一種提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法。它包括如下步驟：將黃芪的實(shí)生苗栽培，控制土壤的相對(duì)含水量，然后對(duì)所述土壤進(jìn)行連續(xù)控水處理，即能提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量。本發(fā)明成本較低，能提高蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量，同時(shí)能緩解我國西北部地區(qū)缺水的問題。
【專利說明】
一種提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法，具體涉及一種提高蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法，屬于中藥材規(guī)范化生產(chǎn)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]黃苗為豆科植物蒙古黃苗[Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]g!cI^^^p^[A.membranaceus(Fisch.)Bge.]的干燥根，藥食兼用，具有補(bǔ)氣升陽，斂疫生肌等功效。主要分布在我國西北部干旱和半干旱地區(qū)。由于野生資源的缺乏，目前主要依靠人工栽培，栽培黃芪占90%以上。但在栽培過程中由于水分控制不當(dāng)，常會(huì)導(dǎo)致黃芪產(chǎn)量和品質(zhì)的降低。
[0003]黃芪中有多種生物活性成分，有皂苷類、多糖類、黃酮類、氨基酸和微量元素及亞油酸等。其中毛蕊異黃酮葡萄糖苷為中華人民共和國藥典2015版規(guī)定的評(píng)價(jià)黃芪質(zhì)量的主要成分之一，其含量不得低于0.02 %。毛蕊異黃酮葡萄糖苷有抗心肌缺血、增強(qiáng)機(jī)體免疫力和護(hù)肝等重要醫(yī)療價(jià)值。然而，在正常條件下，黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量較低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法，本發(fā)明成本較低，能提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量，同時(shí)能緩解我國西北部地區(qū)缺水的問題。
[0005]本發(fā)明提供的提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法，包括如下步驟:將黃芪的實(shí)生苗栽培，控制土壤的相對(duì)含水量，然后對(duì)所述土壤進(jìn)行連續(xù)控水處理，即能提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量。
[0006]上述的方法中，所述黃芪可為蒙古黃芪；
[0007]所述黃芪的實(shí)生苗可為2?3年生，具體可為3年生。
[0008]上述的方法中，所述控水處理的土壤的相對(duì)含水量可為40%?45% ;
[0009]所述控水處理的時(shí)間可為30?60天，具體可為30天、60天或30?60天。
[0010]本發(fā)明中，所述黃芪栽培之后就進(jìn)行所述控水處理;所述控水處理步驟以后均按照本領(lǐng)域人員公知的步驟進(jìn)行正常田間管理。
[0011]上述的方法中，所述蒙古黃芪的實(shí)生苗的苗高為14.6?15.4cm。
[0012]上述的方法中，所述蒙古黃芪的栽培時(shí)間為3月?9月，具體可為5月?6月或5月?7月。
[0013]本發(fā)明中，所述蒙古黃芪的根中提取毛蕊異黃酮葡萄糖苷。
[0014]本發(fā)明中，所述蒙古黃芪的栽種受天氣影響不大，主要是其栽培土壤的相對(duì)含水量的影響，應(yīng)用時(shí)可適用于大棚內(nèi)，也同樣適用于田間的水分管理。
[0015]本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0016]本發(fā)明方法易于控制管理，成本較低，能提高蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量，同時(shí)能緩解我國西北部地區(qū)缺水的問題，使黃芪藥材的品質(zhì)得到提高，適合在黃芪的規(guī)范化種植中廣泛應(yīng)用。
【附圖說明】
[0017]圖1為蒙古黃芪中測(cè)定毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的超高效液相色譜圖；其中圖1(a)為毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品的超高效液相色譜圖(I為)，圖1(b)為本發(fā)明實(shí)施例1中測(cè)定毛蕊異黃酮葡萄糖苷的超高效液相色譜圖(I為毛蕊異黃酮葡萄糖苷)；
[0018]圖1(a)和圖1(b)中特征峰標(biāo)記如下:I為毛蕊異黃酮葡萄糖苷，2為芒柄花苷，3為毛蕊異黃酮，4為芒柄花素。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0020]下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0021]下述實(shí)施例中，蒙古黃芪的實(shí)生苗的培植:
[0022]選用的材料蒙古黃芪的種子采自內(nèi)蒙古武川縣，蒙古黃芪苗于2013年3月26日盆栽播種育苗，選取大小均勻、飽滿、無病蟲的黃芪種子用濃硫酸浸泡8min，在播種前準(zhǔn)備好的種子在4°C放置3天。于2013年3月30日，將催芽的種子移入花盆中(盆高25cm、直徑17cm)，每盆裝3400ml體積粟I丐土 ；
[0023]對(duì)黃芪進(jìn)行正常管理2年，每盆定植長(zhǎng)勢(shì)一致的植株5株，其后定期除草澆水。
[0024]第三年2015年5月25日開始，選擇正常的，平均苗高15.0 ± 0.4cm的黃芪苗進(jìn)行試驗(yàn)。
[0025]下述實(shí)施例中，盆栽土壤基本理化性質(zhì)為:pH7.5，有機(jī)質(zhì)20.78/1^，水解性氮114.7mg/kg，有效磷 22.8mg/kg，速效鉀 207mg/kg。
[0026]下述實(shí)施例中，土壤的相對(duì)含水量的控水處理采用稱重法，具體為每天下午6:00稱各個(gè)花盆重量，補(bǔ)充失去的水分。
[0027]實(shí)施例1、適度干旱脅迫對(duì)蒙古黃芪毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的影響
[0028]將三年生蒙古黃芪的實(shí)生苗，栽種在花盆中，移入塑料防雨大棚內(nèi)。每盆5株，共6盆。
