本發(fā)明涉及植物培養(yǎng)技術領域,具體地說,涉及一種利用葉柄誘導綠蘿的方法。
背景技術:
綠蘿(學名:epipremnumaureum),屬于麒麟葉屬植物,大型常綠藤本,生長于熱帶地區(qū),常攀援生長在雨林的巖石和樹干上,其纏繞性強,氣根發(fā)達,可以水培種植。成熟枝上葉柄粗壯,長30-40厘米,基部稍擴大,上部關節(jié)長2.5-3厘米、稍肥厚,腹面具寬槽,葉鞘長,葉片薄革質(zhì),翠綠色,通常(特別是葉面)有多數(shù)不規(guī)則的純黃色斑塊,全緣,不等側(cè)的卵形或卵狀長圓形,先端短漸尖,基部深心形,稍粗,兩面略隆起。
綠蘿原產(chǎn)地在印度尼西亞所羅門群島的熱帶雨林中,性喜溫暖、潮濕環(huán)境,要求土壤疏松肥沃、排水良好。在熱帶地區(qū)常攀援生長于巖石和樹干上,成為巨大的觀賞藤本植物,我國南方各地均有栽植。綠蘿耐陰性強,終年常綠,葉面有較厚的角質(zhì)層,能適應室內(nèi)干燥的環(huán)境條件,是優(yōu)良的室內(nèi)觀葉植物。此外,還能吸附和去除室內(nèi)空氣中的甲醛、苯、三氯乙烯等污染物,是天然的“空氣凈化器”,具有較大的市場前景。
綠蘿的繁殖目前是通過扦插進行繁殖,由于綠蘿生長環(huán)境高溫高濕,扦插繁殖的后代極易感病菌,生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象,給綠蘿的培育造成一定的經(jīng)濟損失。
技術實現(xiàn)要素:
有鑒于此,本發(fā)明要解決的技術問題在于克服綠蘿的繁殖目前是通過扦插進行繁殖,由于綠蘿生長環(huán)境高溫高濕,扦插繁殖的后代極易感病菌,生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象,給綠蘿的培育造成一定的經(jīng)濟損失的缺陷。
為解決上述問題,本發(fā)明提供一種利用葉柄誘導綠蘿的方法,包括以下步驟:
選取母株,經(jīng)預處理后取綠蘿外植體;
將所述綠蘿外植體進行機械損傷,并接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基中,得愈傷組織;
將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng),即得;
所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號包括如下組分:
改良ms培養(yǎng)基1號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、萘乙酸、d丁酯、蔗糖、椰子水和瓊脂粉;
所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號包括如下組分:
改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、蔗糖、椰子水和瓊脂粉。
優(yōu)選地,所述選取母株,經(jīng)預處理后取綠蘿外植體,包括:
選取母株運用多菌靈灌根;
取所述母株生長點處嫩葉;
將所述嫩葉消毒,得綠蘿外植體。
優(yōu)選地,所述選取母株運用多菌靈灌根,包括:
選取母株使用80%多菌靈1000倍溶液進行灌根30天,每10天1次。
優(yōu)選地,所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基包括愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號和愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號;
所述將所述綠蘿外植體進行機械損傷,并接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基中,得愈傷組織,包括:
將所述綠蘿外植體修剪后,得葉柄段樣;
將所述葉柄段樣進行機械損傷;
將所述機械損傷的葉柄段樣接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第一愈傷組織;
將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接入誘導培養(yǎng)基2號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第二愈傷組織。
優(yōu)選地,所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基1號中,按照濃度加入3.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得;
所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖、150ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得。
優(yōu)選地,所述改良ms培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:1-5mg/l;
鹽酸硫胺素:3-6mg/l;
鹽酸吡哆醇:0.5-2mg/l;
煙酸:0.5-3mg/l;
精氨酸:50mg/l;
天冬氨酸:100mg/l;
谷氨酸:150mg/l;
所述改良ms培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:1-5mg/l;
鹽酸硫胺素:3-6mg/l;
鹽酸吡哆醇:0.5-2mg/l;
煙酸:0.5-3mg/l;
精氨酸:100mg/l;
天冬氨酸:50mg/l;
谷氨酸:200mg/l。
優(yōu)選地,所述將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng),即得,包括:
將所述第二愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在預設培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng);
每40天繼代一次,即得。
優(yōu)選地,所述預設培養(yǎng)條件,包括:
光照強度:1500-20001x;
光照時間:12小時/日;
溫度:25℃-28℃;
濕度:50%-65%。
優(yōu)選地,所述繼代培養(yǎng)基包括如下組分:改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸、蔗糖和瓊脂粉。
優(yōu)選地,所述繼代培養(yǎng)基,按如下方法進行配制:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得。
