAATCA TGCGTCGA TCCATGAA TGGCGTTT GGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT44.黑毛石斛(Dendrobium williamsonii Day et Rchb.f.)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CTGAGGCCAACCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCGTTACGTCACT CCGTGCCA ACTCCATT CCATCGAT GGATGGGCCGGTGAAG GCTCGGAT GTGTAGAG TGGCTCGT CGTGCCCGTCGGTGCG GCGGGTTG AAGAGTGG GTCATCAT CTCGTTGGCTGCGAAC AATAAGGG GTGGAATA AAGTGAGA CCTATGTTATTGTGTC GTGTATGC CTGAGAGA AGACCATT ATCAGGAG
ATCCCAAA TCATGCGT CGATCCAT GAATGGCG TTTGGAATGCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGCATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT45.細(xì)葉石仙桃(Pholidota cantonensis Rolfe)樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCGAGGCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTGCGTCGCTCC GTGCCATC CCCGTCCC ACGAATGC GTGCGACGGTCGAGGC CCGGACGT GCAGAGTG GCTCGTCG TGCCCGTTGGTGCGGC GGGCTGAA GAGTGTGG GCTATCGT CTCGTTGGCCAACAGC GACAAGGG GTGGATGA AAGCTGTA TGAGCAAAGAGAGCCT ATGTTGTT GCTTGCTT GGCCCGAG AAAAGATTCCCAGCTG ATGATCCC AACCCACG CGTCGATC CACAGGCGACGGCTTG GAATGCGA CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCGCCGAGTTT AAGCATAT CAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTTACGAGGAT TCCCCTAG TAACGGCG AGT46.細(xì)葉石仙桃(Pholidota cantonensis Rolfe)樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAACCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGTTGCGTCGCTCCGT GCCATCCC CGTCCCAC GAATGCGT GCGACGGTCGAGGCCC GGACGTGC AGAGTGGC TCGTCGTG CCCGTTGGTGCGGCGG GCTGAAGA GTGTGGGC TATCGTCT CGTTGGCCAACAGCGA CAAGGGGT GGATGAAA GCTGTATG AGCAAAGAGAGCCTAT GTTGTTGC TTGCTTGG CCCGAGAA AAGATTCCCAGCTGAT GATCCCAA CCCACGCG TCGATCCA CAGGCGACGGCTTGGA ATGCGACC CCAGGATG GGCGAGGC CACCCGCC
GAGTTTAA GCATATCA ATAAGCGG AGGAGAAG AAACTTACGAGGATTC CCCTAGTA ACGGCGAGT上述46個(gè)樣品的ITS2及5.8S和28S核糖體部分DNA序列的測(cè)定方法包括下列步驟(1)收集植物樣品，進(jìn)行品種鑒定工作；(2)從步驟(1)選出的植物中提取DNA；(3)以步驟(2)提取的DNA為模板，以寡核苷酸作為聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)的引物，擴(kuò)增ITS2及部份5.8S和28S的區(qū)段，所用的引物分別采自植物5.8S和28S的保守區(qū)段；(4)應(yīng)用直接測(cè)序技術(shù)對(duì)步驟(3)中所獲得的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序。
每一樣品至少重復(fù)測(cè)序4次。而每一樣品的序列也在互聯(lián)網(wǎng)頁(yè)National Center for Biotechnology Information(NCBI)和GeneticsComputer Group package(GCG)與其他蘭花品種的序列作比較和驗(yàn)證以確保本發(fā)明的46個(gè)序列準(zhǔn)確。
如上所示，除了羅河石斛之外，所測(cè)得的同一品種的樣品之間在DNA水平的變異百份率不高于1.22％。所述16種石斛的種間DNA序列(ITS2及部份5.8S和28S)的差異為2％至17％，而石斛與細(xì)葉石仙桃的DNA序列(ITS2及部份5.8S和28S)的差異為16％至20％。
本發(fā)明利用石斛類(lèi)植物內(nèi)ITS2(轉(zhuǎn)錄空隙區(qū)2)和部份5.8S及28S的DNA序列進(jìn)行種間和種內(nèi)的比較，借此鑒定不同的石斛品種并辨別其真?zhèn)?。所采用的方法包括下列步驟(1)從植物中提取DNA；(2)以步驟(1)中提取的DNA為模板，以寡核苷酸作為聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)的引物，擴(kuò)增ITS2及部份5.8S和28S的區(qū)段，所用的引物分別采自植物5.8S和28S的保守區(qū)段；
(3)應(yīng)用直接測(cè)序技術(shù)對(duì)步驟(2)中所獲得的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序；(4)將步驟(3)中測(cè)得的植物ITS2及部份5.8S和28S的DNA序列與上述44個(gè)石斛樣品的DNA序列比較以鑒定所測(cè)植物的石斛品種或分辯其真?zhèn)巍?br> 下面詳細(xì)描述所述方法(1)DNA的提取植物DNA提取方法與Draper和Scott(Draper和Scott，1988)所述大致相同，簡(jiǎn)述如下將干燥的植物材料用70％乙醇的蒸餾水溶液沖洗，然后，與液氮混合并研磨成粉末。將所得的粉末樣品與12倍體積的CTAB混勻，在56℃水浴中保溫30分鐘后，加入等量的氯仿-異戊醇(24∶1)混合液，離心，取上清液。向殘余物中加入0.1體積的10％CTAB溶液，室溫放置10分鐘后再用氯仿-異戊醇萃取一次，離心，取上清液并與前次的上清液混合。向所得上清液中加入等量的CTAB產(chǎn)生沉淀，室溫放置1小時(shí)后以13000g離心15分鐘。將DNA沉淀物用乙醇純化后溶解于TE緩沖液(10mM Tris-HCl，pH 7.5，1mM EDTA)中備用。
(2)PCR擴(kuò)增反應(yīng)ITS2及部份5.8S和28S區(qū)段的DNA由PCR擴(kuò)增反應(yīng)得到。反應(yīng)所用的引物為5.8d和28cc(Hillis和Dixon，1991)5.8d采自植物5.8S保守區(qū)段5’AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC A 3’28cc采自植物28S保守區(qū)段5’ACT CGC CGT TAC TAG GGG AA 3’反應(yīng)溶液包括1 ng植物DNA，1Xtaq緩沖液(10mM Tris-HCl，pH8.3，0.001％明膠)，0.2mM dNTPs，1μM引物(5.8d和28cc)，以及1個(gè)單位的Taq DNA多聚酶。反應(yīng)條件為于94℃預(yù)處理5分鐘，然后進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，循環(huán)條件是94℃，1分鐘，60℃，1分鐘，72℃，2分鐘；最后72℃，10分鐘。
