本發(fā)明屬于農(nóng)作物培養(yǎng)
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種小麥幼苗培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
：小麥?zhǔn)俏覈匾霓r(nóng)作物產(chǎn)品，其產(chǎn)量、品質(zhì)受到小麥品種、氣候、土壤、耕作制度、栽培方法等條件的影響。由于我國人口眾多，每年對小麥的需求量都非常大，選育高產(chǎn)、抗病、抗倒伏等優(yōu)良性狀的小麥新品種一直是備受科學(xué)家關(guān)注的課題。小麥新品種選育方法主要包括傳統(tǒng)雜交育種和矮敗核不育輪回選擇育種以及轉(zhuǎn)基因育種等，這些育種方法都會涉及到小麥幼苗培養(yǎng)實驗。通常情況下，小麥幼苗培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基質(zhì)是沙基培養(yǎng)基，科研工作者將沙基培養(yǎng)基置于培養(yǎng)皿中，然后將小麥種子培養(yǎng)成幼苗。然而，沙基培養(yǎng)基顆粒較多，容易到處散落，不易保存，而且顆粒物質(zhì)消毒不方便，容易造成消毒不充分，最終導(dǎo)致小麥種子染菌霉變。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供的一種小麥幼苗培養(yǎng)方法，解決了現(xiàn)有技術(shù)中，沙基培養(yǎng)基顆粒較多，容易到處散落，不易保存，而且顆粒物質(zhì)消毒不方便，容易造成消毒不充分，最終導(dǎo)致小麥種子染菌霉變的問題。本發(fā)明的目的是提供一種小麥幼苗培養(yǎng)方法，包括以下步驟：s1，小麥催芽：篩選出健康的小麥種子進(jìn)行催芽培養(yǎng)，獲得發(fā)芽小麥種；s2，將多孔海綿消毒后放入消毒后的培養(yǎng)容器中，以多孔海綿作為基質(zhì)載體，向多孔海綿中注入培養(yǎng)基質(zhì)，得到海綿基培養(yǎng)基；所述多孔海綿的結(jié)構(gòu)為：取塊狀海綿剪挖出多個種子通道，每個種子通道均是曲線形狀，并且所述種子通道的出口位于塊狀海綿的上表面，種子通道的底部位于塊狀海綿內(nèi)部；s3，幼苗培養(yǎng)：將發(fā)芽小麥種放入種子通道內(nèi)，然后將盛有發(fā)芽小麥種的多孔海綿置于恒溫培養(yǎng)箱中全光照培養(yǎng)，直至小麥幼苗長成；其中，全光照培養(yǎng)期間每天補充培養(yǎng)基質(zhì)至浸沒多孔海綿上表面。優(yōu)選的，所述小麥幼苗培養(yǎng)方法中，所述催芽培養(yǎng)的步驟為：(1)將小麥種子置于體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水浸泡消毒，浸泡時間為30-60min，得到消毒小麥種；(2)將消毒小麥種浸泡于萌發(fā)液中，直至小麥發(fā)芽，得到發(fā)芽小麥種；所述萌發(fā)液由體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水和苦參浸汁按照1:2的體積比例混合而成；其中，所述苦參浸汁是由新鮮苦參煮沸、過濾后收集得到的濾液。更優(yōu)選的，所述小麥幼苗培養(yǎng)方法中，1l苦參浸汁的制備方法是：取100g洗凈的新鮮苦參，切成0.5-1cm厚度的苦參片，然后將苦參片置于水中煮沸1.5-2h，過濾，收集慮液，最后用無菌水補足1l，得到苦參浸汁。優(yōu)選的，所述小麥幼苗培養(yǎng)方法中，所述多孔海綿內(nèi)種子通道的曲線形狀為s形狀或者為90度的弧線形狀。