本發(fā)明屬于畜牧技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種提高母本綿羊產(chǎn)奶量的方法。
背景技術(shù)：
綿羊是約11000年前在西南亞地區(qū)被最早馴化的動(dòng)物，主要用于肉食來(lái)源?，F(xiàn)在世界各地均有飼養(yǎng)。中國(guó)是世界上綿羊飼養(yǎng)量最多的國(guó)家，其中以?xún)?nèi)蒙和西北地區(qū)飼養(yǎng)量最大，全國(guó)飼養(yǎng)量達(dá)到1.6億只。綿羊性情溫順，易管理。綿羊肉質(zhì)鮮美，各民族都喜食。大多數(shù)綿羊品種為常年發(fā)情，有些地方品種則為季節(jié)發(fā)情，多在秋季發(fā)情、配種，春季產(chǎn)羔。母羊的懷孕期為145～152天，每胎產(chǎn)羔1～5只，羔羊的成活率取決于母羊的產(chǎn)奶量，但中國(guó)大多數(shù)綿羊品種產(chǎn)奶量不高，通常只能養(yǎng)活1～2只羔羊。母羊本身的初生重、斷奶重、乳房容積和形狀、產(chǎn)羔月份、產(chǎn)羔數(shù)、泌乳期間的營(yíng)養(yǎng)水平、產(chǎn)羔前的營(yíng)養(yǎng)狀況等都對(duì)產(chǎn)奶量有一定影響。
湖羊具有繁殖力高、適應(yīng)性好、母性強(qiáng)、易管理等特點(diǎn)，深受廣大養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))的歡迎，被廣泛用作肉羊雜交母本。該品種平均產(chǎn)羔率高達(dá)270％～280％，窩產(chǎn)3～4只羔羊的母羊較常見(jiàn)，但其產(chǎn)奶量通常只夠哺育2只羔羊，多胎羔羊會(huì)被餓死，成活率不到70％，嚴(yán)重影響了肉羊養(yǎng)殖效益。因此，急需開(kāi)發(fā)一種提高母本綿羊產(chǎn)奶量的方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種提高母本綿羊產(chǎn)奶量的方法，本發(fā)明通過(guò)導(dǎo)入東弗里森血液，用東弗里森公羊與湖羊母羊雜交，生產(chǎn)的東湖F1具有較高的產(chǎn)奶量，可用作三元雜交母本羊，從根本上解決母本羊泌乳量不足、羔羊生長(zhǎng)緩慢以及肉羊養(yǎng)殖效益不高等問(wèn)題；該方法通過(guò)解決同窩多胎羔羊的吮乳量問(wèn)題，提高羔羊的成活率和肉羊效益。
其具體技術(shù)方案為：
一種提高母本綿羊產(chǎn)奶量的方法，包括以下步驟：
步驟1、試驗(yàn)動(dòng)物的選擇
(1)雜交父本羊?yàn)闁|弗里森奶綿羊，購(gòu)自澳大利亞；
(2)雜交母本為本地湖羊；
步驟2、雜交
東湖一代，即F1，含1/2東弗里森羊血液，是純種東弗里森公羊與純種湖羊雜交后代；含1/4東弗里森羊血液湖羊?yàn)闁|湖一代公羊與純種湖羊母羊交配后代；所有母羊均利用人工授精技術(shù)配種；
步驟3、體重測(cè)定
對(duì)相同飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下同期出生的湖羊、東湖一代羊、含1/4東弗里森羊血液湖羊的初生重、2月齡重、4月齡重進(jìn)行測(cè)定、記錄；
步驟4、產(chǎn)奶量測(cè)定
分別選擇相同飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下同期產(chǎn)羔母羊3只，用羔羊體重稱(chēng)重法對(duì)產(chǎn)奶量進(jìn)行測(cè)定、記錄；
步驟5、乳腺組織受體基因的mRNA表達(dá)量測(cè)定
5.1采樣
用手術(shù)法采集哺乳期東湖一代羊試驗(yàn)組和湖羊?qū)φ战M乳腺組織樣，置于多聚甲醛中帶回實(shí)驗(yàn)室，固定48h后，修樣至1cm3；
5.2制樣
5.2.1脫水將固定后的組織樣依次置于70％酒精30min、80％酒精1h、90％酒精1h、100％酒精1h，1h后換一次酒精；
5.2.2透明用等比列配制的無(wú)水乙醇、二甲苯混合溶液浸泡2h，再用二甲苯I浸泡10min,換二甲苯，再泡5min；
5.2.3浸蠟在等比列配制的二甲苯、石蠟液的混合液中浸2h，石蠟I液中浸2h、石蠟II液中浸2h，然后置于60℃烤箱中烘干；
5.2.4包埋將預(yù)熱包埋劑倒入簡(jiǎn)易紙盒，然后將浸蠟后的組織樣放在室溫下靜置；
5.2.5切片將包埋好的蠟塊置于石蠟切片機(jī)上，切成5um薄片，再進(jìn)行展片、粘片、標(biāo)記后，置于切片架上，在37℃條件下烘干；
5.3染色
(1)HE染色脫蠟依次將石蠟切片置于二甲苯I液10min、二甲苯II液5min、100％乙醇I液3min、100％乙醇II液3min、90％乙醇3min、80％乙醇3min、70％乙醇3min；
(2)染色蘇木精染色2min，水洗除去染液，加5％冰醋酸分化30s，用蒸餾水洗5min，再用伊紅染色1min,然后在顯微鏡下觀察；
(3)脫色將玻片依次置于70％酒精、80％酒精、90％酒精、100％酒精I(xiàn)液、100％酒精I(xiàn)I液中脫色各1min，然后分別在二甲苯I液和二甲苯II液脫色5min；
(4)封片取出切片，擦干二甲苯，滴上樹(shù)膠，蓋上蓋玻片，在室溫條件下晾干；
(5)照相：用顯微照相機(jī)照相后，進(jìn)行圖像分析；
5.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