(3)直接測(cè)序技術(shù)將步驟(2)得到的PCR產(chǎn)物用乙醇醇化后，取出1μL(約50ng)PCR醇化產(chǎn)物，與4μL反應(yīng)終止混合液，0.64μL 25μM引物(5.8d或28cc)，以及4.86μL蒸餾水混合。然后進(jìn)行以下25個(gè)循環(huán)，反應(yīng)條件為96℃，10秒，56℃，5秒，60℃，4分鐘。最后使用Perkin Elmer的[序列分析]軟件(“Sequencing Analysis第三版”軟件和Hitachi“DNASIS第七版”)分析和確定樣品的DNA序列。
因此，采用本發(fā)明提供的石斛的ITS2及部份5.8S和28S區(qū)段的DNA序列及鑒定方法，通過(guò)其ITS2及部份5.8S和28S區(qū)段的DNA序列的比較，使得對(duì)貴重中藥石斛的鑒定更加方便和可靠。
權(quán)利要求
1.石斛的ITS2及5.8S和28S核糖體部分DNA序列，包括(1)鉤狀石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S核糖體部分rDNA序列AAC CATCGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCGC CCGAGGCCAACCGGCTAA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTAAGC ATTTTATCGCTCCGTG CCTAATCT CCCATCCA TGTATGTG TTGCAAAGGCTCGGAT GTGCACGG TGGCTCCT CGTGCCCC TTGGTGCGGCGGGCTG AAGGCCGG GTCATCTT CTCGTTGG TTGCCAACAATAAGGG GTGGATTA AACAAGGC CTATGCTG TTGTGATATGCGCGCC CGAGAGAT GATCATAC TTTTTAGG TGATCCCAATTCATGC GCTGATCC ATGGATGG CGTATCGA ATGCGACCCCAGGATG GGCGAGGC CACCCGCT GAGTTTAA GCATATCAGCATATCAAT AAG CGGAGG AAAA GAAA CTTACGAGGATTCCC CTA GTA ACG GCG AGT(2)鉤狀石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCCGAGGCCAA CCGGCTAA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAGCATTTTAT CGCTCCGT GCCTAATCTCCCATCC ATGTATGTGTTGCAAAGG CTCGGATG TGCACGGT GGCTCCTC GTGCCCCTTGGTGCGG CGGGCTGA AGGCCGGG TCATCTTC TCGTTGGCTGCCAACA ATAAGGGG TGGATTAA ACAAGGCC TATGCTGTTGTGATA TGCGCGCC CGAGAGAT GATCATAC TTTTTAGGTGATCCCA ATTCATGC GCTGATCC ATGGATGG CGTATCGAATGCGACC CCAGGATG GGCGAGGC CACCCGCT GAGTTTAAGCATATCAAT AAG CGGAGG AAAA GAAA CTTACGAGGATTCCC CTA GTA ACG GCG AGT(3)鉤狀石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGCCAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCGCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGTA TGTGTTGCAAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG CCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAACA AGGCCTAT GCTGTTGTGATATGCG CGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGATCCCAATTC ATGCGCTG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCTGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGG AGG AAAA GAAA CTTA CGA GGATT CCCCTA GTA ACG GCG AGT(4)束花石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AACCATCGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGCCAACCTGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTTTGTTGCTC CGTGTCTC GTCACCCA TCAATGGA TGTGCTGGCGAAGGCT CGGATGTG CACGGTGG CCCGTCGT GCCCCTCGGTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC GCCATCTC GTTGGTTGCGAACAAT AAGGGGTG GATTAAAT GGAGGCCT ATGCTATTGTGTCGTG CATGCCTA AGAGATTA AATTTTTT AGGTGATCCCAAATCA CGCGTCGA TCCACGGA TGATGCTT TGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACAAGGA TT CCCCTA GTA ACG GCG AGT(5)束花石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AACCATCGA GTC TTT GAA CGC AA GTTGCGCC CGAGGCCAACCTGCCA AGGGCACG TCTGCCTG GGCGTCAA GCATTTTGTTGCTCCG TGTCTCGT CACCCATC AATGGATG TGCTGGCGAAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCC CGTCGTGC CCCTCGGTGCGGCGGG CTTAAGAG CGGGTCGC CATCTCGT TGGTTGCGAACAATAA GGGGTGGA TTAAATGG AGGCCTAT GCTATTGTGTCGTGCA TGCCTAAG AGATTAAA TTTTTTAG GTGATCCCAAATCACG CGTCGATC CACGGATG ATGCTTTG AATGCGACCCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC CGAGTTTA AGCATATCAATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CAAGGATT CCCCTAGTAACGGCG AGT(6)鼓槌石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGCCAATCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCGTTACGTCGCTC