專利名稱：白蟻的生物防治的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般地說屬于害蟲的生物防治領(lǐng)域，具體地說屬于采用行為調(diào)節(jié)劑與昆蟲病原真菌組合來防治白蟻的領(lǐng)域。
在滋生期間，白蟻堆積泥土而毀壞包括住宅、商業(yè)建筑、和家具的木質(zhì)建筑物，造成巨大經(jīng)濟損失。白蟻還損害地毯和其它地面料，墻面料，墻粉，壁板，和干的墻材料。住宅滋生白蟻讓房主，特別是那些想出售房屋的房主，很惱火。
防治白蟻最常見的方法是定期噴施化學(xué)殺蟲劑或?qū)λ闹苁峭恋慕ㄖ⑸浯罅康臍⑾x劑。使用化學(xué)處理的問題是費用高;對人、畜和環(huán)境的長期作用尚不清楚;重復(fù)的化學(xué)處理之后一段時間，可能會產(chǎn)生抗性昆蟲品系，因而需要增大使用量或施用不同的化學(xué)品;且目前使用的化學(xué)品傾向于驅(qū)避白蟻而非殺死之，因此對白蟻的防治效果比料想的要小。
昆蟲病原菌或許可替代通常使用的高毒化學(xué)殺蟲劑用于防治害蟲。真菌是一類有希望的適合用作生物藥劑防治白蟻的昆蟲病原菌。
已知真菌或是單細胞生物或多細胞菌落。它們是真核生物因而比細菌更高分化，但比高等植物分化程度低。真菌不能利用光作能源，因此限制在腐生或寄生生活方式。真菌最通常的生長和繁殖形式為無性繁殖或無性生殖，包括孢子形成和隨后的孢子萌發(fā)。無性孢子，或分生孢子，形成在菌絲的頂端以及側(cè)面，菌絲為多細胞菌落的分枝絲狀結(jié)構(gòu)。在適宜的環(huán)境下，分生孢子萌發(fā)，膨大，并產(chǎn)生萌發(fā)管，萌發(fā)管生長一段時間后成菌絲，菌絲再形成菌落。
目前，大多數(shù)評價昆蟲病原真菌生物防治害蟲的工作，集中在涉及農(nóng)業(yè)上的重要害蟲和蚊蟲的應(yīng)用。綠僵菌(Metarhiziumanisopliae)是最廣泛研究的生物防治昆蟲的真菌之一。已將綠僵菌通過許多方法施于害蟲，方法包括直接噴施，注射，和將真菌施于昆蟲生活或取食的植物或土壤物質(zhì)。某些昆蟲種類，已出現(xiàn)感染該真菌而死亡的結(jié)果。綠僵菌，如Hanel和Watson在73Bull.Ent.Res.305-313(1983)中報道的，和球孢白僵菌(Beauveriabassiana)，如Bao和Yendol在16Entomophaga343-352(1971)中報道的，為感染白蟻的真菌的實例。如Kramm等在40J.Invert.Pathol1-6(1982)中報道的，一種白蟻中，感染的個體將真菌傳染給其蟻群的未感染的成員。
以前大多數(shù)利用昆蟲病原真菌的研究受到限制的原因是，研究是在實驗室條件下進行的，完全不同于昆蟲實際的生活條件。大多數(shù)報道例中，處理昆蟲的死亡是由于吞下或注射非常大量的孢子而取得的，而孢子本身可能是有毒的。在其它情況下，在含有大量真菌孢子的試管或培養(yǎng)皿中滾動或?qū)ハx噴粉而得到感染。顯然，應(yīng)用這些方法在商業(yè)或大規(guī)模使用上是不可行的。再者，政府法規(guī)會使它難以注冊成一種需要對昆蟲滋生地，特別是人或食物可能被污染的地區(qū)，隨機釋放大量真菌孢子的真菌殺蟲劑。還沒有人開發(fā)出一種感染白蟻，并確保真菌接種物被廣泛地傳播的，特別是通過繁殖種群傳播的，特效的且商業(yè)上可行的方法，用于治理和生物防治侵擾房屋或建筑的白蟻。
Gunner等的美國專利5，057，315，和5，057，316中公開了使用含有病原真菌的傳染箱來吸引，并用真菌致死感染昆蟲。實施例包括蟑螂和飛行昆蟲。傳染箱設(shè)計既保持真菌培養(yǎng)物又迫使昆蟲進入接觸真菌。依據(jù)昆蟲的類型，通過一種或幾種方式如箱的形狀，使用食物，引誘劑，調(diào)味品，誘餌，或顏色，將昆蟲吸引入箱。
需要提供用于白蟻的傳染箱。然而，這樣的箱以前未描述過，且不清楚箱的形狀，也不清楚用什么作白蟻的引誘劑。
因此本發(fā)明的目的是提供使用昆蟲病原真菌生物防治白蟻的方法和裝置。
本發(fā)明的再一目的是提供方便，可靠，和經(jīng)濟可行的使用真菌生物防治白蟻的裝置。
本發(fā)明的再一目的是提供驅(qū)避白蟻，防止白蟻滋生和損害建造物或地區(qū)的方法和手段。
本發(fā)明的再一目的是提供最終傳染飼養(yǎng)蟻群的全部或大多數(shù)白蟻的方法和手段。
本發(fā)明的另一目的是提供用各種真菌感染和殺死白蟻，以避免形成抗性種群的方法和手段。
已開發(fā)出保護建造物不受白蟻侵擾的方法。優(yōu)選實施方案中，采用激發(fā)一系列行為，包括取食，吸引，和尾隨的召引刺激劑(本文稱作“引誘劑”)，如用真菌Gloeophyllumtrabeum或其揮發(fā)物，吸引白蟻與潛在的致死真菌，如綠僵菌或球孢白僵菌接觸。另一實施方案中，使用如綠僵菌的天然驅(qū)避白蟻的真菌，并用于防止白蟻進入由驅(qū)避真菌包圍的地區(qū)。以傳染箱或與營養(yǎng)組合物配制的方式，提供單獨的或與引誘劑真菌組合的昆蟲病原真菌，并直接施于走廊或通路直至蟻巢最初感染，侵染白蟻并致蟻群死亡。真菌的優(yōu)點是，一旦建立，真菌在一定的時間內(nèi)連續(xù)保護建造物不受白蟻損害。當白蟻經(jīng)傳染箱接種時，雖然其它真菌也可用作病原菌，但最優(yōu)選的昆蟲病原真菌是綠僵菌和球孢白僵菌。綠僵菌是優(yōu)選的驅(qū)避真菌。Gloeophyllumtrabeum為優(yōu)選的引誘真菌。實施例證實了使用含綠僵菌和球孢白僵菌的箱可防治白蟻。


圖1為白蟻傳染箱的透視圖。
