專(zhuān)利名稱(chēng):減輕用除草劑草甘膦制劑處理的草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物內(nèi)的壞死的制作方法
減輕用除草劑草甘膦制劑處理的草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物內(nèi)的壞死
本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2006年3月3日的、發(fā)明名稱(chēng)為“減輕用除草劑草甘膦制劑處理的草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物內(nèi)的壞死”的中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)200680015156. 0 (PCT/US2006/007871)的分案申請(qǐng)。
發(fā)明背景
本發(fā)明一般地涉及用于通過(guò)頂部葉面施用除草劑草甘膦制劑而控制草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物中雜草的改良方法。本發(fā)明還涉及用于實(shí)施本文中所公開(kāi)雜草控制方法的除草劑草甘膦組合物。棉花(即Gossypium hirsutum)提供用于紡織品制造的理想纖維以及用于人類(lèi)消費(fèi)的油、用于家畜的飼料和用于多種工業(yè)產(chǎn)品的基本化學(xué)品。在美國(guó)及世界眾多其他地區(qū)充分建立起棉花生產(chǎn)。如其它栽培作物一樣，雜草可以引起明顯的產(chǎn)量損失并需要種植者精心管理，因?yàn)殡s草通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)包括水、營(yíng)養(yǎng)素和光線(xiàn)在內(nèi)的可用資源起干擾作用。在棉花中，雜草還可以妨礙收獲并通過(guò)降低棉花皮棉產(chǎn)量和皮棉質(zhì)量而對(duì)種植者造成不利經(jīng)濟(jì)影響。控制棉花中雜草的方法包括栽培方法、機(jī)械方法、生物方法和化學(xué)方法。在這些方法中，廣泛采用化學(xué)性雜草控制法以及耕作方法(例如準(zhǔn)備種床、耕作)和栽培方法(例如作物輪換、選擇田地)。
在農(nóng)業(yè)化學(xué)領(lǐng)域內(nèi)稱(chēng)作草甘膦的N-(膦酰甲基)甘氨酸是用在控制萌發(fā)種子、新生幼苗、成熟和已建成木本植物和草本植物以及水生植物生長(zhǎng)的高度有效并且商業(yè)上重要的廣譜植物毒性劑。草甘膦作為出土后除草劑用來(lái)控制栽培作物用地(包括棉花生產(chǎn))內(nèi)類(lèi)型廣泛的一年生和多年生草和闊葉雜草物種的生長(zhǎng)，并且是可從孟山都公司(Monsantocompany, Saint Louis, MO)獲得的ROUNDUP系除草劑中的活性成分。
草甘膦及其鹽便利地以含水除草劑制劑方式(通常含有一種或多種表面活性劑)施用至靶植物的葉組織(即葉或其它光合作用器官)。在施用后，草甘膦由葉組織吸收并轉(zhuǎn)運(yùn)至整個(gè)植物內(nèi)。草甘膦非競(jìng)爭(zhēng)性地阻斷在幾乎全部植物中常見(jiàn)的重要生物化學(xué)途徑。更具體地，草甘膦抑制了導(dǎo)致芳香族氨基酸生物合成的莽草酸途徑。草甘膦通過(guò)抑制植物中存在的酶5-烯醇丙酮酰-3-磷酸莽草酸合酶(EPSP合酶或EPSPS)而抑制磷酸烯醇丙酮酸與3-磷酸莽草酸轉(zhuǎn)化成5-烯醇丙酮酰-3-磷酸莽草酸。
遺傳工程的進(jìn)展已經(jīng)提供轉(zhuǎn)化棉花和其它栽培植物的必要工具，以使它們含有用于改善某些農(nóng)學(xué)性狀及產(chǎn)品質(zhì)量的外來(lái)基因。在農(nóng)學(xué)和環(huán)境上特別重要的一個(gè)性狀是除草劑耐受性，尤其草甘膦除草劑耐受性。草甘膦抵抗或耐受性作物植物可以減少對(duì)控制雜草耕作的需要，因而有效減少土壤侵蝕。此外，草甘膦耐受性作物植物為實(shí)現(xiàn)足夠的雜草控制提供更多簡(jiǎn)便性及靈活性。
草甘膦耐受性棉花例如可以通過(guò)將表達(dá)多種天然或變異的植物或細(xì)菌EPSPS酶的能力導(dǎo)入植物基因組而產(chǎn)生，其中所述的EPSPS酶對(duì)草甘磷具有較低親和力并且因此在草甘膦存在下保留酶的催化活性(見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，633，435,5, 094，945,4, 535，060、6，040，497和6，740，488)。草甘膦耐受性已經(jīng)導(dǎo)入棉花植物并且是在棉花生產(chǎn)中目前廣泛應(yīng)用的成功產(chǎn)品?？蓮拿仙蕉脊镜玫降哪壳吧虡I(yè)上名為棉花事件1445的ROUNDUP READY提供草甘膦抗性。草甘膦通常頂部(OTT)施用至從出土至四葉節(jié)發(fā)育期的ROUNDUP READY棉花(例如以至多約每英畝0. 75磅草甘膦酸當(dāng)量的比率(Ib酸當(dāng)量/A或約0. 84kg酸當(dāng)量/公頃))。與ROUNDUP除草劑草甘膦制劑組合使用的ROUNDUP READY棉花品種已經(jīng)在美國(guó)成為棉花生產(chǎn)中雜草管理的標(biāo)準(zhǔn)程序。對(duì)種植者而言，使用ROUNDUP READY棉花系統(tǒng)的主要優(yōu)點(diǎn)是它允許簡(jiǎn)單而方便地使用草甘膦(一種廣譜的出土后除草劑)以有效控制雜草和牧草、具有優(yōu)異的作物安全性并較少地受到先前植物除草劑應(yīng)用影響。其它好處包括更好地適應(yīng)免耕系統(tǒng)及減耕系統(tǒng)。ROUNDUP READY棉花擴(kuò)展了對(duì)雜草管理的選擇并使實(shí)施雜草控制更容易、更經(jīng)濟(jì)和更有靈活性。已經(jīng)報(bào)道，種植者較少的跨田往返以施用除草劑和較少的栽培往返，這節(jié)省燃料并減少土壤侵蝕。草甘膦耐受性棉花，因此降低除草劑帶來(lái)的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)，與此同時(shí)提高必需的化學(xué)性雜草控制的效率。雖然作為棉花生產(chǎn)中的標(biāo)準(zhǔn)已得到廣泛接受，然而ROUNDUP READY棉花品種對(duì)種植者強(qiáng)加了一些限制。ROUNDUP READY棉花品種具有這樣的繁殖體，其對(duì)在一些情況下可以導(dǎo)致如花粉散發(fā)、落花、落鈴和/或皮棉產(chǎn)量損失所度量的成熟延遲或繁殖性損傷的草甘膦介導(dǎo)性損傷易感。因此，為避免這種繁殖性損傷或使其最小化，通常從第五葉節(jié)期及此后中止向從ROUNDUP READY棉花事件1445及其后代的種子中生長(zhǎng)而來(lái)的棉花植物以頂部方式(例如通過(guò)覆蓋(layby))施用草甘膦除草劑并且取而代之的是在該生長(zhǎng)階段通常將草甘膦作為作物行間的葉后定向噴霧來(lái)施用以便使與棉花植物接觸最小化。除草劑定向施用需要往往易受不正確應(yīng)用影響的專(zhuān)用設(shè)備，必須以較低速度操作，并且與播撒施用器相比，需要每英畝更多次數(shù)的往返。
據(jù)信繁殖性草甘膦耐受性缺乏的原因是關(guān)鍵組織內(nèi)CP4EPSPS表達(dá)不足、這些組織對(duì)草甘膦更敏感和更高量的草甘膦在這些強(qiáng)壯的庫(kù)組織內(nèi)聚集，其中所述的缺乏限制了草甘膦對(duì)對(duì)應(yīng)于名為棉花事件1445的ROUNDUP READY的棉花植物的晚期葉面施用。最近，如國(guó)際公開(kāi)號(hào)W02004/072235所公開(kāi)，孟山都公司已經(jīng)開(kāi)發(fā)出新的草甘膦耐受性棉花事件(命名為M0N88913，將商業(yè)命名為ROUNDUP READY FLEX棉花并具有保藏于美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心、保藏號(hào)為PTA-4854的種子)以向棉花種植者提供改良產(chǎn)物，旨在管理有損經(jīng)濟(jì)的雜草。ROUNDUP READY FLEX棉花因繁殖組織內(nèi)增加的草甘膦耐受性而提供提高的保留果實(shí)和作物安全。這些允許用于頂部方式地面施用草甘膦農(nóng)用除草劑(例如以每英畝草甘膦酸當(dāng)量至多到約I. 125磅(Ib酸當(dāng)量/A或約I. 26kg酸當(dāng)量/公頃)的比率)的期限從棉花出土延長(zhǎng)直至覆蓋，該階段是棉花中雜草控制的關(guān)鍵時(shí)間。通過(guò)這些增強(qiáng)的處理機(jī)會(huì)，與葉后定向施用或遮蔽式噴霧器施用相比，種植者利用頂部除草劑施用可更有效地管理棉花中的雜草控制。
盡管存在由ROUNDUP READY和ROUNDUP READY FLEX棉花在雜草控制中提供的廣為認(rèn)可的優(yōu)勢(shì)，已經(jīng)觀(guān)察到這些轉(zhuǎn)基因棉花品種在某些環(huán)境下，在頂部施用草甘膦除草劑后表現(xiàn)出葉組織壞死易感性。在向處于植物發(fā)育晚期的ROUNDUP READY FLEX棉花以頂部方式施用草甘膦除草劑的情況下，壞死性損害在已處理棉花植物上的外觀(guān)可能因?yàn)楦浞职l(fā)育的株冠和更大的可用葉面積而顯得更醒目。這種現(xiàn)象是罕見(jiàn)的，并且這種葉損傷(如果將遭遇的話(huà))通常是有限的，很少有或沒(méi)有更嚴(yán)重的損傷表現(xiàn)，并且植物在標(biāo)準(zhǔn)或推薦的ROUNDUP處理方案下，棉花可痊愈，基本沒(méi)有產(chǎn)量損失或沒(méi)有對(duì)繁殖力的不利影響。具體而言，棉花的頂部生長(zhǎng)點(diǎn)和隨后的葉未被影響。
因此需要用于向草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物進(jìn)行頂部、葉面施用的方法和除草劑草甘膦制劑，它們?cè)陔s草控制中有效并且始終避免在生長(zhǎng)季期間可能遭遇的可變環(huán)境條件下誘導(dǎo)已處理植物內(nèi)的明顯葉壞死。