CGTGTCCA GCCACCCG TCGATGGA TGGGCTGGCGATGGCT CGGATGTG CACAGTGG CTCCTCGT GCCCCTCGGCACGGCG GGCTTAAG AGCGGGTA ATCATCTC GTTGGCTGCGAACAAT ATGGGGTG GATAAATG CGATGCTT ATGATATTGTGCCGTG CATGCCCG AGAGATGA TCATACTT ATTCAGGTGATCCCAA ACCATGCG TCGATCCA TGGATGGC GTTTTGAATGCGACCC CAGGACAG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAGCATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCCCCTAGTAA CGGCG AGT(7)鼓槌石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S核糖體部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGCCAATCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCGTTACGTCGCTC CGTGTCCA GCCACCCG TCGATGGA TGGGCTGGCGATGGCT CGGATGTG CACAGTGG CTCCTCGT GCCCCTCGGCACGGCG GGCTTAAG AGCGGGTA ATCATCTC GTTGGCTGCGAACAAT ATGGGGTG GATAAATG CGATGCCT ATGATATTGTGCCGTG CATGCCCG AGAGATGA TCATACTT ATTCAGGTGATCCCAA ACCATGCG TCGATCCA TGGATGGC GTTTTGAATGCGACCC CAGGACAG GCGAGGCC ACCCGCCG AGTTTAAGCATATCAA TAAGCGGA GGAGAAGA AACTTACG AGGATTCCCCTA GTA ACG GCG AGT(8)鼓槌石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAATCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGTTACGTCGCTCCGT GTCCAGCC ACCCGTCG ATGGATGG GCTGGCGATGGCTCGG ATGTGCAC AGTGGCTC CTCGTGCC CCTCGGCACGGCGGGC TTAAGAGC GGGTAATC ATCTCGTT GGCTGCGAACAATATG GGGTGGAT AAATGCGA TGCTTATG ATATTGTGCCGTGCAT GCCCGAGA GATGATCA TACTTATT CAGGTGATCCCAAACC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTT TTGAATGCGACCCCAG GACAGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GA AGA AAC TTA CGA GGATT CCCCTA GTA ACG GCG AGT(9)玫瑰石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCG AGG CCAATCGGCCA AGGGCACG TCTGCCTG GGCGTCAA GCATTTTGTTGCTCCG TGTCTACT CACACCCA TCGATGGA TGTGCTGGTGTAGGCT CGGATGTG CATGCTGG CTCGTCGT TCTCCCAGGTGCGGCG GGCTGAAG AGCGGGTC ATCCTCTC GTTTGCGGCGAACAAT AAGGGGTG GATTGAAG AGAGGTCT ATGCTATTGTGTCGTG CATGCCTG AGAGATGA TTAACTTT TTTGTGATCCTAAATC ATGCATCG ATCCATGG ATGATGCT TTGAATGTGACCCCAG GATGGGCG AGGCTACC CGCTGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG A TT CCCCTA GTA ACG GCG AGT(10).玫瑰石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCGAGGCCAATCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AAGCATTTTGTTGCTC CGTGTCTA CTCACACC CATCGATG GATGTGCTGGTGTAGG CTCGGATG TGCATGCT GGCTCGTC GTTCTCCCAGGTGCGG CGGGCTGA AGAGCGGG TCATCCTC TCGTTTGCGGCGAACA ATAAGGGG TGGATTGA AGAGAGGT CTATGCTATTGTGTCG TGCATGCC TGAGAGAT GATTAACT TTTTTGTGATCCCAAA TCATGCAT CGATCCAT GGATGATG CTTTGAATGTGACCCC AGGATGGG CGAGGCTA CCCGCTGA GTTTAAGCATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT(11).玫瑰石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTG CGCCCGAGGCCAATCG GCCAAGGG CACGTCTG CCTGGGCG TCAAGCATTTTGTTGC TCCGTGTC TACTCACA CCCATCGA TGGATGTGCTGGTGTA GGCTCGGA TGTGCATG CTGGCTCG TCGTTCTCCCAGGTGC GGCGGGCT GAAGAGCG GGTCATCC TCTCGTTTGCGGCGAA CAATAAGG GGTGGATT GAAGAGAG GTCTATGCTATTGTGT CGTGCATG CCTGAGAG ATGATTAA CTTTTTTGTGATCCCA AATCATGC ATC GATC CATGGATG ATGC TTTGAATG TGAC CCCA GGAT GGGC GAGG CTAC CCGC TGAGTTTA AGCA TATC AATA AGCG GAGG AGAA GAAA CTTACGAG GA TT CCC CTA GTA ACG GCG AGT(12).密花石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC A AG TTGCGCCCGAGGCCAACCGG CCAAGGGC ACGTCTGC CTGGGCGT CAAGCGTTATGTCGCT CCGTGTTA ACTCCATC CCATCGAT GTATGGGCTGGCGAAG GCTCGGAT GTGCAGTG TGGCTCGT CGTGCCCCTTGGTGCG GCGAGCTG AAAAGCGG GTAATCAT CTCGTTGGCTGCGAAC GATAAGGG GTGGATTA AAGCGAGA CCTATGTTATTGTGTC GTGTATGC CCGAGAGA AGATTATA CATACTCAGGTGATCC TGAATCAT GCGTCGAT CAAAGGAC GGCGCTTGGAATGCGA CCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTTAAGCATATT AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATTCCCCTAGT A ACG GCG AGT(13).