優(yōu)選的，所述小麥幼苗培養(yǎng)方法中，所述培養(yǎng)基質(zhì)由以下濃度的組分制成：0.5g/l的kno3、0.8g/l的ca(no3)2、0.2g/l的nh4h2po4、0.10g/l的mgso4、0.10g/l的赤霉素，溶劑為自來水。優(yōu)選的，所述小麥幼苗培養(yǎng)方法中，多孔海綿和培養(yǎng)容器均采用體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水浸泡消毒，浸泡時間為10-20min。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用發(fā)明提供的一種小麥幼苗培養(yǎng)方法，具有以下有益效果：1、本發(fā)明使用多孔海綿作為培養(yǎng)基載體，既能避免沙基培養(yǎng)基顆粒到處散落、不易保存的缺陷，又能保證用雙氧水消毒充分，有效防治小麥種子霉變，提高種子發(fā)芽率；且將培養(yǎng)基質(zhì)注入多孔海綿中，海綿吸水性強，水分不易流失和蒸發(fā)，減少澆水次數(shù)，節(jié)約水資源成本；種子通道的曲線設(shè)計模擬土壤結(jié)構(gòu)環(huán)境，萌發(fā)后的幼苗沿種子通道長出，便于擺種操作，種子不易流動，便于觀察管理，并且由于種子通道的設(shè)置，便于雙氧水等液體的進(jìn)出，加快海綿的浸濕速度。2、催芽培養(yǎng)時小麥種子用1％雙氧水浸泡處理，可以防治種子本身攜帶的細(xì)菌、病菌等，防止種子霉變生病，提高幼苗質(zhì)量；另一方面，1％雙氧水可以起到打破種子休眠狀態(tài)，達(dá)到催芽目的。3、1％雙氧水和苦參浸汁作為消毒小麥種的萌發(fā)液，快速打破種子休眠狀態(tài)，提高小麥萌發(fā)效率，縮短萌發(fā)所需時間，其效果比1％雙氧水浸泡效果更佳。附圖說明圖1為本發(fā)明多孔海綿的結(jié)構(gòu)示意圖。附圖標(biāo)記說明：1.塊狀海綿，2.種子通道，3.發(fā)芽小麥種。具體實施方式下面結(jié)合附圖和具體實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明，但不應(yīng)理解為本發(fā)明的限制。下列實施例中未注明具體條件的試驗方法，通常按照常規(guī)條件操作。當(dāng)實施例給出數(shù)值范圍時，應(yīng)理解，除非本發(fā)明另有說明，每個數(shù)值范圍的兩個端點以及兩個端點之間任何一個數(shù)值均可選用。除非另外定義，本發(fā)明中使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語與本
技術(shù)領(lǐng)域：
技術(shù)人員通常理解的意義相同。本發(fā)明的小麥幼苗培養(yǎng)方法，包括以下實施例：實施例1s1，小麥催芽：篩選出健康、無霉變、無破損的小麥種子進(jìn)行催芽培養(yǎng)，獲得發(fā)芽小麥種；所述催芽培養(yǎng)的步驟為：(1)將小麥種子置于體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水浸泡消毒，浸泡時間為30-40min，得到消毒小麥種；(2)將消毒小麥種浸泡于萌發(fā)液中，直至小麥發(fā)芽，得到發(fā)芽小麥種；所述萌發(fā)液由體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水和苦參浸汁按照1:2的體積比例混合而成；其中，1l苦參浸汁的制備方法是：取100g洗凈的新鮮苦參，切成0.5-1cm厚度的苦參片，然后將苦參片置于500ml水中煮沸1.5h，過濾，收集慮液，最后用無菌水補足1l，得到苦參浸汁。