本發(fā)明涉及一種動(dòng)物消化系統(tǒng)標(biāo)本的制作方法,尤其涉及一種松香法胃腸消化系統(tǒng)干制標(biāo)本的制作方法。
背景技術(shù):
現(xiàn)有動(dòng)物消化系統(tǒng)標(biāo)本的制作技術(shù)通常采用:福爾馬林浸制、松節(jié)油干制、高分子多聚物塑化三種制作方法制得標(biāo)本。例如,公告號(hào)為CN1971663A的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利,公開(kāi)了一種“一種動(dòng)物標(biāo)本的干式制作方法”,其通過(guò)利用不同濃度甘油分步處理已固定、脫水處理過(guò)的動(dòng)物素材,再用松節(jié)油浸制、風(fēng)干刷漆制得標(biāo)本。此種通過(guò)不同濃度甘油處理、松節(jié)油浸制風(fēng)干的方法存在著缺陷,由于動(dòng)物胃腸壁肌層薄、不同體型動(dòng)物胃腸道長(zhǎng)度在幾米至幾十米,因而采取不同濃度甘油處理、松節(jié)油浸制風(fēng)干的方式制備標(biāo)本,存在甘油消耗量大成本高、步驟繁多周期長(zhǎng)的問(wèn)題,不適用于中、大型動(dòng)物的胃腸消化系統(tǒng)干制標(biāo)本制作。
另外,經(jīng)甘油、松節(jié)油處理后,胃腸道難以承受甘油和松節(jié)油透化,易斷折,使得標(biāo)本色澤蒼白難以維持胃腸原色、形態(tài)完整的問(wèn)題,并最終影響動(dòng)物消化系統(tǒng)標(biāo)本質(zhì)量。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題,提供一種采用松香法胃腸消化系統(tǒng)干制標(biāo)本的制作方法,解決了現(xiàn)有技術(shù)中甘油消耗量大成本高、步驟繁瑣周期長(zhǎng)、甘油和松節(jié)油高強(qiáng)度透化導(dǎo)致的胃腸顏色失真、易折斷、不適用于中、大型動(dòng)物的胃腸消化系統(tǒng)干制標(biāo)本制作等缺陷。
本發(fā)明一種松香法胃腸消化系統(tǒng)干制標(biāo)本的制作方法,其步驟為:
步驟(1)取材:
選擇自然死亡的健康動(dòng)物尸體,完整無(wú)傷取出動(dòng)物消化系統(tǒng),修整消化系統(tǒng)表面,剔除大網(wǎng)膜及腸系膜,流水洗凈消化管清除內(nèi)容物,摘除肝臟保留膽囊,用注射器沿膽囊管刺入,吸出膽汁后,對(duì)膽囊鼓氣并結(jié)扎膽囊管,泡在塑料盆待用;
步驟(2)防腐固定:
預(yù)先配制10倍胃腸體積量的防腐固定液,對(duì)步驟(1)材料用絲線結(jié)扎直腸末端,借助漏斗將防腐固定液由食管處灌入消化管內(nèi),使其處于半充盈狀態(tài),用線結(jié)扎食管,置于收納箱中,加入防腐固定液,覆蓋一層脫脂棉,并在收納箱上加一層塑料膜,密封固定10~14天,期間更換防腐固定液1次;
步驟(3)乙醇脫水固定:
預(yù)先配制10倍胃腸體積量的乙醇固定脫水液,排空消化管內(nèi)防腐固定液,置換為乙醇固定脫水液,同時(shí)將收納箱中的防腐固定液排空并置換為余下的乙醇固定脫水液,保證消化管處于半充盈狀態(tài),覆蓋脫脂棉,在收納箱上加一層塑料膜,密封脫水固定5~7天,直至用酒精比重計(jì)測(cè)乙醇濃度不變化;
步驟(4)梯度乙醇脫水處理:
從食管處排空步驟(3)消化管內(nèi)的乙醇固定脫水液,用氣筒向消化管內(nèi)打氣,使消化管處于半充盈狀態(tài),結(jié)扎食管。將消化管第一次置于80%體積濃度的乙醇溶液中,覆蓋脫脂棉,在收納箱上加一層塑料膜,密封脫水處理4~5天;第二次置于90%體積濃度的乙醇溶液中脫水處理3~5天;第三次置于95%體積濃度的乙醇溶液中脫水處理3~5天;第四次置于無(wú)水乙醇Ⅰ溶液中固定3~5天;最后一次無(wú)水乙醇Ⅱ溶液中浸泡2天;更換乙醇梯度條件以酒精比重計(jì)測(cè)得乙醇濃度不在變化為準(zhǔn);
