本發(fā)明涉及水產(chǎn)品加工技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種魷魚(yú)魚(yú)腸及生產(chǎn)工藝。

背景技術(shù)：

牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）以其花碩大（直徑10～25 cm），多姿（單瓣、半重瓣、重瓣），多彩（白、粉、紅、黃、藍(lán)、綠、紫、復(fù)色等）而顯雍容華貴、富麗端莊，被譽(yù)為“國(guó)色天香”、“花中之王”，明清時(shí)已是國(guó)花.牡丹自16～18世紀(jì)引種到國(guó)外，在許多國(guó)家也極受歡迎。

中國(guó)作為牡丹唯一的原產(chǎn)地，栽培歷史悠久，從南北朝至今已有1500多年，其品種類型已達(dá)800余種，分布于我國(guó)大江南北。它作為我國(guó)原生的、古老的特有植物是研究栽培植物起源、人工選擇理論和進(jìn)行科學(xué)試驗(yàn)的良好材料。牡丹作為我國(guó)重要的出口花卉，在長(zhǎng)期的牡丹栽培歷史過(guò)程中，我國(guó)人民對(duì)它的認(rèn)識(shí)逐步深入，產(chǎn)生了深厚的感情，也歷史地形成和發(fā)展出了我國(guó)特有的牡丹文化。

牡丹傳統(tǒng)的繁殖方法多采用播種、嫁接和分株方式，不僅成苗周期長(zhǎng)，而且出苗量少，質(zhì)量參差不齊，難以滿足生產(chǎn)的需求。觀賞牡丹的快繁技術(shù)研究多以生成愈傷組織為主，但這些方法存在操作復(fù)雜、繁殖系數(shù)較低、誘導(dǎo)芽生長(zhǎng)較弱等缺陷。

本申請(qǐng)的發(fā)明人通過(guò)多年潛心研究，改進(jìn)了牡丹培養(yǎng)生根的方法，以牡丹當(dāng)年的生嫩枝莖尖為外植體，對(duì)牡丹的快繁培養(yǎng)基成分進(jìn)行了優(yōu)化，通過(guò)在培養(yǎng)基中加入附加物水解乳蛋白，并且發(fā)現(xiàn)了一種更適于牡丹組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基，克服以上缺陷，以期為牡丹種苗的工廠化生產(chǎn)提供科。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種用于牡丹組織培養(yǎng)生根新方法的基本培養(yǎng)基，其配方的組成為，1/2MS、PH 5.0～6.3、蔗糖25～45 g/L、山崳醇0.5～1.5 g/L、瓊脂5～15 g/L、水解乳蛋白100～300 mg。

本發(fā)明另一個(gè)目的是提供一種用于牡丹組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基，其配方為：在基本培養(yǎng)基1/2MS的基礎(chǔ)上添加0.05～0.20 mg/LNAA、0.05～0.20mgIBA。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種牡丹組織培養(yǎng)生根新方法，其特征在于包括下列步驟:（1）外植體的滅菌處理；（2）將步驟（1）處理后的外置體接種于基本培養(yǎng)基1/2MS；（3）將經(jīng)過(guò)步驟（2）培養(yǎng)的外植體組織轉(zhuǎn)接于增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)；（4）將經(jīng)過(guò)步驟（3）繼代培養(yǎng)所得的嫩莖切下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)；（5）將經(jīng)過(guò)步驟（4）生根培養(yǎng)的小苗帶瓶移入大棚。

其中，外植體滅菌的步驟包括：洗衣粉液浸泡10~30 min→流水沖洗至清-剝?nèi)[片→體積分?jǐn)?shù)70%酒精浸泡10~50s→無(wú)菌水沖洗1~3 min→50 g/L次氯酸鈉液浸泡10~30 min或25 g/L次氯酸鈉溶液浸泡20~40 min無(wú)菌水漂洗3次，每次1 min。

優(yōu)選的，上述基本培養(yǎng)基的配方的組成為，1/2MS PH 5.5～6.0、蔗糖30~40 g/L、山崳醇0.5～1.5 g/L、瓊脂8~12 g/L、水解乳蛋白150~250 mg。

優(yōu)選的，步驟（3）中在基本培養(yǎng)基1/2MS的基礎(chǔ)上添加0.5~2.0 mg/L 6-BA、0.5~2.0 mg/ LKT作為再生嫩莖增殖培養(yǎng)基

優(yōu)選的，上述生根培養(yǎng)基的配方為，在基本培養(yǎng)基1/2MS的基礎(chǔ)上添加0.1-0.15 mg/L NAA、0.1-0.15 mg IBA。

優(yōu)選的，外植體滅菌的步驟包括：洗衣粉液浸泡15~25 min→流水沖洗至清→剝?nèi)[片→體積分?jǐn)?shù)70%酒精浸泡15~30s→無(wú)菌水沖洗1~2 min→50 g/L次氯酸鈉液浸泡15~25 min或25 g/L次氯酸鈉溶液浸泡25~35 min→無(wú)菌水漂洗3次，每次1 min。

優(yōu)選的，步驟（4）中的生根培養(yǎng)基在121℃條件下滅菌20 min。培養(yǎng)溫度為（20±2）℃，每日光照14h，光照強(qiáng)度2000lx。