s2，將多孔海綿消毒后放入消毒后的培養(yǎng)容器中，以多孔海綿作為基質(zhì)載體，向多孔海綿中注入滅菌后的培養(yǎng)基質(zhì)，直至培養(yǎng)基質(zhì)浸沒多孔海綿上表面，得到海綿基培養(yǎng)基；多孔海綿和培養(yǎng)容器均采用體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水浸泡消毒，浸泡時間為20min。所述多孔海綿的結(jié)構(gòu)如圖1所示，為：取塊狀海綿剪挖出多個種子通道，每個種子通道均是曲線形狀，并且所述種子通道的出口位于塊狀海綿的上表面，種子通道的底部位于塊狀海綿內(nèi)部；所述曲線形狀為s形狀或者為90度的弧線形狀。s3，幼苗培養(yǎng)：將發(fā)芽小麥種放入種子通道內(nèi)，發(fā)芽小麥種滑入種子通道底部，其充分吸收培養(yǎng)基質(zhì)，進(jìn)而長成幼苗，然后將盛有發(fā)芽小麥種的多孔海綿置于恒溫培養(yǎng)箱中全光照培養(yǎng)，直至小麥幼苗長成；其中，全光照培養(yǎng)期間每天補充培養(yǎng)基質(zhì)至浸沒多孔海綿上表面。需要說明的是，s2和s3中所述培養(yǎng)基質(zhì)由以下濃度的組分制成：0.5g/l的kno3、0.8g/l的ca(no3)2、0.2g/l的nh4h2po4、0.10g/l的mgso4、0.10g/l的赤霉素，溶劑為自來水；滅菌條件121℃，15min。實施例2s1，小麥催芽：篩選出健康、無霉變、無破損的小麥種子進(jìn)行催芽培養(yǎng)，獲得發(fā)芽小麥種；所述催芽培養(yǎng)的步驟為：(1)將小麥種子置于體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水浸泡消毒，浸泡時間為50-60min，得到消毒小麥種；(2)將消毒小麥種浸泡于萌發(fā)液中，直至小麥發(fā)芽，得到發(fā)芽小麥種；所述萌發(fā)液由體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水和苦參浸汁按照1:2的體積比例混合而成；其中，1l苦參浸汁的制備方法是：取100g洗凈的新鮮苦參，切成0.5-1cm厚度的苦參片，然后將苦參片置于500ml水中煮沸2h，過濾，收集慮液，最后用無菌水補足1l，得到苦參浸汁。s2，將多孔海綿消毒后放入消毒后的培養(yǎng)容器中，以多孔海綿作為基質(zhì)載體，向多孔海綿中注入滅菌后的培養(yǎng)基質(zhì)，直至培養(yǎng)基質(zhì)浸沒多孔海綿上表面，得到海綿基培養(yǎng)基；多孔海綿和培養(yǎng)容器均采用體積分?jǐn)?shù)1％的雙氧水浸泡消毒，浸泡時間為10min。所述多孔海綿的結(jié)構(gòu)如圖1所示，為：取塊狀海綿剪挖出多個種子通道，每個種子通道均是曲線形狀，并且所述種子通道的出口位于塊狀海綿的上表面，種子通道的底部位于塊狀海綿內(nèi)部；所述曲線形狀為s形狀或者為90度的弧線形狀。s3，幼苗培養(yǎng)：將發(fā)芽小麥種放入種子通道內(nèi)，發(fā)芽小麥種滑入種子通道底部，其充分吸收培養(yǎng)基質(zhì)，進(jìn)而長成幼苗，然后將盛有發(fā)芽小麥種的多孔海綿置于恒溫培養(yǎng)箱中全光照培養(yǎng)，直至小麥幼苗長成；其中，全光照培養(yǎng)期間每天補充培養(yǎng)基質(zhì)至浸沒多孔海綿上表面。需要說明的是，s2和s3中所述培養(yǎng)基質(zhì)由以下濃度的組分制成：0.5g/l的kno3、0.8g/l的ca(no3)2、0.2g/l的nh4h2po4、0.10g/l的mgso4、0.10g/l的赤霉素，溶劑為自來水；滅菌條件121℃，15min。