3°C;在人工檢查海馬身體情況時，操作要輕快，離水時間不能超過 2min。投喂巧料較未懷孕期間適當減少，每天投喂冰凍郵3~5次，總投喂量為海馬體重 的4%~7%。受精卵在雄性的育兒袋中發(fā)育15~22d后，雄性將其排出。
[00巧](5)分別收集一周內(nèi)每一個繁殖組合解出的所有稚魚； 由于海馬的受精和懷孕時間不同，因此，親本產(chǎn)幼的時間不同。為了避免由于出生時間 不同而造成較大的誤差，分別只收集每一個繁殖組合一周w內(nèi)解出的所有稚魚。
[00%] (6)相同飼養(yǎng)方式和相似條件培育子代； 所有子代在相同的管理方式及相似的條件下飼養(yǎng)。將收集剛解出的稚魚放入水桶中 (容積為1m3 )培育，密度為500尾/m3，巧料W豐年蟲為主，巧料投喂量為下一次投喂時水 中的巧料略有剩余為宜。當長到1月齡時，轉(zhuǎn)入小型水泥池(容積為9m3)中培育，密度為 100尾/m3，投喂豐年蟲和冰凍郵，冰凍郵的日投喂量為海馬總體重的5%~8%。當長到2~ 3月齡時，轉(zhuǎn)入成魚養(yǎng)殖池(容積為16m3 )飼養(yǎng)，密度為20尾/m3，投喂冰凍郵，日投喂量為 海馬總體重的5%~8〇/〇。
[0027] (7)海馬子代生長和成活率對比。
[0028] 分別在1、2、4月齡，對每個繁殖組合的子代數(shù)量進行統(tǒng)計，進行成活率比較；在4 月齡時(線紋海馬達到商品魚時期)，對每個繁殖組合的子代進行稱重，對比各組的體重。
[0029] 我們都知道，雜交育種設(shè)及到不同的地理種群(遺傳背景較大)，其生活習(xí)性或適 宜的生活環(huán)境等等因素，都有微妙的變化，因此，是否能夠成功地完成不同群體間的雜交W 及雜交后子代能否正常生長，W及子代的成活率，受海馬本身的生物學(xué)特性、人工操作水平 及養(yǎng)殖環(huán)境等多個因素的影響。經(jīng)過大量的研究和探索得到本發(fā)明上述線紋海馬的雜交育 種方法，能夠成功地、高效地實現(xiàn)不同地理種群(遺傳背景較大)的線紋海馬的雜交育種。通 過本發(fā)明的選育方法利用雜交優(yōu)勢，明顯提高線紋海馬的成活率和生長速度，增加選育群 體的遺傳多樣性，提高線紋海馬苗種的種質(zhì)水平，促進優(yōu)良品系的選育。
[0030] 本發(fā)明具有W下有益效果： (1)本發(fā)明彌補了現(xiàn)有線紋海馬雜交育種技術(shù)的空白，研究出了一種獲得線紋海馬雜 交優(yōu)勢的育種方法，能夠培育出成活率高、生長快的線紋海馬，可W解決線紋海馬種質(zhì)衰 退、苗種質(zhì)量下降的問題，改善海馬養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)缺乏優(yōu)良品種的現(xiàn)狀。
[0031] (2)本發(fā)明方法有效利用雜交優(yōu)勢，可W促進線紋海馬優(yōu)良品系的選育，能夠提高 線紋海馬的遺傳多樣性水平。
[0032] (3)本發(fā)明通過具有明顯差異的不同地理群體雜交，線紋海馬子代在多個重要經(jīng) 濟性狀上出現(xiàn)了超親的現(xiàn)象，獲得了明顯的成活率和生長率雜交優(yōu)勢。
【附圖說明】
[0033] 圖1為深功I、東山和山東的線紋海馬群體雙列雜交子代的成活率示意圖。
[0034] 圖2為深功I、東山和山東的線紋海馬群體雙列雜交子代的體重示意圖。
【具體實施方式】
[0035]W下結(jié)合說明書附圖和具體實施例來進一步說明本發(fā)明，但實施例并不對本發(fā)明 做任何形式的限定。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、方法和設(shè)備為本技術(shù)領(lǐng)域常規(guī)試 劑、方法和設(shè)備。
[0036] 除非特別說明，W下實施例所用試劑和材料均為市購。 陽〇37] 實施例1 獲得線紋海馬雜交優(yōu)勢的育種方法，步驟如下： 1、引進不同地理群體的線紋海馬作為親本，并進行產(chǎn)前強化培育 (1)親本引進 據(jù)調(diào)查，廣東深圳、福建東山和山東煙臺等地區(qū)在2009年后分別從美國引進不同地理 群體的線紋海馬，遺傳背景差異較大。
[0038] 2013年2月，本課題組分別從廣東深圳、福建東山和山東煙臺的線紋海馬養(yǎng)殖公 司引進線紋海馬親本80對、82對和85對，并飼養(yǎng)于廣東湛江。
[0039] (2)親本挑選 引進的親本年齡均為1~1. 5年齡，雌海馬親本體重至少8. 0g，雄海馬親本體重至少 10.0g，親本間的體重差距《2.0g。挑選活力強、無病無害、身體強壯及性腺發(fā)育良好的作 為親本。