密花石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAACCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGTTATGTCGCTCCGT GTTAACTC CATCCCAT CGATGTAT GGGCTGGCGAAGGCTC GGATGTGC AGTGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGA GCTGAAAA GCGGGTAA TCATCTCG TTGGCTGCGAACGATA AGGGGTGG ATTAAAGC GAGACCTA TGTTATTGTGTCGTGT ATGCCCGA GAGAAGAT TATACATA CTCAGGTGATCCTGAA TCATGCGT CGATCAAA GGACGGCG CTTGGAATGCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGCATATTAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTA GTA ACG GCG AGT(14).密花石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCGC CCGAGGCCAACCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CGTTATGTCGCTCCGT GTTAACTC CATCCCAT CGATGTAT GGGCTGGCGAAGGCTC GGATGTGC AGTGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGA GCTGAAAA GCGGGTAA TCATCTCG TTGGCTGCGAACGATA AGGGGTGG ATTAAAGC GAGACCTA TGTTATTGTGTCGTGT ATGCCCGA GAGAAGAT TATACATA CTCAGGTGATCCTGAA TCATGCGT CGATCAAA GGACGGCG CTTGGAATGCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGCATATTAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT(15).流蘇石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CATCGAGTC TTTGAACGCA AGTTGCGC CCGAGGCCAACAGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGTGTTATGTCGCTCC ATGCCAAG TCACCCAT CGATGGAT GGGCCGGCGAAGGCTC GGATGTGC ACAGTGGC TCGCCGTG CCCCTCGGTGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TTATCTTG TTGGCTGCAGGCAATA ATGGGTGG ATAAACGC GAGGCCTT TGTTATTGTGTCGTGC ATGCCTAA GATATGAT TAAACTTT TTAGGTGATCCCAAAT CATGCGTC GATCCACG GATGGCGT TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAGGA TT CCCCTA GTA ACG GCG AGT(16).流蘇石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCCGAGGCCAACA GGCCAAGG GCACGTCT GCCTGGGC GTCAAGTGTTATGTCG CTCCATGC CAAGTCAC CCATCGAT GGATGGGCCGGCGAAG GCTCGGAT GTGCACAG TGGCTCGC CGTGCCCCTCGGTGCG GCGGGCTG AAGAGCGG GTCATTAT CTTGTTGGCTGCAGGC AATAATGG GTGGATAA ACGCGAGG CCTTTGTTATTGTGTC GTGCATGC CTAAGATA TGATTAAA CTTTTTAGGTGATCCC AAATCATG CGTCGATC CACGGATG GCGTTTTGAATGCGAC CCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC CGAGTTTAAGCATATC AATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGA GGATT CCC CTA GTA ACG GCG AGT(17).流蘇石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CC CGAGGCCAACAGGCCA AGGGCACG TCTGCCTG GGCGTCAA GTGTTATGTCGCTCCA TGCCAAGT CACCCATC GATGGATG GGCCGGCGAAGGCTCG GATGTGCA CAGTGGCT CGCCGTGC CCCTCGGTGCGGCGGG CTGAAGAG CGGGTCAT TATCTTGT TGGCTGCAGGCAATAA TGGGTGGA TAAACGCG AGGCCTTT GTTATTGTGTCGTGCA TGCCTAAG ATATGATT AAACTTTT TAGGTGATCCCAAATC ATGCGTCG ATCCACGG ATGGCGTT TTGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGGA TT CCCCTAGTAACG GCGAGT(18).重唇石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AA CCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCGCCTG AGGCCAACCG GCTGAGGGCACGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTT TATCGCTC CGTGCCTAGTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGC CAAGGCTC GGATGTGCACGGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGG TGCGGCGG GCTGAAGGGCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGC CAACAATA AGGGGTGGATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGT GTCAAGCG CGCCTGAGAGATGGTC ATACTTAT TAGGTGAT CCCAATTC ATGCGTCGATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGT GACCCCAG GATGGGCGAGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCAT ATCAATAA GCGGAGGAGAAGAAAC TTA CGA GGA TT CCC CTA GTA ACG GCG AGT(19).