一種獲得線紋海馬雜交優(yōu)勢的育種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于魚類雜交育種技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，設(shè)及一種利用線紋海馬不同群體 進行種內(nèi)雜交獲得雜交優(yōu)勢的育種方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 海馬，屬于魚綱、海龍科、海馬屬（化，是一種名貴海洋中藥材，在我國 素有"南方人參"之稱，具有補腎壯陽、強屯、催產(chǎn)、止血鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜安神的功效。線紋海馬 (化切主要分布在大西洋西岸，是典型的熱帶亞熱帶型海馬種群，其繁殖 力強、個體較大和生長速率快。近年，我國多家單位將該種從美國引入中國，并在海南、廣 東、福建及山東等省沿海進行養(yǎng)殖，目前已經(jīng)發(fā)展為我國主要的養(yǎng)殖品種之一。然而，海馬 經(jīng)過多代的繁殖后，種質(zhì)退化現(xiàn)象非常嚴重。本專利發(fā)明人團隊在2010~2014年期間，連 續(xù)對我國部分沿海的養(yǎng)殖現(xiàn)狀進行調(diào)研，發(fā)現(xiàn)我國海馬繁殖和養(yǎng)殖模式極其原始，近交衰 退嚴重，親本的產(chǎn)卵數(shù)量較原代下降了 30~60%，幼體成活率僅15~25%，幼海馬的生長速 度較原代下降30%左右。因此，現(xiàn)階段，我國線紋海馬的種質(zhì)衰退明顯，苗種質(zhì)量成為限制 我國海馬養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的"瓶頸"之一。
[0003] 雜交優(yōu)勢是一種普遍的生物學現(xiàn)象，是指兩個遺傳背景不同的親本雜交產(chǎn)生的雜 種F1代在生活力、適應性、抗逆性及生產(chǎn)力等方面比純種有所提高的現(xiàn)象。雜交育種迄今 為止是國內(nèi)外動植物遺傳改良應用最廣泛、最成功的方法之一。在水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，雜交育 種也是改良當前水產(chǎn)品養(yǎng)殖性狀的主要途徑之一，目前，在巧孔扇貝（化lamysfarreri) (常亞青等.2006)、細腳對郵（Penaeusst^irostris)(Bierneetal.2000)、克努克娃 (Oncorhynchustshaw}ftscha)(&rydenetal.2004)及虹縛（0.mykiss)(王炳謙等.2009) 等多種水生動物的雜交育種已取得巨大進展。然而，目前為止，國際上還沒有關(guān)于線紋海馬 雜交育種的研究和報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有線紋海馬種質(zhì)衰退、苗種質(zhì)量下降的缺陷和 技術(shù)不足，提供一種利用國內(nèi)多個線紋海馬養(yǎng)殖群體，進行不同地理群體間的雜交，獲得雜 交優(yōu)勢的方法，從而培育出成活率高、生長快的線紋海馬，W改善海馬養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)缺乏優(yōu)良品 種的現(xiàn)狀。
[0005] 本發(fā)明目的是提供一種獲得線紋海馬雜交優(yōu)勢的育種方法。