本發(fā)明提供一種利用葉柄誘導綠蘿的方法,包括選取母株,經(jīng)預處理后取綠蘿外植體;將所述綠蘿外植體進行機械損傷,并接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基中,得愈傷組織;將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng),即得。本發(fā)明通過綠蘿組織培養(yǎng)技術培育的綠蘿葉柄的無菌苗,可縮短生長周期,避免或減小外界不良因素引起的大規(guī)模莖腐、根腐所帶來的損失,避免了目前對綠蘿通過扦插進行繁殖,扦插繁殖的后代極易感病菌,生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象,給綠蘿的培育造成一定的經(jīng)濟損失的問題。
具體實施方式
為了更清楚地說明本發(fā)明的技術方案,下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的權利要求做進一步的詳細說明,可以理解的是,以下僅示出了本發(fā)明的某些實施例,因此不應被看作是對范圍的限定,任何人在本發(fā)明權利要求范圍內(nèi)所做的有限次的修改,仍在本發(fā)明的權利要求范圍之內(nèi)。
本發(fā)明提供一種利用葉柄誘導綠蘿的方法,包括以下步驟:
選取母株,經(jīng)預處理后取綠蘿外植體;
將所述綠蘿外植體進行機械損傷,并接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基中,得愈傷組織;
所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號包括如下組分:
改良ms培養(yǎng)基1號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、萘乙酸、d丁酯、蔗糖、椰子水和瓊脂粉;
所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號包括如下組分:
改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、蔗糖、椰子水和瓊脂粉。
綠蘿(學名:epipremnumaureum),屬于麒麟葉屬植物,大型常綠藤本,生長于熱帶地區(qū),常攀援生長在雨林的巖石和樹干上,其纏繞性強,氣根發(fā)達,可以水培種植。成熟枝上葉柄粗壯,長30-40厘米,基部稍擴大,上部關節(jié)長2.5-3厘米、稍肥厚,腹面具寬槽,葉鞘長,葉片薄革質(zhì),翠綠色,通常(特別是葉面)有多數(shù)不規(guī)則的純黃色斑塊,全緣,不等側(cè)的卵形或卵狀長圓形,先端短漸尖,基部深心形,稍粗,兩面略隆起。
綠蘿原產(chǎn)地在印度尼西亞所羅門群島的熱帶雨林中,性喜溫暖、潮濕環(huán)境,要求土壤疏松肥沃、排水良好。在熱帶地區(qū)常攀援生長于巖石和樹干上,成為巨大的觀賞藤本植物,我國南方各地均有栽植。綠蘿耐陰性強,終年常綠,葉面有較厚的角質(zhì)層,能適應室內(nèi)干燥的環(huán)境條件,是優(yōu)良的室內(nèi)觀葉植物。此外,還能吸附和去除室內(nèi)空氣中的甲醛、苯、三氯乙烯等污染物,是天然的“空氣凈化器”,具有較大的市場前景。
本發(fā)明提供一種利用葉柄誘導綠蘿的方法,包括選取母株,經(jīng)預處理后取綠蘿外植體;將所述綠蘿外植體進行機械損傷,并接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基中,得愈傷組織;將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng),即得。本發(fā)明通過綠蘿組織培養(yǎng)技術培育的綠蘿葉柄的無菌苗,可縮短生長周期,避免或減小外界不良因素引起的大規(guī)模莖腐、根腐所帶來的損失,避免了目前對綠蘿通過扦插進行繁殖,扦插繁殖的后代極易感病菌,生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象,給綠蘿的培育造成一定的經(jīng)濟損失的問題。
優(yōu)選地,所述選取母株,經(jīng)預處理后取綠蘿外植體,包括:
選取母株運用多菌靈灌根;
取所述母株生長點處嫩葉;
將所述嫩葉消毒,得綠蘿外植體。
優(yōu)選地,所述選取母株運用多菌靈灌根,包括:
選取母株使用80%多菌靈1000倍溶液進行灌根30天,每10天1次。
上述,為外植體選取的步驟,選取形態(tài)正常、生長旺盛的健壯母株預處理(使用80%多菌靈可濕性粉劑1000倍液灌根,每10天一次)30天后,切取莖生長點處2~3片幼嫩完整葉,經(jīng)表面除雜、清洗后的外植體轉(zhuǎn)入超凈工作臺進行消毒處理,得到無菌的綠蘿外植體。此外,綠蘿母株的切面在外植體采集后,對切面進行防護處理,待恢復生長后可以重新取樣。
優(yōu)選地,所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基包括愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號和愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號;
所述將所述綠蘿外植體進行機械損傷,并接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基中,得愈傷組織,包括:
將所述綠蘿外植體修剪后,得葉柄段樣;
將所述葉柄段樣進行機械損傷;
將所述機械損傷的葉柄段樣接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第一愈傷組織;
將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接入誘導培養(yǎng)基2號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第二愈傷組織。
上述,為本發(fā)明中的愈傷組織的誘導培養(yǎng)過程。具體的,保留綠蘿葉片距離葉基1~1.5cm處葉柄,將綠蘿葉柄切成段樣,并且在基部進行縱切刻傷,接種到愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號中,呈橫躺狀態(tài),一半浸沒在培養(yǎng)基中,在溫度為25~28℃,濕度為50~65%的條件下進行暗培養(yǎng),直至葉柄刻傷處膨大,得第一愈傷組織;將得到的膨大葉柄(第一愈傷組織)再次縱切后轉(zhuǎn)接入愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號中,在溫度為25~28℃,濕度為50~65%的條件下暗培養(yǎng),獲得第二愈傷組織。
優(yōu)選地,所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基1號中,按照濃度加入3.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得;
所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖、150ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得。
