專利名稱：：毛囊吸收定量法與皮膚吸收測定法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及作用于頭發(fā)的成分等的篩選方法及篩選用裝置，以及根據(jù)此篩選方法的含有確認(rèn)有促進經(jīng)毛吸收效果乃至皮脂轉(zhuǎn)移促進效果成分的組合物。開發(fā)養(yǎng)發(fā)劑時，其有效成分當(dāng)然具有優(yōu)良的養(yǎng)發(fā)作用，但重要的是其有效成分確實具有能到達作用點的滲透性。是否能確實到達作用點，很大程度上依賴于其有效成分的性質(zhì)及養(yǎng)發(fā)劑基質(zhì)的性質(zhì)。此外，從毛囊的藥物吸收，不只是養(yǎng)發(fā)劑，作為疫苗或基因等的給藥途徑也值得注意。另外，已有報道表明藥物的皮脂轉(zhuǎn)移性大小決定藥物到達皮膚內(nèi)作用點(例如，毛囊組織和皮脂腺)的難易(CriticalReviews，14(3):207-219(1997))。目前，從毛囊的藥物吸收，進行了①熒光標(biāo)記·放射性同位素的組織切片觀察[Suzuki,M.,et.Al.,J.Soc.ConsmetChem.(1978)、Nicholau,G.,et.al.,Xenobiolica(1987)、Lieb,L.M.,et.al.,J.Invest.Dermatol.(1995)]，②有毛皮膚與無毛皮膚的藥物透皮滲透性的比較〔無毛大鼠和有毛大鼠的比較Illel,B.,et.al.,J.Pherm.Sci.(1991)；人正常皮膚和燙傷愈合皮膚的比較Hueber,F.,et.al.,J.SkinPhermacol.(1994)〕等方面的研究。然而，上述①的方法不是定量而只是定性的方法，并且存在組織切片的調(diào)制很費工夫的缺點。另外，上述②的方法，藥物的吸收只從透皮吸收的方面進行研究，作為養(yǎng)發(fā)劑很重要的經(jīng)毛吸收及皮脂轉(zhuǎn)移性沒有進行直接的研究。所以，只根據(jù)這些以前的技術(shù)，直接篩選藥物是否到達作用點、是否充分發(fā)揮期望效果等很困難。這里，本發(fā)明要解決的課題是，得到藥物等被檢物是否到達作用點、是否充分發(fā)揮期望效果的直接指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)簡便、準(zhǔn)確定量經(jīng)毛吸收性與皮脂轉(zhuǎn)移性的方法，更進一步，根據(jù)經(jīng)毛吸收及優(yōu)良的皮脂轉(zhuǎn)移性，提供藥物等能確實到達作用點的頭皮頭發(fā)用組合物。還有，藥物等的皮脂轉(zhuǎn)移性今后可作為判斷藥物等是否容易到達皮膚內(nèi)特定作用點的有用指標(biāo)，雖不好說能容易作為體內(nèi)評價的指標(biāo)，但對于藥物等的皮脂轉(zhuǎn)移性，由此而準(zhǔn)確、簡便地評價，將其作為體外的方法則是具體的課題。本發(fā)明者經(jīng)過深入地研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以滲透到毛囊組織的被檢物量作為經(jīng)毛吸收的被檢物量的指標(biāo)，通過體外或體內(nèi)的相關(guān)聯(lián)，可以簡便且準(zhǔn)確地定量被檢物的經(jīng)毛吸收性，測定被檢物的皮膚吸收。所謂“經(jīng)毛吸收”，是指與“透皮吸收”這種皮膚全面吸收相對的通過毛孔吸收的概念。如后述，即使確定有透皮吸收作用的藥劑也不一定有經(jīng)毛吸收。并且，鑒于多數(shù)養(yǎng)發(fā)劑的作用點在毛囊組織附近，很顯然研究藥劑經(jīng)毛吸收的意義就非常大了。本發(fā)明提供了將滲透到毛囊組織的被檢物量作為經(jīng)毛吸收被檢物量的指標(biāo)來定量相關(guān)被檢物的經(jīng)毛吸收量、測定被檢物的皮膚吸收的皮膚吸收測定法(以下稱為本測定法1)。另外，所謂“經(jīng)毛吸收”的現(xiàn)象，從吸收的角度來說，是被檢物經(jīng)毛孔的滲透，一般是通過毛囊組織而進行的。為此，在本發(fā)明中，所謂“經(jīng)毛吸收”與“經(jīng)毛囊吸收”具有基本相同的含義。因此，本測定法1也提供了一種皮膚吸收測定法，是將滲透到毛囊組織的被檢物量作為經(jīng)毛囊吸收的被檢物量的指標(biāo)來定量相關(guān)被檢物的經(jīng)毛囊吸收量，從而測定被檢物的皮膚吸收。本測定法1是指，(1)通過測定從在保持機體模擬狀態(tài)的皮膚模型中受被檢物作用的皮膚的真皮層取下的毛囊組織(皮膚組織也可)各部位的被檢物的吸附量而定量測定毛囊組織及皮膚組織的各部位所滲透的藥物等被檢物量的離體(invitro)定量法(以下，稱為本測定法1-1)；和(2)通過測定從受被檢物作用的人頭皮上回收的毛囊組織中的被檢物吸附量而對毛囊組織滲透的藥物等的被檢物量進行定量測定的在體(invivo)定量法(以下稱為本測定法1-2)兩大類。