發(fā)明簡(jiǎn)述
如下詳細(xì)討論，根據(jù)本發(fā)明，發(fā)現(xiàn)在頂部方式施用草甘膦除草劑后及在某些生長(zhǎng)條件下在草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物內(nèi)偶爾觀(guān)察到的葉壞死現(xiàn)象受N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸(PMIDA)和/或其鹽誘導(dǎo)，至少部分地受其誘導(dǎo)，N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸 (PMIDA)和/或其鹽在草甘膦除草劑制劑中通常以相對(duì)低的濃度存在。本發(fā)明包含多個(gè)方面和實(shí)施方案，其涉及減輕在以除草劑草甘膦制劑處理的草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物內(nèi)的PMIDA誘導(dǎo)性壞死的策略，包括雜草控制方法、用來(lái)在實(shí)施此類(lèi)雜草控制方法中使用的除草劑草甘膦組合物和制劑以及制造用來(lái)在制備此類(lèi)除草劑草甘膦組合物和制劑中使用的工業(yè)級(jí)草甘膦產(chǎn)物的方法。雖然本發(fā)明具有減輕在草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物內(nèi)的PMIDA誘導(dǎo)性壞死方面的應(yīng)用，本文中所公開(kāi)的本發(fā)明眾多方面和實(shí)施方案具有更廣泛的應(yīng)用。
因此，在多種實(shí)施方案中，提供用于選擇性控制含草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草的方法。該方法包括施加足夠量的包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽的除草劑草甘膦制劑至作物的葉及雜草以控制雜草生長(zhǎng)。在一些實(shí)施方案中，草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物在營(yíng)養(yǎng)組織和繁殖組織內(nèi)具有提高的草甘膦耐受性，以致除草劑草甘膦制劑在棉花作物植物上出現(xiàn)至少5個(gè)葉節(jié)時(shí)的施用沒(méi)有對(duì)植物造成顯著的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷。在一個(gè)實(shí)施方案中，控制存在于草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的濃度和除草劑草甘膦制劑的施用比率，以致沒(méi)有在所述棉花作物植物中誘導(dǎo)明顯葉壞死。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，草甘膦制劑包含N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和安全劑，安全劑的濃度足以抑制由存在于草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，施加至草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的除草劑草甘膦制劑包含N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和除了烷氧基化烷基胺之外的助劑。助劑以有效降低作物內(nèi)細(xì)胞膜通透性的量存在，其目的是與用施用混合物處理的作物相比，降低N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在用制劑處理的作物內(nèi)的細(xì)胞攝取，其中所述的施用混合物除用烷氧基化烷基胺替換助劑之外具有如制劑那樣的相同組成。
備選地，除草劑草甘膦制劑包含N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要是選自N_(膦酰甲基)甘氨酸的堿金屬鹽、烷基胺鹽和鏈烷醇胺鹽形式的其可農(nóng)用鹽；N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和含有助劑的安全劑。選擇除草劑草甘膦制劑內(nèi)助劑的濃度以致于N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽轉(zhuǎn)移至草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的葉組織中的速率足夠緩慢，以抑制由存在于草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
本發(fā)明還提供殺死在含草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草或或控制其生長(zhǎng)以及用于其它雜草控制應(yīng)用內(nèi)的除草劑草甘膦組合物(例如噴霧溶液、罐式混合物和濃縮物)。在一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽、N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽，和如此濃度的安全劑，其足以抑制由存在于草甘膦組合物內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在作物誘導(dǎo)的明顯葉壞死。合適的安全劑可以選自金屬離子、抗氧化劑、保濕劑、光吸收化合物及其混合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水除草劑濃縮組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽以及小于5克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽。組合物還包含氨甲基膦酸并且N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽與氨甲基膦酸的重量比不超過(guò)0. 25:1 ;或組合物還包含除了烷氧基化烷基胺或烷氧基化磷酸酯之外的至少一種表面活性劑；或N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要其鉀鹽、二鉀鹽、單銨鹽、二銨鹽、鈉鹽、單乙醇胺鹽、正丙胺鹽、乙胺鹽、乙二胺鹽、六亞甲基二胺鹽或三甲基琉鹽形式存在；或組合物還包含含有燒氧基化燒基胺和燒氧基化憐酸酷的表面活性劑成分；或N-(膦酰甲基)甘氨酸主要以其異丙胺鹽形式存在。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，除草劑草甘膦組合物包含N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要是選自N-(膦酰甲基)甘氨酸的堿金屬鹽、烷基胺鹽和鏈烷醇胺鹽的其可農(nóng)用鹽形式；N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽；和包含助劑的安全劑，選擇所述助劑的濃度是為了 N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽轉(zhuǎn)移至草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的葉組織中的速率足夠緩慢，以抑制由存在于草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽，其中N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽的濃度基于酸當(dāng)量是至少約360克/升或更高；N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽；易于與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其脫質(zhì)子化作用或部分脫質(zhì)子化作用所形成的陰離子形成絡(luò)合物或鹽的金屬離子安全齊U，其中金屬離子與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量的摩爾比是至少約0.4:1 ;和含有至少一種陽(yáng)離子型表面活性劑的表面活性劑成分。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽；小于5克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽；和氨甲基膦酸(酸當(dāng)量)，其中N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽與氨甲基膦酸的重量比不超過(guò)0.25:1。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽、小于約5克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和除了烷氧基化烷基胺或烷氧基化磷酸酯之外的至少一種表面活性劑。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要是其鉀鹽、二鉀鹽、單銨鹽、二銨鹽、鈉鹽、單乙醇胺鹽、正丙胺鹽、乙胺鹽、乙二胺鹽、六亞甲基二胺鹽或三甲基锍鹽形式，和小于約5克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽、小于約5克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和含有烷氧基化烷基胺或烷氧基化磷酸酯的至少一種表面活性劑成分。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要是其異丙胺鹽形式，和小于約5克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽；基于草甘膦酸當(dāng)量(酸當(dāng)量)的小于0.45wt.