優(yōu)選地,所述改良ms培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:1-5mg/l;
鹽酸硫胺素:3-6mg/l;
鹽酸吡哆醇:0.5-2mg/l;
煙酸:0.5-3mg/l;
精氨酸:50mg/l;
天冬氨酸:100mg/l;
谷氨酸:150mg/l;
所述改良ms培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:1-5mg/l;
鹽酸硫胺素:3-6mg/l;
鹽酸吡哆醇:0.5-2mg/l;
煙酸:0.5-3mg/l;
精氨酸:100mg/l;
天冬氨酸:50mg/l;
谷氨酸:200mg/l。
上述,需要理解的是,ms培養(yǎng)基是murashige和skoog于1962年為煙草細胞培養(yǎng)設計的,其特點是無機鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿足植物細胞的營養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基?;诖耍@種培養(yǎng)基就用他們的名字來命名。其配方如表所示。
表1ms培養(yǎng)基配方表
優(yōu)選地,所述將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng),即得,包括:
將所述第二愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在預設培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng);
每40天繼代一次,即得。
優(yōu)選地,所述預設培養(yǎng)條件,包括:
光照強度:1500-20001x;
光照時間:12小時/日;
溫度:25℃-28℃;
濕度:50%-65%。
優(yōu)選地,所述繼代培養(yǎng)基包括如下組分:改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸、蔗糖和瓊脂粉。
優(yōu)選地,所述繼代培養(yǎng)基,按如下方法進行配制:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得。
上述,為愈傷組織的繼代培養(yǎng)過程。具體的,將第二愈傷組織轉(zhuǎn)接到繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)條件:光照強度為1500~20001x,每日光照時間為12小時,溫度為25~28℃,濕度為50~65%,每40天繼代一次。
實施例1:
按如下方法進行綠蘿外植體的培養(yǎng):
步驟1,選取母株使用80%多菌靈1000倍溶液進行灌根30天,每10天1次;
步驟2,取所述母株生長點處嫩葉;
步驟3,將所述嫩葉消毒,得綠蘿外植體;
步驟4,將所述綠蘿外植體修剪后,得葉柄段樣;
步驟5,將所述葉柄段樣進行機械損傷;
步驟6,所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基包括愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號和愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號;
步驟7,將所述機械損傷的葉柄段樣接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第一愈傷組織;
步驟8,將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接入誘導培養(yǎng)基2號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第二愈傷組織;
步驟9,將所述第二愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在光照強度:1500-20001x、光照時間:12小時/日、溫度:25℃-28℃、濕度:50%-65%條件下進行培養(yǎng);每40天繼代一次,即得。
1、改良ms培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4,微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2;
還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:1mg/l;
鹽酸硫胺素:3mg/l;
鹽酸吡哆醇:0.5mg/l;
煙酸:0.5mg/l;
精氨酸:50mg/l;
天冬氨酸:100mg/l;
谷氨酸:150mg/l;
2、改良ms培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4,微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2;
還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:1mg/l;
鹽酸硫胺素:3mg/l;
鹽酸吡哆醇:0.5mg/l;
煙酸:0.5mg/l;
精氨酸:100mg/l;
天冬氨酸:50mg/l;
谷氨酸:200mg/l;
3、愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基1號中,按照濃度加入3.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得;
4、愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖、150ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得;
5、繼代培養(yǎng)基,按如下方法進行配制:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得。
實施例2:
按如下方法進行綠蘿外植體的培養(yǎng):
步驟1,選取母株使用80%多菌靈1000倍溶液進行灌根30天,每10天1次;
步驟2,取所述母株生長點處嫩葉;
步驟3,將所述嫩葉消毒,得綠蘿外植體;
步驟4,將所述綠蘿外植體修剪后,得葉柄段樣;
步驟5,將所述葉柄段樣進行機械損傷;
步驟6,所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基包括愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號和愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號;
步驟7,將所述機械損傷的葉柄段樣接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第一愈傷組織;