步驟(5)細(xì)胞填充封固液浸泡處理:
配制5倍胃腸體積量的細(xì)胞填充封固液,常溫下充分?jǐn)嚢枞芙獠⒚荛]靜置1天,用雙層紗布過(guò)濾,將清液倒進(jìn)塑料盆中待用,將步驟(4)消化管取出,按照消化管不同部位肌層厚度,依次分段浸入細(xì)胞填充封固液,并覆蓋一層脫脂棉,浸泡0.5h~3h;
步驟(6)固化定形:
將步驟(5)處理完全的消化管撈出,擺放在陰涼通風(fēng)處干燥固化定形,對(duì)腸管坍塌的部位氣筒鼓氣至半充盈狀態(tài),胃不能鼓起時(shí)做小切口塞入無(wú)菌氣球撐起后縫合,通風(fēng)干燥2~3天,以消化管呈80%~85%固化程度時(shí)刷漆包被;
步驟(7)刷漆包被:
整潔步驟(6)材料上多余松香晶體及脂肪,對(duì)腸管上出現(xiàn)的白色松香結(jié)晶用紗布蘸取無(wú)水乙醇擦拭回復(fù)原色,均勻涂刷一遍清漆,通風(fēng)晾干3天,再次涂刷一遍清漆,晾干后對(duì)標(biāo)本進(jìn)行最終整體修整,用魚(yú)線將標(biāo)本綁在細(xì)木工板上,標(biāo)注器官名稱(chēng),裝入有機(jī)玻璃罩內(nèi)密封保存。
所述的步驟(1)中,用5ml注射器沿膽囊管刺入;整個(gè)步驟(1)應(yīng)在常溫環(huán)境下4h內(nèi)完成。
所述的步驟(2)中,防腐固定液為,市售甲醛、水和冰乙酸的體積比為,市售甲醛:水:冰乙酸=100:870:30。
所述的步驟(3)中,乙醇固定脫水液為,無(wú)水乙醇、自來(lái)水和冰乙酸的體積比為,無(wú)水乙醇:自來(lái)水:冰乙酸= 700:270:30。
所述的步驟(5)中,細(xì)胞填充封固液為,松香、松節(jié)油和無(wú)水乙醇的質(zhì)量體積比為,松香:松節(jié)油:無(wú)水乙醇=1.2kg:500ml:500ml。
所述的步驟(5)中,浸泡標(biāo)準(zhǔn)以胃腸管壁接近半透明為宜,在保證松香飽和濃度情況下,細(xì)胞填充封固液多次重復(fù)利用,每段腸管都要浸泡處理完全。
本發(fā)明的有益效果是,本發(fā)明依據(jù)相似相容的原理,將細(xì)胞填充封固液中松香成分短時(shí)間內(nèi)快速填充進(jìn)無(wú)水乙醇脫水完全的胃腸組織細(xì)胞,同時(shí)乙醇和松節(jié)油本身極易揮發(fā),能快速干制得到胃腸消化系統(tǒng)標(biāo)本,有效地解決了現(xiàn)有技術(shù)中甘油消耗量大成本高、步驟繁瑣周期長(zhǎng)、甘油和松節(jié)油高強(qiáng)度透化導(dǎo)致的胃腸顏色失真、易折斷、難以應(yīng)用于中、大型動(dòng)物的胃腸消化系統(tǒng)干制標(biāo)本制作等缺陷。制作需要儀器設(shè)備要求低、試劑常見(jiàn)、步驟少而時(shí)間短,尤其是松香本身無(wú)毒、無(wú)腐蝕性,具有防腐、防潮、防霉、保真、軟化能力,使標(biāo)本自身具有很強(qiáng)驅(qū)蟲(chóng)、防腐、防潮效果,而且標(biāo)本呈淡琥珀色澤、富有彈力、不損傷材料固有形態(tài)、皺縮率低于9%,在保證標(biāo)本制作的環(huán)保健康基礎(chǔ)上,提高標(biāo)本質(zhì)量和保存效果。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白,以下結(jié)合具體實(shí)施例,對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解,此處所描述的具體實(shí)施例僅是用以解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。
試劑及器械準(zhǔn)備:
