本發(fā)明屬于水稻抗病研究領(lǐng)域，具體涉及一種通過短時(shí)間褪黑素處理提高水稻抗白葉枯病的方法，該方法適用于我國任何地區(qū)水稻的種植和抗白葉枯病的水稻生長。

背景技術(shù)：

降香黃檀(dalbergiaodoriferat.chen)又名黃花梨，是豆科蝶形花亞科黃檀屬常綠半落葉喬木，別名黃花梨、降香、花梨、香紅木、香枝木、花梨木，是海南省特有的珍貴紅木樹種，被列為國家二級保護(hù)植物，為國家標(biāo)準(zhǔn)5屬8類34種紅木之一(楊冬華,陳福,宋希強(qiáng),等.海南島降香黃檀區(qū)系組成與群落特征分析.熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,(12):110-115.)。降香黃檀原產(chǎn)于中國海南省，曾分布于海南西部、西南部和南部的東方、昌江、樂東、白沙縣和三亞市，北部的瓊山縣有零星分布，但目前只有廣東(連輝明等,2014)、廣西(郭文福&賈宏炎,2006；梁建平等,2015)和福建(葉水西,2008)南部等地也有零星分布，甚至在四川部分地區(qū)也開始引種栽培(倪臻等,2008；羅文揚(yáng)等,2009)，主要原因是干旱限制了降香黃檀的廣泛栽種。在全球氣候變化的大背景下，極端干旱氣候發(fā)生的頻率越來越高。如廣西是石漠化最為嚴(yán)重的地區(qū)之一，石漠化地區(qū)缺少土壤，干旱嚴(yán)重，尤其是水分因子在一定程度上限制了降香黃檀的廣泛栽種(梁建平等,2015)。

在自然生長條件無法改變的情況下，通過提高植物本身對逆境的抗性，可以增強(qiáng)植物適應(yīng)不利生長環(huán)境的能力，平穩(wěn)渡過極端環(huán)境條件。目前我國紅木樹種資源短缺，98％以上的紅木木材依賴進(jìn)口。因此，如何綜合提高降香黃檀抗干旱脅迫的能力，使其在短時(shí)期內(nèi)應(yīng)對極端環(huán)境條件，擴(kuò)大其引種栽培范圍，對發(fā)展人工種植降香黃檀具有重要意義，也能為紅木森林資源的培育提供科學(xué)指導(dǎo)。

本發(fā)明的申請人曾申請的專利cn106386350a公開了一種提高降香黃檀抗旱性的方法，該方法包括如下步驟：對處于生長階段任一時(shí)期的降香黃檀苗連續(xù)澆灌生長調(diào)節(jié)劑溶液，所述的生長調(diào)節(jié)劑溶液含有0.2～0.4mol/l的丙三醇和1～4mmol/l的硅酸鉀，澆灌時(shí)間為8～15d，澆灌量為使土壤水分保持在30％～40％的田間土壤相對含水量。然而，丙三醇為液體，不利于野外攜帶和操作，而且價(jià)格也較本發(fā)明所用的化學(xué)試劑昂貴。相反，本發(fā)明所用的鹽和硅都是固體粉末，可以按照比例進(jìn)行事先稱量混合，再在野外需要時(shí)直接加水配制，更便于攜帶和操作，而且價(jià)格便宜，也更有利于商業(yè)化推廣。另外，本發(fā)明得到了國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31660165)和海南自然科學(xué)基金項(xiàng)目(317052)的資助。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是在于提供一種通過短時(shí)間鹽溶液處理提高降香黃檀抗旱性的方法。該方法可用于提高極端干旱條件下人工種植的降香黃檀成活率。

為了實(shí)現(xiàn)上述的發(fā)明目的，本發(fā)明人創(chuàng)造性地利用si和na的鹽溶液對降香黃檀苗進(jìn)行誘導(dǎo)處理，從而獲得了一種提高降香黃檀抗旱性的方法和生長調(diào)節(jié)劑及其應(yīng)用。具體地，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：