圖2A和2B為覓食時暴露于真菌后，習(xí)慣路線上白蟻減退的曲線圖，將生存率相對于處理后以天為單位的時間繪成曲線圖。圖2A為與對照(○)相比暴露于綠僵菌后的生存率(□)，圖2A為與對照(◇)相比暴露于球孢白僵菌的生存率(□)。
本發(fā)明主要依據(jù)兩個發(fā)現(xiàn)(1)昆蟲病原真菌可以用來感染和殺死白蟻，但需要引誘劑將白蟻誘入與真菌接觸和(2)某些類型的真菌，由于他們對白蟻的天然驅(qū)避性，可用于從某個地區(qū)將白蟻逐出。將單獨或與真菌引誘劑及其衍生化合物組合的病原真菌，或驅(qū)避真菌，以營養(yǎng)制劑或起始感染或驅(qū)避白蟻的真菌培養(yǎng)物的傳染箱的形式，施于要處理或保護的區(qū)域。
與防治白蟻的昆蟲病原真菌相關(guān)的主要問題是，病原真菌應(yīng)表現(xiàn)出驅(qū)避白蟻，使得它極難以得到充分擴散感染而顯著減少白蟻的種群。將真菌或其它引誘劑與昆蟲病原真菌組合克服了昆蟲病原真菌的驅(qū)避性，解決了這一問題。
另一主要問題是如何維持有效殺死白蟻的真菌培養(yǎng)物，此問題通過開發(fā)出的營養(yǎng)制劑得以解決，該制劑當施于有白蟻的土壤時能有效地建立真菌培養(yǎng)物。營養(yǎng)制劑由在培養(yǎng)基上的真菌組成，營養(yǎng)基如糠或其它纖維素質(zhì)食物，營養(yǎng)制劑可以干粉施用，如谷粉或鋸木屑。
另一更主要問題是用感染致死的真菌感染白蟻。此問題已由在要處理或保護的區(qū)域的附近使用有效建立真菌培養(yǎng)物的傳染箱而解決。傳染箱包括真菌培養(yǎng)物的營養(yǎng)源，以及在要保護或處理的區(qū)域事先建立的包含或保護的真菌。
真菌的選擇可從感染的白蟻(病原真菌)或從白蟻侵擾的食物(真菌引誘劑)分離菌，或使用常規(guī)技術(shù)從土壤或從保藏的培養(yǎng)物中分離菌，以得到有用的真菌。這些真菌可從美國典型培養(yǎng)物保藏中心，12301ParklawnDrive，Rockville，Maryland(ATCC)或昆蟲病原真菌培養(yǎng)物USDA-ARS保藏中心，U.S.Plant，SoilandWaterLab，TowerRoad，Ithaca，NewYork(ARSEF)不受限制地得到。篩選存在真菌的土壤樣品得到土壤分離菌，然后用生物測定測試真菌對昆蟲的作用。當暴露的昆蟲死亡時致病性便得到確認。
至少兩種昆蟲病原真菌，綠僵菌和球孢白僵菌，已顯示感染和殺死白蟻的作用。例如包括MM.anisopliaeATCC62176和ARSEP1112，它們還顯示驅(qū)避白蟻作用。
如下面的實施例所示，在實驗室條件下將白蟻暴露于土壤篩選分離菌，可以得到有用的真菌。有用的病原真菌為那些直接接觸之后能殺死白蟻的真菌。有用的真菌驅(qū)避劑為那些在如下所述的土壤盒測試中，驅(qū)避白蟻的真菌。如本文中采用的，“真菌趨避劑”包括如Metarhiziumspp.的真菌，或由有效驅(qū)避白蟻的真菌產(chǎn)生的化合物。
引誘劑有用的引誘劑為那些吸引白蟻，或刺激白蟻召引其它白蟻聚集和取食的引誘劑。優(yōu)選的白蟻引誘劑包括Gloeophyllumtrabeum(正式名Lenzitestrabea)和它的一些代謝產(chǎn)物，由某些真菌腐壞的含可提取引誘劑物質(zhì)的木材，和如下列文獻中描述的某些有機化合物模擬尾隨激素WatanabeandCasida，56∶3J.Econ.Ent.300-307(1963)，Matsumura，F(xiàn).，等人，65∶2J.Econ.Ent.600-602(1972)，Smythe，R.V.，等人，58∶3J.Econ.Ent.420-423(1965)，和Prestwich，G.D.，等人，10∶8JournalofChemicalEcology1201-1217(1984)，其中的技術(shù)引入本文。箱的形狀及其組成，以及箱的位置也可用來吸引白蟻。
如Matsumura，F(xiàn).，等人，62∶3J.Econ.Ent.699-603(1969);WatanabeandCasida(1963)中描述的，一些真菌腐壞的木材，含有白蟻的引誘劑。例如，由褐腐真菌G.trabeum腐壞的木材含有(S.S.E)-3，6，8-十二碳三烯-1-醇和其它已知召引白蟻的化合物。Grace，J.K.，92Proc.Entomol.Soc.Wash.773-777(1990)中，用白蟻對與抗氧化劑組合的由G.trabeum腐壞的木材的提取物的反應(yīng)，進行涉及尾隨活性的行為生測。Watanabe和Casida(1963)還發(fā)現(xiàn)許多有機化合物可以吸引白蟻。已觀察到白蟻引誘劑活性受木材的大小影響，木材的大小必須超過最小質(zhì)量以保證召引。
已知至少一種真菌，G.trabeum產(chǎn)生吸引白蟻的物質(zhì)并掩蓋病原真菌的驅(qū)避力。其它的有用真菌是腐壞木材的真菌?？蓮腁TCC得到幾種G.trabeum分離菌，對ATCC13021作了測試并確認其有吸引力。
真菌的培養(yǎng)基可用在傳染箱的適合培養(yǎng)基是已知的。培養(yǎng)基的例子是本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的并可從市場得到，包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)，或綠僵菌屬和白僵菌屬生長用的米瓊脂。米瓊脂由1%葡萄糖，1%酵母浸出液，5%米粉，1.5%瓊脂和0.5% 5×Dubois孢子鹽溶液組成。5×Dubois孢子鹽溶液由15g(NH4)2SO4/1000ml;0.30g MgSO47H2O/1000ml;0.15g MnSO4H2O/1000ml;0.0375g CuSO45H2O/1000ml;0.0375g ZnSO47H2O/1000ml;和0.0038g FeSO47H2O/1000ml組成。每一種鹽完全溶解后加入另一種鹽，并將溶液用高壓消毒。
