蓮品種的培育方法，包括以下步驟：
[0055](a)、將二倍體金線蓮的種子在第一培養(yǎng)基上培養(yǎng)32天，得到原球莖，其中，第一 培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有BA0.8mg/L、KT0.7mg/L、NAA0.05mg/L、蔗糖20g/L、瓊脂 4. 5g/L、香蕉 25g/L;
[0056](b)、將原球莖暗培養(yǎng)5天，然后浸泡在8ymol/L安磺靈溶液中浸泡處理30h;
[0057](c)、浸泡后的原球莖轉(zhuǎn)接到第一培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，得到叢生芽；
[0058](d)、叢生芽分株后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)45天得到根莖葉完整的組培苗，其中， 生根培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有NAA0. 4mg/L、活性炭0. 4g/L、香蕉18g/L;
[0059] (e)、經(jīng)染色體檢測篩選得到多倍體植株與親本二倍體相比，植株高大，莖段粗壯， 節(jié)間長，葉大而厚，葉色深，根粗壯，誘導(dǎo)率為43. 8%。
[0060]另外，步驟（a)、（b)、（c)、（d)、（e)均在無菌條件下進(jìn)行；步驟（a)、（c)和（d)中的 培養(yǎng)條件均為：溫度為25±2°C，濕度為58-63%，光照強(qiáng)度為2000x1，光照時(shí)間為9h/天。
[0061] 實(shí)施例4
[0062] 多倍體金線蓮品種的培育方法，包括以下步驟：
[0063](a)、將二倍體金線蓮的種子在第一培養(yǎng)基上培養(yǎng)40天，得到原球莖，其中，第一 培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有BAL0mg/L、KT0?9mg/L、NAA0?08mg/L、蔗糖 32g/L、瓊脂 8g/ L、香蕉 20g/L;
[0064](b)、將原球莖暗培養(yǎng)4天，然后浸泡在10ymol/L安磺靈溶液中浸泡處理15h;
[0065](c)、浸泡后的原球莖轉(zhuǎn)接到第一培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，得到叢生芽；
[0066](d)、叢生芽分株后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)42天得到根莖葉完整的組培苗，其中， 生根培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有NAA0. 5mg/L、活性炭0. 5g/L、香蕉23g/L;
[0067] (e)、經(jīng)染色體檢測篩選得到多倍體植株與親本二倍體相比，植株高大，莖段粗壯， 節(jié)間長，葉大而厚，葉色深，根粗壯，誘導(dǎo)率為44. 1%。
[0068]另外，步驟（a)、（b)、（c)、（d)、（e)均在無菌條件下進(jìn)行；步驟（a)、（c)和（d)中 的培養(yǎng)條件均為：溫度為25±2°C，濕度為58-63%，光照強(qiáng)度為1700x1，光照時(shí)間為Ilh/ 天。
[0069] 實(shí)施例5
[0070] 多倍體金線蓮品種的培育方法，包括以下步驟：
[0071] (a)、將二倍體金線蓮的種子在第一培養(yǎng)基上培養(yǎng)28天，得到原球莖，其中，第一 培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有BAL0mg/L、KTL0mg/L、NAA0?12mg/L、蔗糖32g/L、瓊脂6g/ L、香蕉 20g/L;
[0072](b)、將原球莖暗培養(yǎng)3天，然后浸泡在15ymol/L安磺靈溶液中浸泡處理IOh;
[0073] (c)、浸泡后的原球莖轉(zhuǎn)接到第一培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，得到叢生芽；
[0074](d)、叢生芽分株后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)40天得到根莖葉完整的組培苗，其中， 生根培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有NAA0. 6mg/L、活性炭0. 5g/L、香蕉20g/L;
[0075] (e)、經(jīng)染色體檢測篩選得到多倍體植株與親本二倍體相比，植株高大，莖段粗壯， 節(jié)間長，葉大而厚，葉色深，根粗壯，誘導(dǎo)率為44. 5%。
[0076] 另外，步驟（a)、（b)、（c)、（d)、（e)均在無菌條件下進(jìn)行；步驟（a)、（c)和（d)中 的培養(yǎng)條件均為：溫度為25±2°C，濕度為58-63%，光照強(qiáng)度為1800x1，光照時(shí)間為IOh/ 天。
[0077] 實(shí)施例6
[0078] 多倍體金線蓮品種的培育方法，包括以下步驟：
[0079](a)、將二倍體金線蓮的種子在第一培養(yǎng)基上培養(yǎng)35天，得到原球莖，其中，第一 培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有BAI.Omg/L、KTI.Omg/L、NAA0? 12mg/L、蔗糖32g/L、瓊脂 5. 5g/L、香蕉 21g/L;
[0080](b)、將原球莖暗培養(yǎng)5天，然后浸泡在9ymol/L安磺靈溶液中浸泡處理24h;
[0081](c)、浸泡后的原球莖轉(zhuǎn)接到第一培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，得到叢生芽；
[0082](d)、叢生芽分株后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)45天得到根莖葉完整的組培苗，其中， 生根培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有NAA0. 4mg/L、活性炭0. 4g/L、香蕉25g/L;
