本發(fā)明涉及一種基于海帶孢子體白爛病的預(yù)防方法，尤其是指一種利用海帶孢子體抗氧化能力對白爛病的預(yù)防方法。

背景技術(shù)：

海帶是一種具有明顯世代交替的兩年生褐藻，葉狀體是海帶的孢子體世代。海帶原產(chǎn)于日本、朝鮮北部的冷水海洋中，我國自主的海帶養(yǎng)殖研究工作開始于1951年，經(jīng)過科研人員不斷努力和探索，解決了海帶苗種和養(yǎng)殖生產(chǎn)中的關(guān)鍵技術(shù)，成果及時推廣應(yīng)用，使我國的海帶養(yǎng)殖業(yè)從無到有蓬勃發(fā)展，迅速成為世界上產(chǎn)量和養(yǎng)殖規(guī)模最大的國家。然而近幾年海帶白爛病的發(fā)生，不僅造成減產(chǎn)，海帶的品相也大打折扣，腐爛的海帶也會使養(yǎng)殖海域周邊的環(huán)境發(fā)生污染。海帶白爛病通常是孢子體在脆嫩期以后營養(yǎng)缺乏和光照過強引起，因此如果能通過對海帶孢子體生理狀況的監(jiān)測，提前對海帶白爛病進行預(yù)防，及時采取措施，完全可以杜絕海帶白爛病的發(fā)生。植物體內(nèi)存在著抗氧化調(diào)控系統(tǒng)，它們參與抵抗逆境脅迫對植物的損害，當脅迫出現(xiàn)時，抗氧化系統(tǒng)的成分會發(fā)生變化，一些清除活性氧的關(guān)鍵性酶（SOD、POD、CAD）活性升高，機體抵抗外界脅迫的能力也相應(yīng)增強。但是在脅迫后期或者脅迫超過了抗氧化系統(tǒng)的承載能力時，抗氧化系統(tǒng)受到損傷，進而導(dǎo)致活性氧含量劇增，細胞受到損害。因此可以利用脅迫初期海帶的清除活性氧的關(guān)鍵性酶（SOD、POD、CAD）的變化作為海帶受環(huán)境脅迫的預(yù)防指標。

海帶孢子體的生長分為幼齡期、凸凹期、脆嫩期、厚成期、成熟期、衰老期四個階段，海帶養(yǎng)殖中在凸凹期夾苗，厚成期后期收獲，脆嫩期和厚成期的海帶為間生長方式，不同長度的葉片生長部范圍不同，同一長度的葉片不同部位的生長速度差異較大，總體而言，越接近于柄部的基部生長速度越快，梢部生長最慢，長度超過1米的海帶生長部的位置約在葉片基部到距基部10厘米的位置，梢部逐漸衰退并脫落。海帶孢子體這種生長方式?jīng)Q定了葉片各部位對環(huán)境的要求不同，因此對環(huán)境脅迫所表現(xiàn)出的抗氧化能力不同。

為了防止營養(yǎng)缺乏或光照過強引起海帶白爛病，保證海帶養(yǎng)殖的產(chǎn)量和質(zhì)量，針對海帶不同生長時期的生長特性的差異，本發(fā)明提供一種海帶孢子體取樣方法，并通過對樣品抗氧化酶（SOD、POD、CAD）進一步的測定，根據(jù)測定結(jié)果對海帶孢子體白爛病的發(fā)生進行預(yù)防。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：一種海帶孢子體白爛病的預(yù)防方法，其特征在于：

1)凸凹期海帶孢子體：

凸凹期抗氧化酶活性測定：取距基部4-20cm葉片邊緣厚度≤1.3mm部分研磨后按抗氧化酶測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定；

2)脆嫩期海帶孢子體：

a、生長部抗氧化酶活性測定：取距海帶葉片基部0-10cm處邊緣片取表層厚度≤0.8mm的部分研磨后按抗氧化酶測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定；

b、脫落部抗氧化酶活性測定：取海帶葉片尾部即將脫落部分片取表層厚度≤0.8mm的部分研磨后按抗氧化酶測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定；

3)厚成期海帶孢子體：

a、生長部抗氧化酶活性測定：取距海帶葉片基部5-10cm處選長1cm寬8-10cm片取表層厚度≤0.8mm部分研磨后按抗氧化酶測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定；

b、脫落部抗氧化酶活性測定：取海帶葉片尾部脫落部分向前10-20cm選長1cm寬8-10cm片取表層厚度≤0.8mm部分研磨后按抗氧化酶測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定；