其它的有用培養(yǎng)基是已知的并可從本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的那些中優(yōu)選出來。例如，PDA或象鋸木屑的纖維素材料可用作培養(yǎng)基，用于G.Trabeum的生長。
傳染箱如本文采用的，“箱”是指在存在的種群中，用于起始傳染過程的接種箱。傳染箱(1)在很小的體積中，濃縮極高濃度的病原真菌接種物，直接使白蟻接觸孢子侵染并殺死白蟻;(2)含有真菌孢子和/或菌絲，使真菌最小地暴露給環(huán)境且使真菌不進入環(huán)境，因此增加培養(yǎng)物的成活力并最小地污染真菌培養(yǎng)物;和(3)通過白蟻引誘劑如Gloeophyllumtrabeum或其揮發(fā)產(chǎn)物的存在將白蟻吸引到病原真菌，克服了病原真菌的驅(qū)避特性，引誘劑可以單獨或與作為白蟻食物源的鋸木屑或木片組合使用。
該箱可由非生物降解材料，或生物降解材料制成，并設(shè)計建成有效抗白蟻傳染的傳染區(qū)。重量輕的小傳染箱(或栓)不顯眼，并可容易置于大量白蟻滋生的位置，增加裝置的有效率。
在箱內(nèi)，一種真菌培養(yǎng)物可用作引誘劑而第二種在長時期內(nèi)提供傳染孢子的持續(xù)供應(yīng)。這些孢子附在白蟻上并產(chǎn)生穿透白蟻表皮的萌發(fā)管，導(dǎo)致白蟻在短時間內(nèi)死亡。如由木材分解產(chǎn)生的揮發(fā)化合物的引誘劑，可以單獨提供或與如Gloeophyllumtrabeum的木材分解真菌組合提供引誘作用。雖然外接觸是主要的傳染方式，白蟻也可由相互接觸和由消化孢子傳染。
這些引誘劑作為白蟻的食物源，單獨或與纖維質(zhì)材料結(jié)合，激發(fā)另外的箱與蟻群道路間的白蟻尾隨行為反應(yīng)，因此召引其它的白蟻受感染并由此將孢子傳到蟻群中的其它白蟻。
一旦進入箱內(nèi)，白蟻就直接與昆蟲病原真菌接觸。真菌的分生孢子附在白蟻體上。附著之后，分生孢子在昆蟲表皮上萌發(fā)，形成穿透白蟻外皮的萌發(fā)管。萌發(fā)管不斷穿透直到到達白蟻的內(nèi)體腔(血腔)而殺死之。白蟻死后，給予適宜的相對濕度和溫度條件，白蟻體上真菌菌絲可產(chǎn)生孢子，且其它白蟻可由于暴露于死去的白蟻產(chǎn)生的分生孢子而傳染。未感染的白蟻暴露于感染白蟻或白蟻尸體表面的孢子后，會有效地傳播病原菌。通過白蟻的社會行為可提高孢子的傳播，社會行為，例如，清理，接觸交流，運輸和埋葬尸體，和糞便物的交換，以及自相殘殺。一些白蟻也會消化孢子，它促成或?qū)е掳紫伒乃劳觥?br> 箱由形成箱基本形態(tài)的外箱和裝填箱單元的內(nèi)核心的混合物組成。室箱可用常規(guī)材料包括玻璃，金屬，壓?；蚩伤芩芰?，或木材構(gòu)建，但優(yōu)選由下列構(gòu)建可生物降解纖維質(zhì)材料如卡紙板，紙板，木材，壓合樹脂刨花或刨花板，膨脹纖維素，制型紙或泥炭。
如
圖1所示，室10應(yīng)有大得足以讓白蟻自由出入的12個小開口(2-5mm直徑)或能易于讓白蟻嚼透的薄壁14。
優(yōu)選的實施方案是管狀構(gòu)建物。形狀可從園形至相截的多尖端的多角形，但最好是三角管。箱的長度應(yīng)從10至30cm，邊寬3至8cm。箱的頂端16是尖的，為的是方便將箱安置在地上。頂端16可由與箱壁14相同的材料制成，并涂有樹脂或其它材料以增加強度，或頂端可由更硬的材料如塑料或木材制成。室箱的蓋18在填充后用紙或塑料蓋覆蓋。
箱內(nèi)，室核心可裝填以下幾種成分的混合物(1)白蟻的基本食物源(纖維質(zhì)材料，最廉價的鋸木屑，(2)引誘劑在鋸木屑上生長4-8周的G.trabeum培養(yǎng)物，殺死的G.trabeum培養(yǎng)物，或G.trabeum培養(yǎng)物的提取物，或合成的化學(xué)引誘劑，定留劑，外激素或追蹤激素;和(3)致死劑(綠僵菌或其它生長在固體或液體培養(yǎng)基上的昆蟲病原生物，與食物鏈和保護劑，或孢子一起配制成干或濕制劑。)核心混合物應(yīng)含有在比例上超過致死真菌的引誘劑，優(yōu)選劑量為，100g用G.trabeum接種的鋸木屑5g與燕麥糠混合的綠僵菌菌絲干制劑1g綠僵菌孢子。
這些成分可以是空間分離的或均勻混合的，以最大地讓白蟻接觸致死真菌并給白蟻個體提供超劑量的致死真菌孢子。為生長或固定適合的真菌培養(yǎng)物或為在裝置內(nèi)保持營養(yǎng)物，培養(yǎng)物可施于用作支撐基質(zhì)的惰性晶板或柵板。
可由下列方式將箱適當?shù)匕仓?1)如果箱是由硬質(zhì)材料建造，將它直接插在地上;(2)將它插在用如泥鏟或樣品芯儀的工具挖的洞中;(3)將它放在可用來將箱插在地上的空筒工具的內(nèi)套里。
下面給出的是一般的準則，它可依據(jù)場所，白蟻的密度和種類，氣候，和其它可影響箱有效率的變化因素而改變。將箱置于要保護的構(gòu)建物的地區(qū)周圍，距離構(gòu)建物不小于3米但最好是5至10米。箱應(yīng)集中在有白蟻活動的地區(qū)或白蟻活動地區(qū)和要保護的地區(qū)間。箱間隔距離為0.1米至1米。
溫室和實驗室測試表明致死真菌綠僵菌在土壤中以高水平存留達90天以上，而球孢白僵菌屬在農(nóng)業(yè)土壤中至少從五月存留至十月。
傳染箱和制劑的制備先建如
圖1所示的箱單元，然后用核心內(nèi)容物裝填之，便可構(gòu)建出適合感染白蟻的傳染箱。箱單元可切自有彈性的平板纖維產(chǎn)品，折成所要的形狀并粘接在一起。更希望的是在切割和折疊之前，先將塑料，樹脂/木，制型紙或泥炭板造形。造形形成槽和壁上的孔而折疊形成最后的形狀?？梢允且淮卧斐赏暾男螤?，或也可造成可以由粘，釘或小縫榫接的組裝部件。