重唇石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCTGAGGCCAACCGGC TGAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCGCTC CGTGCCTA GTCTCCCA TCCATGGA TGTGTTGCCAAGGCTC GGATGTGC ACGGTGGC TCGTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGCTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAATA AGGCCTAT GCTATTGTGTCAAGCG CGCCTGAG AGATGGTC ATACTTAT TAGGTGATCCCAATTC ATGCGTCG ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGTGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTA ACG GCG AGT(20).小黃花石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAATCGGCC AAGGGCAC GTTCGCCTG GGCGTCAA GCATTACGTCGCTCCA TGTCAACTC CATCC CTTC TTTTGATG GGCTGGTAAAAGGCTT GGACGTGT AAAGTGGC TCGTCGTG CCCCTCGGTGCGGCGG GCTTAAGA GCGGGTCAT CATCTCGT TGGCTACGAACAATTA CGTGTGGA TTAAAGTG CGGCCTAT CTTATTGTGTCATGTA TGCCTGAG AAGATTAT GCATTTTT AGGTGATCCCAAATCA TGCGTCGA TCCATGGA TGACGTTT GGAATGCGACCCCAGG ATGGGCGA GGTCACCC GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACG GCG AGT(21).小黃花石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAATCGGCCAA GGGCACGT TCGCCTGG GCGTCAAG CATTACGTCGCTCCAT GTCAACTC CATCCCTT CTTTTGAT GGGCTGGTAAAAGGCT TGGACGTG TAAAGTGG CTCGTCGT GCCCCTCGGTGCGGCG GGCTTAAG AGCGGGTC ATCATCTC GTTGGCTACGAACAAT TACGTGTG GATTAAAG TGCGGCCT ATCTTATTGTGTCATG TATGCCTG AGAAGATT ATGCATTT TTAGGTGATCCCAAAT CATGCGTC GATCCATG GATGACGT TTGGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGTCAC CCGCTGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT(22).聚石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTG CGCCCGAGGCCAATCGGC CAAGGGCA CGTTCGCC TGGGCGTC AAGCATTATGACGCTC CCTGTCAA CTCCATCC CATCTTTT AATGGGCTGGCGAAGG CTCGGATG TGCAAAGT GGCTCGTC GTGCCTCTCAGTGCGG CGGGCTTA AGAGCGGG TCATCATC TCGTTGGCTACGAACA ATTACGGG TGGATTAA AGTGAGGC CTATATTATATTGTCG TGTATGCC TGAGAGAA GATTATTC ATTTTTTGGTTATCCC AAATCATG CGTCGATC CATAGATC ACGTTTGGAATGCGAC CCCAGGAT GGGCGAGG TCACCCGC TGAGTTTAAGCATATC ACTAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATTCCC CTA GTA ACG GCG AGT(23).聚石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCGAGTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAATCGGCCAA GGGCACGT TCGCCTGG GCGTCAAG CATTATGACGCTCCCT GTCAACTC CATCCCAT CTTTTAAT GGGCTGGCGAAGGCTC GGATGTGC AAAGTGGC TCGTCGTG CCTCTCAGTGCGGCGG GCTTAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTACGAACAATT ACGGGTGG ATTAAAGT GAGGCCTA TATTATATTGTCGTGT ATGCCTGA GAGAAGAT TATTCATT TTTTGGTTATCCCAAA TCATGCGT CGATCCAT AGATCACG TTTGGAATGCGACCCC AGGATGGG CGAGGTCA CCCGCTGA GTTTAAGCATATCACT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACGA GGATTCCCCTA GTA ACG GCG AGT(24).美花石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC A AGTTGCGC CCGAGGCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA GTCATTTTATCGCTCT GTGCCAAG CTACCCAT CGATTGAT GTGTTGGCGAAGGCTT GGATGTGC ATTATGGC TCATCGTG CCCCTGGGCGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTGCGAACAATA AGGGGTGG ACTGAAGG GAGACCTA TGCTATTGTGTCGTGC ATGCCTAA GAGTTGAT CATACCTT TGAGGAGATCCCAAAT CATGCGTC GATCTATG GACGGCGC TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT(25).美花石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTT GCGC CCGAGGCCAACCGG CCAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAGTCATTTTATCGCT CTGTGCCA AGCTAACC ATCGATTG ATGTGTTGGCGAAGGC TTGGATGT GCATTATG GCTCATCG TGCCCCTGGGCGCGGC GGGCTGAA GAGCGGGT CATCATCT CGTTGGCTGCGAACAA TAAGGGGT GGACTGAA GGGAGAC CTATGCTATTGTGTCG TGCATGCC TAAGAGTT GATCATAC CTTTGAGGAGATCCCA AATCATGC GTCGATCT ATGGACGG CGCTTTGAATGCGACC CCAGGATG GGCGAGGC CACCCGCC GAGTTTAAGCATATCA ATAAGCGG AGGAGAAG AAACTTAC GAGGATTCCC CTA GTA ACG GCG AGT(26).