%的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽(酸當(dāng)量)；和氨甲基膦酸，其中N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽(酸當(dāng)量)與氨甲基膦酸(酸當(dāng)量)的重量比不超過(guò)0. 25:1。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽，基于N-(膦酰甲基)甘氨酸酸當(dāng)量的 小于約0.45wt.%的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽(酸當(dāng)量)，和除了烷氧基化烷基胺或烷氧基化磷酸酯之外的至少一種表面活性劑。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要是其鉀鹽、二鉀鹽、單銨鹽、二銨鹽、鈉鹽、單乙醇胺鹽、正丙胺鹽、乙胺鹽、乙二胺鹽、六亞甲基二胺鹽或三甲基锍鹽形式，和基于N-(膦酰甲基)甘氨酸酸當(dāng)量的小于約0. 45wt. %(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽(酸當(dāng)量)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽、基于N-(膦酰甲基)甘氨酸的小于約0. 45wt. %的^ (膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和含有烷氧基化烷基胺或烷氧基化磷酸酯的至少一種表面活性劑成分。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要是其異丙胺鹽形式，和基于N-(膦酰甲基)甘氨酸酸當(dāng)量的小于約0. 45wt. %的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽(酸當(dāng)量)。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要是其鹽形式，小于約0.45wt.%N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽(酸當(dāng)量)，和至少約0. 02wt. %的甘氨酸或其鹽(酸當(dāng)量)，其中重量百分?jǐn)?shù)基于相對(duì)于N-(膦酰甲基)甘氨酸酸當(dāng)量的酸當(dāng)量。
仍在又一個(gè)實(shí)施方案中，含水濃縮除草劑草甘膦組合物包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸，其主要是其鹽形式，組合物的制備包含水解二烷基膦酸酯中間體，該中間體包含二烷基N-(膦酰甲基)甘氨酸的羧酸鹽或衍生自二烷基亞膦酸鹽與N-羥甲基甘氨酸的反應(yīng)。
本發(fā)明還提供用于制備除草劑草甘膦組合物和制劑的多種工業(yè)級(jí)草甘膦組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，工業(yè)級(jí)草甘膦組合物基于干重包含至少95wt. %的N-(膦酰甲基)甘氨酸酸當(dāng)量、小于0. 15wt.%的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和選自不超過(guò)0. 7wt.%的N-甲酰-N-(膦酰甲基)甘氨酸或不超過(guò)0. 03wt. %的N-甲基亞氨基二乙酸中的副產(chǎn)物。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，工業(yè)級(jí)草甘膦組合物包含至少90wt. %的N-(膦酰甲基)甘氨酸酸當(dāng)量，小于0.6wt.%的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和氨甲基膦酸，其中N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽與氨甲基膦酸的重量比不超過(guò)0. 25:1，其中重量百分?jǐn)?shù)基于干重。[0037]根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，工業(yè)級(jí)草甘膦組合物包含至少90wt. %的N-(膦酰甲基)甘氨酸酸當(dāng)量或其鹽、小于0. 45wt. %的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和至少0. 02wt. %的甘氨酸或其鹽，其中重量百分?jǐn)?shù)基于干酸當(dāng)量。
根據(jù)又一個(gè)實(shí)施方案，工業(yè)級(jí)草甘膦組合物包含至少90wt. %的N-(膦酰甲基)甘氨酸酸當(dāng)量、在約0. 02wt. %和約0. 25wt. %之間的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和選自不超過(guò)0. 6wt. %N-甲酰-N-(膦酰甲基)甘氨酸的副產(chǎn)物，其中重量百分?jǐn)?shù)基于干酸當(dāng)量。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，草甘膦產(chǎn)物選自包含至少約90wt. %草甘膦酸的工業(yè)級(jí)草甘膦組合物和包含至少約360克/升酸當(dāng)量的草甘膦的可農(nóng)用鹽的濃縮水溶液。組合物基于草甘膦酸當(dāng)量包含小于約0. 45wt. %的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽(酸當(dāng)量)， 以及在約0. 05和約2wt. %之間的草甘雙膦或其鹽(酸當(dāng)量)。
本發(fā)明還提供用于通過(guò)氧化N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸而制備草甘膦的多種工藝過(guò)程，其中草甘膦產(chǎn)物具有低N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量。在一個(gè)實(shí)施方案中，方法包括使含有N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的含水反應(yīng)介質(zhì)與含分子氧的氣體在用于氧化的催化劑存在下接觸；從在得到的產(chǎn)物反應(yīng)溶液內(nèi)獲得的草甘膦中回收草甘膦產(chǎn)物，草甘膦產(chǎn)物的回收包含從含水混合物中分離該產(chǎn)物，其中總N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量與總草甘膦含量的比率高于產(chǎn)物反應(yīng)溶液內(nèi)的相應(yīng)比率至少25%，迫使氧氣在催化劑存在下流經(jīng)含水反應(yīng)介質(zhì)內(nèi)至如此程度，即其足以減少產(chǎn)物反應(yīng)溶液內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量至如此水平，以致回收的草甘膦產(chǎn)物具有基于草甘膦的小于約600ppm的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量；和從工藝過(guò)程中取出草甘膦產(chǎn)物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，工藝過(guò)程包括使含有N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的含水反應(yīng)介質(zhì)與含分子氧的氣體在用于氧化的催化劑存在下接觸；從在得到的產(chǎn)物反應(yīng)溶液內(nèi)獲得的草甘膦中回收草甘膦產(chǎn)物，迫使氧氣在催化劑存在下流經(jīng)含水反應(yīng)介質(zhì)內(nèi)至如此程度，即其足以減少產(chǎn)物反應(yīng)溶液內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量至如此水平，以致回收的草甘膦產(chǎn)物具有基于草甘膦的小于約600ppm的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量；和從工藝過(guò)程中取出草甘膦產(chǎn)物。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，工藝過(guò)程包括氧化在含水反應(yīng)介質(zhì)內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸以產(chǎn)生含有草甘膦和未反應(yīng)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的產(chǎn)物反應(yīng)溶液；將草甘膦以具有基于草甘膦不大于600ppm N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量的產(chǎn)物形式從產(chǎn)物反應(yīng)溶液中回收，該產(chǎn)物形式的回收包括使包含反應(yīng)溶液的水溶液或包含衍生自產(chǎn)物反應(yīng)溶液的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的溶液與具有相對(duì)于草甘膦優(yōu)先對(duì)N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的選擇性親和力的陰離子交換樹(shù)脂接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，工藝過(guò)程包括氧化在含水反應(yīng)介質(zhì)內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸以產(chǎn)生含有草甘膦和未反應(yīng)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的產(chǎn)物反應(yīng)溶液；使草甘膦從包含或衍生自產(chǎn)物反應(yīng)溶液的結(jié)晶器料液中結(jié)晶；使得到的母液內(nèi)的草甘膦晶體漿液接受固體/液體分離處理；清洗一部分母液以從工藝過(guò)程中去除N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸；并將另一份母液再循環(huán)至在其中草甘膦從料液中結(jié)晶的結(jié)晶器內(nèi)，清洗部分的體積相對(duì)于再循環(huán)部分的體積是足夠的，以致在固體/液體分離步驟內(nèi)分離的固體草甘膦晶體具有低于600ppm的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量或可以使其與含水洗滌介質(zhì)接觸以產(chǎn)生具有低于600ppm的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量的固體草甘膦產(chǎn)物。