接下來用核心混合物填充裝配箱。該核心混合物分三個步驟配制。步驟Ⅰ中，為白蟻和G.trabeum兩者制備纖維質(zhì)營養(yǎng)物，典型的是鋸木屑。將鋸木屑裝在塑料袋或其它容器中，用高壓消毒兩次，之間冷卻時間為12-24小時。用采自液體培養(yǎng)基如馬鈴薯葡萄糖汁的G.trabeum菌絲接種鋸木屑。將鋸木屑和G.trabeum菌絲混合并在24-27℃下培養(yǎng)4至8周。
步驟Ⅱ中，將纖維素G.trabeum培養(yǎng)物與配制的綠僵菌菌絲混合。該制劑由采自液體培養(yǎng)物(1%酵母浸出液，1%胨，4%葡萄糖)的綠僵菌菌絲與干食料(燕麥糠粉)，礦物鹽和防腐劑混合而制備。將混合物干燥并研磨制成顆粒。
最后，步驟Ⅲ中，將上述制備物與綠僵菌分生孢子混合，該分生孢子采自大米瓊脂生長板，已在大米上接種并生長三周。然后用手工或機器將核心混合物裝入箱中并封上蓋。此外，可將支撐基質(zhì)核或柵格核插入箱中?；|(zhì)核為裝有如前述真菌制備物的小袋纖維素材料中的G.trabeum和瓊脂中的綠僵菌，或干的菌絲制劑或采集的孢子。
下列非限定性實施例證明傳染箱，制劑和其成分控制白蟻的效力的理論和功能參數(shù)。在所有的例子中，觀察到白蟻的行為明顯受箱成分的影響，并且白蟻蟲口被存在于傳染箱中的真菌明顯減少。
實施例1將WeedWood白蟻(Zootermopsisangusticollis)直接暴露于綠僵菌和白僵菌，證明真菌殺死白蟻的效力將白蟻五個一組轉(zhuǎn)移到真菌生長了7天時間的培養(yǎng)盤上。5分鐘后，將白蟻移至干凈盤，并去除多余的分生孢子。30分鐘后，將白蟻轉(zhuǎn)移到鋪上一層濕濾紙和Kim手巾的固定板上。然后在室溫下在固定板上放上裝有濕紙的塑料盒。結(jié)果如表1所示。
表1接觸選擇的真菌后觀察白蟻(Zootermopsisagusticollis)反應(yīng)真菌試劑暴露后30分鐘第3天的第5天的白蟻的表現(xiàn)白蟻死亡率尸體表現(xiàn)綠僵菌緩慢100%覆蓋真菌ATCC62176球孢白僵菌病態(tài)100%覆蓋真菌ESC71球孢白僵菌病態(tài)80%一些真菌生長ARSEF721對照良好0%不適用如表1所示，三天后所有的＃62176和＃71處理的白蟻死亡，而所有的對照白蟻都活著。五天后，尸體出現(xiàn)真菌生長的覆蓋物。
由此得出結(jié)論，白蟻個體與病原真菌培養(yǎng)物的直接接觸導(dǎo)致白蟻的死亡。
實施例2將白蟻直接暴露于真菌分離菌對FasternSubteeranean白蟻(Reticulitermesflavipes)的感染從Montague，Massachusetts的森林收集含白蟻的木材。將白蟻從木材中分離，并置入個體可以移出做生測的實驗室蟻群。將十只白蟻放在含有病原真菌形成孢子的培養(yǎng)板的表面15分鐘。處理后，將白蟻轉(zhuǎn)移到含有濾紙的固定板上并觀察一段時間。
表2中顯示的結(jié)果表明，一些綠僵菌和白僵菌菌種對白蟻很有效，并可用作白蟻防治。由于土壤分離菌也顯示高的效力，這證明，可使用常規(guī)方法從土壤中獲得這些病原真菌。
表2接觸生物測定法的抗Reticulitermisflavipes真菌活性分離菌死亡百分率來源#菌屬24小時72小時ARSEF21112 綠僵菌 100 100191210010020801001009256010010956010053840100108040100111640100216740100231010029510100148901001878080ARSEF2529010072163.61001079080ATCC338249 綠僵菌 70 100621760100ATCC48585白僵菌5010048586080土壤 ESC4(JK) 130 綠僵菌 40 100土壤ESC(JK)13130100土壤ESC(JK)1960100昆蟲ESC(JK)10白僵菌90100昆蟲ESC7180100昆蟲ESC7060100土壤ESC(JK)22350100昆蟲ESC(JK)24130100土壤ESC(JK)1610100
1.接觸生物測定法將動物置于生長真菌的盤上15分鐘，然后將它們轉(zhuǎn)移至含有濕濾紙的固定板上觀察。
2.ARSEFUSDA-ARS昆蟲病原真菌培養(yǎng)物保藏中心3.ATCC美國典型培養(yǎng)物保藏中心4.ESCEcoScienceCorporation分離菌實施例3將感染的白蟻直接放入蟻群傳染蟻群的成員將白蟻(Z.angusticollis)四個一組置于纖維素粉和從瓊脂生長板上刮下的綠僵菌或球孢白僵菌分生孢子的混合物覆蓋的小木片(2cm×0.5cm×0.5)的培養(yǎng)皿中。將白蟻暴露于此傳染源一小時，然后移至固定板。48小時后，將一組暴露的白蟻引入至另一組未暴露于真菌的白蟻中。接觸九天后，將第二組的未顯示任何生病跡象的白蟻，轉(zhuǎn)移至第三組未暴露的白蟻中。一段時間后觀察各組白蟻的死亡率。
五天后，開始暴露于真菌的兩培養(yǎng)皿中的第一組白蟻成員全部死亡，第13和15天之間，第二組的死亡。第23天，最后一次轉(zhuǎn)移14天后，所有暴露的白蟻死亡且有些產(chǎn)生真菌。各種的對照白蟻全部存活。
該研究的結(jié)果說明，病原真菌在白蟻間轉(zhuǎn)移，且導(dǎo)致從未接觸過原傳染源的白蟻死亡。傳染的傳播可能發(fā)生在如進行清理的社會行為中。