此外，本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)，利用使用人工皮脂的皮膚模型，能容易地在體外(離體)評價被檢物的皮脂移動性。即，本發(fā)明提供了使薄膜的一側(cè)表面與人工皮脂相接觸，在其類似皮膚表層的另一側(cè)與藥劑等的被檢物相接觸，以這種被檢物向上述人工皮脂轉(zhuǎn)移的程度作為指標(biāo)，評價被檢物的皮脂轉(zhuǎn)移性，測定被檢物皮膚吸收的皮膚吸收測定法(下面稱為本測定法2)。更進一步，根據(jù)本測定法，本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)，I.O.B值在0.06-4.0的油分，對于從水溶性物質(zhì)到脂溶性物質(zhì)廣泛極性范圍內(nèi)的物質(zhì)能發(fā)揮優(yōu)良的經(jīng)毛吸收促進作用及優(yōu)良的皮脂轉(zhuǎn)移性。即，本發(fā)明提供了含有I.O.B.值為0.06～4.0的油分的頭皮頭發(fā)用組合物(下面稱為本發(fā)明組合物)。I.O.B值(InorganicOrganicBalance無機有機平衡值的簡稱)是表示油分(廣義上的油分，不僅油脂、蠟類、烴油、高級脂肪酸、高級醇、酯類等油分，一般的醇和脂肪酸等也屬于這個范疇。下同)的極性度的指標(biāo)，為無機性與有機性的比值(其油分分子中的碳原子每個的“有機性值”為20，羥基每個的“無機性值”為100，以此為基準(zhǔn)，得出其它取代基(無機性基)的無機性值[1、藤田著《有機分析》(1930年)，ヵニヤ書店，2、同著《有機化合物的預(yù)測與有機概念圖(化學(xué)的領(lǐng)域11-10)》(1957年)719-725頁，3、藤田及赤冢著《系統(tǒng)性有機定性分析(純粹物篇)》487頁(1970年)，風(fēng)間書店，4、甲田著《有機概念圖基礎(chǔ)與應(yīng)用》227頁(1984年)，三共出版，5、矢口著《根據(jù)有機概念圖的乳化處方設(shè)計]98頁》(1985年)，日本Emulsion株式會社，6、R.H.Ewell,J.M.Harrison,L.Berg:IndEngChem36,871(1944)]，具體的I.O.B.值=該油分的無機性值/其油分的有機性值此外，頭皮頭發(fā)用組合物是指，如其字面含義，為頭皮或頭發(fā)用的組合物，作為其代表性的制品形式例如有養(yǎng)發(fā)劑，但并不僅限于此，脫毛劑、染發(fā)劑、毛發(fā)脫色劑等毛發(fā)處理用組合物；香波、護發(fā)香波等洗發(fā)劑組合物；護發(fā)素、護理素(treatment)等護發(fā)用組合物；還有防白發(fā)劑等的制品形式。更進一步，還可以有經(jīng)頭部以外皮膚吸收的一般化妝品，疫苗及基因制劑等醫(yī)藥品的形式。下面就本發(fā)明的實施方案進行說明。A．本測定法1本測定法1-1本測定法1-1是指本測定法離體方案的一種作為本測定法1-1所用的皮膚模型，可以使用模型動物的皮膚、也可以是細(xì)胞等構(gòu)成的皮膚重構(gòu)物。作為皮膚模型提供源的模型動物沒有特別的限定，豬、人、牛、小鼠、大鼠等都可作用。但是，本測定法因為要研究藥劑通過毛孔向毛囊組織的滲透性，因而通常必須使用有毛動物。所以，無毛化突變體等通常不宜作為上述的模型動物。此外，本測定法1-1通常采用適用于人的藥物篩選法作為定量方法，因而模型動物的皮膚優(yōu)選盡可能與人相近。因此，除人以外，優(yōu)選用豬作為模型動物。本測定法1-1中的“機體模似狀態(tài)”是指可以把皮膚看作為機體一部分時存在的狀態(tài)，只要滿足這個條件就行，其它沒有特別的形式限定。例如，如后述實施例，可采用將皮膚模型在膠原凝膠上固定等的方法。這樣，將藥物等被檢物作用于保持機體模似狀態(tài)的皮膚模型，定量從其皮膚真皮層取出的毛囊組織中吸附的被檢物量，以此作為被檢物經(jīng)毛吸收性的指標(biāo)。這些藥物等被檢物的作用條件可根據(jù)被檢物的種類和目的等進行自由設(shè)定。通常，在和人體溫相近的37℃附近在根據(jù)預(yù)定的被檢物使用形式相應(yīng)的時間內(nèi)進行溫育。測定被檢物吸收量的部位限于皮膚真皮層，這是因為，對于皮膚角質(zhì)層和表皮層，在毛囊組織周圍有表皮組織和皮脂腺等雜質(zhì)，不能正確地測定被檢物的吸收量。另外，被檢的吸收量的測定方法沒有特別限定，例如有液相色譜法(含高效液相色譜法)和使用熒光標(biāo)記抗體的熒光抗體法、質(zhì)量分析、放射性同性素法等，考慮到簡便的原因，優(yōu)選使用上述的液相色譜法。這樣測得的被檢物毛囊組織吸收量越多，可判定這種被檢物的經(jīng)毛吸收性越好。而根據(jù)以往的定性方法，只能得到被檢物是否具有經(jīng)毛吸收性的信息。此外，在定量測定上述的滲透到毛囊組織的藥物等的被檢物量同時，也定量測定滲透到角質(zhì)層、表皮、真皮等其它的皮膚組織的被檢物量，以這些定量值作為經(jīng)毛吸收和透皮吸收的被檢物量的指標(biāo)而相關(guān)聯(lián)，也可以測定被檢物的皮膚吸收。