[0083] (e)、經(jīng)染色體檢測篩選得到多倍體植株與親本二倍體相比，植株高大，莖段粗壯， 節(jié)間長，葉大而厚，葉色深，根粗壯，誘導(dǎo)率為44. 2%。
[0084] 另外，步驟（a)、（b)、（c)、（d)、（e)均在無菌條件下進(jìn)行；步驟（a)、（c)和（d)中 的培養(yǎng)條件均為：溫度為25±2°C，濕度為58-63%，光照強(qiáng)度為2000x1，光照時(shí)間為12h/ 天。
[0085] 此外，實(shí)施例1-6中的步驟均在無菌條件下進(jìn)行。
[0086] 本發(fā)明提供的多倍體金線蓮品種的培育方法，通過多次試驗(yàn)驗(yàn)證，其誘導(dǎo)率均維 持在43. 2% -44. 8之間，誘導(dǎo)率穩(wěn)定，且得到的多倍體植株與二倍體親本相比，植株高大， 莖段粗壯，節(jié)間長，葉大而厚，葉色深，根粗壯。
[0087] 盡管已用具體實(shí)施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識(shí)到，在不背離本發(fā)明的 精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中 包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 多倍體金線蓮品種的培育方法，其特征在于，包括以下步驟： (a) 、將二倍體金線蓮的種子培養(yǎng)得到原球莖； (b) 、將所述原球莖浸泡在5-15ymol/L安磺靈溶液中浸泡處理10-36h; (c) 、浸泡后的原球莖繼續(xù)培養(yǎng)，得到叢生芽； (d) 、所述叢生芽分株后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到根莖葉完整的組培苗； (e) 、所述組培苗經(jīng)篩選得到多倍體植株。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，在步驟（a)和步驟（c)中，所述培養(yǎng) 均采用第一培養(yǎng)基進(jìn)行； 所述第一培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有BA0. 8-1. 2mg/L、KT0. 7-1. 2mg/L、NAA0? 05-0. 15mg/L、蔗糖 20-35g/L、瓊脂 4. 5-8g/L、香蕉 17-25g/L。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的培育方法，其特征在于，所述第一培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有 BAI.Omg/L、KTLOmg/L、NAA0?lmg/L、鹿糖 30g/L、瓊脂 5g/L、香蕉 20g/L。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的培育方法，其特征在于，在步驟（a)中，所述培養(yǎng)的時(shí)間為 27-40d〇5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，在步驟（b)中，所述安磺靈溶液的濃 度為8-10ymol/L，浸泡處理15-30h。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有 NAA0? 4-0. 8mg/L、活性炭 0? 4-0. 6g/L、香蕉 18-25g/L。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的培育方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中含有 NAA0? 5mg/L、活性炭 0? 5g/L、香蕉 20g/L。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的培育方法，其特征在于，在步驟（d)中，生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)的 時(shí)間為38-45d。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的培育方法，其特征在于，步驟（a)、（b)、（c)、（d)、（e)均在無菌 條件下進(jìn)行；步驟（a)、（c)和（d)中的培養(yǎng)條件均為：溫度為25±2°C，濕度為58%-63%， 光照強(qiáng)度為1500-2000x1，光照時(shí)間為9-12h/d。10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的培育方法，其特征在于，在步驟（b)中，所述原球莖 在浸泡安磺靈溶液之前，先進(jìn)行暗培養(yǎng)3-5d。
【專利摘要】本發(fā)明涉及植物培育領(lǐng)域，特別涉及多倍體金線蓮品種的培育方法，包括以下步驟：將二倍體金線蓮的種子培養(yǎng)得到原球莖；將原球莖浸泡在5-15μmol/L安磺靈溶液中浸泡處理10-36h；浸泡后的原球莖繼續(xù)培養(yǎng)，得到叢生芽；叢生芽分株后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到根莖葉完整的組培苗；組培苗經(jīng)篩選得到多倍體植株。本發(fā)明提供的多倍體金線蓮品種的培育方法，選用具有很強(qiáng)的分生能力的金線蓮原球莖作為誘導(dǎo)材料，以特定濃度的安磺靈溶液對原球莖浸泡特定的時(shí)間，經(jīng)過培養(yǎng)后得到的植株中，篩選即可得到多倍體金線蓮植株，誘導(dǎo)率在43.2％-44.8％之間，得到的多倍體金線蓮植株性狀優(yōu)良。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號(hào)】CN105191807
【申請?zhí)枴緾N201510749602
【發(fā)明人】蘇鈺琴, 莫燕蘭, 盤飛蘭, 楊杰花, 韋祥意, 羅文正, 張華英
【申請人】廣西相成生物科技有限公司
【公開日】2015年12月30日
【申請日】2015年11月6日