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，工藝過(guò)程包括使初級(jí)反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)含有N-膦酰甲基-亞氨基二乙酸的含水介質(zhì)與含分子氧的氣體在特定氧化催化劑存在下接觸，以產(chǎn)生包含產(chǎn)物反應(yīng)溶液并使特定催化劑懸浮于其中的產(chǎn)物漿液，其中所述的產(chǎn)物反應(yīng)溶液包含草甘膦和未反應(yīng)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸；將催化劑從反應(yīng)產(chǎn)物溶液中分離以產(chǎn)生過(guò)濾的產(chǎn)物反應(yīng)溶液；并使包含或衍生自過(guò)濾產(chǎn)物反應(yīng)溶液的水溶液與精煉反應(yīng)區(qū)內(nèi)的氧化劑接觸以使N-膦酰甲基-亞氨基二乙酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成草甘膦。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，工藝過(guò)程包括使含有N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的含水反應(yīng)介質(zhì)與含分子氧的氣體在碳上貴金屬催化劑存在下并且不存在非貴金屬助催化劑濃度下接觸，其中所述濃度的非貴金屬助催化劑將有效遲滯N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的氧化或引起氧氣在氧化甲醛或甲酸中的消耗速率相對(duì)于氧氣在氧化N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸中的消耗速率顯著提高；并維持反應(yīng)介質(zhì)與含分子氧的氣體接觸持續(xù)足夠時(shí)間，以降低得到的產(chǎn)物反應(yīng)溶液中的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量至不大于250ppm。在又一個(gè)實(shí)施方案中，工藝過(guò)程包括氧化在含水反應(yīng)介質(zhì)內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸以產(chǎn)生含有草甘膦和未反應(yīng)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的產(chǎn)物反應(yīng)溶液；轉(zhuǎn)移產(chǎn)物反應(yīng)溶液至多種草甘膦產(chǎn)物經(jīng)其而產(chǎn)生的產(chǎn)物回收過(guò)程；和操作產(chǎn)物回收過(guò)程以產(chǎn)生至少2種分開(kāi)的具有不同N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量的草甘膦鹽產(chǎn)物，其中產(chǎn)物之一的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量基于草甘膦小于約IOOOppm,該含量低于多種草甘膦產(chǎn)物中另一種產(chǎn)物的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量至少25%。
仍在又一個(gè)實(shí)施方案中，工藝過(guò)程包括使N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸與氧化作用反應(yīng)區(qū)內(nèi)的在含水反應(yīng)介質(zhì)中的氧化劑在用于氧化的催化劑存在下接觸，因而實(shí)現(xiàn)N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的氧化并產(chǎn)生包含草甘膦或可以轉(zhuǎn)換成草甘膦的其它中間體的反應(yīng)溶液；并且進(jìn)一步加工反應(yīng)溶液以產(chǎn)生含有不超過(guò)約600ppm N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽的草甘膦產(chǎn)物，繼續(xù)含水反應(yīng)介質(zhì)內(nèi)N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的氧化直至反應(yīng)介質(zhì)內(nèi)N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸的濃度已經(jīng)降低至最終濃度，以致所述的進(jìn)一步加工產(chǎn)生基于草甘膦的不大于約600ppm濃度。
本發(fā)明還提供編程控制方案，其與用來(lái)通過(guò)氧化N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸而制備草甘膦的多種方法組合使用。此類(lèi)方法還包括測(cè)量影響如通過(guò)本方法所產(chǎn)生的一種或更多種草甘膦產(chǎn)物中N-(甲基磷酸)亞氨基二乙酸含量的選擇方法變量；通過(guò)自動(dòng)化控制回路控制選擇方法變量，以符合于分別建立在所述諸回路內(nèi)的調(diào)定點(diǎn)；將信號(hào)傳輸至傳送度量值和調(diào)定點(diǎn)值的編程性控制器內(nèi)；根據(jù)寫(xiě)入軟件內(nèi)的算法對(duì)與所述信號(hào)相對(duì)應(yīng)的調(diào)定點(diǎn)計(jì)算調(diào)節(jié)量，其中控制器用所述的軟件編程；和將來(lái)自編程性控制器的信號(hào)傳輸至用于調(diào)節(jié)調(diào)定點(diǎn)的控制回路以使對(duì)方法操作與算法一致。
本發(fā)明還提供用于制備包含至少約360克/升(基于酸當(dāng)量)的N-(膦酰甲基)甘氨酸(其主要是其鹽形式)的含水除草劑濃縮組合物的工藝過(guò)程。工藝過(guò)程包括水解包含二烷基N-(膦酰甲基)甘氨酸、二烷基N-(膦酰甲基)甘氨酸的羧酸鹽或由二烷基亞膦酸鹽與N-羥甲基甘氨酸反應(yīng)所產(chǎn)生其它酯中間體的二烷基中間體，以產(chǎn)生包含草甘膦或草甘膦的可農(nóng)用鹽的溶液；和回收固體草甘膦酸或包含濃度至少約360克/升酸當(dāng)量的草甘膦可農(nóng)用鹽的含水濃縮物。[0050]本發(fā)明還提供供應(yīng)草甘膦產(chǎn)物用于在其中需要將產(chǎn)物的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量始終維持在小于約0.06wt.%(基于草甘膦)的應(yīng)用的方法。該方法包括在制造設(shè)施內(nèi)產(chǎn)生草甘膦，草甘膦在如此設(shè)施內(nèi)的產(chǎn)生包含在用于氧化的催化劑存在下催化氧化含水介質(zhì)內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸；在設(shè)施內(nèi)的指定操縱期間，在可有效始終產(chǎn)生具有基于草甘膦的小于約0. 06wt.%N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量的草甘膦產(chǎn)物的條件下開(kāi)展本方法；和將指定操縱期間所產(chǎn)生的草甘膦與其它操縱期間所產(chǎn)生的其它草甘膦產(chǎn)物分開(kāi)，其中其它草甘膦產(chǎn)物具有基于草甘膦的大于約0. 06wt. %N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸含量。
在本發(fā)明的其它方面，提供用于篩選用來(lái)對(duì)草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因作物植物進(jìn)行葉面施用的除草劑草甘膦制劑的方法，其中所述植物易受存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽所致的葉壞死影響。該方法包括(a)培育作物植物直至預(yù)定發(fā)育階段或持續(xù)預(yù)定時(shí)間階段；(b)施加包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其鹽的除草劑草甘膦制劑至該植物；(c)在預(yù)定的溫度和濕度條件下維持處理的植物持續(xù)預(yù)定時(shí)間階段，其中選擇所述的溫度和濕度條件旨在在引起植物中由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽所致的葉壞死損傷應(yīng)答；和(d)確定對(duì)植物的葉壞死 損傷程度。
總之，本發(fā)明涉及如下項(xiàng)目的技術(shù)方案
I.用于選擇性控制含有草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草的方法，其中所述作物在營(yíng)養(yǎng)組織和繁殖組織內(nèi)具有提高的草甘膦耐受性，該方法包括