這樣，根據(jù)本測定法1-1就可測定被檢物的皮膚吸收。本測定法1-2在本測定法1-2中，藥物等被檢物與人頭皮作用的方法可根據(jù)被檢物的性質(zhì)和預(yù)定的使用形式進行自由選擇。此外，與被檢物作用后的被檢者的毛囊組織能確保作為拔下的頭發(fā)的毛干和/或外毛根鞘。即，測定被檢者頭發(fā)皮下部份的毛干和/或外毛根鞘吸附的被檢物量，可將此吸收量作為被檢物經(jīng)毛吸收性的指標(biāo)。還有，被檢物吸收量的測定可以和本測定法1-2一樣進行。這樣，根據(jù)本測定法1-2，可測定被檢物的皮膚吸收。本測定法1-2因為要直接拔去人的毛發(fā)，因而評價很多種被檢物的經(jīng)毛吸收時可能并不適用。因此，經(jīng)毛吸收性的第一次的篩選采用本測定法1-1，這樣，對于確認(rèn)了經(jīng)毛吸收性的被檢物，作為此被檢物的最終評價手段使用本測定法1-2。B．關(guān)于本測定法2本測定法2使用的人工皮脂是基于天然的皮脂成分調(diào)制而成的，主要為油脂類的混合物。作為人工皮脂里含有的油分，例如有甘油三酯、碳原子數(shù)14～18的飽和或不飽和脂肪酸、角鯊烯、角鯊?fù)?、膽固醇、碳原子?shù)18～72的蠟酯等，但并不僅限于此。人工皮脂具體處方的一例記載于后述實施例中。還有，為了正確評價物質(zhì)的移動性，人工皮脂優(yōu)選為流動狀態(tài)。此流動狀態(tài)例如使用攪拌機和磁力攪拌器，攪拌人工皮脂，很容易獲得。人工皮脂與除去真皮層的皮膚類似的薄膜(以下也單獨稱為“薄膜”)的一面相接觸，正好可形成與人體皮膚表面附近相似的狀態(tài)。還有，將預(yù)定的皮膚構(gòu)造作為皮膚表層，因為作為皮脂供給源皮脂腺的開口部存在于皮膚表層。所以，與藥物等被檢物相接觸的薄膜表面，因為要保持與皮膚相同的接觸狀態(tài)，優(yōu)選與皮膚表層相似。具體地說，作為基底膜，選用確認(rèn)無表面反應(yīng)性的薄膜，如單層硅酮膜、聚碳酸乙二醇酯膜、纖維素膜、其它高分子膜等，對于這些基底膜的一側(cè)表面，使之成為和角質(zhì)層相類似狀態(tài)的方法例如實施角蛋白處理、粉體處理等，此處理面建立角質(zhì)層，使角質(zhì)層在預(yù)定側(cè)(下面稱為角質(zhì)層側(cè))形成，可用于本發(fā)明。這樣，人工皮脂在表皮層側(cè)(角質(zhì)層側(cè)的對側(cè))相接觸的薄膜的角質(zhì)層側(cè)同被檢物接觸，對于此被檢物向人工皮脂的轉(zhuǎn)移程度，例如可以將單位時間內(nèi)被檢物向人工皮脂的轉(zhuǎn)移量作為人工皮脂中被檢物的存在量檢測，以此存在量為指標(biāo)，評價被檢物的皮膚轉(zhuǎn)移性。人工皮脂中被檢物的定量方法沒有特別限制，可根據(jù)被檢物的性質(zhì)等從現(xiàn)有的方法中自由選擇。例如，可以使用高效液相色譜、薄層層析、質(zhì)量分析等。本測定法2為了和現(xiàn)實藥物等使用的環(huán)境想類似，通常優(yōu)選將薄膜的角質(zhì)層側(cè)作為開放系統(tǒng)。當(dāng)然，根據(jù)預(yù)定藥物等的使用形式，也可以使薄膜角質(zhì)層側(cè)成為封閉系統(tǒng)(例如密閉狀態(tài)并要促進藥物滲透作用時)。本測定法2具體地優(yōu)選實施下面的形式。即，本發(fā)明者為了進行本測定法2，提供了至少包含以下1-3要素的評價裝置(以下也稱本裝置)。①封入部，其中設(shè)有開口部，此開口部設(shè)有以可能將薄膜以可脫落的狀態(tài)被覆固定的固定手段的全部或一部分，以封入人工皮脂。②被覆固定于封入部分開口部的類皮膚表層薄膜。③封入部封入的人工皮脂。就圖對本實驗裝置進行說明。圖1為本實驗裝置的一種實施方案。在圖1(1)中，封入部11為一面開口、一面為底的筒狀容器。在其開口部111的頂端部，沿著其形成的圓周，向外側(cè)突出。封入部11，應(yīng)能容易地觀察其內(nèi)部的狀態(tài)，優(yōu)選使用透明的材料。此外，為了能從外側(cè)容易地取出人工皮脂，優(yōu)選使用插入拔出注射器等針狀物也不會使其內(nèi)容物輕易漏出的材料。薄膜12的一面121為經(jīng)角蛋白等處理的處于和皮膚表層類似狀態(tài)的、確認(rèn)無表面反應(yīng)性的薄膜。本實驗裝置使用時，將薄膜12被覆固定于其封入部11的開口端111(通常于封入部外側(cè)在一面121，向另一面122向內(nèi)側(cè)被覆固定)。在封入部11，以可能固定手段的全部或一部分在開口端111上以可脫落的狀態(tài)被覆固定薄膜，在此實施形式中，以薄膜固定器件13作為主要的固定手段。薄膜固定部件13設(shè)計為兩端為開口，并且一邊的開口部131的頂端部往形成圓周的外部突出，能和封入部11的開口部111的頂端部相結(jié)合的結(jié)構(gòu)。