實施例4通過暴露于蟻巢外的真菌而感染白蟻將三個小培養(yǎng)盤(15×100mm)和一個大培養(yǎng)盤(20×150mm)用管連接成一系列相互連接的室。大培養(yǎng)盤模仿蟻巢有水池和幾片木材。讓白蟻在此環(huán)境里生活一個月。將或是綠僵菌或是球孢白僵菌的分生孢子的真菌制劑，涂在濾紙盤和/或置于最外室的牙簽上。六個白蟻一組，且處理重復(fù)兩次。
結(jié)果示于圖2中。重復(fù)的數(shù)據(jù)加在一塊以增加樣本的蟲口數(shù)。用ATCC62176處理的白蟻死亡，其LT50為26天，而所有對照都存活。用ESC71進行的試驗出現(xiàn)相似的結(jié)果，結(jié)果是LT50為22天。
上述研究的結(jié)論是，當配制的真菌放置在白蟻覓食區(qū)域內(nèi)時，小蟻群的所有成員可被真菌感染殺死。
實施例5在距蟻巢一定距離，對土壤施用真菌制劑進行比較1.土壤盒效力測試將塑料盒(15×20×35cm)的底部埋入土中2至3cm，將含有300只白蟻的模擬蟻巢置于盒的一端。由兩個20×100mm培養(yǎng)皿底制成蟻巢，邊上開四個洞，開口面對在一起放好，并裝上濾紙和木片。讓白蟻適應(yīng)此環(huán)境3至10天。在盒的另一端，在土中挖一個1.5-2cm深的洞，施用真菌制劑。將木板(5cm×3cm×7cm)置于含有制劑的洞中，并半埋在土里。制劑包括(A)顆粒形式(燕麥、麩谷和菌絲)和(B)粉形式(纖維素和分生孢子)。定期查看木材，土壤和巢，觀察真菌對白蟻的活性。
表3中所示的結(jié)果說明，可以通過在木材附近施用真菌制劑而保護木材。還說明可以通過在離開蟻巢的一定距離，在白蟻侵擾的地點施用真菌制劑殺死蟻群。
表3白蟻對土壤中的真菌制劑的反應(yīng)真菌真菌生長和白蟻反應(yīng)第3天第20天ATCC62176制劑A真菌生長白蟻全部死亡制劑B不生長白蟻全部死亡ESC71制劑A真菌生長木材周圍沒有白蟻,蟻巢有生氣制劑B不生長白蟻貫通活動,蟻巢有生氣對照制劑A白蟻在木材下挖洞白蟻貫通活動,在木材上穿洞制劑B白蟻在木材下挖洞白蟻貫通活動,在木材上穿洞。
實施例6離開蟻群一定距離誘導(dǎo)真菌致病力的篩選將塑料盒底埋入土中2至3cm，將含有約300只白蟻的人工蟻巢置于一端。巢由兩個20×100mm的培養(yǎng)皿底制成，邊上開四個洞。將培養(yǎng)皿的開口對在一起放好，并裝上濾紙和木片。將白蟻轉(zhuǎn)移至巢中，并讓其適應(yīng)環(huán)境3至7天。在盒的另一端，在土壤中挖一個洞，施用干的菌絲制劑，在洞上放木板(5×3×7cm)，再蓋上土。定期查看木材，土壤和蟻巢，觀察真菌對白蟻的活性。
一組分離菌的效力示于表4中。在許多情況下，真菌生長良好。在特定的情況下，白蟻被驅(qū)逐出真菌生長的地區(qū)。在有限數(shù)量的情況下，在蟻巢中發(fā)現(xiàn)死蟻。之后，從蟻巢的尸體上找到真菌。
最有效的殺死蟻巢的分離菌為ATCC62176和ESC70，分別為綠僵菌和白僵菌。其它高效且驅(qū)避的分離菌為2080和1112。
實施例7白蟻引誘劑試驗開始在短距離上進行研究，確定G.trabeum作為引誘劑的效果。將由玻璃和木材制成的場地(60×60×50cm)，涂上一層薄塑料。在最后的試驗中，在塑料上面放上一層薄土。將邊上帶有六個孔并含有濕濾紙的轉(zhuǎn)換培養(yǎng)皿中的白蟻(150至300只)，放在該場所的一邊。
在一組試驗中，將裝有(a)潛在引誘劑和(b)對照材料的微離心管(1.5ml)放在場所的另一邊，離蟻巢15cm和25cm遠處。場所用定時照像機錄像并觀察15天。另一組試驗中，做法相似，除了用G.trabeum鋸木屑和綠僵菌(分生孢子或菌絲)的混合物裝試管，代替G.trabeum鋸木屑和對照的鋸木屑。所有的試驗重復(fù)三次。
結(jié)果顯示G.trabeum感染的鋸木屑優(yōu)于未感染的鋸木屑。當綠僵菌分生孢子或菌絲與G.trabeum混合時，白蟻對綠僵菌的存在沒有反應(yīng);這就是說，它們進入引誘劑管和引誘劑加綠僵菌的管。在兩種情況下，在試驗開始后2-7小時，它們與管接觸并挖出管中的鋸木屑或G.trabeaum/綠僵菌鋸木屑混合物。當土壤存在時，它們建立朝向試驗樣口的土隧道。在比較加綠僵菌菌絲的G.trabeam鋸木屑與單獨的G.trabeum鋸木屑的試驗中，15天后暴露于綠僵菌的蟻巢白蟻全部死亡(死亡率100%)。帶G.trabeum鋸木屑的綠僵菌分生孢子制劑未取得這樣高的死亡率。
上述研究的結(jié)論是(1)與未腐壞的木材相比，白蟻較喜歡由真菌G.trabeum部分腐壞的木材，且腐壞的木材激發(fā)白蟻召引和挖掘活性，和(2)G.trabeum存在時，白蟻不理會致死真菌并以相似的活性忙碌;這就是說，G.trabeum克服致死真菌的驅(qū)避作用。
實施例8使用引誘真菌確立白蟻的覓食范圍將場所(122×366×30.5cm)建好并蓋上1cm的土。將含約1000只白蟻和濾紙的雙培養(yǎng)皿人工巢，置于場所的另一端，離四面墻壁中的三面61cm遠。
A)在場所的中央放置G.trabeum腐壞的木片(15×3×2cm)，離巢122，183和244cm遠。將它們保留一周，并且間一天監(jiān)視一次白蟻的活性。
B)將裝有用G.trabeum接種并培養(yǎng)幾周的鋸木屑的紙板管(15cm高×4cm直徑)置于離巢122，183和244cm遠。將它們保留一周，定期觀察白蟻的活性。
C)將如上述的木片和紙板管移至離巢60cm之內(nèi);將它們保留一周，并定期觀察白蟻的活性觀察到白蟻在離巢30至60cm遠掘隧道。在離巢遠達200cm的區(qū)域可見白蟻。然而，未觀察到試驗A的木片上或周圍或者試驗B的管中有白蟻。另一方面，如試驗C中所示，一旦木片或紙板管移近巢，隔夜便發(fā)現(xiàn)木片上和管中有白蟻。