一種提高降香黃檀抗旱性的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：對處于生長階段任一時(shí)期的降香黃檀苗連續(xù)澆灌鹽溶液，所述的鹽溶液含有1～4mmol的si和15～60mmol的na，澆灌時(shí)間為10～14d，澆灌量為使土壤水分保持在25％～30％的田間土壤相對含水量。

進(jìn)一步優(yōu)選地，如上所述提高降香黃檀抗旱性的方法，開始灌澆所述鹽溶液時(shí)，降香黃檀苗高12～17cm。

進(jìn)一步優(yōu)選地，如上所述提高降香黃檀抗旱性的方法，其中的鹽溶液含有1.5～2.5mmol的k2sio3和15～30mmol的nacl。

進(jìn)一步優(yōu)選地，如上所述提高降香黃檀抗旱性的方法，其中的鹽溶液由2mmol的k2sio3和15～30mmol的nacl組成。

進(jìn)一步優(yōu)選地，如上所述提高降香黃檀抗旱性的方法，其中連續(xù)灌澆鹽溶液的時(shí)間為10～14d，每日清晨澆灌1次。

另外，本發(fā)明所提供了一種用于提高降香黃檀抗旱性的鹽溶液，該鹽溶液由1.5～2.5mmol的k2sio3和15～30mmol的nacl組成。

進(jìn)一步優(yōu)選地，如上所述用于提高降香黃檀抗旱性的鹽溶液，該鹽溶液由2mmol的k2sio3和15mmol的nacl組成。

本發(fā)明以降香黃檀為實(shí)驗(yàn)材料，采用人工模擬干旱的方法，分析外源物質(zhì)存在形態(tài)、生理生化等方面對促進(jìn)降香黃檀生長發(fā)育、提高抗旱能力的作用機(jī)制。在本發(fā)明所優(yōu)選的實(shí)施例中，發(fā)明人通過短時(shí)間連續(xù)澆低2mmol的k2sio3和30mmol的nacl混合溶液處理，發(fā)現(xiàn)k2sio3和nacl抗旱作用機(jī)理不同，對具體指標(biāo)的促進(jìn)效果也相差較大。如30mmol的na能夠較為顯著的提高降香黃檀asa-pod的活性，但其對pod活性沒有太大促進(jìn)作用；而2mmol的si能夠較為顯著的提高降香黃檀的pod活性，卻對asa-pod活性沒有顯著促進(jìn)作用。將2mmol的k2sio3和15mmol的nacl配置成混合溶液后，二者可協(xié)同促進(jìn)降香黃檀在旱脅迫環(huán)境中的生長，處理過的降香黃檀相比單一鹽溶液處理過的降香黃檀在干旱條件下生長情況顯著增強(qiáng)。基于上述研究成果，本發(fā)明還提供了si聯(lián)用na在提高降香黃檀抗旱性中的應(yīng)用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提高了降香黃檀對干旱脅迫的抗性，使其在短期內(nèi)能應(yīng)對極端環(huán)境條件，同時(shí)意外地得到了具有協(xié)同作用的鹽溶液，即1.5～2.5mmol的k2sio3和13～30mmol的nacl配置的混合溶液可協(xié)同促進(jìn)降香黃檀在旱脅迫環(huán)境中的生長，處理過的降香黃檀相比單一鹽溶液處理過的降香黃檀在干旱條件下生長情況顯著增強(qiáng)。同時(shí)，采用該鹽溶液實(shí)現(xiàn)降香黃檀抗旱性的方法操作簡便，見效快捷，可使降香黃檀苗能在短時(shí)期內(nèi)應(yīng)對極端環(huán)境條件，擴(kuò)大其引種栽培范圍。

附圖說明

圖1：不同nacl溶液處理對降香黃檀生長的影響(注：1為濕潤對照；2為干旱對照；3為15mmnacl處理；4為30mmnacl處理；5為45mmnacl處理；6為60mmnacl處理)。