此封入部11的開口部111的項端部和薄膜固定部13一側(cè)的開口部131頂端部的構(gòu)造只要是能相互結(jié)合，并沒有特殊限定，例如，相互的頂端部可設(shè)計為能相互嵌合的凹凸結(jié)構(gòu)。此外，為了加強封入部11與薄膜固定部13結(jié)合時的結(jié)合性和密封性，可使用任何辦法。在圖1(1)中，薄膜12的一面121與薄膜固定部13之間夾入墊片14(墊片14的材料一般為硅橡膠、合成橡膠、天然橡膠等橡膠類材料，硅橡膠因為不易腐蝕，很適用)，以[薄膜固定部件13-墊片14-薄膜12-封入部11]的狀態(tài)固定，可使上述結(jié)合性和密封性升高。另外，在本裝置中，為了穩(wěn)定地固定[薄膜固定部件13-墊片14-薄膜12-封入部11]的狀態(tài)，使用了固定部件15[參照圖1(2)]。固定部件15由長度(Φ)〔比“薄膜固定部13-墊片14-薄膜12-封入部11”狀態(tài)的接合部的厚度(φ)稍長〕的由4根大致一樣長的支持棒(151a,b,c,d)支撐的保持相互平行位置的2塊板狀材料(152·153)構(gòu)成〔固定部件15可設(shè)計能調(diào)節(jié)長度Φ的機構(gòu)。例如在支持棒(151a,b,c,d)上，以可調(diào)節(jié)長度Φ的螺栓構(gòu)造，設(shè)定長度調(diào)節(jié)機構(gòu)，可以調(diào)節(jié)所需的長度〕。板狀材料152·153設(shè)計為在相對位置比開口部111和閉口部131的外緣要大、可以在此閉口部嵌入的凹形形狀。在具有此結(jié)構(gòu)的固定部15上設(shè)定的凹構(gòu)造中，嵌入接合部100，進一步往一定長度支持棒上的固定部15上設(shè)定的空隙內(nèi)，插入粗箭頭所指方向，依靠2塊板狀材料152·153上棒狀材料(151a,b,c,d)的支持力，可以維持“薄膜固定部件13-墊片14-薄膜12-封入部11”的層疊狀態(tài)。毫無疑問，可以用其它的層疊狀態(tài)穩(wěn)定化手段代替此形式的固定部件15，例如使用夾子夾住進行固定。第1圖(2)為使用本裝置10的一種形式。墊片14插入封入部11與薄膜固定部13中，形成[薄膜固定部件13-墊片14-薄膜12-封入11]，薄膜12經(jīng)過上述處理過的面121向上，將人工皮脂被覆固定于封入部11的開口部111，面122與封入部11內(nèi)的人工皮脂相接觸。封入部11的底部配置有磁力攪拌子，使人工皮脂能成為流動狀態(tài)。另外，上述的層疊固定狀態(tài)用上述的固定部件15保持。被檢物從薄膜固定部件13的另一端開口部132開始，與薄膜12的面121接觸，通過研究此被檢物由薄膜12介導(dǎo)向封入部11封入的人工皮脂的轉(zhuǎn)移程度，可考查被檢物的皮脂轉(zhuǎn)移性。還有，本發(fā)明評價方法在封閉體系進行時，一端的開口部132可用蓋進行封閉。此被檢物的人工皮脂轉(zhuǎn)移程度，可以通過使用注射器17抽樣分析得到。這樣，根據(jù)本測定法2，可測定被檢物的皮膚吸收。B．關(guān)于本組合物如后述實施例所示，根據(jù)本測定法1、2，發(fā)現(xiàn)I.O.B.值為0.06～4.0的油分具有藥物等的經(jīng)毛吸收促進效果以及皮脂轉(zhuǎn)移促進效果。即，在養(yǎng)發(fā)劑等形式的頭皮頭發(fā)用組合物中，通過配合I.O.B.值為0.06～4.0油分的1種或2種以上，能促進養(yǎng)發(fā)成分等通過毛孔滲透到靶位毛囊組織。I.O.B.值小于0.06或者大于4.0時，則很難認(rèn)定具有所期望的經(jīng)毛吸收促進和皮脂轉(zhuǎn)移促進效果。具體地說，上述I.O.B.值為0.06～4.0的油分，有機性值為100～750，且無機性值為50～400，特別優(yōu)選無機性值為100～400的油分。另外，I.O.B.值為0.06-4.0的油分，優(yōu)選常溫下為液態(tài)的、以碳數(shù)6～18的烴為基本骨架的烴衍生物(這類烴衍生物優(yōu)選常溫下液態(tài)的兩性物質(zhì)滿足“常溫下為液體”條件的烴衍生物，其總碳數(shù)多數(shù)為24以下)。作為烴衍生物的種類例如有脂肪酸、醇、酰胺和酯等，但并不僅限于此。優(yōu)選醇或脂肪酸。這些油分中，記載的優(yōu)選具體例子，例如有月桂醇(I.O.B.值為0.41有機性值為240、無機性值為100)、月桂酸(I.O.B.值為0.68有機性值為220、無機性值為150)、月桂酸乙醇胺酰胺(I.O.B.值為1.25有機性值為240、無機性值為300)、月桂酸二乙醇胺酰胺(I.O.B.值為1.53有機性值為260、無機性值為400)、月桂酸單甘油酯(I.O.B.值為0.92有機性值為280、無機性值為260)、月桂酸二甘油酯(I.O.B.值為0.32有機性值為500、無機性值為160)、油醇(I.O.B.值為0.28有機性值為360、無機性值為102)、油酸(I.O.B.