與田野中的相比，實驗室條件下白蟻覓食的范圍會更受限制。這些條件下的召引會只在有限的距離內(nèi)發(fā)生。巢中充足的食物也會降低覓食的需要。然而，即使在這些條件下，G.trabeum顯然起著召引刺激物的作用。
實施例9真菌引誘劑箱對白蟻的吸誘作用A.木材試驗將約1000只白蟻從Montague，Massachusetts的森林區(qū)采集的木材中分離出，并置于帶濕濾紙的培養(yǎng)皿中。
試驗場所為122×122×30cm(長×寬×高)，由plexi玻璃制成，沒有蓋。將場所填5cm的土。用G.trabeum接種用高壓消毒的濕木片(15×3×2cm)，生長8周，并置于4cm直徑和13cm長的紙管中。高壓消毒的木片進行類似處理，但不用G.trabeum接種。第三種情況下，使用非經(jīng)高壓消毒的木片裝入相同類型的紙管。將蟻群放在蓋有培養(yǎng)皿的場所中央。培養(yǎng)皿壁上的四個開口作為白蟻四個方向的入口，每個孔指向場所的一個角。將管靠場所壁垂直放置，一面壁三個，隔10cm，每只管都部分插入土中。管的安排如下面1管A-G.trabeum木材管B-高壓消毒的木材管C-木材面2管D-高壓消毒的木材管E-木材管F-G.trabeum木材面3管G-G.trabeum木材管H-高壓消毒的木材管I-木材面4管J-高壓消毒的木材管K-G.trabeum木材管L-木材一天后，任何管中未發(fā)現(xiàn)白蟻，雖然巢中的白蟻入侵了土壤。5天后，在所有含G.trabeum的管中發(fā)現(xiàn)白蟻，但其它管中卻沒有。
從此試驗得出結(jié)論即使在土中，箱內(nèi)的G.trabeum也有效地吸引白蟻。
B.鋸木屑試驗除提及的外，試驗條件與上述木材試驗的相同。用如下所列的各種鋸木屑代替紙板管中的木片(1)未經(jīng)高壓消毒的新鮮鋸木屑(增濕的);(2)高壓消毒的鋸木屑(增濕并經(jīng)高壓消毒25分鐘);(3)G.trabeum鋸木屑(增濕并高壓消毒，然后用G.trabeum接種并在室溫下培養(yǎng)約8周)。
如上所述按以下順序安排試驗管面1管A-高壓消毒的鋸木屑管B-未經(jīng)高壓消毒的鋸木屑管C-G.trabeum鋸木屑面2管D-未經(jīng)高壓消毒的鋸木屑管E-高壓消毒的鋸木屑管FG.trabeum鋸木屑面3管G未經(jīng)高壓消毒的鋸木屑管H高壓消毒的鋸木屑管IG.trabeum鋸木屑面4管J高壓消毒的鋸木屑管KG.trabeum鋸木屑管L未經(jīng)高壓消毒的鋸木屑此試驗的結(jié)果是巢中的白蟻走入土中，很少留在巢中。所有的G.trabeum管中和一支高壓消毒的管(管H)中發(fā)現(xiàn)白蟻。此試驗的結(jié)論是G.trabeum吸引白蟻，但在此項研究所用的時間和距離內(nèi)，單獨的鋸木屑不吸引白蟻。白蟻只從一組放置在土壤中的箱中選擇G.trabeum接種的箱。
實施例10用土盒選擇試驗比較真菌制劑將塑料盒底埋在表土中3cm深，將含有300只白蟻的人工巢放在一端。巢由兩個20×100cm培養(yǎng)皿底制成，在邊上有四個孔，開口對好放在一起，并裝有濾紙和木片。讓白蟻適應(yīng)此環(huán)境3至10天，在盒的另一邊，將兩塊小木片放于在土中挖的淺洞里。
每塊木用引誘劑(G.trabeum感染的木片)，或配制的真菌(與燕麥糠混合的ATCC62176)，或兩者處理或未處理。每盒中板的安排如下所示盒板1板2A木材木材和引誘劑B木材木材和配制的62176C木材和配制的62176木材和引誘劑D木材木材和引誘劑和配制的62176引誘劑放在木塊上面同時配制的致死真菌(62176)放在木塊下的土壤中。
當給定一選擇(盒A中)時，與單獨的木材相比，白蟻較喜歡與G.trabeum有關(guān)的木材。白蟻穿透木塊的表面建造可見的隧道以到達G.trabeum感染的木材。在盒B中，與置于綠僵菌制劑上的木塊相比，白蟻較喜歡未處理的木塊。這些結(jié)果表示綠僵菌驅(qū)避白蟻。在盒C中，與放置于綠僵菌制劑上的木塊相比，白蟻較喜歡G.trabeum處理的木塊。當綠僵菌和G.trabeum置于相同的木塊附近(盒D)時，比單獨的綠僵菌如盒B中，蟻巢中的白蟻死亡要快。
G.trabeum顯示吸引并引起白蟻召引其它白蟻，建巢和取食。與白蟻相遇時，綠僵菌驅(qū)避白蟻。當兩種菌組合時，由于引誘劑(召引刺激物)的存在，白蟻與致死真菌的接觸要容易。因此，可得出結(jié)論，以適當?shù)谋壤涂臻g構(gòu)象組合，G.trabeum將克服綠僵菌的驅(qū)避性質(zhì)并最終導(dǎo)致廣泛傳染和殺死蟻群。
實施例11綠僵菌ATCC62176顆粒劑的驅(qū)避作用在前面描述的場所中，將兩個含有G.trabeum鋸木屑的培養(yǎng)皿相距45cm遠放置，并離隨后放置蟻群的位點60cm遠。在一個培養(yǎng)皿周圍放上20mm寬的一圈培養(yǎng)物62176制劑，而另一培養(yǎng)皿由對照制劑(沒有綠僵菌的燕麥麩)包圍。然后將制劑與土壤混合形成在G.trabeum鋸木屑皿周圍的制劑區(qū)。再用水噴施場所以放置土以及制劑。五天后，蟻群轉(zhuǎn)移入離兩培養(yǎng)皿60cm遠的場所中。觀察G.trabeum皿中真菌生長和白蟻的活性并用來評價制劑的驅(qū)避效果。在同樣的時間設(shè)立三個場所作為重復(fù)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，各場所具有與上述相同的設(shè)置。
蟻群引入12天后，白蟻穿過對照制劑區(qū)，抵達三個場所所有的G.trabeum皿中。在這三個場所中，每個有幾百只白蟻。皿中的白蟻還挖掘鋸木屑并建造隧道，這點從皿外可見。在相同的時期內(nèi)，只有兩個場所中(場所Ⅰ和Ⅱ)一些白蟻穿過62176制劑區(qū)，并且這些引誘劑皿中，每皿都不超過20只白蟻。62176包圍的培養(yǎng)皿外見不到白蟻活動或任何隧道。