美花石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCC GAGGCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA GTCATTTTATCGCTCT GTGCCAAG CTACCCAT CGATTGAT GTGTTGGCGAAGGCTT GGATGTGC ATTATGGC TCATCGTG CCCCTGGGCGCGGCGG GCTGAAGA GCGGGTCA TCATCTCG TTGGCTGCGAACAATA AGGGGTGG ACTGAAGG GAGACCTA TGCTATTGTGTCGTGC ATGCCTAA GAGTTGAT CATACCTT TGAGGAGATCCCAAAT CATGCGTC GATCTATG GACGGCGC TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACGGCG AGT(27).羅河石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG AGTCTTTG AACGCAAG TTGCGCCC GAGGCCAACCGGCCAA GGGCACGT CTGCCTGG GCGTCAAG CATTACATCGCTCCAT GTCAAGTC ACCCTTCG ATGGATGG GCTGGCGAAGGCTTGG ATGTGCAC AGTGGCTC GTCGTGCC ACTTGGTGCGGCGGGC TGAAGAGC GGGTCGTC ATCCTCTT GGCCGCGAACAATAAT GGGTGGAT TAAAGCGA TGCCTAAG TTATTGTGTGTGCATG CCTAAGAG ATGATTAT ACTTTTTA AGTGATCCCAATTCAT GCGTCGAT CCATGGAT GACGTTTT GAATGCGACCCCAGGA TAGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTT AAGCATATCAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT ACGAGGAT TCCCCTAGTAACGGCG AGT(28).細(xì)莖石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTT GCGCCTGA GGCCAACCGGCT GAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCACTCC GTGCCTAC TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTGCTAAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAATAA GGCCTATG CTATTGTGTCAAGCGC GCCCGAGA GATGGTCA TACTTTTT AGGTGATCCCAATTCA TGCGTTGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCTGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TT CCC CTAGTA ACG GCG AGT(29).細(xì)莖石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGT TGCGCCTG AGGCCAACCGGCTG AGGGCACG TCCGCCTG GGCGTCAA GCATTTTATCACTCCG TGCCTACT CTCCCATC CATGGATG TGTTGCTAAGGCTCGG ATGTGCAC GGTGGCTC GTCGTGCC CCTTGGTGCGGCGGGC TGAAGGGC GGGTCATC TTCTCGTT GGCTGCCAACAATAAG GGGTGGAT TAAATAAG GCCTATGC TATTGTGTCAAGCGCG CCCGAGAG ATGGTCAT ACTTTTTA GGTGATCCCAATTCAT GCGTTGAT CCATGGAT GGCGTATC GAATGTGACCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG CTGAGTTT AAGCATATCAATAAGC GGAGGAGA AGAAACTT ACGAGGAT TCCCCTAGTAACGGCG AGT(30).細(xì)莖石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCG A GTC TTT GAA CGC AAGTTGCGC CTGAGGCCAACCGGCTGA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG CATTTTATCACTCCGT GCCTACTC TCCCATCC ATGGATGT GTTGCTAAGGCTCGGA TGTGCACG GTGGCTCG TCGTGCCC CTTGGTGCGGCGGGCT GAAGGGCG GGTCATCT TCTCGTTG GCTGCCAACAATAAGG GGTGGATT AAATAAGG CCTATGCT ATTGTGTCAAGCGCGC CCGAGAGA TGGTCATA CTTTTTAG GTGATCCCAATTCATG CGTTGATC CATGGATG GCGTATCG AATGTGACCCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC TGAGTTTA AGCATATCAATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATT CCCCTAGTAACGGCGAGT(31).杓唇石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTTGAACGCA AGTTGCGC CTGAGGCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGATATGTCGCTCT GTGCTAAG TTAACCAT CGATGGAT GGGTTGGCGAAGGCTC GGATGTGC ATAATGGC TCGTTGTG CCCCTCAGCGTGGCGG GCTGAAGA GGGGGTCA TCATCTTG TTAGTCGCAAACAATA AGGGGTGG ATAAATAT GAGGCCTA TGTTATTGTGTTGTGC ATGCCCAA GAGATGAT TAAACCTT TTTTGTGATCCTAAAT CATGCGTC AATCCATG TATGGCGT TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AGAAGAAA CTTACAAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT(32).杓唇石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGT TGCGCCTGAG GCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGA TATGTCGCTCT GTGTTAAG TTAACCAT CGATGGAT GGGTTGGCGAAGGCTC GGATGTGC ATAATGGC TCGTTGTG CCCCTCAGCGTGGCGG GCTGAAGA GGGGGTCA TCATCTTG TTAGTCGCAAACAATA AGGGGTGG ATAAATAT GAGGCCTA TGTTATTGTGTTGTGC ATGCCCAA GAGATGAT TAAACCTT TTTTGTGATCCTAAAT CATGCGTC AATCCATG TATGGCGT TTTGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CCGCCGAG TTTAAGCATATCAAT AAGCGGTG GAGAAGAA ACTTACAA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT(33).