值為0.45有機性值為340、無機性值為152)、油酸乙醇胺酰胺(I.O.B.值為0.83有機性值為360、無機性值為302)、油酸二乙醇胺酰胺(I.O.B.值為1.05有機性值為380、無機性值為402)、油酸單甘油酯(I.O.B.值為0.66有機性值為400、無機性值為262)、油酸二甘油酯(I.O.B.值為0.30有機性值為740、無機性值為222)、異硬脂醇(I.O.B.值為0.29有機性值為350、無機性值為100)、異硬脂酸(I.O.B.值為0.45有機性值為330、無機性值為150)、異硬脂酸乙醇胺酰胺(I.O.B.值為0.86有機性值為350、無機性值為300)、異硬脂酸二乙醇胺酰胺(I.O.B.值為1.08有機性值為370、無機性值為400)、異硬脂酸單甘油酯(I.O.B.值為0.66有機性值為390、無機性值為260)、異硬脂酸二甘油酯(I.O.B.值為0.30有機性值為730、無機性值為220)、硬脂醇(I.O.B.值為0.27有機性值為360、無機性值為100)、硬脂酸(I.O.B.值為0.44有機性值為340、無機性值為150)、硬脂酸乙醇胺酰胺(I.O.B.值為0.83有機性值為360、無機性值為300)、硬脂酸二乙醇胺酰胺(I.O.B.值為1.05有機性值為380、無機性值為400)、硬脂酸單甘油酯(I.O.B.值為0.67有機性值為390、無機性值為260)、硬脂酸二甘油酯(I.O.B.值為0.30有機性值為740、無機性值為220)或芐醇(I.O.B.值為0.96有機性值為120、無機性值為115)等。其中更優(yōu)選月桂醇、月桂酸、異硬脂酸、異硬脂醇、異硬脂酸單甘油酯和異硬酯酸乙醇胺酰胺，特別優(yōu)選異硬脂醇。另外，萜類雖不一定符合上述[I.O.B.值為0.06～4.0]的條件，但確認(rèn)其有優(yōu)良的經(jīng)毛吸收促進作用。特別是，樟腦在萜類中具有最優(yōu)良的經(jīng)毛吸收促進作用。本組合物是至少由異硬酯醇等I.O.B.值為0.06～4.0的油分和作為促進經(jīng)毛吸收及皮脂轉(zhuǎn)移的成分(樟腦等萜類作為經(jīng)毛吸收成分可以單獨或與I.O.B.值為0.06～4.0的油分共同配合使用)配合而成的，根據(jù)其它的目的也可以配入相應(yīng)的成分。例如，異硬脂醇可作為油劑、藥物的溶劑、皮脂溶解劑等配合使用，樟腦等萜類可作為清涼劑、血流促進劑等配合使用。本組合物中I.O.B.值為0.06～4.0油分的配比量依本組合物的形態(tài)，此外也因目的而異，無特殊限制。本組合物采用養(yǎng)發(fā)劑的形式時，上述成分至少發(fā)揮經(jīng)毛吸收促進的機制，或者，要發(fā)揮藥物的皮脂轉(zhuǎn)移促進機制時，大致占組合物的1ppm～20質(zhì)量％，優(yōu)選0.01～5質(zhì)量％的范圍。本組合物除了I.O.B.值為0.06-4.0的油分外，可根據(jù)其它具體形式配合藥效成分和基質(zhì)成分。例如，本組合物為養(yǎng)發(fā)劑時，作為藥效成分，例如有獐牙菜提取物、風(fēng)箱樹素、維生素E類、γ-硫胺、懸鉤子提取物等血流促進劑；辣椒酊、生姜酊、斑蝥酊、煙酸芐酯等局部刺激劑；以各種維生素類和氨基酸類為代表的營養(yǎng)劑；雌二醇、乙炔基雌二醇等雌性激素；泛酸類、胎盤提取物、尿囊素、感光素301等毛囊組織激活劑；甘氨酰視黃酸、甘氨酰甘草次酸等消炎藥。作為組合物必需成分配合的I.O.B.值為0.06～4.0的油分，能夠提高這些藥效成分的經(jīng)毛吸收和皮脂轉(zhuǎn)移，提高向毛囊組織的滲透性。其它可配合眾所周知的成分，如保濕劑、角質(zhì)溶解劑、清涼劑、油分、表面活性劑、硅酮、紫外線吸收劑、香料、水等。即，如圖2所示，制好2×2cm的微豬皮膚標(biāo)本10(保持角質(zhì)層11，表皮12，真皮13)，固定于膠原凝膠上，形成模擬機體的狀態(tài)。在含有毛孔14的皮膚標(biāo)本上直徑1.5cm的范圍(涂有硅潤滑油的檢測環(huán)內(nèi))涂上20μl的被檢試樣。保持此狀態(tài)，于37℃放置16小時后，洗凈皮膚標(biāo)本10，將其分離為角質(zhì)層11、表皮12和真皮13。在這些皮膚分離層中拔出真皮13的毛囊組織15，用液相色譜〔NANOSPACE(株式會社資生堂制造)、流動相(CH3CN∶H2O=3∶7)、檢測波長210nm〕按單位重量的吸收量測定毛囊組織里泛基乙基醚的量。還有，微豬的皮膚標(biāo)本10是以微豬軀干上方及軀干下方的皮膚制成的(n=3)。精度研究的結(jié)果如圖3所示(第3圖的縱軸為泛基乙基醚的毛囊組織吸收量)。根據(jù)圖3，本測定法1-1所得結(jié)果，微豬的皮膚部份幾乎無波動，可認(rèn)為根據(jù)本測定法1-1能夠得到具有優(yōu)良重現(xiàn)性的數(shù)據(jù)。2．以本測定法1-1進行成分評價1)成分評價實驗調(diào)制下述表1所示的被測試樣〔對照制劑(乙醇制劑)和5％異硬脂醇制劑〕。