[0006] 本發(fā)明上述目的通過W下技術(shù)方案實現(xiàn)： 一種獲得線紋海馬雜交優(yōu)勢的育種方法，包括W下步驟： 51. 從遺傳背景差異較大的群體挑選線紋海馬親本； 52. 對步驟S1中的線紋海馬親本進行強化培育； 53. 將步驟S2中的不同群體的線紋海馬親本按照來源地進行完全雙列雜交，進行配組 繁殖； 54. 將步驟S3所得的每一個繁殖組合的懷孕親本進行精細護養(yǎng)，避免流產(chǎn)； 55. 分別收集一周內(nèi)步驟S4中每一個繁殖組合的懷孕親本解出的所有子代； 56. 將步驟S5的子代在相似環(huán)境下，按照相同的飼養(yǎng)方式精屯、培育； 57. 子代成活率和生長比較，得到成活率高、生長速度快、遺傳多樣性好的優(yōu)質(zhì)線紋海 馬品系。
[0007] 據(jù)調(diào)查，廣東深圳、福建東山和山東煙臺等地區(qū)在2009年后分別從美國引進不同 地理群體的線紋海馬，遺傳背景差異較大。
[0008] 因此，優(yōu)選地，步驟S1是選取廣東深圳、福建東山和山東煙臺的養(yǎng)殖群體作為親 本，挑選活力強、無病無害、身體健康強壯、性腺發(fā)育良好的線紋海馬作為親本用于繁殖配 對；優(yōu)選地，親本的年齡均為1~1. 5年齡，雄性親本的體重在10. 0gW上，雌性親本的體 重在8. 0gW上，而且所有父本或母本的體重差別《2. 0邑。
[0009] 其中，優(yōu)選地，步驟S2所述強化培育的方法是：海馬親本引進后的1~2個月，雌 雄分開飼養(yǎng)，單獨培育半個月，期間保持水溫在22~30°C之間，W冰凍郵為主，輔W榜足類 和豐年蟲作為巧料進行強化培育，冰凍郵的日投喂量占線紋海馬總體重的5%~8%，每天的 投喂分別在上午8點、下午1點和下午6點S次。
[0010] 更優(yōu)選地，海馬親本引進后放入白桶中進行強化培育，白桶中放置人工水草，可供 海馬附著休息。
[0011] 優(yōu)選地，步驟S3所述親本按照來源地進行完全雙利雜交的具體方法為： 531. 按照煙臺畢X煙臺S、煙臺畢X深圳S、煙臺畢X東山S、深圳畢X深圳S、深 圳畢X煙臺S、深圳畢X東山S、東山畢X東山S、東山畢X煙臺S和東山畢X深圳基 九個組合進行配組； 532. 分別將S31的各組親本放入仿生態(tài)白桶中配組繁殖，每一個仿生態(tài)白桶中放入親 本數(shù)量> 4對，每一個繁殖組合的親本總數(shù)量> 12對。
[0012] 更優(yōu)選地，步驟S32所述每一個仿生態(tài)白桶中分別放入相同數(shù)量的雌性和雄性親 本；操作時，保證輕拿輕放，并戴上乳膠手套，將纏繞在一起的海馬輕輕地在水中分開，盡 量減少對海馬的刺激和傷害(此時海馬受到刺激后可能會產(chǎn)生繁殖障礙或者流產(chǎn)，W及表 皮的損傷容易引起海馬致病菌的侵染，增大患病的風險)。將親本放入白桶后，保持微流水 0. 05m3A刺激，每天早晨保證周邊環(huán)境安靜(海馬多在早晨交配，此時保持周邊環(huán)境安靜， 防止對海馬產(chǎn)生干擾)。
[0013] 此時，雌雄親本先發(fā)情，并列游動，相互追逐，當興奮達到高潮時，雄魚的育兒袋膨 大，袋口張開，雌魚的生殖器突出；雌雄尾部相互纏繞在一起，雌魚將卵子排入雄性的育兒 袋中，并完成受精。
[0014] 優(yōu)選地，步驟S4所述精細護養(yǎng)的具體條件為：保持養(yǎng)殖環(huán)境安靜，水溫溫差 《3°C;在人工檢查海馬身體情況時，操作要輕快，離水時間不能超過2min;投喂巧料較未 懷孕期間適當減少，每天投喂冰凍郵3~5次，總投喂量為海馬體重的4%~7%。