顯而易見，穿越62176制劑區(qū)的白蟻數(shù)與穿越對照制劑區(qū)的白蟻數(shù)之間有顯著的差別。這表示如果該制劑與G.trabeum鋸木屑空間分離，62176對白蟻有阻隔作用。
實施例12應(yīng)用綠僵菌ATCC62176顆粒劑保護場所中的木質(zhì)構(gòu)建物材料和方法場所為122×366×30.5cm(寬×長×高)的底部帶15mm深土壤的Plexi玻璃場所。
從Montague，Massachusetts采集白蟻并放在室溫下。使用前，將白蟻移出木材并轉(zhuǎn)移到裝有濾紙的培養(yǎng)皿中。
木框由大塊木料構(gòu)建。
A部分由4片在表面帶許多2cm深槽的5×10×30cm的木材制成。這4片木材用釘子釘在一起成10×35×35cm木質(zhì)長方體。
B部分由4片5×10×30cm的木材制成。用釘子釘在一起成5×40×40cm的木質(zhì)長方體。B部分釘在A部分上形成木框。
將從液體培養(yǎng)基上采集的ATCC培養(yǎng)物62176菌絲與消毒的燕麥麩粉混合。在室溫下用氣流干燥混合物過夜，然后研磨成顆粒并過14＃篩。
高壓消毒木片(13×3×2cm)，用G.trabeum接種，并在室溫下培養(yǎng)4至8周，制得G.trabeum木材。
將木框放在場所中央。在木框基座周圍和下面，將培養(yǎng)物ATCC62176與土混合并將木框安置在上面。在木框中央，在土上放一堆G.trabeum木材。然后將木框用一片紙板蓋上，以防止干燥和保持這一地區(qū)黑暗。場所的各端離木框120cm遠處，與幾片濕濾紙一起轉(zhuǎn)移一蟻群(600-1000只)，蟻群用一邊開有幾個小口的培養(yǎng)皿蓋上，形成蟻巢。使用的兩個蟻群，一個約1000只白蟻，另一個約600只白蟻。然后每周觀察每個場所一或兩次，察看真菌生長以及木框內(nèi)和G.trabeum木堆上白蟻的活動，并定期噴水保持土壤濕潤。另一場所設(shè)置類似的材料，除了使用對照制劑(沒有62176菌絲的燕麥制劑)和兩個各含1000只白蟻的蟻群。
制劑施用后兩天，觀察制劑上真菌生長。施用一周后，62176開始產(chǎn)生分生孢子。分生孢子產(chǎn)生開始后，在制劑上，約持續(xù)20天可見到分生孢子。相同時期里，發(fā)現(xiàn)白蟻生活在巢內(nèi)以及巢周圍的土內(nèi)，但被保護的“木框”或“G.trabeum木堆”里沒有。
試驗開始五周后，在“木框下”和“G.trabeum木堆”里發(fā)現(xiàn)幾百只白蟻。再過十天，發(fā)現(xiàn)在木框下的白蟻(幾百只)全都死亡，而在“G.trabeum木堆”里的還活著。
白蟻移入“G.trabeum木堆”和“木框”后兩周，在“G.trabeum木堆”內(nèi)和一個蟻巢(原有約1000只白蟻的巢)中發(fā)現(xiàn)死蟻。發(fā)現(xiàn)在大多數(shù)土壤中的白蟻死尸上，真菌生長出。從在巢中找到的死尸上分離出綠僵菌。
試驗完成后(試驗開始后67天)，將蟻巢和場所的土壤以及“木框”分開，徹底檢查。一個巢中(發(fā)現(xiàn)死蟻的巢)少于10%的蟻種群還存活著，即該巢中多于90%的白蟻被殺死。另一巢中，未發(fā)現(xiàn)死蟻，并且從巢和土壤中找出的白蟻數(shù)與原白蟻數(shù)大約相同。更重要的是，未見木質(zhì)構(gòu)建物受白蟻侵擾而損害。
對照試驗中，在構(gòu)建物上使用的制劑不含綠僵菌，一周后在木構(gòu)建物上發(fā)現(xiàn)白蟻。隨后，白蟻向上，向周圍掘隧道，進入木。順木框內(nèi)發(fā)現(xiàn)幾百只白蟻，包括第二代和卵。
發(fā)現(xiàn)白蟻與真菌的接觸存在三個階段。首先，蟻群成員花一周的時間，穿越120cm覓食與構(gòu)建物相遇。接著白蟻察覺到處理的構(gòu)建物有綠僵菌存在并避開。一旦真菌在土中達到最大生長，真菌開始死亡。驅(qū)避性質(zhì)馬上消失，并且侵擾白蟻穿過障礙物。然而，土壤中還存在新近產(chǎn)生的分生孢子。當覓食白蟻穿過施用真菌制劑的地區(qū)時，分生孢子附在白蟻上并感染它們。覓食者還將分生孢子帶回巢中感染其它的蟻群成員。這種作用似乎快得足以保護構(gòu)建物，即使蟻數(shù)相當高。
實施13綠僵菌ATCC62176/G.trabeumATCC13021浸泡過箱的土壤場所試驗箱用G.trabeum鋸木屑，綠僵菌ATCC62176制劑和62176分生孢子以100∶5∶1比率的均勻混合物，裝填紙管(3cm直徑×5cm高)。
空白對照室比率為100∶5的G.trabeaum鋸木屑和顆粒，裝填紙管。
場所(122×122×30)和白蟻與實施例9中的相同。每只培養(yǎng)皿含約1000只白蟻，并且作為蟻群對待。用5cm深的土填充場所。
每一場所中，有一蟻群在場所的中央并有四個傳染箱。各箱對著放置，并在每個場所的墻中央，埋入土中。三個場所安置綠僵菌ATCC62176/G.trabeumATCC13021箱作為重復(fù)，和一個場所安置對照箱作為對照。
在所有62176處理的場所，試驗開始一周后，發(fā)現(xiàn)四個室中的兩個有白蟻。然而，二至三周后，雖然土中仍有白蟻活著，但箱內(nèi)未發(fā)現(xiàn)白蟻。對照場所中，從第30天至試驗結(jié)束時的第70天，發(fā)現(xiàn)其中的箱有白蟻。
為確定這些土壤場所中白蟻的死亡率，在第45天將兩個62176處理的場所分開。兩個場所中都得到30%至40%的白蟻死亡率。第70天，在第三個62176箱處理的場所中得到100%的死亡率，而對照場所中未發(fā)現(xiàn)白蟻數(shù)量減少。在對照場所中還觀察到第二代繁殖卵以及小令幼蟲。