試劑:無(wú)水乙醇、松香、松節(jié)油、甲醛、冰乙酸、清漆。
器械:解剖臺(tái)、手術(shù)刀、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、手術(shù)盤(pán)、直針、絲線、500ml量筒、500ml燒杯、2000ml燒杯、漏斗、臺(tái)秤、塑料盆、大號(hào)塑料收納箱、脫脂棉、氣筒、塑料膜、細(xì)木工板、漆刷、魚(yú)線、防護(hù)用具。
裝飾材料:標(biāo)簽、有機(jī)玻璃罩。
【實(shí)施例1】
制作羊胃腸消化系統(tǒng)松香干制標(biāo)本
1、選擇自然死亡的健康成年小尾寒羊尸體,立即解剖處理,完整無(wú)傷取出消化系統(tǒng)。清除大網(wǎng)膜及腸系膜,修整大腸、小腸表面脂肪,保留食道、瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、皺胃、膽囊、胰腺、小腸、大腸、肛門(mén)等。
在皺胃胃小彎處切5厘米開(kāi)口,用流水洗凈四個(gè)胃室及腸道內(nèi)容物,保證自咽喉至肛門(mén)處的消化管完整性,剔除肝臟保留膽囊,用5ml注射器沿膽囊管刺入,吸出膽汁后,對(duì)膽囊鼓氣并結(jié)扎膽囊管,泡在塑料盆待用,整個(gè)步驟應(yīng)在4h內(nèi)完成,防止腸道組織自溶,腸壁變薄現(xiàn)象。
2、根據(jù)防腐固定液配方:市售甲醛100ml+水870ml+冰乙酸30ml,配置30L。用絲線結(jié)扎直腸末端,在食管處用漏斗將防腐固定液灌入消化管內(nèi),使其處于半充盈狀態(tài),用線扎緊食管前端,置于收納箱中設(shè)計(jì)擺放姿態(tài),加入防腐固定液,覆蓋一層脫脂棉并在收納箱上加一層塑料膜,密封固定14天,期間更換防腐固定液1次。
3、根據(jù)乙醇固定脫水液配方:無(wú)水乙醇700ml+自來(lái)水270ml+冰乙酸30ml,配置25L。在食管處排空消化管內(nèi)防腐固定液,置換為乙醇固定脫水液,保證消化管處于半充盈狀態(tài),用線扎緊食管前端,將收納箱中的防腐固定液排空,置換為余下的乙醇固定脫水液,設(shè)計(jì)擺放姿態(tài),覆蓋脫脂棉,在收納箱上加一層塑料膜,固定脫水浸泡處理7天,直到酒精比重計(jì)測(cè)得乙醇濃度不在變化。
4、從食管處排空上述步驟3中消化管內(nèi)的乙醇固定脫水液,用氣筒向消化管內(nèi)打氣,使消化管處于半充盈狀態(tài),結(jié)扎食管。將消化管第一次置于80%體積濃度的乙醇溶液中,覆蓋脫脂棉,在收納箱上加一層塑料膜,密封脫水處理5天;第二次置于90%體積濃度的乙醇溶液中脫水處理5天;第三次置于95%體積濃度的乙醇溶液中脫水處理5天;第四次置于無(wú)水乙醇Ⅰ溶液中固定5天;最后一次無(wú)水乙醇Ⅱ溶液中浸泡2天。更換乙醇梯度條件以酒精比重計(jì)測(cè)得乙醇濃度不在變化為準(zhǔn),此步中乙醇廢液可減壓蒸餾提純,重復(fù)利用減少成本支出。
5、根據(jù)細(xì)胞填充封固液配方:松香1.2kg+松節(jié)油500ml+無(wú)水乙醇500ml,常溫下充分?jǐn)嚢枞芙獠⒚荛]靜置1天,用雙層紗布過(guò)濾,取8L量倒進(jìn)大號(hào)塑料盆中待用。將上述步驟4中消化管取出,按照消化管不同部位肌層厚度,依次分段浸入細(xì)胞填充封固液,并覆蓋一層脫脂棉,浸泡標(biāo)準(zhǔn)以胃腸管壁接近半透明為宜。
本實(shí)施例中消化管各組織浸泡時(shí)間:食管和胃2.5h,十二指腸、胰腺1.5h,空腸1h,盲腸1h,結(jié)腸和直腸2h。在保證松香飽和濃度情況下,該細(xì)胞填充封固液可多次重復(fù)利用,務(wù)必注意應(yīng)對(duì)每段腸管都要浸泡處理完全,否則會(huì)導(dǎo)致腸管皺縮蒼白、變窄影響標(biāo)本最終質(zhì)量。
