利用分子標(biāo)記培育水稻耐病材料的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種利用分子標(biāo)記培育水稻耐病材料的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來，水稻生產(chǎn)中經(jīng)常遭遇稻瘟病、白葉枯病、紋枯病等水稻病害的危害，造成水稻減產(chǎn)，甚至絕收，嚴(yán)重制約了水稻生產(chǎn)，威脅到水稻可持續(xù)生產(chǎn)和我國的糧食安全問題。
[0003]目前，利用與抗病基因連鎖的分子標(biāo)記培育抗病品種中，通用的方法為配制少量的組合，自雜種早代便開始使用單株P(guān)CR檢測，剔除不含抗病基因的單株，入選含有抗病基因的單株，這種方法在雜種后代選擇時(shí)，每一時(shí)代都要檢測大量的單株，并且由于配制數(shù)量少常無法兼顧農(nóng)藝性狀和品種性狀，造成了大量的人力物力的浪費(fèi)，基于這個(gè)原因，如何簡化利用分子標(biāo)記選擇耐病材料，是提高分子標(biāo)記抗病育種的關(guān)鍵問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種利用分子標(biāo)記培育水稻耐病材料的方法。
[0005]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是，利用分子標(biāo)記培育水稻耐病材料的方法，包括以下步驟:
[0006](I)利用抗病基因連鎖分子標(biāo)記，使用聚合酶鏈反應(yīng)檢測水稻品種，篩選出含有抗病基因的品種作為抗病基因供體；
[0007](2)選擇性狀優(yōu)良的水稻不育系、恢復(fù)系和保持系為抗病基因受體，與抗病基因供體雜交、回交，進(jìn)行抗病基因轉(zhuǎn)移時(shí)配制的組合數(shù)應(yīng)在200?400之間；
[0008](3)雜交后代早代進(jìn)行選擇時(shí)，依據(jù)不同的選擇目的，加大選擇壓，淘汰農(nóng)藝性狀、品質(zhì)差的組合，選擇具有農(nóng)藝性狀好、品質(zhì)優(yōu)等優(yōu)點(diǎn)的不育系、恢復(fù)系和保持系優(yōu)良單株；
[0009](4)雜交后代5代以后，開始對(duì)入選組合，單株進(jìn)行分子標(biāo)記PCR檢測，淘汰不含有抗病基因的單株，保留含有抗病基因且綜合性狀優(yōu)良的單株；
[0010](5)將含有抗病基因入選單株按株行種植，繼續(xù)選擇，直到入選材料完全穩(wěn)定；
[0011](6)將最終入選的含抗病基因的材料，進(jìn)行病害接種和自然鑒定，淘汰由于抗病基因與背景之間的互作導(dǎo)致雖然含有抗病基因但耐病性差的組合，保留含抗病基因且耐病性強(qiáng)的組合，即為水稻耐病材料，可以抗病親本使用和應(yīng)用于水稻生產(chǎn)。
[0012]作為優(yōu)選，抗病基因包括抗稻瘟病基因、抗白葉枯病基因、抗紋枯病基因。
[0013]本發(fā)明的有益效果是:
[0014]I)進(jìn)行抗病基因轉(zhuǎn)移時(shí)，大量配制組合，可以使得抗病基因盡可能轉(zhuǎn)移到綜合性狀優(yōu)良的受體親本中，保證了雜種后代優(yōu)良基因與抗病基因聚合的可能性。
[0015]2)早代加大選擇壓，進(jìn)行嚴(yán)格的農(nóng)藝性狀和品質(zhì)性狀的篩選，而不進(jìn)行分子標(biāo)記篩選，可以保證入選后代的優(yōu)良性狀可以較好的遺傳下去。
[0016]3)5代開始篩選含有抗病基因的單株，可以大大減少選擇的工作量，同時(shí)節(jié)省了大量的人力和物力。
[0017]4)利用與抗病基因連鎖的分子標(biāo)記選擇出的含有抗病基因的抗病材料，在高代進(jìn)行人工接種和田間鑒定，可以剔除掉由于遺傳背景原因造成的雖然含有抗病基因，但耐病性差的組合，提高了水稻耐病材料選擇的準(zhǔn)確性。
【具體實(shí)施方式】
[0018]—種利用抗稻瘟病基因Pi9連鎖分子標(biāo)記培育水稻抗稻瘟病材料的方法，包括以下步驟:
[0019](I)利用抗稻瘟病基因Pi9連鎖分子標(biāo)記(PB8，引物序列:F:5’ -CCGGACTAAGTACTGGCTTCGATA-3’ ；R:5’ -CCCAATCTCAATGACCCATAAC-3’)，使用 PCR 反應(yīng)檢測水稻品種，篩選出含有抗稻瘟病基因Pi9的品種作為抗病基因供體。