當(dāng)所述棉花作物植物上出現(xiàn)至少5個(gè)葉節(jié)時(shí)，向所述作物及雜草的葉施加足夠量的包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽的除草劑草甘膦制劑以控制所述雜草生長(zhǎng)，而未對(duì)所述作物植物造成明顯的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷；和
控制存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的濃度以及所述田中所述作物及雜草與除草劑草甘膦制劑的施加比率，以致未在所述棉花作物植物中誘導(dǎo)明顯的葉壞死。
2.用于選擇性控制含草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草的方法，該方法包括
向所述作物及雜草的葉應(yīng)用足夠量的除草劑草甘膦制劑以控制所述雜草的生長(zhǎng)，除草劑草甘膦制劑包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽、N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽及安全劑，其中安全劑的濃度足以抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
3.項(xiàng)目2所述的方法，其中施加所述除草劑草甘膦制劑至處于特定發(fā)育期的所述作物植物，而未對(duì)所述作物植物造成明顯的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷。
4.項(xiàng)目3所述的方法，其中草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物在營(yíng)養(yǎng)組織和繁殖組織內(nèi)具有提高的草甘膦耐受性，以致當(dāng)所述棉花作物植物上出現(xiàn)至少5個(gè)葉節(jié)時(shí)，施加所述除草劑草甘膦制劑至所述田中的所述作物及雜草，而未對(duì)所述作物植物造成明顯的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷。
5.項(xiàng)目I或4所述的方法，其中在所述作物植物上出現(xiàn)至少一個(gè)繁殖節(jié)時(shí)，施加除草劑草甘膦制劑至所述田中的所述作物及雜草。[0061]6.項(xiàng)目I或4所述的方法，其中當(dāng)所述作物植物上存在6個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)，或當(dāng)所述作物植物上存在10個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)，或當(dāng)所述作物植物上存在12個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)，或當(dāng)所述作物植物上存在14個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)時(shí)，施加除草劑草甘膦制劑至所述田中的所述作物及雜草。
7.項(xiàng)目I或4所述的方法，其中施加除草劑草甘膦制劑至具有所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的所述田中的所述作物及雜草，其中所述的田中包括田邊。
8.項(xiàng)目I或4所述的方法，其中當(dāng)所述作物植物上存在6個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)且不超過(guò)10、12、14、16、18、20或25個(gè)葉節(jié)時(shí)，施加除草劑草甘膦制劑至所述田中的所述作物及雜 草。
9.項(xiàng)目I或4中任一項(xiàng)所述的方法，其中草甘膦介導(dǎo)對(duì)所述作物植物的繁殖損傷通過(guò)花粉散發(fā)和/或皮棉產(chǎn)量來(lái)定量。
10.項(xiàng)目9所述的方法，其中所述作物植物表現(xiàn)出這樣的花粉散發(fā)，其與4葉節(jié)階段后未葉面施用除草劑草甘膦制劑的草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的花粉散發(fā)是可比的。
11.項(xiàng)目9所述的方法，其中所述作物植物表現(xiàn)出這樣的皮棉產(chǎn)量，其與4葉節(jié)階段后未葉面施用除草劑草甘膦制劑的草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的皮棉產(chǎn)量是可比的。
12.項(xiàng)目I至11中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述作物內(nèi)的葉壞死通過(guò)所述作物植物葉表面上壞死性損害的面積定量，并且其中所述作物植物葉表面上的壞死性損害面積平均占不超過(guò)約25%的所述作物植物的總?cè)~面積，或不超過(guò)約20%的所述作物植物的總?cè)~面積，或不超過(guò)約15%的所述作物植物的總?cè)~面積，或不超過(guò)約10%的所述作物植物的總?cè)~面積，或不超過(guò)約5%的所述作物植物的總?cè)~面積。
13.項(xiàng)目2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全齊U，并且所述安全劑通過(guò)抑制所述作物植物內(nèi)植物毒性自由基的堆積而抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
14.項(xiàng)目2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含所選濃度的助劑，所選濃度的助劑使得N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽轉(zhuǎn)移至所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的葉組織中的速率足夠緩慢，以便抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
15.項(xiàng)目14的方法，其中所述助劑包含烷基多聚葡糖苷、二元醇、三元醇、多元醇、二鏈烷醇胺、三鏈烷醇胺、聚亞烷基二醇、二亞烷基二醇、三亞烷基二醇、多元醇酯、烷氧基化酰胺、烷氧基化烷基苯酚、烷氧基化芳基苯酚、脂肪醇烷氧基化物或醇烷氧基化物。
16.項(xiàng)目2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑選自金屬離子、抗氧化劑、保濕劑、光吸收化合物及其混合物。
17.項(xiàng)目2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含易于與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其通過(guò)脫質(zhì)子化作用或部分脫質(zhì)子化作用所形成的陰離子形成絡(luò)合物或鹽的金屬離子，此種絡(luò)合物或鹽的形成可以有效抑制由存在于所述除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。[0073]18.項(xiàng)目17所述的方法，其中金屬離子是多價(jià)的。
19.項(xiàng)目17或18所述的方法，其中金屬離子是過(guò)渡金屬離子。
20.項(xiàng)目17或18所述的方法，其中金屬離子選自鋁、銻、鐵、鉻、鎳、錳、鈷、銅、鋅、釩、鈦、鑰、錫、鋇及其混合物。
21.項(xiàng)目20所述的方法，其中金屬離子選自鋁、銅、鐵、鋅及其混合物。
22.項(xiàng)目21所述的方法，其中安全劑包含鐵和鋅金屬離子的混合物或鐵和銅金屬離子的混合物。
23.項(xiàng)目2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含抗氧化劑。
24.項(xiàng)目2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含保濕劑。
25.項(xiàng)目2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含光吸收化合物。
26.項(xiàng)目2至25中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全齊U，并且存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的濃度以及所述田中所述作物及雜草與除草劑草甘膦制劑的施加比率是這樣的，以致N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的施加比率大于約2. 5g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃。
27.項(xiàng)目中I至25中任一項(xiàng)中任一項(xiàng)的方法，其中控制存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的濃度以及所述田中所述作物及雜草與除草劑草甘膦制劑的施加比率，以致N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的施加比率不超過(guò)約2. 5gN-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約2. 2g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約2g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約I. 7gN-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約I. 5g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約I. 2g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約IgN-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約0. 7g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約0. 5g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約0. 25gN-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃。