從此試驗可得出結(jié)論綠僵菌ATCC62176和G.trabeumATCC13021浸泡的鋸木屑箱能夠吸引，并隨后消滅白蟻種群。
權(quán)利要求
1.一種殺白蟻的組合物，包含與有效量的召引刺激物組合的白蟻昆蟲病原真菌，該召引物克服了白蟻昆蟲病原真菌的驅(qū)避作用。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中白蟻的召引刺激物為Gloeophyllumtrabeum。
3.權(quán)利要求2的組合物，其中Gloeophyllum為生長在營養(yǎng)培養(yǎng)基上的真菌培養(yǎng)物。
4.權(quán)利要求1的組合物，其中白蟻的召引刺激物為腐壞木材的真菌產(chǎn)生的化學(xué)組合物。
5.權(quán)利要求1的組合物，進一步包含昆蟲病原真菌的箱。
6.權(quán)利要求5的組合物，其中箱包含選自下組包括的材料木質(zhì)材料，纖維素基質(zhì)產(chǎn)品，和合成塑料。
7.權(quán)利要求6的組合物，進一步包含箱的套殼。
8.權(quán)利要求7的組合物放在由選自塑料，金屬和木材組成的一組材料制成的抗分解套殼中。
9.權(quán)利要求7的組合物，其中套殼是可生物降解的。
10.權(quán)利要求1的組合物，其中昆蟲病原真菌選自由綠僵菌屬，白僵菌屬，蟲霉菌屬(Entomophthora)，耳霉菌屬(Conidiobolus)，擬青霉菌屬(Paecilomyces)，輪枝孢菌屬(Verticillium)和犁頭霉菌屬(Absidia)的菌種所組成的一組真菌。
11.權(quán)利要求10的組合物，其中真菌選自綠僵菌屬和白僵菌屬。
12.權(quán)利要求1的組合物，其中組合物是含有與纖維素質(zhì)食物混合的真菌菌絲的制劑形式。
13.吸引白蟻的方法，包含在白蟻存在的位點，提供吸引白蟻的Gloeophyllumtrabeum。
14.權(quán)利要求13的方法，其中Gloeophyllum是以活的培養(yǎng)物提供的。
15.權(quán)利要求13的方法，其中Gloeophyllum是以真菌培養(yǎng)物提取物提供的。
16.權(quán)利要求13的方法，進一步包含提供與Gloeophyllum組合的白蟻昆蟲病原真菌。
17.權(quán)利要求16的方法，其中昆蟲病原真菌為白蟻的驅(qū)避劑。
18.權(quán)利要求17的方法，其中昆蟲病原真菌選自由綠僵菌屬，白僵菌屬，輪枝孢菌屬，蟲霉菌屬，耳霉菌屬，擬青霉菌屬和犁頭霉菌屬菌種組成的一組真菌。
19.權(quán)利要求18的方法，其中昆蟲病原真菌選自綠僵菌和球孢白僵菌。
20.權(quán)利要求16的方法，進一步包含真菌箱。
21.權(quán)利要求20的方法，其中箱包含選自由木質(zhì)材料，纖維素基質(zhì)產(chǎn)品，和合成塑料組成的一組材料。
22.權(quán)利要求20的方法，進一步包含箱的套殼。
23.權(quán)利要求13的方法，進一步包含將與引誘劑組合的昆蟲病原真菌，放置在防止受白蟻侵擾的位點。
24.權(quán)利要求13的方法，包括向要保護的構(gòu)建物的地點提供含有與纖維素質(zhì)食物混合的菌絲的制劑。
25.一種保護構(gòu)建物不受白蟻侵擾的驅(qū)避白蟻的方法，包含向構(gòu)建物處提供一種選自由昆蟲病原真菌和驅(qū)避真菌組成的真菌。
26.權(quán)利要求25的方法，其中真菌選自由綠僵菌屬，白僵菌屬，蟲霉菌屬，輪枝孢屬，耳霉菌屬，擬青霉菌屬和犁頭霉菌屬菌種組成的一組真菌。
27.權(quán)利要求26的方法，其中真菌為綠僵菌。
28.權(quán)利要求25的方法，其中將真菌制成制劑混入土中。
29.權(quán)利要求25的方法，其中驅(qū)避劑是昆蟲病原真菌或其它真菌培養(yǎng)物的提取物。
30.權(quán)利要求28的方法，進一步包括將制劑置于蟻群的室中。
31.權(quán)利要求25的方法，其中真菌培養(yǎng)物是置于箱中插入要保護的構(gòu)建物周圍的土中的。
32.驅(qū)避或殺死白蟻的制劑，包含與纖維素基質(zhì)組合物組合的選自感染致死白蟻的真菌和驅(qū)避白蟻的真菌，其中真菌選自孢子，菌絲和它的組合的形式。
33.權(quán)利要求32的制劑，其中真菌選自綠僵菌屬，白僵菌屬，蟲霉菌屬，耳霉菌屬，擬青霉屬和犁頭霉菌屬菌種組成的一組真菌。
34.權(quán)利要求33的制劑，其中真菌是綠僵菌且真菌為菌絲形式。
35.權(quán)利要求33的制劑，其中真菌是白僵菌。
36.權(quán)利要求33的制劑，其中真菌是由篩選對白蟻有作用的土壤分離菌而得到的。
37.權(quán)利要求32的制劑，其中纖維素質(zhì)組合物選自糖，谷物，和鋸木屑。
全文摘要
保護構(gòu)建物不受白蟻侵擾的方法。一方面，優(yōu)選使用引誘劑，如真菌Gloeophyllum trabeum或其揮發(fā)物，吸引白蟻與潛在的致死真菌，如綠僵菌或球孢白僵菌接觸。另一方面，使用天然驅(qū)避白蟻真菌，如綠僵菌，并通過驅(qū)避劑真菌防止白蟻進入其包圍的地區(qū)。以傳染箱或是以與營養(yǎng)組合物配制的形式提供了單獨或與真菌引誘劑合用的昆蟲病原真菌，并直接施用于居住走道或白蟻巢以引起感染，遷移和蟻群死之，實施例中采用的含綠僵菌和球孢白僵菌的傳染箱證明了對白蟻的防治作用。
文檔編號A01N63/00GK1085733SQ93117629
公開日1994年4月27日 申請日期1993年8月19日 優(yōu)先權(quán)日1992年8月19日
發(fā)明者H·古納, H·段, J·凱恩 申請人:生態(tài)科學(xué)公司