[0029]控制各盆土壤的相對(duì)含水量40%?45%，連續(xù)進(jìn)行土壤相對(duì)含水量40%?45%的控水處理30天后，取黃芪根曬干、粉碎、過篩用于測(cè)定毛蕊異黃酮葡萄糖苷。
[0030]毛蕊異黃酮葡萄糖苷采用超高效液相色譜(UPLC)測(cè)定，BEH shield RP18色譜柱(2.1\100_，1.74111)。流動(dòng)相為乙腈(厶)和0.1%甲酸水(8)梯度洗脫0-41^11，25%厶?75%B;4-6min，35%A?65%B;6-8min，45%A?55%B;8-10min，55%A?45%B;10-12min，25%A?75%B;流速0.2mL/min;進(jìn)樣體積2μ1;注溫30°C。如圖1所示為本發(fā)明方法所得的蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定的UPLC圖。
[0031]本發(fā)明方法所得的蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量為0.91±0.02mg/g。與對(duì)比例I中所得的蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量為0.82±0.04mg/g相比，本發(fā)明蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量提高了10.97%。
[0032]實(shí)施例2、適度干旱脅迫對(duì)蒙古黃芪毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的影響
[0033]將三年生蒙古黃芪的實(shí)生苗，栽種在花盆中，移入塑料防雨大棚內(nèi)。每盆5株，共6盆。
[0034]控制各盆土壤的相對(duì)含水量40%?45%，連續(xù)進(jìn)行土壤相對(duì)含水量40%?45%的控水處理60天后，黃芪根曬干、粉碎、過篩用于測(cè)定毛蕊異黃酮葡萄糖苷。毛蕊異黃酮葡萄糖苷采用超高效液相色譜(UPLC)測(cè)定，BH! shield RP18色譜柱(2.I X 100mm，I.7μπι)。流動(dòng)相為乙腈(A)和0.1% 甲酸水(B)梯度洗脫0-4min，25%A?75%B;4-6min，35%A?65%Β;6-8min，45%A ?55%8;8-1011^11，55%八?45%8;10-1211^11，25%八?75%8;流速0.21111711^11;進(jìn)樣體積2μ1;注溫30°C。
[0035]本發(fā)明方法所得的蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量為0.93±0.01mg/g。與對(duì)比例2中所得的蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量為0.86±0.02mg/g相比，本發(fā)明蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量提高了 8.14%。
[0036]對(duì)比例1、
[0037]將三年生蒙古黃芪的實(shí)生苗，栽種在花盆中，移入塑料防雨大棚內(nèi)。每盆5株，共6盆。
[0038]控制各盆土壤相對(duì)含水量70%?75%，連續(xù)進(jìn)行土壤相對(duì)含水量70%?75%的控水處理30天后，黃芪根曬干、粉碎、過篩用于測(cè)定毛蕊異黃酮葡萄糖苷。毛蕊異黃酮葡萄糖苷采用超高效液相色譜(UPLC)測(cè)定，BH! shield RP18色譜柱(2.1 X 100mm，1.7μπι)。流動(dòng)相為乙腈(A)和0.1% 甲酸水(B)梯度洗脫0-4min，25%A?75%B;4-6min，35%A?65%Β;6-8min，45%A ?55%8;8-1011^11，55%八?45%8;10-1211^11，25%八?75%8;流速0.21111711^11;進(jìn)樣體積2μ1;注溫30°C。
[0039]該方法所得的蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量為0.82±0.04mg/go
[0040]對(duì)比例2、
[0041]將三年生蒙古黃芪的實(shí)生苗，栽種在花盆中，移入塑料防雨大棚內(nèi)。每盆5株，共6盆。
[0042]控制各盆土壤相對(duì)含水量70%?75%，連續(xù)進(jìn)行土壤相對(duì)含水量70%?75%的控水處理60天后，黃芪根曬干、粉碎、過篩用于測(cè)定毛蕊異黃酮葡萄糖苷。毛蕊異黃酮葡萄糖苷采用超高效液相色譜(UPLC)測(cè)定，BH! shield RP18色譜柱(2.1 X 100mm，1.7μπι)。流動(dòng)相為乙腈(A)和0.1% 甲酸水(B)梯度洗脫0-4min，25%A?75%B;4-6min，35%A?65%Β;6-8min，45%A ?55%8;8-1011^11，55%八?45%8;10-1211^11，25%八?75%8;流速0.21111711^11;進(jìn)樣體積2μ1;注溫30°C。
[0043]該方法所得的蒙古黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量為0.86±0.02mg/go
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法，包括如下步驟:將黃芪的實(shí)生苗栽培，控制土壤的相對(duì)含水量，然后對(duì)所述土壤進(jìn)行連續(xù)控水處理，即能提高黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述黃芪為蒙古黃芪； 所述黃芪的實(shí)生苗為2?3年。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于:所述土壤的相對(duì)含水量為40%?45 %。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述控水處理的土壤的相對(duì)含水量為40%?45%; 所述控水處理的時(shí)間為30?60天。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述黃芪的實(shí)生苗的苗高為14.6?15.4cm06.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述黃芪的栽培時(shí)間為3月?9月。
【文檔編號(hào)】G05D11/00GK105993861SQ201610583259
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年7月22日
【發(fā)明人】陳貴林, 賈鑫, 李光躍, 孫窗舒, 李孟婧
【申請(qǐng)人】?jī)?nèi)蒙古大學(xué)