6、將上步驟5中消化管撈出,按照設(shè)計(jì)的形態(tài)將其擺放在陰涼通風(fēng)處干燥固化定形,對(duì)腸管坍塌的部位鼓氣至半充盈狀態(tài),胃不能鼓起時(shí)做一切口用氣球撐起并嚴(yán)密縫合,通風(fēng)干燥2天,以消化管呈85%固化程度時(shí)準(zhǔn)備刷漆包被。
7、整潔步驟6材料上多余松香晶體及脂肪,對(duì)腸管上出現(xiàn)的白色松香結(jié)晶可用紗布蘸取無(wú)水乙醇擦拭回復(fù)原色,均勻涂刷一遍清漆,通風(fēng)晾干2天,再次涂刷一遍清漆,晾干后對(duì)標(biāo)本進(jìn)行最終整體修整、用魚(yú)線將標(biāo)本綁在細(xì)木工板上,標(biāo)注器官名稱(chēng),裝入有機(jī)玻璃罩內(nèi)密封保存。
【實(shí)施例2】
制作犬胃腸消化系統(tǒng)松香干制標(biāo)本
1、選擇自然死亡的健康成年小型雜交犬尸體,立即解剖處理,完整無(wú)傷取出消化系統(tǒng),保留舌、食道、胃、膽囊、胰腺、小腸、大腸、肛門(mén)、腸系膜,將漏斗插入材料咽喉內(nèi),用流水洗凈胃和腸道內(nèi)容物,保證消化管完整,浸入塑料盆中待用。
2、根據(jù)防腐固定液配方:市售甲醛100ml+水870ml+冰乙酸30ml,配置10L。將直腸末端用線扎緊,在食管處用漏斗將防腐固定液灌入消化管內(nèi),使標(biāo)本處于半充盈狀態(tài),用線扎緊食管前端,按其形態(tài)擺放浸泡在防腐固定液中,覆蓋一層脫脂棉并在收納箱上加一層塑料膜,密封固定14天,期間更換防腐固定液1次。
3、根據(jù)乙醇固定脫水液配方:無(wú)水乙醇700ml+自來(lái)水270ml+冰乙酸30ml,配置10L。在咽喉處排空消化管內(nèi)防腐固定液,置換為乙醇固定脫水液,保證消化管處于半充盈狀態(tài),用線扎緊食管前端,將收納箱中的防腐固定液排空,置換為余下的乙醇固定脫水液,設(shè)計(jì)擺放姿態(tài),覆蓋脫脂棉,在收納箱上加一層塑料膜,固定脫水浸泡處理7天,直到酒精比重計(jì)測(cè)得乙醇濃度不在變化。
4、從咽喉處排空上述步驟3中消化管內(nèi)的乙醇固定脫水液,用氣筒向消化管內(nèi)打氣,使消化管處于半充盈狀態(tài),結(jié)扎食管。將消化管第一次置于80%體積濃度的乙醇溶液中,覆蓋脫脂棉,在收納箱上加一層塑料膜,密封脫水處理5天;第二次置于90%體積濃度的乙醇溶液中脫水處理5天;第三次置于95%體積濃度的乙醇溶液中脫水處理5天;第四次置于無(wú)水乙醇Ⅰ溶液中固定5天;最后一次無(wú)水乙醇Ⅱ溶液中浸泡3天,更換乙醇梯度條件以酒精比重計(jì)測(cè)得乙醇濃度不在變化為準(zhǔn),此步中乙醇廢液可減壓蒸餾提純,重復(fù)利用減少成本支出。
5、根據(jù)細(xì)胞填充封固液配方:松香1.2kg+松節(jié)油500ml+無(wú)水乙醇500ml,常溫下充分?jǐn)嚢枞芙獠⒚荛]靜置1天,用雙層紗布過(guò)濾,取4L量倒進(jìn)塑料盆中待用。將上述步驟4中消化管取出,按照消化管不同部位肌層厚度,依次分段浸入細(xì)胞填充封固液,并覆蓋一層脫脂棉,浸泡標(biāo)準(zhǔn)以胃腸管壁接近半透明為宜。
本實(shí)施例中消化管各部位浸泡時(shí)間:舌和食管2.5h,胃1h,小腸、大腸1.5h,務(wù)必注意應(yīng)對(duì)每段腸管都要浸泡處理完全,否則會(huì)導(dǎo)致腸管皺縮蒼白、變窄影響標(biāo)本最終質(zhì)量。
6、將上步驟5中消化管撈出,按照設(shè)計(jì)的形態(tài)將其擺放在陰涼通風(fēng)處干燥固化定形,對(duì)腸管坍塌的部位鼓氣至半充盈狀態(tài),胃不能鼓起時(shí)做一切口用氣球撐起嚴(yán)密縫合,通風(fēng)干燥2天,以消化管呈85%固化程度時(shí)準(zhǔn)備刷漆包被。