表1<tablesid="table1"num="001"><table>配合成分(質(zhì)量％)對照制劑5％異硬脂醇制劑乙醇89.584.2硬化蓖麻油環(huán)氧乙烷(40摩爾)--0.1異硬脂醇--5.0異硬脂酸--0.2離子交換水10.010.0泛基乙基醚0.50.5</table></tables>以上述精度評價實驗相同的方法研究此二種被檢試樣(對照制劑和異硬脂醇制劑)的經(jīng)毛吸收量(實驗數(shù)n=5，微豬的軀干上方與軀干下方的皮膚為標(biāo)本)。結(jié)果如圖4所示。由圖4可見，使用異硬脂醇使泛基乙基醚的毛囊組織吸收量表現(xiàn)出具有顯著性的增大。同時，以上述相同的液相色譜法研究所用的各種皮膚標(biāo)本角質(zhì)層〔圖5(1)〕、表皮〔圖5(2)〕和真皮〔圖5(3)〕的泛基乙基醚吸收量。由圖5的結(jié)果可見，真皮的吸收量有一定的增加(但絕對量少)，而角質(zhì)層與表皮的吸收量減少。可判定異硬酯醇對泛基乙基醚的經(jīng)毛吸收具有特異的促進作用，但不能確定是否具有促透皮吸收作用。另外，本實驗可見，經(jīng)毛吸收為與透皮吸收不同的皮膚吸收指標(biāo)，同時，圖4所示結(jié)果為毛囊組織中被檢物的吸附量，圖5所示結(jié)果為微豬皮膚的其它皮膚組織(角質(zhì)層、表皮及真皮)中被檢物的吸附量。以這些定量值作為經(jīng)毛吸收和透皮吸收的被檢物量的指標(biāo)，可見能夠測定被檢物的皮膚吸收。2)成分評價實驗2如下述表2所示，調(diào)制含有I.O.B.值為0.06～4.0油份的被檢試樣。表2以上述精度研究試驗相同方法研究這6種被檢試樣中泛基乙基醚的經(jīng)毛吸收量(實驗數(shù)n=6，以微豬的軀干上方與軀干下方的皮膚為標(biāo)本)。結(jié)果如圖6所示。根據(jù)圖6，和對照制劑相比，含有I.0.B.值為0.06～4.0油分能夠使泛基乙基醚的毛囊組織吸收量增大。特別是異硬脂醇制劑和異硬脂酸制劑中泛基乙基醚的毛囊組織吸收量增大。3)成分評價實驗3作為I.O.B.值為0.06～4.0的油分，例如選擇月桂醇、月桂酸、月桂酸乙醇胺酰胺、月桂酸二乙醇胺酰胺、月桂酸單甘油脂、月桂酸二甘油酯、油醇、油酸、油酸乙醇胺酰胺、油酸二乙醇胺酰胺、油酸單甘油酯、油酸二甘油酯、異硬酯醇、異硬脂酸、異硬脂酸乙醇胺酰胺、異硬脂酸二乙醇胺酰胺、異硬脂酸單甘油酯、異硬脂酸二甘油酯、硬脂醇、硬脂酸、硬脂酸乙醇胺酰胺、硬脂酸二乙醇胺酰胺、硬脂酸單甘油酯和硬脂酸二甘油酯，調(diào)制含有其的被檢試樣。被檢試樣的處方依照上述成分評價實驗2使用的處方。即對照制劑和成分評價實驗2中使用的相同，各種油分各含1％，對照制劑中99％乙醇的含量為87％。以上述精度研究實驗相同的方法研究這24種被檢試樣中泛基乙基醚的經(jīng)毛吸收量(實驗數(shù)n=5，以微豬的軀干上方和軀干下方的皮膚為標(biāo)本)。結(jié)果如圖7所示。從圖7可見，與對照制劑相比，I.O.B.值為0.06～4.0的油分一般能增大泛基乙基醚的毛囊組織吸收量。本測定法1-2為了確認(rèn)上述的本測定法1-1結(jié)果的合理性，對人的毛發(fā)實施測定法1-2，研究異硬脂醇的經(jīng)毛吸收促進效果。在30名男性志愿者的頭部，以1cm2/0.5ml的比率在頭皮上涂上被檢試樣(上述的成分評價試驗1的被檢試樣一樣，泛基乙基醚量都為1％)，保持16個小時后，洗凈頭皮，每人20根的比例，撥下應(yīng)用了被檢試樣的頭發(fā)。切取頭發(fā)的外發(fā)根鞘，以上述同樣的液相色譜法測定外發(fā)根鞘部泛基乙基醚的吸收量(20根頭發(fā))。結(jié)果如圖8所示。從結(jié)果可見，在本測定法1-2中，異硬脂醇能增大泛基乙基醚的毛囊組織吸收量，即泛基乙基醚具有促進經(jīng)毛吸收的作用。3．同透皮吸收劑的比較研究實驗本實驗是將已知的特定透皮吸收劑氧化胺作為比較試劑，研究本測定法1-1的傾向。具體地說，用第3表處方所示的被檢試樣，同樣地進行本測定法1-1試驗，分別以液相色譜法(條件同上)測定β-甘氨酰視黃酸和米諾地爾的毛囊組織吸收量。表3結(jié)果如圖9[圖9(1)β-甘氨酰視黃酸的毛囊組織吸收量、圖9(2)米諾地爾的毛囊組織吸收量]所示。根據(jù)結(jié)果，異硬脂醇制劑與氧化胺相比，有明顯的經(jīng)毛吸收促進作用，此外，還顯示透皮吸收和經(jīng)毛吸收是完全不同的現(xiàn)象。4．清涼劑的研究試驗本實驗，使用作為清涼劑的各種已知的萜類化合物為被檢試樣(配比如表4所示)，研究關(guān)于本測定法的傾向。表4<tablesid="table6"num="006"><table>對照制劑樟腦制劑薄荷醇制劑桉葉油制劑泛基乙基醚0.50.50.50.5乙醇71707070離子交換水28.528.528.528.5樟腦-1--薄荷醇--1-桉葉油---1總計100100100100</table></tables>圖10所示結(jié)果為上述的被檢試樣以本測定法1-2進行評價的結(jié)果。