通過(guò)HE染色對(duì)東湖一代羊和湖羊乳腺組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：
本發(fā)明的試驗(yàn)方法通過(guò)東弗里森公羊與湖羊母羊雜交生產(chǎn)高產(chǎn)奶量東湖F1，用作三元雜交母本羊，從根本上解決母本羊泌乳量不足、羔羊生長(zhǎng)緩慢以及肉羊養(yǎng)殖效益不高等問(wèn)題。結(jié)果證明：雜種一代羊母羊是較理想的母本羊，與杜泊羊雜交后，可哺育3只羔羊，養(yǎng)殖效益提高30％以上。
附圖說(shuō)明
圖1是不同品種妊娠綿羊乳腺組織受體基因mRNA表達(dá)量。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)地說(shuō)明。
一、體重和產(chǎn)奶量測(cè)定
1材料與方法
1.1試驗(yàn)動(dòng)物的選擇
(1)雜交父本羊東弗里森奶綿羊購(gòu)自澳大利亞。
(2)雜交母本湖羊?yàn)楸镜仫曫B(yǎng)的成年湖羊。
1.2雜交東湖一代，即F1，含1/2東弗里森羊血液，是純種東弗里森公羊與純種湖羊雜交后代；含1/4東弗里森羊血液湖羊?yàn)闁|湖一代公羊與純種湖羊母羊交配后代。所有母羊均利用人工授精技術(shù)配種。
1.3體重測(cè)定用常規(guī)方法對(duì)相同飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下同期出生的湖羊、東湖一代羊、含1/4東弗里森羊血液湖羊的初生重、2月齡重、4月齡重進(jìn)行測(cè)定、記錄。
1.4產(chǎn)奶量測(cè)定分別選擇相同飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下同期產(chǎn)羔母羊3只，用羔羊體重稱(chēng)重法對(duì)產(chǎn)奶量進(jìn)行測(cè)定、記錄。
二、乳腺組織受體基因的mRNA表達(dá)量測(cè)定
1采樣
用手術(shù)法采集哺乳期東湖一代羊(試驗(yàn)組)和湖羊(對(duì)照組)乳腺組織樣，置于多聚甲醛中帶回實(shí)驗(yàn)室，固定48h后，修樣至1cm3即可。
2制樣
2.1脫水將固定后的組織樣依次置于70％酒精30min、80％酒精1h、90％酒精1h、100％酒精1h(1h后換一次酒精)。
2.2透明用等比列配制的無(wú)水乙醇、二甲苯混合溶液浸泡2h，再用二甲苯I浸泡10min,換二甲苯，再泡5min。
2.3浸蠟在等比列配制的二甲苯、石蠟液的混合液中浸2h，石蠟I液中浸2h、石蠟II液中浸2h，然后置于60℃烤箱中烘干。
2.4包埋將預(yù)熱包埋劑倒入簡(jiǎn)易紙盒，然后將浸蠟后的組織樣放在室溫下靜置。
2.5切片將包埋好的蠟塊置于石蠟切片機(jī)上，切成5um薄片，再進(jìn)行展片、粘片、標(biāo)記后，置于切片架上，在37℃條件下烘干。
3染色
(1)HE染色脫蠟依次將石蠟切片置于二甲苯I液10min、二甲苯II液5min、100％乙醇I液3min、100％乙醇II液3min、90％乙醇3min、80％乙醇3min、70％乙醇3min。
(2)染色蘇木精染色2min，水洗除去染液，加5％冰醋酸分化30s，用蒸餾水洗5min，再用伊紅染色1min,然后在顯微鏡下觀察。
(3)脫色將玻片依次置于70％酒精、80％酒精、90％酒精、100％酒精I(xiàn)液、100％酒精I(xiàn)I液中脫色各1min，然后分別在二甲苯I液和二甲苯II液脫色5min。
(4)封片取出切片，擦干二甲苯，滴上樹(shù)膠，蓋上蓋玻片，在室溫條件下晾干。
(5)照相：用顯微照相機(jī)照相后，進(jìn)行圖像分析。
4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
通過(guò)HE染色對(duì)東湖一代羊和湖羊乳腺組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較。
三、試驗(yàn)結(jié)果
湖羊母羊與東弗里森公羊雜交，其雜種一代羊(簡(jiǎn)稱(chēng)東湖F1)初生重、2月齡斷奶重和4月齡體重分別比相同飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下的湖羊高0.25kg、3.74kg和3.65kg，而且體型外貌更趨于肉用型。東湖F1成年母羊產(chǎn)后50天內(nèi)平均日奶量達(dá)到2.36kg，比相同飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下的湖羊高0.46k kg。但雜種羊的產(chǎn)奶量會(huì)隨東弗里森含血量的下降而下降(見(jiàn)表1)。
表1東湖F1生長(zhǎng)速度和產(chǎn)奶量(kg)
*指第三胎產(chǎn)雙羔母羊產(chǎn)后1～50天平均產(chǎn)奶量。
東湖F1妊娠母羊乳腺組織GHR(生長(zhǎng)激素受體)、PR(孕激素受體)、PRLR(催乳素受體)、IGF-IR(胰島素樣生長(zhǎng)因子I受體)基因的mRNA表達(dá)量均顯著高于湖羊(見(jiàn)圖1)，這表明東湖F1母羊具有較高的泌乳性能。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，可顯而易見(jiàn)地得到的技術(shù)方案的簡(jiǎn)單變化或等效替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。