杓唇石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCTGAGGCCAACCGGC CAAGGGCA CGTCTGCC TGGGCGTC AA GCGATATGTCGCTC TGTGCTAA GTTAACCA TCGATGGA TGGGTTGGCGAAGGCT CGGATGTG CATAATGG CTCGTTGT GCCCCTCAGCGTGGCG GGCTGAAG AGGGGGTC ATCATCTT GTTAGTCGCAAACAAT AAGGGGTG GATAAATA TGAGGCCT ATGTTATTGTGTTGTG CATGCCCA AGAGATGA TTAAACCT TTTTTGTGATCCTAAA TCATGCGT CAATCCAT GTATGGCG TTTTGAATGCGACCCC AGGATGGG CGAGGCCA CCCGCCGA GTTTAAGCATATCAAT AAGCGGAG GAGAAGAA ACTTACAA GGATTCCCCTAGTAAC GGCGAGT(34).金釵石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCAT CGA GTC TTT GA ACGCAAGTTG CGCCTGAG GCCAATCGGTTG AGGGCACG TCCGCCTG GGCGTCAA GCATTTTATCGCTCCG TGCCTAGT CTCCCATC CATGGATG TGTTGCCAAGGCTCGG ATGTGCAC GGTGGCTC GTCGTGCC CGTTGGTGCGGCGGGC TGAAGGGC GGGTCATC TTCTCGTT GGTTGCCAACAATAAG GGGTGGAT TAAATAAG GCCTATGC TATTGTGTCAAGCGCG CCTGAGAG ATGGTCAT ACTTTTTA GGTGATCCCAATTCAT GCGTCGAT CCATGGAT GGCGTATC GAATGTGACCCCAGGA TGGGCGAG GCCACCCG CCGAGTTT AAGCATATCAATAAGC GGAGGAGA AGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT(35).金釵石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCT GAGGCCAACCGGCT GAGGGCAC GTCCGCCT GGGCGTCA AGCATTTTATCGCTCC GTGCCTAG TCTCCCAT CCATGGAT GTGTTGCCAAGGCTCG GATGTGCA CGGTGGCT CGTCGTGC CCCTTGGTGCGGCGGG CTGAAGGG CGGGTCAT CTTCTCGT TGGCTGCCAACAATAA GGGGTGGA TTAAATAA GGCCTATG CTATTGTGTCAAGCGC GCCTGAGA GATGGTCA TACTTATT AGGTGATCCCAATTCA TGCGTCGA TCCATGGA TGGCGTAT CGAATGTGACCCCAGG ATGGGCGA GGCCACCC GCCGAGTT TAAGCATATCAATAAG CGGAGGAG AAGAAACT TACGAGGA TTCCCCTAGTAACGGC GAGT(36).金釵石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AACCATCGA GTC TTT GAA CGC AAG TTGCGCCT GAGGCCAACCGGCTGA GGGCACGT CCGCCTGG GCGTCAAG CATTTTATCGCTCCGT GCCTAGTC TCCCATCC ATGGATGT GTTGCCAAGGCTCGGA TGTGCACG GTGGCTCG TCGTGCCC CTTGGTGCGGCGGGCT GAAGGGCG GGTCATCT TCTCGTTG GCTGCCAACAATAAGG GGTGGATT AAATAAGG CCTATGCT ATTGTGTCAAGCGCGC CTGAGAGA TGGTCATA CTTATTAG GTGATCCCAATTCATG CGTCGATC CATGGATG GCGTATCG AATGTGACCCCAGGAT GGGCGAGG CCACCCGC CGAGTTTA AGCATATCAATAAGCG GAGGAGAA GAAACTTA CGAGGATT CCCCTAGTAACGGCGAGT(37).鐵皮石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCAAGGCCAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCTCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGGA TGTGTTACTAAGGCTC GGATGTGC ATGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAAAA AGGCCTAT GCTATTGTGATAAGCG CGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGATCCCAATCC ATGCGCTA ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC TGCTGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA AAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGGCGAGT(38).鐵皮石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCAAGGCCAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCTCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGGA TGTGTTACTAAGGCTC GGATGTGC ATGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGCCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAA AAGGCCTA TGCTATTGTGATAAGC GCGCCCGA GAGATGAT CATACTTT TTAGGTGATCCCAATC CATGCGCT AATCCATG GATGGCGT ATCGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CTGCTGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AAAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT(39).鐵皮石斛樣品3的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCAAGGCCAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCTCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGGA TGTGTTACTAAGGCTC GGATGTGC ATGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAAAA AGGCCTAT GCTATTGTGATAAGCG CGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGATCCCAATCC ATGCGCTA ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC TGCTGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA AAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT(40).