優(yōu)選的，步驟（5）中，生根培養(yǎng)的小苗根長(zhǎng)為1.5～2.0 cm時(shí)，將其帶瓶移入大棚煉苗7d，移栽前3d用50%可濕性多菌靈800倍液噴澆滅菌，幼苗種植基質(zhì)有蛭石、草炭土。

由于在本發(fā)明的基本培養(yǎng)基1/2MS上添加水解乳蛋白，而且改變了大量元素的組成和含量，使得基本培養(yǎng)基中鹽分的總摩爾數(shù)減少，大大降低了牡丹培養(yǎng)物的褐變；也避免了高鹽培養(yǎng)基對(duì)植株生長(zhǎng)的抑制，使得在繼代增殖階段的植株生長(zhǎng)健壯，葉片濃綠，葉柄呈粉紅、紅紫色，莖段木質(zhì)化程度增加，增殖率顯著高于平均水平；同時(shí)水解乳蛋白培養(yǎng)基上的誘導(dǎo)效果較好，增殖倍數(shù)最高，生根良好。

具體實(shí)施方式以下實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用于來(lái)限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1：牡丹外植體的滅菌處理

在12月-次年1月間在晴朗的午后，從生長(zhǎng)健壯品種為“大胡紅”的牡丹植株上采集無(wú)病蟲(chóng)害、飽滿的莖尖作為外植體，放入4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

將上述采集莖尖的分別按下述方法進(jìn)行滅菌處理：

洗衣粉液浸泡15~25 min→流水沖洗至清→剝?nèi)[片→體積分?jǐn)?shù)70%酒精浸泡15~30s→無(wú)菌水沖洗1~2 min→50 g/L次氯酸鈉液浸泡15~25 min或25 g/L次氯酸鈉溶液浸泡25~35 min→無(wú)菌水漂洗3次，每次1 min。

經(jīng)過(guò)上述滅菌方法處理后，將莖尖接種在預(yù)先制備的基本培養(yǎng)基1/2MS上，每瓶放一個(gè)外植體，在121℃條件下滅菌20 min。培養(yǎng)溫度為（20±2）℃，每日光照14h，光照強(qiáng)度2000lx。

實(shí)施例2：不同激素配比對(duì)牡丹再生嫩莖增殖的影響：

在12月-次年1月間在晴朗的午后，從生長(zhǎng)健壯的“紫蘭魁”品種的牡丹植株上采集無(wú)病蟲(chóng)害、飽滿的莖尖作為外植體，按上述實(shí)施例1所述方法對(duì)外植體進(jìn)行消毒滅菌。將無(wú)菌消毒后的外植體接種到在基本培養(yǎng)基1/2MS的基礎(chǔ)上添加0.5~2.0 mg/L 6-BA、0.5~2.0 mg/L KT和0.05~0.2 mg/L NAA的再生嫩莖增殖培養(yǎng)基。

實(shí)施例3：不同生長(zhǎng)素組合對(duì)牡丹生根的影響

在12月-次年1月間在晴朗的午后，從生長(zhǎng)健壯的“紫蘭魁”品種的牡丹植株上采集無(wú)病蟲(chóng)害、飽滿的莖尖作為外植體，按上述實(shí)施例1所述方法對(duì)外植體進(jìn)行消毒滅菌。將無(wú)菌消毒后的外植體接種到在基本培養(yǎng)基1/2MS的基礎(chǔ)上添加0.1-0.15 mg/L NAA、0.1-0.15 mg IBA的生根培養(yǎng)基。

實(shí)施例4

在12月-次年1月間在晴朗的午后，從生長(zhǎng)健壯的“紫蘭魁”品種的牡丹植株上采集無(wú)病蟲(chóng)害、飽滿的莖尖作為外植體，按上述實(shí)施例1所述方法對(duì)外植體進(jìn)行消毒滅菌。將無(wú)菌消毒后的外植體接種到在基本培養(yǎng)基1/2MS的基礎(chǔ)上添加0.0~2.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L KT和0.1 mg/L NAA的再生嫩莖增殖培養(yǎng)基。培養(yǎng)溫度為（20±2）℃，每日光照14h，光照強(qiáng)度2000lx，4周后觀察，并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。結(jié)果見(jiàn)下表

不同激素配比對(duì)牡丹再生嫩莖增殖的影響

由上表可知，嫩莖增殖倍數(shù)隨6-BA的增加而增大，在2.0 mg/L時(shí)達(dá)到最大，為8.40。

實(shí)施例5

在12月-次年1月間在晴朗的午后，從生長(zhǎng)健壯的“紫蘭魁”品種的牡丹植株上采集無(wú)病蟲(chóng)害、飽滿的莖尖作為外植體，按上述實(shí)施例1所述方法對(duì)外植體進(jìn)行消毒滅菌。將無(wú)菌消毒后的外植體接種到在基本培養(yǎng)基1/2MS的基礎(chǔ)上添加0.0-0.15 mg/L NAA、0.1 mg IBA的生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為（20±2）℃，每日光照14h，光照強(qiáng)度2000lx，20d后觀察。結(jié)果見(jiàn)下表

不同生長(zhǎng)素組合對(duì)牡丹生根的影響

由上表可知，在IBA濃度為1.0 mg/L，NAA濃度為0.0~1.0 mg/L時(shí)，生根率為30.8%~73.6%。