一、不同浸種液的比較小麥幼苗培養(yǎng)過程中，小麥催芽和幼苗生長是重要階段，小麥種子中過氧化物酶pod等的活性是種子萌發(fā)的關(guān)鍵，我們測定了清水浸種、1％雙氧水浸種、萌發(fā)液浸種以及1％雙氧水-萌發(fā)液共同浸種的小麥pod活性，其中1％雙氧水-萌發(fā)液浸種是先將小麥種子置于1％雙氧水中浸泡30min，然后將小麥種子轉(zhuǎn)移至萌發(fā)液中浸泡，其余組是直接將小麥種子置于清水、1％雙氧水或者萌發(fā)液中浸泡，結(jié)果如表1所示。清水浸種72h后，小麥種pod活性最低，為373.6u·min-1·(gfw)-1，觀察此時小麥生理狀態(tài)，其并未出現(xiàn)發(fā)芽現(xiàn)象；1％雙氧水-萌發(fā)液浸種72h的pod活性最高，小麥發(fā)芽率(每100粒中發(fā)芽的小麥種子數(shù))為98％；而1％雙氧水浸種和萌發(fā)液浸種72h后，發(fā)芽率分別為65％和90％，說明1％雙氧水可以起到打破種子休眠狀態(tài)，達(dá)到催芽目的，1％雙氧水和苦參浸汁作為消毒小麥種的萌發(fā)液，快速打破種子休眠狀態(tài)，提高了小麥萌發(fā)效率，縮短萌發(fā)所需時間，其效果比1％雙氧水浸泡效果更佳。表1不同小麥浸種條件下小麥種子pod的活性(u·min-1·(gfw)-1)二、不同培養(yǎng)基質(zhì)比較為了比較不同培養(yǎng)基質(zhì)的作用，我們采用實施例1的催芽培養(yǎng)步驟制備發(fā)芽小麥種，然后將發(fā)芽小麥種分別置于無菌自來水和本發(fā)明的培養(yǎng)基質(zhì)(無菌)中培養(yǎng)，并且每天各自補充無菌自來水和本發(fā)明的培養(yǎng)基質(zhì)(無菌)，觀察記錄小麥幼苗的出苗率和苗高，結(jié)果如表2所示，結(jié)果顯示，利用本發(fā)明的培養(yǎng)基質(zhì)培養(yǎng)小麥幼苗，出苗率和苗高均較清水顯著提高，效果明顯。表2不同培養(yǎng)基質(zhì)小麥的出苗率和苗高三、不同培養(yǎng)基載體比較采用實施例1的催芽培養(yǎng)步驟制備發(fā)芽小麥種，然后分別采用沙子和多孔海綿作為培養(yǎng)基載體培養(yǎng)小麥幼苗，期間補充本發(fā)明的培養(yǎng)基質(zhì)，其中沙子和多孔海綿的消毒方法均是1％的雙氧水浸泡消毒浸泡時間20min，觀察小麥幼苗的染菌霉變情況，計算霉變百分率(100粒發(fā)芽小麥種發(fā)生霉變的種子數(shù)量)結(jié)果如表3所示，結(jié)果表明，多孔海綿作為培養(yǎng)基載體既能避免沙基培養(yǎng)基顆粒到處散落、不易保存的缺陷，又能保證用雙氧水消毒充分，顯著降低小麥霉變現(xiàn)象，有效防治小麥種子霉變。表3不同培養(yǎng)基載體小麥的霉變百分率(％)培養(yǎng)時間沙子多孔海綿1d002d1.603d3.40.94d5.01.55d8.62.2盡管已描述了本發(fā)明的優(yōu)選實施例，但本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員一旦得知了基本創(chuàng)造性概念，則可對這些實施例作出另外的變更和修改。所以，所附權(quán)利要求意欲解釋為包括優(yōu)選實施例以及落入本發(fā)明范圍的所有變更和修改。顯然，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對本發(fā)明進(jìn)行各種改動和變型而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。這樣，倘若本發(fā)明的這些修改和變型屬于本發(fā)明權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi)，則本發(fā)明也意圖包含這些改動和變型在內(nèi)。當(dāng)前第1頁12