7、整潔步驟6消化管上多余松香晶體及脂肪,均勻涂刷一遍清漆,通風(fēng)晾干3天,再次整潔修繕涂刷一遍清漆,晾干后對(duì)標(biāo)本進(jìn)行最終整體修整、用魚(yú)線綁在細(xì)木工板上,標(biāo)注器官名稱(chēng),裝入有機(jī)玻璃罩中密封保存。
【實(shí)施例3】
制作雞胃腸消化系統(tǒng)松香干制標(biāo)本
1、選取自然死亡的健康海蘭褐殼蛋雞尸體,立即解剖處理,完整無(wú)傷取出消化系統(tǒng),保留舌骨、食道、嗉囊、腺胃、肌胃、膽囊、胰腺、小腸、回腸、盲腸、泄殖腔等,保證消化管完整性。將漏斗插入材料食道內(nèi),用流水洗凈消化管內(nèi)容物,泡在水盆中待用。
2、防腐固定液(1L量):甲醛100ml+自來(lái)水870ml+冰乙酸30ml。配置6L防腐固定液。將直腸末端用線扎緊,在食管處用漏斗將防腐固定液灌入消化管內(nèi),使標(biāo)本處于半充盈狀態(tài),用線扎緊食管前端,按其形態(tài)擺放浸泡在裝有防腐固定液的標(biāo)本缸中,覆蓋一層脫脂棉,密封固定10天,期間更換防腐固定液1次。
3、根據(jù)乙醇固定脫水液配方:無(wú)水乙醇700ml+自來(lái)水270ml+冰乙酸30ml,配置6L。在喉頭處排空消化管內(nèi)防腐固定液,置換為乙醇固定脫水液,保證消化管處于半充盈狀態(tài),用線扎緊食管前端置于標(biāo)本缸,將標(biāo)本缸中的防腐固定液排空,置換為余下的乙醇固定脫水液,覆蓋脫脂棉,固定脫水浸泡處理7天,直到酒精比重計(jì)測(cè)得乙醇濃度不在變化。
4、從喉頭處排空上述步驟3中消化管內(nèi)的乙醇固定脫水液,用氣筒向消化管內(nèi)打氣,使消化管處于半充盈狀態(tài),結(jié)扎食管。將消化管第一次置于80%體積濃度的乙醇溶液標(biāo)本缸中,覆蓋脫脂棉,密封脫水處理5天;第二次置于90%體積濃度的乙醇溶液中脫水處理4天;第三次置于95%體積濃度的乙醇溶液中脫水處理4天;第四次置于無(wú)水乙醇Ⅰ溶液中固定4天;最后一次無(wú)水乙醇Ⅱ溶液中浸泡3天,更換乙醇梯度條件以酒精比重計(jì)測(cè)得乙醇濃度不在變化為準(zhǔn)。
5、根據(jù)細(xì)胞填充封固液配方:松香1.2kg+松節(jié)油500ml+無(wú)水乙醇500ml,常溫下充分?jǐn)嚢枞芙獠⒚荛]靜置1天,用雙層紗布過(guò)濾,取2L量倒進(jìn)標(biāo)本缸中待用。將上述步驟4中消化管取出,按照消化管不同部位肌層厚度,依次分段浸入細(xì)胞填充封固液,并覆蓋一層脫脂棉,浸泡標(biāo)準(zhǔn)以胃腸管壁接近半透明為宜。
本實(shí)施例中消化管各部位浸泡時(shí)間:舌骨、食管、嗉囊1h,腺胃、肌胃3h,十二指腸至泄殖腔1h。
6、將上步驟5中消化管撈出,按照設(shè)計(jì)的形態(tài)將其擺放在陰涼通風(fēng)處干燥固化定形,對(duì)腸管坍塌的部位鼓氣至半充盈狀態(tài),通風(fēng)干燥2天,以消化管呈80%固化程度時(shí)準(zhǔn)備刷漆包被。
7、整潔步驟6消化管上多余松香晶體及脂肪,均勻涂刷一遍清漆,通風(fēng)晾干2天,再次整潔修繕涂刷一遍清漆,晾干后對(duì)標(biāo)本進(jìn)行最終整體修整、用魚(yú)線綁在細(xì)木工板上,標(biāo)注器官名稱(chēng),裝入有機(jī)玻璃罩中密封保存。
以上實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)的說(shuō)明,能使所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在閱讀后無(wú)需付出創(chuàng)造性勞動(dòng)即可再現(xiàn)。但是,需要指出的是,在不脫離本發(fā)明的發(fā)明構(gòu)思下,還可以對(duì)上述實(shí)施例中的各個(gè)具體參數(shù)進(jìn)行變更,形成多個(gè)具體的實(shí)施例,均為本發(fā)明的常見(jiàn)變化范圍,在此不再一一詳述。