圖2：不同濃度na處理下的日均生長量(注：ck濕潤為濕潤對照；ck干旱為干旱對照；na-15為15mmnacl處理；na-30為30mmnacl處理；na-45為45mmnacl處理；na-60為60mmnacl處理；下同)。

圖3：不同k2sio3溶液對降香黃檀生長的影響(注：1為濕潤對照；2為干旱對照；3為1mmk2sio3處理；4為2mmk2sio3處理；5為3mmk2sio3處理；6為4mmk2sio3處理)。

圖4：不同濃度si處理下的日均生長量(注：ck濕潤為濕潤對照；ck干旱為干旱對照；si-1為1mmk2sio3處理；si-2為2mmk2sio3處理；si-3為3mmk2sio3處理；si-4為4mmk2sio3處理；下同)。

圖5：nacl溶液協(xié)同k2sio3溶液對降香黃檀生長的影響(注：1為干旱對照；2為濕潤對照；3為15mmnacl處理；4為30mmnacl處理；5為2mmk2sio3處理；6為15mmnacl+2mmk2sio3處理；7為30mmnacl+2mmk2sio3處理)。

圖6：na、si及na+si協(xié)同處理下的日均生長量(注：ck干旱為干旱對照；ck濕潤為濕潤對照；na-15為15mmnacl處理；na-30為30mmnacl處理；si-2為2mmk2sio3處理；na-15+si-2為15mmnacl+2mmk2sio3處理；na-30+si-2為30mmnacl+2mmk2sio3處理)。

圖7：na、si及na+si協(xié)同處理下的可溶性蛋白含量變化(注：依次ck為濕潤對照；d為干旱對照；na-15為15mmnacl處理；na-30為30mmnacl處理；si-2為2mmk2sio3處理；na-15+si-2為15mmnacl+2mmk2sio3處理；na-30+si-2為30mmnacl+2mmk2sio3處理；下同)。

圖8：na、si及na+si協(xié)同處理下的可溶性糖含量變化。

圖9：na、si及na+si協(xié)同處理下的還原性谷胱甘肽含量變化。

圖10：na、si及na+si協(xié)同處理下的超氧陰離子含量變化。

圖11：na、si及na+si協(xié)同處理下的丙二醛含量變化。

圖12：na、si及na+si協(xié)同處理下的超氧化物歧化酶酶活性變化。

圖13：na、si及na+si協(xié)同處理下的過氧化氫酶酶活性變化。

具體實(shí)施方式

以下是本發(fā)明涉及的具體實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步說明，但是本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于該實(shí)施例。凡是不背離本發(fā)明構(gòu)思的改變或等同替代均包括在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例1：

1、實(shí)驗(yàn)材料

為消除生態(tài)型及其它環(huán)境因素的影響，試驗(yàn)材料來自同一生態(tài)型的兩年生降香黃檀實(shí)生苗。

2、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

前期處理(第一批):各組保持100％土壤相對含水量。外源物質(zhì)處理設(shè)5個(gè)水平，分別澆灌100ml不同濃度的鹽溶液，對照組澆灌對應(yīng)體積的清水。實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4株植物。實(shí)驗(yàn)處理3天后，以相同體積的清水代替澆灌2天，每天記錄苗高(從根部到攏起后最高葉片)。處理10天后采集植株半數(shù)葉片，-72℃保存。

后期處理(第二批):第二批在第一批處理的基礎(chǔ)上進(jìn)行干旱處理。灌溉用量為第一批樣品用量的1/4(25ml)，其他處理同上。

表1單一外源物質(zhì)對降香黃檀生長、抗旱性的最適濃度范圍實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)模型