[0020](2)選擇性狀優(yōu)良的水稻不育系、恢復(fù)系和保持系為抗稻瘟病基因Pi9的受體，與抗稻瘟病基因Pi9供體雜交、回交，Ρ?9基因轉(zhuǎn)移時(shí)配制的組合數(shù)應(yīng)在300。
[0021](3)雜交后代早代進(jìn)行選擇時(shí)，依據(jù)不同的選擇目的，加大選擇壓，淘汰農(nóng)藝性狀、品質(zhì)差的組合，選擇具有農(nóng)藝性狀好、品質(zhì)優(yōu)等優(yōu)點(diǎn)的不育系、恢復(fù)系和保持系優(yōu)良單株。
[0022](4)雜交后代5代以后，開始對(duì)入選組合，單株進(jìn)行分子標(biāo)記PCR檢測，淘汰不含有抗稻瘟病基因Pi9的單株，保留含有抗病基因且綜合性狀優(yōu)良的單株。
[0023](5)將含有抗稻瘟病基因Pi9入選單株按株行種植，繼續(xù)選擇，直到入選材料完全穩(wěn)定。
[0024](6)將最終入選的含抗稻瘟病基因的材料，進(jìn)行病害接種和自然鑒定，淘汰由于抗病基因與背景之間的互作導(dǎo)致雖然含有抗病基因但抗病性差的組合，保留含抗稻瘟病基因且抗病性強(qiáng)的組合，即為水稻抗稻瘟病材料。
[0025](7)利用該方法目前已經(jīng)篩選出37個(gè)含抗稻瘟病基因Pi9，且抗病性好綜合性狀較優(yōu)良的水稻恢復(fù)系和12個(gè)水稻兩系不育系，可用于水稻生產(chǎn)。
[0026]同樣，還可以利用抗白葉枯病基因、抗紋枯病基因的分子連鎖標(biāo)記培育出水稻抗白葉枯病或水稻抗紋枯病材料，由于與上述方法基本類似，這里不再贅述。
[0027]以上所述的本發(fā)明實(shí)施方式，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。任何在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.利用分子標(biāo)記培育水稻耐病材料的方法，包括以下步驟: (1)利用抗病基因連鎖分子標(biāo)記，使用聚合酶鏈反應(yīng)檢測水稻品種，篩選出含有抗病基因的品種作為抗病基因供體； (2)選擇性狀優(yōu)良的水稻不育系、恢復(fù)系和保持系為抗病基因受體，與抗病基因供體雜交、回交，進(jìn)行抗病基因轉(zhuǎn)移時(shí)配制的組合數(shù)應(yīng)在200?400之間； (3)雜交后代早代進(jìn)行選擇時(shí)，依據(jù)不同的選擇目的，加大選擇壓，淘汰農(nóng)藝性狀、品質(zhì)差的組合，選擇具有農(nóng)藝性狀好、品質(zhì)優(yōu)、抗性好及綜合性狀佳優(yōu)點(diǎn)的不育系、恢復(fù)系和保持系優(yōu)良單株； (4)雜交后代5代以后，開始對(duì)入選組合，單株進(jìn)行分子標(biāo)記PCR檢測，淘汰不含有抗病基因的單株，保留含有抗病基因且綜合性狀優(yōu)良的單株； (5)將含有抗病基因入選單株按株行種植，繼續(xù)選擇，直到入選材料完全穩(wěn)定； (6)將最終入選的含抗病基因的材料，進(jìn)行病害接種和自然鑒定，淘汰由于抗病基因與背景之間的互作導(dǎo)致雖然含有抗病基因但耐病性差的組合，保留含抗病基因且耐病性強(qiáng)的組合，即為水稻耐病材料，可以抗病親本使用和應(yīng)用于水稻生產(chǎn)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗病基因包括抗稻瘟病基因、抗白葉枯病基因、抗紋枯病基因。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用分子標(biāo)記培育水稻耐病材料的方法。該方法利用水稻抗病基因連鎖分子標(biāo)記與抗病基因連鎖，且可以遺傳的特點(diǎn)，早代不進(jìn)行標(biāo)記分子檢測，只進(jìn)行農(nóng)藝性狀和品質(zhì)性狀等品種特性的選擇，5代性狀穩(wěn)定以后，進(jìn)行分子標(biāo)記PCR檢測，抗病性檢測，篩選含有抗病基因后代單株，培育水稻耐病材料。
【IPC分類】A01H1/02, A01H1/04
【公開號(hào)】CN105104177
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510599847
【發(fā)明人】李澤福, 馬廷臣, 夏加發(fā), 王元壘, 周坤能
【申請(qǐng)人】安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所
【公開日】2015年12月2日
【申請(qǐng)日】2015年9月21日