28.用于選擇性控制含有草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的田中雜草的方法，其中所述作物在營(yíng)養(yǎng)組織和繁殖組織內(nèi)具有提高的草甘膦耐受性，該方法包括
當(dāng)所述棉花作物植物上出現(xiàn)至少5個(gè)葉節(jié)時(shí)，向所述作物及雜草的葉施加足夠量的包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽的除草劑草甘膦制劑以控制所述雜草生長(zhǎng)，而未對(duì)所述作物植物造成明顯的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷，其中除草劑草甘膦制劑還包含N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和除烷氧基化烷基胺之外的助劑，所述助劑以如此的量存在，其有效降低所述作物內(nèi)的細(xì)胞膜通透性，以便與用施用混合物處理的作物相比降低所述N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在用所述制劑處理的所述作物內(nèi)的細(xì)胞攝入，其中除了烷氧基化烷基胺被替換為所述助劑之外所述制劑具有與所述施用混合物相同的組成。
29.用于選擇性控制含草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草的方法，該方法包括[0086]向所述作物及雜草的葉施加足夠量的除草劑草甘膦制劑以控制所述雜草生長(zhǎng)，除草劑草甘膦制劑包含N-(膦酰甲基)甘氨酸主要為、N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽以及包含助劑的安全劑，其中N-(膦酰甲基)甘氨酸主要為選自N-(膦酰甲基)甘氨酸的堿金屬鹽、烷基胺鹽和鏈烷醇胺鹽的可農(nóng)用鹽形式，其中如此選擇除草劑草甘膦制劑中所述助劑的濃度，以致N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽轉(zhuǎn)移至所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的葉組織中的速率足夠緩慢，以便抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
30.項(xiàng)目29所述的方法，其中所述助劑包括烷基多聚葡糖苷、二元醇、三元醇、多元醇、二鏈烷醇胺、三鏈烷醇胺、聚亞烷基二醇、二亞烷基二醇、三亞烷基二醇、多元醇酯、烷氧基化酰胺、烷氧基化烷基苯酚、烷氧基化芳基苯酚、脂肪醇烷氧基化物或醇烷氧基化物。
·[0088]31.項(xiàng)目29或30所述的方法，還包括除了銨或二銨之外的N-(膦酰甲基)甘氨酸鹽。
32.項(xiàng)目I至31中任一項(xiàng)所述的方法，其中草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的基因組包含選自 SEQ ID N0:USEQ ID NO:2,SEQ ID N0:3 和 SEQ ID NO:4 的一個(gè)或更多個(gè) DNA分子；或
在DNA擴(kuò)增方法中，草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的基因組產(chǎn)生包含SEQ ID NO: I或SEQ ID NO:2的擴(kuò)增子；或
草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物包含與標(biāo)記多核酸的互補(bǔ)鏈遺傳連鎖的草甘膦耐受性狀，并且該標(biāo)記多聚核酸分子與選自SEQ ID NO: I和SEQID NO: 2的DNA分子同源或互補(bǔ)。
33.項(xiàng)目I至32中任一項(xiàng)所述的方法，其中草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物包含從棉花事件的種子或其草甘膦耐受性后代生長(zhǎng)而來(lái)的棉花植物，其中所述棉花事件命名為MON 88913并具有保藏于美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)、保藏號(hào)為PTA-4854的代表性種子。
34.項(xiàng)目3或29的方法，其中草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物包含從命名為1445的棉花事件的種子或其草甘膦耐受性后代生長(zhǎng)而來(lái)的棉花植物，并且當(dāng)所述作物植物上存在4個(gè)或更少葉節(jié)時(shí)，出現(xiàn)指定發(fā)育期。
35.用于殺死含草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草或控制其生長(zhǎng)的除草劑草甘膦組合物，包含
N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽；
N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽；和
安全劑，其濃度足以抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死，所述安全劑選自金屬離子、抗氧化劑、保濕劑、光吸收化合物及其混合物。
36.項(xiàng)目35所述的除草劑草甘膦組合物，其中安全劑包含易于與N_(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其通過(guò)脫質(zhì)子化作用或部分脫質(zhì)子化作用所形成的陰離子形成絡(luò)合物或鹽的金屬離子，此種絡(luò)合物或鹽的形成有效抑制由存在于所述除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。[0099]37.項(xiàng)目36所述的組合物，其中所述金屬離子是多價(jià)的。
38.項(xiàng)目36所述的組合物，其中所述金屬離子是過(guò)渡金屬離子。
39.項(xiàng)目36或37所述的組合物，其中金屬離子選自鋁、銻、鐵、鉻、鎳、錳、鈷、銅、鋅、銀、鈦、鑰、錫、鋇、及其混合物。
40.項(xiàng)目39所述的組合物，其中金屬離子選自鋁、銅、鐵、鋅及其混合物。
41.項(xiàng)目42所述的組合物，其中安全劑包含鐵和鋅金屬離子的混合物或者鐵和銅金屬離子的混合物。
42.項(xiàng)目36至41中任一項(xiàng)所述的組合物，其中金屬離子安全劑包含選自鐵、鋁、鋅和銅多價(jià)金屬離子及其混合物的多價(jià)金屬離子。43.項(xiàng)目42所述的組合物，其中金屬離子安全劑包含多價(jià)鐵離子。
44.項(xiàng)目43所述的組合物，其中金屬離子安全劑衍生于選自硫酸鐵、氯化鐵、二元、三元或其它多元羧酸的鐵鹽及其混合物的化合物。
45.項(xiàng)目36至44中任一項(xiàng)所述的組合物，其中金屬離子與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量的摩爾比率是至少約0. 15: I、至少約0. 2: I、至少約0. 25: I、至少約0. 3: I、至少約0. 35: I、至少約0. 4: I、至少約0. 45: I、至少約0. 5: I、至少約0. 55: I、至少約0. 6: I、至少約0. 65: I、至少約0. 7: I、至少約0. 75: I、至少約0. 8: I、至少約0. 85: I、至少約0. 9:1或至少約 0. 95:1。
46.項(xiàng)目36至45中任一項(xiàng)所述的組合物，其中金屬離子與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量的摩爾比率不大于約25: I、不大于約20: I、不大于約15: I、不大于約10: I、不大于約5: I、不大于約4: I、不大于約3:1或不大于約2. 5: I。
47.項(xiàng)目36至46中任一項(xiàng)所述的組合物，其中金屬離子與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量的摩爾比率是從約0. 5:1至約25: I、從約0. 5:1至約20: I、從約I: I至約25: I、從約1:1至約20: I、從約1:1至約15: I、從約1:1至約10: I、從約1:1至約9: I、從約1:1至約8:1、從約I: I至約7:1、從約I: I至約6:1、從約I: I至約5:1、從約I: I至約4:1、從約1:1至約3: I、從約1:1至約2. 5:1或從約1:1至約2:1。
48.項(xiàng)目36至47中任一項(xiàng)所述的組合物，其中組合物為濃縮物形式并且組合物還包含增溶配體以協(xié)助維持制備濃縮組合物期間溶液內(nèi)的金屬離子，從而金屬離子可用于與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其通過(guò)脫質(zhì)子化作用或部分脫質(zhì)子化作用所形成的陰離子形成絡(luò)合物或鹽。
49.項(xiàng)目48所述的組合物，其中金屬離子包含衍生自硫酸鐵、氯化鐵或氧化鐵的多價(jià)鐵并且組合物包含N-(膦酰甲基)甘氨酸的鉀鹽。
50.項(xiàng)目48或49所述的組合物，其中增溶配體選自多酸、羥酸、酐、酯、酰胺、鹵化物鹽或其前體、多羥基化合物、氨基酸、蛋白質(zhì)、多糖及其混合物。