正交前期處理(第三批)：根據(jù)前面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選取每種物質(zhì)的最適濃度，開展正交實(shí)驗(yàn)，分別澆灌100ml不同濃度的鹽溶液，對照組澆灌對應(yīng)體積的清水。實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4株植物。實(shí)驗(yàn)處理3天后，以相同體積的清水代替澆灌2天，每天記錄苗高(從根部到攏起后最高葉片)。每個(gè)處理設(shè)4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6株植物。處理10天后采集植株葉片，-72℃保存。

正交后期處理(第四批)：第四批在第三批的基礎(chǔ)上進(jìn)行干旱處理。灌溉用量為第三批樣品用量的1/4(25ml)，其他處理同上。

表2外源物質(zhì)對提高降香黃檀抗旱性最優(yōu)配方的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)模型

3、測量方法

四批樣品分別取2.5g、1.5g、2.0g和2.0g新鮮葉片，分別加35ml通用磷酸緩沖液(uspb，內(nèi)包含50mmol/l磷酸緩沖液(ph7.8)，1mmol/ledta，15％甘油，1mmol/lasa，1mmol/ldtt，1mmol/lgsh，5mmol/lmgcl2，和1％(w/v)pvpp)充分研磨。使用離心力為8000g、4℃離心15min后取上層清液，并分裝保存在-72℃超低溫冰箱中。按如下方法測定各項(xiàng)指標(biāo)，并進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析。

3.1可溶性蛋白：

采用bradford法測定蛋白濃度，以牛血清蛋白bsa作為標(biāo)樣制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，取上清加入20μlg250充分混合，放置3min測定波長595nm測定吸光度，并通過已知蛋白濃度制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線查得并計(jì)算蛋白含量。

3.2可溶性糖：參照高俊鳳主編的《植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》中的方法測定，吸取可溶性糖提取液2ml，置10ml離心管中，準(zhǔn)確加入2ml蒸餾水，，加入5ml蒽酮試劑后，同時(shí)置于沸水浴中，準(zhǔn)確加熱7min，立即取出置冰浴中迅速冷卻。待各管溶液達(dá)室溫后，用1cm厚度的比色皿，迅速在620nm測光吸收值。根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線得到可溶性糖含量。

3.3谷胱甘肽(gsh)：參照韓春宇和han的方法測定

利用南京建成試劑盒(a006-1)測定。取上清液100μl，根據(jù)說明書加入試劑，最后進(jìn)行顯色反應(yīng)，在420nm處用酶標(biāo)儀測定其吸光度，雙蒸水調(diào)零。

3.4超氧陰離子(o2^-)：采用羥胺氧化法測定。

此指標(biāo)采用elisa試劑盒測定，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物超氧陰離子含量。

3.5丙二醛(mda)：采用硫代巴比妥酸法

取0.5g鮮葉，加5ml5％tca，研磨后所得勻漿在3000r/min下離心10min。取上清液2ml，加0.67％tba2ml，混合后在100℃水浴上煮沸30min，冷卻后再離心一次。分別測定上清液在波長450nm，532nm和600nm處的吸光度值，計(jì)算出mda的含量。

3.6超氧化物歧化酶(sod)：參照beaucham及yang等方法測定。

取上清液，分別加入1.5ml0.05mol/l磷酸緩沖液，0.3ml130mmol/lmet溶液，0.3ml750μmol/lnbt溶液，100μmol/ledta-na2溶液，0.3ml20μmol/l核黃素，0.05ml酶液，蒸餾水0.25ml混勻，1支對照管置暗處，其他各管于4000lx日光下反應(yīng)5min。以抑制nbt光化還原的50％為一個(gè)酶活性單位表示進(jìn)行計(jì)算。

3.7過氧化氫酶(cat)：參照aebi和huseynova方法

取20μl樣品到1.5ml塑料離心管中，加入20μl過氧化氫酶檢測緩沖液,再及10μl250mmol/l過氧化氫溶液，用移液器迅速混勻；加入450μl過氧化氫酶反應(yīng)終止液混勻；在15min之內(nèi)完成以下步驟，在潔凈的塑料離心管內(nèi)加入40μl過氧化氫酶檢測緩沖液，再加入10μl已終止并混勻的上述反應(yīng)體系，混勻；從上一步驟的50μl體系中取10μl加入到96孔板中的一個(gè)孔內(nèi)，加入200μl顯色工作液，25℃至少孵育15min后測定a520。

