053] (1)在25°C下，用25號浮游生物網(wǎng)過濾自然水體得到活體晶囊輪蟲；
[0054] (2)將活體晶囊輪蟲置于4體積％的甲醛溶液中浸泡并置于25°C的陰暗處保存。
[0055] 對比例2
[0056] (1)在25°C下，用25號浮游生物網(wǎng)過濾自然水體得到活體晶囊輪蟲；
[0057] (2)將活體晶囊輪蟲置于10體積％的乙醇溶液中浸泡并置于25°C的陰暗處保存。
[0058] 檢測例1
[0059] 通過OlympusBH-2型顯微鏡和MC-D500U(T2)型電子目鏡（江西鳳凰光學(xué)公司） 顯微拍照設(shè)備測得檢測實施例1、對比例1和2中晶囊輪蟲標本的個體形態(tài)（見圖1-3)，并 統(tǒng)計晶囊輪蟲標本的體長和體寬（見圖4-5)，然后根據(jù)體長和體寬計算相應(yīng)的收縮率（見 表1)和顯著性差異。
[0060] 相對于圖2和圖3,由圖1可知實施例1中制得的輪蟲標本可以保持輪蟲活體的原 有體型，特別是未發(fā)生頭冠未縮入體內(nèi)、軀干部蜷曲和體長變短等體貌變形。
[0061] 由圖4和圖5可知，相對于輪蟲活體而言，實施例1中制得的輪蟲標本的體長和體 寬均未發(fā)生顯著性變化（輪蟲標本與輪蟲活體之間的顯著性差異P值均< 〇. 05)，而對比例 1和2制得的輪蟲標本體長和體寬均發(fā)生了顯著性變化。在此基礎(chǔ)上，由表1可知，相對于 輪蟲活體而言，實施例1中制得的輪蟲標本的收縮率僅為2. 7%，而對比例1制得的輪蟲標 本體的收縮率為73. 8%，對比例2制得的輪蟲標本體的收縮率為22. 6%，從而進一步說明 了本發(fā)明提供的短期保存方法制得的蟲標本體能夠保持輪蟲活體的原有體型。
[0062] 通過同樣的方法進行檢測，得知實施例2-5中制得輪蟲標本的個體形態(tài)、體長、體 寬、顯著性差異和收縮率均與實施例1制得輪蟲標本的個體形態(tài)、體長、體寬、顯著性差異 和收縮率保持一致。
[0063] 另外，通過顯微裝置觀察，實施例1、3、4和5中的輪蟲標本能夠保存3天不變形， 而實施例2中的輪蟲標本能夠保存7天不變。
[0064] 表 1
[0065]
[0066] 實施例6
[0067] (1)在25°C下，用25號浮游生物網(wǎng)過濾自然水體得到活體晶囊輪蟲；
[0068] (2)將活活體晶囊輪蟲置于80°C的熱水中熱處理3min;
[0069] ⑶將熱處理后的輪蟲樣品冷卻30min至20°C;
[0070] (4)將甲醛濃度為38重量％的甲醛水溶液加入至冷卻后的輪蟲樣品與水的混合 物中以使得甲醛的濃度稀釋至4體積％，然后在25°C的陰暗處保存。
[0071] 實施例7
[0072] 按照實施例1的方法進行，所不同的是，在步驟（2)中，冷卻溫度改為rc，冷卻時 間改為40min。
[0073] 實施例8
[0074] 按照實施例1的方法進行，所不同的是，在步驟（2)中，冷卻溫度改為25°C，冷卻時 間改為20min。
[0075] 實施例9
[0076] 按照實施例1的方法進行，所不同的是，在步驟（1)中，熱處理的溫度改為70°C，熱 處理的時間改為5min。
[0077]實施例10
[0078] 按照實施例1的方法進行，所不同的是，在步驟（1)中，熱處理的溫度改為90°C，熱 處理的時間改為2min。
[0079] 實施例11
[0080] 按照實施例1的方法進行，所不同的是，在步驟（3)中，改為在1°C的冰箱中保存。
[0081] 實施例12
[0082] 按照實施例1的方法進行，所不同的是，在步驟（3)中，改為在40°C的陰暗處保存。 [0083] 檢測例2
[0084] 通過OlympusBH-2型顯微鏡和MC-D500U(T2)型電子目鏡（江西鳳凰光學(xué)公司） 顯微拍照設(shè)備測得檢測實施例6中晶囊輪蟲標本的個體形態(tài)（見圖6)，并統(tǒng)計晶囊輪蟲標 本的體長和體寬（見圖7-8)，然后根據(jù)體長和體寬計算相應(yīng)的收縮率（見表2)和顯著性差 異。
[0085] 相對于圖2和圖3,由圖6可知實施例6中制得的輪蟲標本可以保持輪蟲活體的原 有體型，特別是未發(fā)生頭冠等縮入體內(nèi)、軀干部蜷曲和體長變短等體貌變形。
[0086] 由圖7和圖8可知，相對于輪蟲活體而言，實施例6中制得的輪蟲標本的體長和體 寬均未發(fā)生顯著性變化（輪蟲標本與輪蟲活體之間的顯著性差異P值均< 〇. 05)。在此基 礎(chǔ)上，由表2可知，相對于輪蟲活體而言，實施例6中制得的輪蟲標本的收縮率僅為2. 9% 而對比例1制得的輪蟲標本體的收縮率為73. 6%，對比例2制得的輪蟲標本體的收縮率為 22. 6%，從而進一步說明了本發(fā)明提供的長期保存方法制得的蟲標本體也能夠保持輪蟲活 體的原有體型。