4)如果海帶脆嫩期或厚成期生長部抗氧化酶活性高出凸凹期抗氧化酶活性達50%，8天內(nèi)需及時施肥或降低海帶養(yǎng)殖水層避免強光照；

如果脆嫩期和厚成期海帶生長部抗氧化酶活性接近或高于脫落部表層抗氧化酶活性，8天內(nèi)需及時施肥或降低海帶養(yǎng)殖水層避免強光照。

本發(fā)明的有益效果是：海帶孢子體在同一養(yǎng)殖海域?qū)Νh(huán)境的適應(yīng)使抗氧化系統(tǒng)的酶活性保持相對穩(wěn)定，然而海帶孢子體不同時期的不同位置抗氧化酶活性差異較大，海帶孢子體在幼齡期整個葉片抗氧化酶差別不大，正常情況下凹凸期葉片邊緣靠前部抗氧化酶基本與幼齡期差不多，但在脆嫩期和厚成期，生長部和脫落部差異很大，正常情況下生長部表層的抗氧化酶活性和凸凹期的差不多，但脫落部表層抗氧化酶活性比生長部高出40-60%，但當生長部表層的抗氧化酶活性接近或高于脫落部表層抗氧化酶活性，一般持續(xù)8天就會發(fā)生白爛病。如果及時施肥或降低海帶養(yǎng)殖水層避免強光照，則會避免白爛病的發(fā)生。

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明

實施例一：

1、凸凹期，海帶孢子體長度10-100cm，取距基部4-20cm葉片邊緣厚度≤1.3mm部分研磨后按抗氧化酶（SOD、POD、CAD）測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定。

2、脆嫩期，海帶孢子體長度≥100cm，a、距海帶葉片基部0-10cm處邊緣片取表層厚度≤0.8mm的部分研磨后按抗氧化酶（SOD、POD、CAD）測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定；b、海帶葉片尾部即將脫落部分片取表層厚度≤0.8mm的部分研磨后按抗氧化酶（SOD、POD、CAD）測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定。

3、厚成期，a、距海帶葉片基部5-10cm處選長1cm寬8-10cm片取表層厚度≤0.8mm部分研磨后按抗氧化酶（SOD、POD、CAD）測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定；b、海帶葉片尾部脫落部分向前10-20cm選長1cm寬8-10cm片取表層厚度≤0.8mm部分研磨后按抗氧化酶（SOD、POD、CAD）測定要求稱取用量，然后進行酶活性測定。

4、脆嫩期和厚成期海帶生長部的抗氧化酶（SOD、POD、CAD）活性與凸凹期相近，脫落部偏高，表明海帶生長正常。

5、脆嫩期或厚成期海帶生長部的抗氧化酶（SOD、POD、CAD）活性比凸凹期的高出50%以上，一般持續(xù)8天就會發(fā)生白爛病，8天內(nèi)需及時施肥或降低海帶養(yǎng)殖水層避免強光照。

6、脆嫩期或厚成期生長部表層的抗氧化酶（SOD、POD、CAD）活性接近或高于脫落部表層抗氧化酶（SOD、POD、CAD）活性，一般持續(xù)8天就會發(fā)生白爛病，8天內(nèi)需及時施肥或降低海帶養(yǎng)殖水層避免強光照。

在5個不同海域分別取海帶孢子體凸凹期取距基部4-15cm葉片邊緣厚度≤1.3mm部分研磨稱取5.00g利用超氧化物歧化酶檢測試劑盒進行測定；

在5個不同海域分別取海帶孢子體脆嫩期(a)距葉片基部3-5cm處邊緣片表層厚度≤0.8mm的部分研磨后稱取5.00g利用超氧化物歧化酶檢測試劑盒進行測定；(b)分別取海帶葉片尾部即將脫落部分片表層厚度≤0.8mm的部分研磨后稱取5.00g利用超氧化物歧化酶檢測試劑盒進行測定。

在5個不同海域分別取厚成期(a)距海帶葉片基部6-7cm處選寬8-10cm片取表層厚度≤0.8mm部分研磨稱取5.00g，利用超氧化物歧化酶檢測試劑盒進行測定；(b)分別取海帶葉片尾部脫落部分向前10-11cm選寬8-10cm片取表層厚度≤0.8mm部分研磨后稱取5.00g，利用超氧化物歧化酶檢測試劑盒進行測定，結(jié)果如表一：

表一、不同海區(qū)海帶不同部位SOD活性

由表一可以看出海區(qū)2、4、5厚成期海帶生長部的SOD活性與脫落部的持平，為此在海區(qū)2養(yǎng)殖的海帶采取下降水層的方式，而海區(qū)4、5未做處理，結(jié)果8天以后海區(qū)4、5海帶開始出現(xiàn)嚴重的白爛現(xiàn)象。