3.8過氧化物酶(pod)：在maehly和yang等方法基礎(chǔ)上修改

采用南京建成pod試劑盒測定(a084-3)。利用過氧化物酶催化過氧化氫的原理，加入試劑應(yīng)用液和樣品后混勻，3500×g離心10min，取上清于波長420nm測定各管吸光度值得到pod酶活性。

3.9抗壞血酸過氧化物酶(apx)：在nakano和asada基礎(chǔ)上做適當(dāng)修改

此指標(biāo)采用elisa試劑盒測定，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物抗壞血酸過氧化物酶濃度。

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1生長發(fā)育

由圖1可以看出，經(jīng)歷正常水分生長和干旱脅迫后，與對照相比，降香黃檀苗在不同nacl溶液長勢出現(xiàn)明顯不同，其中60mmna處理下其長勢受到明顯抑制。相反，在15-45mm處理下，長勢有一定的提高，尤其是以30mm的na處理效果最好。由圖2可以看出，在15-45mm處理下的降香黃檀苗的日均生長量較干旱對照有顯著提高，30mm處理的效果最好，但15mm處理與45mm處理的差異并不顯著。因此，在后續(xù)處理中，我們選擇了15mm與45mm的氯化鈉溶液作為優(yōu)選濃度。

由圖3可以看出，經(jīng)歷正常水分生長和干旱脅迫后，與對照相比，降香黃檀苗在不同k2sio3溶液長勢出現(xiàn)明顯不同，其中4mmsi處理下其長勢受到明顯抑制。相反，在1-3mm處理下，長勢有一定的提高，尤其是以2mm的si處理效果最好。由圖4可以看出，在1-3mm的si處理下的降香黃檀苗的日均生長量較干旱對照有顯著提高，其中以2mm處理的效果最好。因此，在后續(xù)處理中，我們選擇了2mm的硅酸鉀溶液作為優(yōu)選濃度。

綜合圖1、2、3、4的分析，我們選擇了15mmnacl、30mmnacl溶液與2mmk2sio3溶液協(xié)同處理降香黃檀苗，闡明其協(xié)同處理效果。由圖5可以看出，經(jīng)歷正常水分生長和干旱脅迫后，與對照相比，降香黃檀苗在15mmnacl、30mmnacl溶液、2mmk2sio3溶液單獨(dú)處理及協(xié)同處理后，其長勢均有顯著的提高。其中na與si協(xié)同處理下其長勢更好。由圖6可以看出，在適合濃度的鈉及硅處理下，降香黃檀苗的日均生長量較干旱對照有顯著提高，其中以鈉、硅協(xié)同處理的效果最好。

4.2可溶性內(nèi)含物的變化

可溶性內(nèi)含物在干旱脅迫下的含量越高，其抗旱性越強(qiáng)。如圖7所示，在水分充足的條件下，與對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均可提高可溶性蛋白的含量。雖然30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果相對差一些，但各處理之間差異并不顯著。干旱條件下，與干旱對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均可提高可溶性蛋白的含量，但單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理的提高效果并不顯著，相反，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均能顯著提高其可溶性蛋白含量，尤其以15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果最好。

如圖8所示，在水分充足的條件下，與對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理對可溶性糖的含量沒有顯著影響。干旱條件下，與干旱對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均可提高可溶性糖的含量，但單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理的提高效果并不顯著，相反，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均能顯著提高其可溶性糖含量，尤其以15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果最好。

如圖9所示，在水分充足的條件下，與對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理對谷胱甘肽的含量沒有顯著影響。干旱條件下，與干旱對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均可顯著提高谷胱甘肽的含量。其中，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理又比單一的鈉、硅處理效果更好，尤其以15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果最好。