[0087] 通過同樣的方法進行檢測，得知實施例7-12中制得輪蟲標本的個體形態(tài)、體長、 體寬、顯著性差異和收縮率均與實施例6制得輪蟲標本的個體形態(tài)、體長、體寬、顯著性差 異和收縮率保持一致。
[0088] 表 2
[0089]
[0090] 檢測例3
[0091] 將實施例6制得的輪蟲標本置于25°C的陰暗處30天后，通過MC-D500U(T2)型電 子目鏡（江西鳳凰光學(xué)公司）顯微拍照設(shè)備觀察輪蟲標本的個體形態(tài)，結(jié)果與圖6基本保 持一致，進而說明本發(fā)明提供的長期保存方法能夠保證輪蟲標本長期保存。
[0092] 以上詳細描述了本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，但是，本發(fā)明并不限于上述實施方式中 的具體細節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行多種簡單變型，這 些簡單變型均屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0093] 另外需要說明的是，在上述【具體實施方式】中所描述的各個具體技術(shù)特征，在不矛 盾的情況下，可以通過任何合適的方式進行組合，為了避免不必要的重復(fù)，本發(fā)明對各種可 能的組合方式不再另行說明。
[0094] 此外，本發(fā)明的各種不同的實施方式之間也可以進行任意組合，只要其不違背本 發(fā)明的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開的內(nèi)容。
【主權(quán)項】
1. 一種輪蟲標本的短期固定保存方法，其特征在于，所述短期固定保存方法包括： (1) 將輪蟲的活體樣品置于水中進行熱處理； (2) 將熱處理后的輪蟲樣品取出，然后進行保存。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定保存方法，其中，所述熱處理至少滿足以下條件：熱處理 的溫度為70-90°C，熱處理的時間為2min-5min。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的保存方法，其中，所述保存至少滿足條件：保存溫度為 1-40 cC 〇4. 一種輪蟲標本的長期固定保存方法，其特征在于，所述長期固定保存方法包括： (1) 將輪蟲的活體樣品置于水中進行熱處理，然后冷卻； (2) 將甲醛加入至所述輪蟲樣品中以對冷卻后的輪蟲標本進行保存。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的保存方法，其中，所述熱處理至少滿足以下條件：熱處理的溫 度為70-90°C，熱處理的時間為2min-5min。6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的保存方法，其中，所述冷卻至少滿足以下條件：冷卻溫度為 1-25°C，冷卻時間為 20-40min。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的保存方法，其中，以所述甲醛與水的總體積為基準，所述甲醛 的含量為3-5體積％ ; 優(yōu)選地，所述甲醛通過甲醛水溶液提供； 更優(yōu)選地，所述甲醛水溶液含有37-40重量％的甲醛。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的保存方法，其中，所述保存的溫度為1-40°C。9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8中任意一項所述的固定保存方法，其中，所述輪蟲的活體樣品選 自晶囊輪蟲、巨腕輪蟲、聚花輪蟲或疣毛輪蟲。10. -種輪蟲標本，其特征在于，所述輪蟲標本通過權(quán)利要求1-9中任意一項所述的方 法制備而成。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種輪蟲標本的短期固定保存方法和長期固定保存方法，短期固定保存方法包括：(1)將輪蟲的活體樣品置于水中進行熱處理；(2)將熱處理后的輪蟲取出，然后進行保存；長期固定保存方法包括：(1)將輪蟲的活體樣品置于水中進行熱處理，然后冷卻；(2)將甲醛加入至所述輪蟲樣品中以對冷卻后的輪蟲標本進行保存。通過這兩種方法制備的輪蟲標本體貌變化小，便于測量體長體寬和鑒別種類。
【IPC分類】A01N1/00
【公開號】CN105076108
【申請?zhí)枴緾N201510398693
【發(fā)明人】溫新利, 翟盼, 席貽龍, 胡好遠, 桂健勇
【申請人】安徽師范大學(xué)
【公開日】2015年11月25日
【申請日】2015年7月7日