步驟8,將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接入誘導培養(yǎng)基2號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第二愈傷組織;
步驟9,將所述第二愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在光照強度:1500-20001x、光照時間:12小時/日、溫度:25℃-28℃、濕度:50%-65%條件下進行培養(yǎng);每40天繼代一次,即得。
1、改良ms培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4,微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2;
還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:2mg/l;
鹽酸硫胺素:4mg/l;
鹽酸吡哆醇:1mg/l;
煙酸:1mg/l;
精氨酸:50mg/l;
天冬氨酸:100mg/l;
谷氨酸:150mg/l;
2、改良ms培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4,微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2;
還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:2mg/l;
鹽酸硫胺素:4mg/l;
鹽酸吡哆醇:1mg/l;
煙酸:1mg/l;
精氨酸:100mg/l;
天冬氨酸:50mg/l;
谷氨酸:200mg/l;
3、愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基1號中,按照濃度加入3.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得;
4、愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖、150ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得;
5、繼代培養(yǎng)基,按如下方法進行配制:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得。
實施例3:
按如下方法進行綠蘿外植體的培養(yǎng):
步驟1,選取母株使用80%多菌靈1000倍溶液進行灌根30天,每10天1次;
步驟2,取所述母株生長點處嫩葉;
步驟3,將所述嫩葉消毒,得綠蘿外植體;
步驟4,將所述綠蘿外植體修剪后,得葉柄段樣;
步驟5,將所述葉柄段樣進行機械損傷;
步驟6,所述愈傷組織誘導培養(yǎng)基包括愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號和愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號;
步驟7,將所述機械損傷的葉柄段樣接種至愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第一愈傷組織;
步驟8,將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接入誘導培養(yǎng)基2號中,在溫度25℃-28℃和濕度50%-65%的條件下進行培養(yǎng),得第二愈傷組織;
步驟9,將所述第二愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在光照強度:1500-20001x、光照時間:12小時/日、溫度:25℃-28℃、濕度:50%-65%條件下進行培養(yǎng);每40天繼代一次,即得。
1、改良ms培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4,微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2;
還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:5mg/l;
鹽酸硫胺素:6mg/l;
鹽酸吡哆醇:2mg/l;
煙酸:3mg/l;
精氨酸:50mg/l;
天冬氨酸:100mg/l;
谷氨酸:150mg/l;
2、改良ms培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
以ms培養(yǎng)基為基礎,調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4,微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2;
還包括以下成分,并調(diào)整含量為:
肌醇:5mg/l;
鹽酸硫胺素:6mg/l;
鹽酸吡哆醇:2mg/l;
煙酸:3mg/l;
精氨酸:100mg/l;
天冬氨酸:50mg/l;
谷氨酸:200mg/l;
3、愈傷組織誘導培養(yǎng)基1號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基1號中,按照濃度加入3.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得;
4、愈傷組織誘導培養(yǎng)基2號按如下方法配置:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖、150ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得;
5、繼代培養(yǎng)基,按如下方法進行配制:
在改良ms培養(yǎng)基2號中,按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉,調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8,即得。
應當理解,雖然本說明書按照實施方式加以描述,但并非每個實施方式僅包含一個獨立的技術方案,說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見,本領域技術人員應當將說明書作為一個整體,各實施方式中的技術方案也可以經(jīng)適當組合,形成本領域技術人員可以理解的其他實施方式。
發(fā)明人聲明,本發(fā)明通過上文所列出的一系列的詳細說明僅僅是針對本發(fā)明的可行性實施方式的具體說明,但本發(fā)明并不局限于上述詳細工藝設備和工藝流程。并且即不意味著本發(fā)明應依賴上述詳細工藝設備和工藝流程才能實施。所屬技術領域的技術人員應該明了,對本發(fā)明的任何改進,對本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等,均落在本發(fā)明的保護范圍和公開范圍之內(nèi)。