4.3超氧陰離子(o2^·—)及膜脂過氧化產(chǎn)物(丙二醛mda)含量的變化

超氧陰離子o2^·—屬于活性氧簇物質(zhì)，是反應(yīng)植物在環(huán)境脅迫下受氧化傷害程度的指示指標(biāo)，其含量越高，表明受氧化傷害的程度越高。如圖10所示，在水分充足的條件下，與對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理對超氧陰離子o2^·—含量沒有顯著影響。干旱條件下，與干旱對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均可顯著降低超氧陰離子o2^·—的含量。雖然，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理與30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均比單一的鈉、硅處理效果更好，而且兩種直接的處理效果差異并不顯著，但是以15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果最好，它與單一的鈉、硅處理的效果達(dá)到顯著差異水平。

丙二醛mda含量是膜脂過氧化的指示指標(biāo)，表示膜系統(tǒng)受傷害的程度。其含量越高，表明膜脂過氧化約嚴(yán)重。如圖11所示，在水分充足的條件下，與對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理對丙二醛mda含量沒有顯著影響。干旱條件下，與干旱對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均可降低丙二醛mda的含量，但效果并沒有達(dá)到顯著差異水平。相反，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均比單一的鈉、硅處理和30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果更好，效果達(dá)到顯著差異水平。

4.4抗氧活化酶酶活性變化

抗氧化酶系統(tǒng)能將活性氧簇物質(zhì)如超氧陰離子o2^·—、h2o2、·oh等轉(zhuǎn)變成對細(xì)胞無毒的物質(zhì)h2o和o2，從而減輕活性氧簇物質(zhì)對植物細(xì)胞的氧化傷害?？寡趸富钚栽綇?qiáng)，清除清除活性氧簇物質(zhì)的能力越強(qiáng)，其抗環(huán)境脅迫的能力越強(qiáng)。如圖12所示，在水分充足的條件下，與對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理對超氧化物歧化酶sod酶活性沒有顯著影響。干旱條件下，與干旱對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均可提高超氧化物歧化酶sod酶活性，但效果并沒有達(dá)到顯著差異水平。相反，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均比單一的鈉、硅處理和30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果更好。與干旱對照相比，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果達(dá)到顯著差異水平。

如圖13所示，在水分充足的條件下，與對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理對過氧化氫酶cat酶活性有一定的提高作用，但沒有顯著影響。干旱條件下，與干旱對照相比，單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理以及30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均可提高過氧化氫酶cat酶活性，但效果并沒有達(dá)到顯著差異水平。相反，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均比單一的鈉、硅處理和30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果更好。與干旱對照相比，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果達(dá)到顯著差異水平。

5、結(jié)論與討論

綜上所述，適當(dāng)濃度的外源物質(zhì)如氯化鈉、硅酸鉀能在一定程度上促進(jìn)降香黃檀的生長發(fā)育提高其干旱抗性，相反，當(dāng)濃度不適(過高或過低)反而起到反作用，造成環(huán)境脅迫。本實(shí)驗(yàn)篩選到15-30mm的氯化鈉、1-2mm的硅酸鉀能促進(jìn)降香黃檀的生長發(fā)育提高其干旱抗性，尤其是以30mm的氯化鈉、2mm的硅酸鉀在促進(jìn)生長發(fā)育方面效果最好。當(dāng)兩者適宜濃度的外源物質(zhì)協(xié)同作用時(shí)，其作用效果可能比單一外源物質(zhì)效果更好。干旱脅迫下，通過對可溶性內(nèi)含物、活性氧物質(zhì)及膜脂過氧化物質(zhì)、抗氧化酶系統(tǒng)的分析發(fā)現(xiàn)，15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理、30mm的na處理協(xié)同2mm的si處理均比單一的15mm的na處理、30mm的na處理、2mm的si處理的效果更好，尤其以15mm的na處理協(xié)同2mm的si處理效果最好。