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枯草芽孢桿菌HMB19198在防治黃瓜白粉病上的應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):11881411閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌株HMB19198在防治黃瓜白粉病上的應(yīng)用。

2.含有枯草芽孢桿菌HMB19198的微生物菌劑在防治黃瓜白粉病上的應(yīng)用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于所述的微生物菌劑的活性成分為枯草芽孢桿菌HMB19198菌體。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的應(yīng)用,其特征在于所述的微生物菌劑為液體制劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于所述的微生物菌劑的液體制劑,按照如下方法制備:

(1)將低溫保存的HMB19198菌株在LB平板培養(yǎng)基上活化,挑取單菌落在LB斜面培養(yǎng)基上,在30~32℃培養(yǎng)16~24小時(shí),得活化的菌株;

(2)用無(wú)菌的接種環(huán)刮取一接種環(huán)步驟(1)活化的菌株并接種到100mL LB液體培養(yǎng)基中,在28~34℃、搖床轉(zhuǎn)速為170~210rpm條件下培養(yǎng)20~24小時(shí),得種子液;

(3)按照體積比為0.5~3.0%的比例將步驟(2)的種子液接入到蔗糖豆餅粉培養(yǎng)基(pH值為5.8-6.2)中,在溫度為28~34℃、搖床轉(zhuǎn)速為170~210rpm條件下發(fā)酵培養(yǎng)36~54h,得發(fā)酵液;所述的蔗糖豆餅粉培養(yǎng)基的組成成分及其重量百分比為:蔗糖2.0~3.0%,豆餅粉1.6~2.4%,NaCl 0.1~0.2%,CaCO3 0.1~0.3%,KH2PO4 0.01~0.03%和MgSO4·7H2O 0.01~0.03%,其余為水;

(4)檢測(cè)發(fā)酵液中菌體和芽孢數(shù)量,待發(fā)酵液中成熟芽孢占到芽孢和菌體總數(shù)的90%時(shí)停止發(fā)酵培養(yǎng);所得即為HMB19198菌株的液體制劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于其步驟(2)或(3)中所述的溫度為30~32℃;所述的搖床轉(zhuǎn)速為210rpm;所述的培養(yǎng)時(shí)間為48h。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于所述的微生物菌劑中枯草芽孢桿菌HMB19198的活菌數(shù)大于1.0×109cfu/mL。

8.利用含有枯草芽孢桿菌HMB19198的微生物菌劑防治黃瓜白粉病的方法,其特征在于用水將權(quán)利要求5所得的微生物菌劑的液體制劑稀釋至活菌體數(shù)為107cfu/mL,在黃瓜白粉病發(fā)病前在黃瓜葉面進(jìn)行噴霧即可。

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