[0015]優(yōu)選地，步驟S6所述精屯、培育是在相似的條件及相同的管理方式下，將不同的繁 殖組合的子代分別放入水桶(優(yōu)選地，所述水桶的為容積為1m3 )中培育，密度為500尾/ m3,巧料W豐年蟲為主，巧料投喂量為下一次投喂時水中的巧料略有剩余為宜；當長到1月 齡時，轉(zhuǎn)入小型水泥池(優(yōu)選地，所述小型水泥池的為容積為9m3 )培育，密度為100尾/m3， 投喂豐年蟲和冰凍郵，冰凍郵的日投喂量為海馬總體重的5%~8% ;當長到2~3月齡時， 轉(zhuǎn)入成魚養(yǎng)殖池(優(yōu)選地，所述成魚養(yǎng)殖池的為容積為16m3 )飼養(yǎng)，密度為20尾/m3,投喂 冰凍郵，日投喂量為海馬總體重的5%~8%。
[0016] 優(yōu)選地，步驟S7所述子代成活率和生長比較具體方法是：分別在1、2、4月齡時，比 較各個繁殖組合子代的成活率，在4月齡時(線紋海馬達到商品魚時期）對比各組線紋海馬 的體重。
[0017] 作為一種優(yōu)選的可實施方案，上述獲得線紋海馬雜交優(yōu)勢的育種方法的具體操作 流程總結(jié)如下： (1)從遺傳背景差異較大的群體挑選線紋海馬親本； 本步驟中收集的親本是廣東深圳、福建東山和山東煙臺的養(yǎng)殖群體(據(jù)調(diào)查，廣東深 圳、福建東山和山東煙臺等地區(qū)在2009年后分別從美國引進不同地理群體的線紋海馬，遺 傳背景差異較大。）。
[001引挑選活力強、無病無害、身體強壯及性腺發(fā)育良好的作為親本，從每一群體引進的 親本數(shù)量超過80對，親本的年齡均為1~1. 5年齡，雄性親本的體重在10. 0gW上，雌性 親本的體重在8. 0gW上，且所有父本或母本的體重差別《2. 0邑。
[0019] (2)親本產(chǎn)前強化培育； 海馬親本引進后的1~2個月進行產(chǎn)前強化培育，保持水溫在22~30°C之間，巧料為 豐年蟲和冰凍郵，每天的投喂分別在上午8點、下午1點和下午6點=次，冰凍郵的日投喂 量占線紋海馬總體重的5%~8%。
[0020] (3)不同群體的線紋海馬親本按照完全雙列雜交的方法進行配組繁殖； 在仿生態(tài)白桶中放入雌雄親本，并按照來源地進行完全雙列雜交，即煙臺畢X煙臺 基、煙臺畢X深圳S、煙臺畢X東山S、深圳畢X深圳S、深圳畢X煙臺S、深圳畢X東 山基、東山畢X東山S、東山畢X煙臺A和東山畢X深圳A等九個組合。
[0021] 從候選親本中，每一個桶中分別隨機放入4雌和4雄親本，每一組設(shè)置=個平行。 在操作的時候，一定要輕拿輕放，并戴上乳膠手套，將纏繞在一起的海馬輕輕地在水中分 開，盡量減少對海馬的刺激和傷害。此時海馬受到刺激后可能會產(chǎn)生繁殖障礙或者流產(chǎn)，W 及表皮的損傷容易引起海馬致病菌的侵染，增大患病的風險。
[0022] 將親本在放入白桶后，保持微流水（0.05m3A)刺激。海馬多在早晨交配，此時保 持周邊環(huán)境安靜，防止對海馬產(chǎn)生干擾。
[0023] 在放入白桶中2~7d后，雌雄親本先發(fā)情，并列游動，相互追逐，當興奮達到高潮 時，雄魚的育兒袋膨大，袋口張開，雌魚的生殖器突出。雌雄尾部相互纏繞在一起，雌魚將卵 子排入雄性的育兒袋中，并完成受精。
[0024] (4)懷孕海馬培育和護理 在懷孕期間，雄性海馬體質(zhì)較弱，對外界干擾較為敏感，需要精細護養(yǎng)。因此，需保持養(yǎng) 殖環(huán)境安靜，水溫溫差《