鐵皮石斛樣品4的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAGTTGCG CCCAAGGCCAACCGGC TAAGGGCA CGTCCGCC TGGGCGTC AAGCATTTTATCTCTC CGTGCCTA ATCTCCCA TCCATGGA TGTGTTACTAAGGCTC GGATGTGC ATGGTGGC TCCTCGTG CCCCTTGGTGCGGCGG GCTGAAGG GCGGGTCA TCTTCTCG TTGGTTGCCAACAATA AGGGGTGG ATTAAAAA AGGCCTAT GCTATTGTGATAAGCG CGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGATCCCAATCC ATGCGCTA ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC TGCTGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA AAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT(41).鐵皮石斛樣品5的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCA AGGCCAACCGG CTAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATTTTATCTCT CCGTGCCT AATCTCCC ATCCATGG ATGTGTTACTAAGGCT CGGATGTG CATGGTGG CTCCTCGT GCCCCTTGGTGCGGCG GGCTGAAG GGCGGGTC ATCTTCTC GTTGGTTGCCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAA AAGGCCTA TGCTATTGTGATAAGC GCGCCCGA GAGATGAT CATACTTT TTAGGTGATCCCAATC CATGCGCT AATCCATG GATGGCGT ATCGAATGCGACCCCA GGATGGGC GAGGCCAC CTGCTGAG TTTAAGCATATCAATA AGCGGAGG AAAAGAAA CTTACGAG GATTCCCCTAGTAACG GCGAGT(42).鐵皮石斛樣品6的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGC CCA AGGCCAACCGG CTAAGGGC ACGTCCGC CTGGGCGT CAAGCATTTTATCTCT CCGTGCCT AATCTCCC ATCCATGG ATGTGTTACTAAGGCT CGGATGTG CATGGTGG CTCCTCGT GCCCCTTGGTGCGGCG GGCTGAAG GGCGGGTC ATCTTCTC GTTGGTTGCCAACAAT AAGGGGTG GATTAAAA AAGGCCTA TGCTATTGTGATAAGC GCGCCCGAG AGATGATC ATACTTTT TAGGTGATCCCAATCC ATGCGCTA ATCCATGG ATGGCGTA TCGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC TGCTGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA AAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT(43).黑毛石斛樣品1的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AA GTT GCG CCT GAG GCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTACGTCACTCC GTGCCAAC TCCATTCC ATCGATGG ATGGGCCGGTGAAGGC TCGGATGT GTAGAGTG GCTCGTCG TGCCCGTCGGTGCGGC GGGTTGAA GAGTGGGT CATCATCT CGTTGGCTGCGAACAA TAAGGGGT GGAATAAA GTGAGACC TATGTTATTGTGTCGT GTATGCCT GAGAGAAG ACCATTAT CAGGAGATCCCAAATC ATGCGTCG ATCCATGA ATGGCGTT TGGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT或(44).黑毛石斛樣品2的ITS2及5.8S和28S部份rDNA序列AAC CAT CGA GTC TTT GAA CGC AAG TTG CGCCTGAG GCCAACCGGCC AAGGGCAC GTCTGCCT GGGCGTCA AGCGTTACGTCACTCC GTGCCAAC TCCATTCC ATCGATGG ATGGGCCGGTGAAGGC TCGGATGT GTAGAGTG GCTCGTCG TGCCCGTCGGTGCGGC GGGTTGAA GAGTGGGT CATCATCT CGTTGGCTGCGAACAA TAAGGGGT GGAATAAA GTGAGACC TATGTTATTGTGTCGT GTATGCCT GAGAGAAG ACCATTAT CAGGAGATCCCAAATC ATGCGTCG ATCCATGA ATGGCGTT TGGAATGCGACCCCAG GATGGGCG AGGCCACC CGCCGAGT TTAAGCATATCAATAA GCGGAGGA GAAGAAAC TTACGAGG ATTCCCCTAGTAACGG CGAGT
2.權(quán)利要求1所述的石斛的ITS2及5.8S和28S核糖體部份DNA序列，其中所述石斛的同一品種的樣品之間在DNA水平的變異百份率不高于1.22％，所述石斛的種間ITS2及5.8S和28S核糖體部份DNA序列的差異為2％至17％。
3.一種鑒定石斛品種或辨別其真?zhèn)蔚姆椒?，該方法包括如下步驟a.從植物樣品中提取DNA；b.以步驟a提取的DNA為模板，以寡核苷酸作為聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)引物，擴(kuò)增ITS2及部份5.8S和28S的區(qū)段，所用的引物分別采自植物5.8S和28S的保守區(qū)段；c.應(yīng)用直接測(cè)序技術(shù)測(cè)定步驟b所獲得的PCR產(chǎn)物的序列；d.將步驟c測(cè)得的DNA序列與權(quán)利要求1中所述的任一石斛品種的ITS2及5.8S和28S核糖體部份DNA序列比較以確定石斛品種或辨別其真?zhèn)巍?br> 全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了16種石斛和一種石仙桃的ITS2及5.8S和28S核糖體部分DNA序列,所得DNA序列是采用PCR擴(kuò)增反應(yīng)和直接測(cè)序法獲得的,可用于鑒定石斛品種和分辨其真?zhèn)巍?br> 文檔編號(hào)C12P19/00GK1368504SQ0110243
公開(kāi)日2002年9月11日 申請(qǐng)日期2001年1月31日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月31日
發(fā)明者邵鵬柱, 王駿, 畢培曦, 劉大偉 申請(qǐng)人:香港中文大學(xué)