[0040] (3)親本產(chǎn)前強化培育 引進后的1~2個月，親本放于白桶中進行培育，白桶中放置人工水草，可供海馬附著 休息。在親本培育期間，保持水溫穩(wěn)定，在22~30°C之間，巧料投喂主要W冰凍郵為主，輔 W榜足類和豐年蟲，冰凍郵每天的投喂量占海馬體重的5%~8%，每天的投喂分別在上午8 點、下午1點和下午6點=次。該批線紋海馬將作為海馬高成活率、生長快品系選育的基礎(chǔ) 群體。
[0041] 2、按照完全雙列雜交進行親本配組繁殖 (1 )2013年3月20日，引進的海馬親本經(jīng)過約一個月的強化培育，生長正常，育兒袋、性 腺發(fā)育良好。每一個群體隨機挑選活力強、體表無傷的雌雄海馬(各4尾)放入白桶中，放入 時采用完全雙列雜交的方法進行配組，即煙臺畢X煙臺S、煙臺畢X深圳S、煙臺畢X東 山S、深圳畢X深圳S、深圳畢X煙臺S、深圳畢X東山S、東山畢X東山S、東山畢X 煙臺S和東山畢X深圳S。每個組合設(shè)置=個平行，即每一個繁殖組合有12對海馬親本。
[0042] (2)將各繁殖組合親本放入仿生態(tài)白桶中，在操作的時候，一定要輕拿輕放，并戴 上乳膠手套，將纏繞在一起的海馬輕輕地在水中分開，盡量減少對海馬的刺激和傷害。此時 海馬如果受到刺激，可能會產(chǎn)生繁殖障礙或者流產(chǎn)，W及表皮的損傷容易引起海馬致病菌 的侵染，增大患病的風(fēng)險。
[0043] 將親本在放入白桶后，保持微流水（0.05m3A)刺激。海馬多在早晨交配，此時保 持周邊環(huán)境安靜，防止對海馬產(chǎn)生干擾。
[0044] 3、懷孕海馬培育和護理及稚魚收集 在放入白桶中2~7d后，雌雄親本先發(fā)情，并列游動，相互追逐，當興奮達到高潮時， 雄魚的育兒袋膨大，袋口張開，雌魚的生殖器突出。雌雄尾部相互纏繞在一起，雌魚將卵子 排入雄性的育兒袋中，并完成受精。在懷孕期間，雄性海馬體質(zhì)較弱，對外界干擾較為敏感， 需要精細護養(yǎng)。因此，需保持養(yǎng)殖環(huán)境安靜，保持水溫溫差《3°C;在人工檢查海馬身體情 況時，操作要輕快，離水時間不能超過2min。投喂巧料較未懷孕期間適當減少，每天投喂冰 凍郵4~5次，總投喂量為海馬體重的4%~7%。受精卵在雄性的育兒袋中發(fā)育15~22d 后，雄性將其排出。 W45] 由于海馬的受精和懷孕時間不同，因此，親本產(chǎn)幼的時間不同。為了避免由于出生 時間不同而造成較大的誤差，本次實驗收集2013年4月4日~4月11日剛解出的稚魚(分 別只收集每一個繁殖組合一周W內(nèi)解出的所有稚魚)。
[0046] 4、魚苗在相同的管理方式及相似的條件下培育 每一組繁殖的海馬子代分別單獨放入水桶中（容積為1m3 )培育，密度為500尾/m3。 期間，每天適當增加巧料的投喂量，巧料主要W豐年蟲為主，巧料W豐年蟲為主，巧料投喂 量為下一次投喂時水中的巧料略有剩余為宜。
[0047] 隨著個體生長，在1月齡時，從每個繁殖組合中隨機選取900尾幼海馬放入小型水 泥池(容積為9m3 )培育，密度為100尾/m3，投喂豐年蟲和冰凍郵，冰凍郵的日投喂量為海 馬總體重的5%~8〇/〇。
[0048]在2月齡時，轉(zhuǎn)入成魚養(yǎng)殖池飼養(yǎng)(容積為16m3 )培育，密度為20尾/m3，直到約 為4月齡，期間投喂冰凍郵，日投喂量為海馬總體重的5%~8%。
[0049]5、子代成活率和生長比較 (1) 2013年5月6~8日、6月8~9日、8月7~9日我們分別統(tǒng)計每一個繁殖組合 的成活率。
[0050] 經(jīng)分析計算，發(fā)現(xiàn)線紋海馬純系的4月齡成活率在68. 64%~72. 67%，平均值為 70. 58% ;雜交系成活率在71. 38%~79. 60%，平均值為75. 29%，比純系提高了 6. 70〇/〇。 陽化U 其中，東山畢X深圳S的雜交優(yōu)勢最明顯，比純系提高了11. 26% ;雜交優(yōu)勢> 8% 的還有東山畢X煙臺煙臺畢X東山S和深圳畢X煙臺S等組合設(shè)日表1和圖1所示)。
[0052] 表1線紋海馬F1代1、2、4月齡的成活率
(2) 2013年8月7~9日我們從每個養(yǎng)殖池中隨機抽取100尾海馬進行稱重。
[0053] 經(jīng)分析計算，發(fā)現(xiàn)線紋海馬純系的4月齡平均體重在5. 20~5. 35g，平均值為 5. 27g;雜交系體重在5. 37~5. 76g，平均值為5. 61g，比純系提高了 6. 32〇/〇。
[0054] 其中，煙臺畢X深功I、S東山畢X深圳S和深圳畢X東山S運幾組的平均體重 最高，分別為5.76g、5. 74g和5.65g;東山畢X深圳基、煙臺畢X東山S和煙臺畢X深 功U運幾組的雜交優(yōu)勢最明顯，分別為8. 81%、8. 47%和7. 11%巧日表2和圖2所示)。 陽化5] 表2線紋海馬F1代4月齡的體重
因此，本發(fā)明通過不同地理群體雜交獲得的線紋海馬子代在成活率和生長速度比未雜 交子代有顯著的提高；同時由于親本遺傳背景差異較大，子代的遺傳多樣性水平得到提高， 有利于后續(xù)線紋海馬優(yōu)良品種的選育。
[00