51.項(xiàng)目50所述的組合物，其中增溶配體包含多元羧酸。
52.項(xiàng)目51所述的組合物，其中增溶配體包含檸檬酸。
53.項(xiàng)目48至52中任一項(xiàng)所述的組合物，其中增溶配體以相對(duì)于金屬離子過(guò)量的摩爾數(shù)存在于組合物內(nèi)。
54.項(xiàng)目53所述的組合物，其中增溶配體與金屬離子的摩爾比率是從約I. 5:1至約 4:1。[0117]55.項(xiàng)目35所述的除草劑草甘膦組合物，其中安全劑包含抗氧化劑，選擇抗氧化劑是為了抑制由存在于所述除草劑草甘膦組合物內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
56.項(xiàng)目55所述的組合物，其中抗氧化劑選自氫醌、間苯二酚、BHA、BHT及其混合物。
57.項(xiàng)目55或56所述的組合物，其中抗氧化劑與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量的摩爾比是從約50:1至約I: I、從約40:1至約I: I、從約30:1至約I: I、從約20:1至約I: I、從約15:1至約I: I、從約10:1至約I: I、從約5:1至約I: I、從約3:1至約1:1或從約2:1 至約 1:1。
58.項(xiàng)目35所述的除草劑草甘膦組合物，其中安全劑包含保濕劑，選擇保濕劑是為了抑制由存在于所述除草劑草甘膦組合物內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
59.項(xiàng)目58所述的組合物，其中保濕劑是吸濕性的并且在水中基本不可離子化。
60.項(xiàng)目58或59所述的組合物，其中保濕劑包含多羥基醇。
61.項(xiàng)目60所述的組合物，其中保濕劑選自山梨醇、木糖醇、肌醇、甘露醇、羥泛酸、甘油及其衍生物和混合物。
62.項(xiàng)目58至61中任一項(xiàng)所述的組合物，其中保濕劑與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量的摩爾比率是從約1000:1至約I: I、從約500:1至約I: I、從約250:1至約I: I、從約100:1至約I: I、從約50:1至約I: I、從約40:1至約I: I、從約30:1至約I: I、從約20:1至約I: I、從約15:1至約I: I、從約10:1至約I: I、從約5:1至約I: I、從約3:1至約1:1或 從約2:1至約1:1。
63.項(xiàng)目35所述的除草劑草甘膦組合物，其中安全劑包含光吸收化合物，選擇光吸收化合物是為了抑制由存在于所述除草劑草甘膦組合物內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
64.項(xiàng)目63所述的組合物，其中光吸收化合物包含染料。
65.項(xiàng)目64所述的組合物，其中光吸收化合物包含3-羧基_5_羥基_1_對(duì)-磺苯基-4-對(duì)-磺苯基偶氮吡唑三鈉鹽。
66.項(xiàng)目35至65中任一項(xiàng)所述的組合物，其中組合物還包含表面活性劑成分。
67.項(xiàng)目66所述的組合物，其中表面活性劑包含選自陽(yáng)離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑、陰離子型表面活性劑、兩性表面活性劑、兩性離子表面活性劑及其混合物的至少一種表面活性劑。
68.項(xiàng)目67所述的組合物，其中表面活性劑成分包含選自烷基胺、烷基醚胺、烷基胺烷氧基化物、烷基醚胺烷氧基化物、季烷基胺、季烷基醚胺、烷氧基化季烷基胺、烷氧基化季烷基醚胺、乙酸烷基胺、氧化胺、烷氧基化氧化胺、烷氧基化氧化醚胺及其鹽和混合物的陽(yáng)離子型表面活性劑。
69.項(xiàng)目68所述的組合物，其中表面活性劑成分包含式(3)的乙氧基化烷基胺，
權(quán)利要求
1.用于選擇性控制含有草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草的方法，其中所述作物在營(yíng)養(yǎng)組織和繁殖組織內(nèi)具有提高的草甘膦耐受性，該方法包括 當(dāng)所述棉花作物植物上出現(xiàn)至少5個(gè)葉節(jié)時(shí)，向所述作物及雜草的葉施加足夠量的包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽的除草劑草甘膦制劑以控制所述雜草生長(zhǎng)，而未對(duì)所述作物植物造成明顯的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷；和 控制存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的濃度以及所述田中所述作物及雜草與除草劑草甘膦制劑的施加比率，以致未在所述棉花作物植物中誘導(dǎo)明顯的葉壞死。
2.用于選擇性控制含草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草的方法，該方法包括 向所述作物及雜草的葉應(yīng)用足夠量的除草劑草甘膦制劑以控制所述雜草的生長(zhǎng)，除草劑草甘膦制劑包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽、N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽及安全劑，其中安全劑的濃度足以抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
3.權(quán)利要求
2所述的方法，其中施加所述除草劑草甘膦制劑至處于特定發(fā)育期的所述作物植物，而未對(duì)所述作物植物造成明顯的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷。
4.權(quán)利要求
3所述的方法，其中草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物在營(yíng)養(yǎng)組織和繁殖組織內(nèi)具有提高的草甘膦耐受性，以致當(dāng)所述棉花作物植物上出現(xiàn)至少5個(gè)葉節(jié)時(shí)，施加所述除草劑草甘膦制劑至所述田中的所述作物及雜草，而未對(duì)所述作物植物造成明顯的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷。
5.權(quán)利要求
I或4所述的方法，其中在所述作物植物上出現(xiàn)至少一個(gè)繁殖節(jié)時(shí)，施加除草劑草甘膦制劑至所述田中的所述作物及雜草。
6.權(quán)利要求
I或4所述的方法,其中當(dāng)所述作物植物上存在6個(gè)或更多個(gè)葉節(jié),或當(dāng)所述作物植物上存在10個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)，或當(dāng)所述作物植物上存在12個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)，或當(dāng)所述作物植物上存在14個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)時(shí)，施加除草劑草甘膦制劑至所述田中的所述作物及雜草。
7.權(quán)利要求
I或4所述的方法，其中施加除草劑草甘膦制劑至具有所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的所述田中的所述作物及雜草，其中所述的田中包括田邊。
8.權(quán)利要求
I或4所述的方法，其中當(dāng)所述作物植物上存在6個(gè)或更多個(gè)葉節(jié)且不超過(guò)10、12、14、16、18、20或25個(gè)葉節(jié)時(shí)，施加除草劑草甘膦制劑至所述田中的所述作物及雜草。
9.權(quán)利要求
I或4中任一項(xiàng)所述的方法，其中草甘膦介導(dǎo)對(duì)所述作物植物的繁殖損傷通過(guò)花粉散發(fā)和/或皮棉產(chǎn)量來(lái)定量。
10.權(quán)利要求
9所述的方法，其中所述作物植物表現(xiàn)出這樣的花粉散發(fā)，其與4葉節(jié)階段后未葉面施用除草劑草甘膦制劑的草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的花粉散發(fā)是可比的。
11.權(quán)利要求
9所述的方法，其中所述作物植物表現(xiàn)出這樣的皮棉產(chǎn)量，其與4葉節(jié)階段后未葉面施用除草劑草甘膦制劑的草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的皮棉產(chǎn)量是可比的。
12.權(quán)利要求
I至11中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述作物內(nèi)的葉壞死通過(guò)所述作物植物葉表面上壞死性損害的面積定量，并且其中所述作物植物葉表面上的壞死性損害面積平均占不超過(guò)約25%的所述作物植物的總?cè)~面積，或不超過(guò)約20%的所述作物植物的總?cè)~面積，或不超過(guò)約15%的所述作物植物的總?cè)~面積，或不超過(guò)約10%的所述作物植物的總?cè)~面積，或不超過(guò)約5%的所述作物植物的總?cè)~面積。
13.權(quán)利要求
2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑，并且所述安全劑通過(guò)抑制所述作物植物內(nèi)植物毒性自由基的堆積而抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
14.權(quán)利要求
2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含所選濃度的助劑，所選濃度的助劑使得N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽轉(zhuǎn)移至所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的葉組織中的速率足夠緩慢，以便抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