從圖中可見，清涼劑中只有樟腦促進泛基乙基醚的經(jīng)毛吸收。此外，圖11[圖11(1)泛基乙基醚的毛囊組織吸收量、圖11(2)泛基乙基醚的表皮和真皮的吸收量]顯示上述被檢試樣用本測定法1-1評價的結(jié)果。也可從圖中得到圖10的結(jié)果。本測定法2使用上述的本裝置10，具體地對米諾地爾制劑的皮脂轉(zhuǎn)移性進行評價。1、米諾地爾制劑是按表5所示處方的調(diào)制的2％米諾地爾制劑，取20μl進行實驗。表5<tablesid="table7"num="007"><table>乙醇二丙二醇C8單甘油酯乳酸乙酯鯨蠟醇硬脂醇混合物異硬脂醇99％乙醇883882.782.782.782.7硬化蓖麻油環(huán)氧乙烷(60摩爾)--0.10.10.10.1異硬脂酸--0.20.20.20.2離子交換水101010101010二丙二醇-50-----丙二醇-------異硬脂醇------5鯨蠟醇硬脂醇混合物-----5-乳酸乙酯---5--C8單甘油酯--5---米諾地爾222222總計100100100100100100</table></tables>2、所用人工皮脂處方如下配合成分配合量(質(zhì)量％)三油酸甘油酯40.0棕櫚油酸26.0蠟酯20.0角鯊?fù)?0.0棕櫚酸2.0膽固醇2.0100.0將此人工皮脂11.5ml裝入封入部11中。3、作為封入部11，為了能用注射器吸取人工皮脂，采用11.5ml容量的Franz池(Franzcell)。4、作為薄膜12，使用一面經(jīng)角蛋白處理過的單層硅酮膜。具體條件為如上述1-4的設(shè)定，實驗溫度設(shè)定為37℃，以24小時米諾地爾向人工皮脂的轉(zhuǎn)移量作為人工皮脂中米諾地爾的量，進行時程研究。對于米諾地爾的定量，每到測定時間，用帶針頭的注射器吸取0.5ml，吸取液進行攪拌，加入1.0ml的甲醇，靜置后，4000rpm離心處理5分鐘。吸取分離后的甲醇層0.5ml，用2倍量的甲醇稀釋，以此作為試樣，用高效液相色譜〔SHISEIDONanospace，柱為capselpack(ヵプセルパック)C18，洗脫劑為CH3CN∶H2O=20∶80〕定量米諾地爾。結(jié)果如圖12所示。可以看出，異硬脂醇能增加米諾地爾的皮脂轉(zhuǎn)移性。4、本組合物的處方例下面記載了典型的本組合物(養(yǎng)發(fā)劑-香波)的處方例，均以常法調(diào)制而成。處方例1養(yǎng)發(fā)劑配合成分配合量(質(zhì)量％)泛基乙基醚0.5β-甘氨酰視黃酸0.5獐牙菜提取物糊0.5煙酰胺0.5維生素E乙酸酯0.5乙醇70.0離子交換水21.41異硬脂醇5.0月桂基二甲基胺氧化物油酸鈉0.49硬化蓖麻油環(huán)氧乙烷(40mol加成物)0.5處方例2香波配合成分配合量(質(zhì)量％)椰子油脂肪酸酰基甲基?；撬徕c10.0椰子油脂肪酸酰胺丙基甜菜堿5.0甘油1.0檸檬酸1.0異硬脂醇5.0牛磺酸1.5甲基?；撬?.5陽離子化纖維素0.5香料適量離子交換水余量處方例3護發(fā)素·護理素配合成分配合量(質(zhì)量％)氯化硬脂基三甲基銨1.0異硬脂醇3.0棕櫚酸1.0L-谷胺酰胺0.1精制水余量處方例4護發(fā)香波配合成分配合量(質(zhì)量％)N-椰油基-N-甲基?；撬徕c7.0椰子油脂肪酸酰胺丙基甜菜堿7.0硬脂酸二甲基氨基丙酰胺0.1異硬脂醇0.25精制水余量處方例5防白發(fā)劑配合成分配合量(質(zhì)量％)95％乙醇55.0秦椒提取物5.0煙酰胺0.5日柏醇0.21,3-丁二醇1.5硬化蓖麻油環(huán)氧乙烷(60mol加成物)1.0異硬脂醇5.0琥珀酸適量香料適量色素適量精制水余量處方例6脫毛劑配合成分配合量(質(zhì)量％)95％乙醇55.0巰基乙酸鈣5.01,3-丁二醇1.5硬化蓖麻油環(huán)氧乙烷(60mol加成物)1.0異硬脂醇5.0琥珀酸適量香料適量色素適量根據(jù)本發(fā)明，可以簡便、準(zhǔn)確地定量被檢物的經(jīng)毛吸收性以至皮脂轉(zhuǎn)移性，發(fā)現(xiàn)簡便、準(zhǔn)確測定皮膚吸收的方法，以此提供了促進藥物等的經(jīng)毛吸收以至皮脂轉(zhuǎn)移、使藥物到達養(yǎng)發(fā)劑等的靶點毛囊組織的方法。權(quán)利要求1．皮膚吸收測定法，是將毛囊組織中滲透的被檢物量作為經(jīng)毛吸收被檢物量的指標(biāo)而定量被檢物的經(jīng)毛吸收量，從而測定被檢物的皮膚吸收。2．根據(jù)權(quán)利要求1記載的皮膚吸收測定法，其中毛囊組織中滲透的被檢物量按以下方法定量，將被檢物作用于保持機體模擬狀態(tài)的皮膚模型，由此皮膚的真皮摘出毛囊組織，測定毛囊組織上被檢物的吸附量。3．皮膚吸收測定法，是在按權(quán)利要求2記載的皮膚吸收測定法定量測定毛囊組織中被檢物的吸附量的同時，定量測定皮膚模型中其它皮膚組織的被檢物的吸附量，以上述定量值作為經(jīng)毛吸收和透皮吸收的被檢物量的指標(biāo)并相關(guān)，從而測定被檢物的皮膚吸收。4．根據(jù)權(quán)利要求1記載的皮膚吸收測定法，其中毛囊組織中滲透的被檢物量按以下方法定量，測定從被檢物作用的人頭皮回收的發(fā)根吸附的被檢物量。5．皮膚吸收測定法，使薄膜一側(cè)表面和人工皮脂接觸，使與皮膚表層類似的薄膜另一側(cè)表面和被檢物接觸，以此被檢物向人工皮脂的轉(zhuǎn)移程度為指標(biāo)，通過評價被檢物的皮脂轉(zhuǎn)移性，測定被檢物的皮膚吸收。6．根據(jù)權(quán)利要求5記載的皮膚吸收測定法，薄膜另一側(cè)表面為開放體系。7．根據(jù)權(quán)利要求5或6記載的皮膚吸收測定法，其中人工皮脂為流動狀態(tài)。8．根據(jù)權(quán)利要求5～7任一項記載的皮膚吸收測定法，其中薄膜為表面用角蛋白處理的單層硅酮膜，而且薄膜的角蛋白處理面和被檢物接觸。9．皮膚吸收測定裝置，用于進行權(quán)利要求5～8任一項記載的皮膚吸收測定法，至少含有以下要素①封入部，其中設(shè)有開口部，此開口部設(shè)有以可能將薄膜以可脫落的狀態(tài)被覆固定的固定手段，以封入人工皮脂的封入部；②被覆固定于封入部分開口部的類皮膚表層薄膜；③封入部封入的人工皮脂。10．頭皮頭發(fā)用組合物，含有I.O.B.值為0.06～4.0的油分作為經(jīng)毛吸收促進成分。11．根據(jù)權(quán)利要求10記載的頭皮頭發(fā)用組合物，I.O.B.值0.06～4.0的油分為有機性值100～750且無機性值50～400的油分。12．根據(jù)權(quán)利要求10記載的頭皮頭發(fā)用組合物，I.O.B.值0.06～4.0的油分為有機性值100～750且無機性值100～400的油分。13．根據(jù)權(quán)利要求10記載的頭皮頭發(fā)用組合物，I.O.B.值0.06～4.0的油分為兩親性物質(zhì)。14．根據(jù)權(quán)利要求10記載的頭皮頭發(fā)用組合物，I.O.B.值0.06～4.0的油分為常溫下液態(tài)、碳原子數(shù)6～24的兩親性物質(zhì)。15．根據(jù)權(quán)利要求10記載的頭皮頭發(fā)用組合物，I.O.B.值0.06～4.0的油分為以碳原子數(shù)6～18的烴為基本骨架的烴衍生物。16．根據(jù)權(quán)利要求15記載的頭皮頭發(fā)用組合物，其中的烴衍生物為脂肪酸、醇、酰胺或酯。17．根據(jù)權(quán)利要求10記載的頭皮頭發(fā)用組合物，I.O.B.值0.06～4.0的油分為選自月桂醇、月桂酸、月桂酸乙醇胺酰胺、月桂酸二乙醇胺酰胺、月桂酸單甘油酯、月桂酸二甘油酯、油醇、油酸、油酸乙醇胺酰胺、油酸二乙醇胺酰胺、油酸單甘油酯、油酸二甘油酯、異硬脂醇、異硬脂酸、異硬脂酸乙醇胺酰胺、異硬脂酸二乙醇胺酰胺、異硬脂酸單甘油酯、異硬脂酸二甘油酯、硬脂醇、硬脂酸、硬脂酸乙醇胺酰胺、硬脂酸二乙醇胺酰胺、硬脂酸單甘油酯和硬脂酸二甘油酯的1種或2種以上油分。18．頭皮頭發(fā)用組合物，含有異硬脂醇和/或樟腦作為經(jīng)毛吸收促進成分。19．頭皮頭發(fā)用組合物，含有異硬脂醇作為皮脂轉(zhuǎn)移促進成分。20．根據(jù)權(quán)利要求1～19任一項記載的頭皮頭發(fā)用組合物，其中頭皮頭發(fā)用組合物的制品形式為養(yǎng)發(fā)劑。21．根據(jù)權(quán)利要求10～19任一項記載的頭皮頭發(fā)用組合物，其中頭皮頭發(fā)用組合物的制品形式為防白發(fā)劑、香波、護發(fā)劑、護發(fā)香波和護理素等形式。22．含有異硬脂醇的養(yǎng)發(fā)劑組合物。23．含有異硬脂醇的洗發(fā)用組合物。24．根據(jù)權(quán)利要求23記載的洗發(fā)用組合物，其中洗發(fā)用組合物的制品形式為香波或護發(fā)香波。25．含有異硬脂醇的脫毛劑。26．含有異硬脂醇的防白發(fā)劑。27．根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項的皮膚吸收測定法，經(jīng)毛吸收為經(jīng)毛囊吸收。全文摘要本發(fā)明提供了皮膚吸收測定法(1)通過定量毛囊組織浸潤的被檢物量測定被檢物的皮膚吸收;和(2)通過定量被檢物透過與皮膚表層類似的薄膜向與薄膜接觸的人工皮脂的轉(zhuǎn)移而測定被檢物的皮膚吸收。由此判定了I.O.B.值為0.06～4.0的油分對從水溶性物質(zhì)到脂溶性物質(zhì)廣泛極性范圍的物質(zhì)發(fā)揮優(yōu)良的經(jīng)毛吸收促進作用至皮脂轉(zhuǎn)移性,提供了含有此油分的皮膚滲透性優(yōu)良的頭皮頭發(fā)用組合物。文檔編號C12Q1/00GK1303015SQ00131969公開日2001年7月11日申請日期2000年10月30日優(yōu)先權(quán)日1999年10月29日發(fā)明者武岡永里子,高本隆一,梁木利男申請人:株式會社資生堂