15.權(quán)利要求
14的方法，其中所述助劑包含烷基多聚葡糖苷、二元醇、三元醇、多元醇、二鏈烷醇胺、三鏈烷醇胺、聚亞烷基二醇、二亞烷基二醇、三亞烷基二醇、多元醇酯、烷氧基化酰胺、烷氧基化烷基苯酚、烷氧基化芳基苯酚、脂肪醇烷氧基化物或醇烷氧基化物。
16.權(quán)利要求
2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑選自金屬離子、抗氧化劑、保濕劑、光吸收化合物及其混合物。
17.權(quán)利要求
2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含易于與N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其通過(guò)脫質(zhì)子化作用或部分脫質(zhì)子化作用所形成的陰離子形成絡(luò)合物或鹽的金屬離子，此種絡(luò)合物或鹽的形成可以有效抑制由存在于所述除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
18.權(quán)利要求
17所述的方法，其中金屬離子是多價(jià)的。
19.權(quán)利要求
17或18所述的方法，其中金屬離子是過(guò)渡金屬離子。
20.權(quán)利要求
17或18所述的方法，其中金屬離子選自鋁、銻、鐵、鉻、鎳、錳、鈷、銅、鋅、釩、鈦、鑰、錫、鋇及其混合物。
21.權(quán)利要求
20所述的方法，其中金屬離子選自鋁、銅、鐵、鋅及其混合物。
22.權(quán)利要求
21所述的方法，其中安全劑包含鐵和鋅金屬離子的混合物或鐵和銅金屬離子的混合物。
23.權(quán)利要求
2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含抗氧化劑。
24.權(quán)利要求
2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含保濕劑。
25.權(quán)利要求
2至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑并且所述安全劑包含光吸收化合物。
26.權(quán)利要求
2至25中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述除草劑草甘膦制劑包含所述安全劑，并且存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的濃度以及所述田中所述作物及雜草與除草劑草甘膦制劑的施加比率是這樣的，以致N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的施加比率大于約2. 5g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃。
27.權(quán)利要求
中I至25中任一項(xiàng)中任一項(xiàng)的方法,其中控制存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的濃度以及所述田中所述作物及雜草與除草劑草甘膦制劑的施加比率，以致N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸及其鹽的施加比率不超過(guò)約2. 5gN-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約2. 2g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約2g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約I. 7gN-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約1.5g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約1.2g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約IgN-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約O. 7g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約O. 5g N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃；或不超過(guò)約O. 25gN-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸當(dāng)量/公頃。
28.用于選擇性控制含有草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的田中雜草的方法，其中所述作物在營(yíng)養(yǎng)組織和繁殖組織內(nèi)具有提高的草甘膦耐受性，該方法包括 當(dāng)所述棉花作物植物上出現(xiàn)至少5個(gè)葉節(jié)時(shí)，向所述作物及雜草的葉施加足夠量的包含N-(膦酰甲基)甘氨酸或其可農(nóng)用鹽的除草劑草甘膦制劑以控制所述雜草生長(zhǎng)，而未對(duì)所述作物植物造成明顯的草甘膦介導(dǎo)性繁殖損傷，其中除草劑草甘膦制劑還包含N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽和除烷氧基化烷基胺之外的助劑，所述助劑以如此的量存在，其有效降低所述作物內(nèi)的細(xì)胞膜通透性，以便與用施用混合物處理的作物相比降低所述N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在用所述制劑處理的所述作物內(nèi)的細(xì)胞攝入，其中除了烷氧基化烷基胺被替換為所述助劑之外所述制劑具有與所述施用混合物相同的組成。
29.用于選擇性控制含草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的田中雜草的方法，該方法包括 向所述作物及雜草的葉施加足夠量的除草劑草甘膦制劑以控制所述雜草生長(zhǎng)，除草劑草甘膦制劑包含N-(膦酰甲基)甘氨酸主要為、N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽以及包含助劑的安全劑，其中N-(膦酰甲基)甘氨酸主要為選自N-(膦酰甲基)甘氨酸的堿金屬鹽、烷基胺鹽和鏈烷醇胺鹽的可農(nóng)用鹽形式，其中如此選擇除草劑草甘膦制劑中所述助劑的濃度，以致N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽轉(zhuǎn)移至所述草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物的葉組織中的速率足夠緩慢，以便抑制由存在于除草劑草甘膦制劑內(nèi)的N-(膦酰甲基)亞氨基二乙酸或其鹽在所述作物內(nèi)誘導(dǎo)的明顯葉壞死。
30.權(quán)利要求
29所述的方法，其中所述助劑包括烷基多聚葡糖苷、二元醇、三元醇、多元醇、二鏈烷醇胺、三鏈烷醇胺、聚亞烷基二醇、二亞烷基二醇、三亞烷基二醇、多元醇酯、烷氧基化酰胺、烷氧基化烷基苯酚、烷氧基化芳基苯酚、脂肪醇烷氧基化物或醇烷氧基化物。
31.權(quán)利要求
29或30所述的方法，還包括除了銨或二銨之外的N-(膦酰甲基)甘氨酸鹽。
32.權(quán)利要求
I至31中任一項(xiàng)所述的方法，其中草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的基因組包含選自 SEQ ID NO:USEQ ID NO:2,SEQ ID N0:3 和 SEQ ID NO:4 的一個(gè)或更多個(gè) DNA分子；或 在DNA擴(kuò)增方法中，草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物的基因組產(chǎn)生包含SEQ ID NO: I或SEQ ID NO:2的擴(kuò)增子；或 草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花植物包含與標(biāo)記多核酸的互補(bǔ)鏈遺傳連鎖的草甘膦耐受性狀，并且該標(biāo)記多聚核酸分子與選自SEQ ID N0:1和SEQID NO: 2的DNA分子同源或互補(bǔ)。
33.權(quán)利要求
I至32中任一項(xiàng)所述的方法，其中草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物包含從棉花事件的種子或其草甘膦耐受性后代生長(zhǎng)而來(lái)的棉花植物，其中所述棉花事件命名為MON 88913并具有保藏于美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)、保藏號(hào)為PTA-4854的代表性種子。
34.權(quán)利要求
3或29的方法，其中草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物包含從命名為1445的棉花事件的種子或其草甘膦耐受性后代生長(zhǎng)而來(lái)的棉花植物，并且當(dāng)所述作物植物上存在4個(gè)或更少葉節(jié)時(shí)，出現(xiàn)指定發(fā)育期。
專(zhuān)利摘要
本發(fā)明一般地涉及用于通過(guò)頂部葉面施用除草劑草甘膦制劑而控制草甘膦耐受性轉(zhuǎn)基因棉花作物植物中雜草和不需要的植物生長(zhǎng)、特別是用于控制雜草生長(zhǎng)的改良方法和除草劑草甘膦組合物。
文檔編號(hào)A01N57/20GKCN102792969SQ201210298071
公開(kāi)日2012年11月28日 申請(qǐng)日期2006年3月3日
發(fā)明者S·D·普羅施, M·E·塞茨, E·A·豪普費(fèi)爾, E·卡薩諾瓦, P·E·羅格斯, D·R·伊頓, D·Z·比徹 申請(qǐng)人:孟山都技術(shù)公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan