本發(fā)明涉及一種荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)：

荔枝(學(xué)名：Litchi chinensis Sonn.)無(wú)患子科，荔枝屬常綠喬木，高約10米。果皮有鱗斑狀突起，鮮紅，紫紅。成熟時(shí)至鮮紅色；種子全部被肉質(zhì)假種皮包裹?；ㄆ诖杭?，果期夏季。果肉產(chǎn)鮮時(shí)半透明凝脂狀，味香美，但不耐儲(chǔ)藏。分布于中國(guó)的西南部、南部和東南部，廣東和福建南部栽培最盛。亞洲東南部也有栽培，非洲、美洲和大洋洲有引種的記錄。荔枝與香蕉、菠蘿、龍眼一同號(hào)稱(chēng)“南國(guó)四大果品”。荔枝味甘、酸、性溫，入心、脾、肝經(jīng)；可止呃逆，止腹瀉，是頑固性呃逆及五更瀉者的食療佳品，同時(shí)有補(bǔ)腦健身，開(kāi)胃益脾，有促進(jìn)食欲之功效。因性熱，多食易上火。荔枝木材堅(jiān)實(shí)，紋理雅致，耐腐，歷來(lái)為上等名材。

荔枝樹(shù)木的幼樹(shù)生長(zhǎng)期長(zhǎng)，遺傳組成高度雜合，傳統(tǒng)的育種技術(shù)來(lái)改良荔枝形狀及培育新品種費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，難以滿(mǎn)足荔枝產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需要。因此，亟需一種快速高效地培育荔枝幼苗的方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題和/或缺陷，并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一種荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法。

本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：

一種荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法，包括：

步驟一、荔枝外植體獲?。涸诶笾ㄑ棵劝l(fā)期，取荔枝花芽作為外植體，首先將荔枝花芽使用體積百分比9％的酒精溶液浸泡5-15min，之后使用自來(lái)水沖洗10-20min，然后用質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.1％的次氯酸鈉溶液消毒8-10min，最后用無(wú)菌水沖洗3-5次，除去表面水分得到荔枝外植體；

步驟二、分化培養(yǎng)：將步驟一中得到的荔枝外植體接種于MS分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)25～35天直至荔枝外植體的側(cè)芽分化長(zhǎng)出叢生芽，其中，分化培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23-27℃，光照強(qiáng)度為2000-2500lux，光照周期為10-15小時(shí)/天；

步驟三、壯苗培養(yǎng)：將步驟二中經(jīng)過(guò)分化培養(yǎng)的荔枝外植體在MS壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)35～45天得到荔枝健壯植株，其中，壯苗培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23-27℃，光照強(qiáng)度為2000-2500lux，光照周期為10-15小時(shí)/天；

步驟四、生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟三中得到的荔枝健壯植株置于MS生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)45～55天得到帶根的荔枝樹(shù)苗，其中，生根培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23-27℃，光照強(qiáng)度為2000-2500lux，光照周期為10-15小時(shí)/天。

優(yōu)選的是，所述的荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法中，所述步驟二中，MS分化培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳30～40mg/L，0.1-0.4mg/L ZT，0.2～1mg/L 6-BA，0.2-0.8mg/L NAA，納米活性炭顆粒1～2g/L，25-30g/L蔗糖和4.8-5.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

優(yōu)選的是，所述的荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法中，所述步驟三中，MS壯苗培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳40～50mg/L，0.3-1.0mg/L 6-BA、0.2-0.8mg/L IAA，納米活性炭顆粒1～2g/L，25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

優(yōu)選的是，所述的荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法中，所述步驟三中，MS生根培養(yǎng)基包含：1/2MS，椰子乳50～60mg/L，1.0-2.0mg/L NAA，納米活性炭顆粒1～2g/L，25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

優(yōu)選的是，所述的荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法中，在所述步驟四之后還進(jìn)行步驟五，所述步驟五包括：煉苗和移栽：先將步驟四中得到的帶根的木鱉植株在溫度25℃下煉苗2-4天，之后再移栽到沙土壤中生長(zhǎng)45天，然后再移栽至大田生長(zhǎng)，其中，大田的生長(zhǎng)條件為：溫度為20-28℃，相對(duì)濕度為75-80％，遮陽(yáng)率為70％。

優(yōu)選的是，所述的荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法中，所述椰子乳為椰子經(jīng)100目紗布過(guò)濾之后得到的液體。

本發(fā)明至少包含如下優(yōu)點(diǎn)：

本發(fā)明的培養(yǎng)基中含有大量的椰子乳，椰子乳中含有蛋白質(zhì)、脂肪、維生素C及鈣、磷、鐵、鉀、鎂、鈉等礦物質(zhì)，同時(shí)含有較多的水分和驅(qū)蟲(chóng)物質(zhì)，使得培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)更加豐富，且能夠促進(jìn)荔枝外植體的生長(zhǎng)。本發(fā)明的培養(yǎng)基中含有的納米活性炭顆粒能夠通氣透風(fēng)，同時(shí)不易滋生細(xì)菌，使得培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分分布更加均勻，不易板結(jié)，通風(fēng)透氣，利于荔枝外植體的生根發(fā)芽。

本發(fā)明通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)荔枝進(jìn)行組織培養(yǎng)快速繁殖，在短時(shí)間內(nèi)培育出大量可供大田栽培的荔枝幼苗，提高了荔枝種苗的繁殖系數(shù)和種苗質(zhì)量，實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)，滿(mǎn)足生產(chǎn)上的需要。

采用本發(fā)明的方法，獲得的組培苗生根率在90％以上，每株平均帶3-4個(gè)根，根長(zhǎng)為2-3厘米，移栽沙床成活率在95％以上；快速、便捷、高效地進(jìn)行荔枝組織培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)荔枝組培種苗的規(guī)?；a(chǎn)。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書(shū)文字能夠據(jù)以實(shí)施。

本發(fā)明提供一種荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法，包括：

步驟一、荔枝外植體獲?。涸诶笾ㄑ棵劝l(fā)期，取荔枝花芽作為外植體，首先將荔枝花芽使用體積百分比9％的酒精溶液浸泡5-15min，之后使用自來(lái)水沖洗10-20min，然后用質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.1％的次氯酸鈉溶液消毒8-10min，最后用無(wú)菌水沖洗3-5次，除去表面水分得到荔枝外植體；

步驟二、分化培養(yǎng)：將步驟一中得到的荔枝外植體接種于MS分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)25～35天直至荔枝外植體的側(cè)芽分化長(zhǎng)出叢生芽，其中，分化培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23-27℃，光照強(qiáng)度為2000-2500lux，光照周期為10-15小時(shí)/天；

步驟三、壯苗培養(yǎng)：將步驟二中經(jīng)過(guò)分化培養(yǎng)的荔枝外植體在MS壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)35～45天得到荔枝健壯植株，其中，壯苗培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23-27℃，光照強(qiáng)度為2000-2500lux，光照周期為10-15小時(shí)/天；

步驟四、生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟三中得到的荔枝健壯植株置于MS生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)45～55天得到帶根的荔枝樹(shù)苗，其中，生根培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23-27℃，光照強(qiáng)度為2000-2500lux，光照周期為10-15小時(shí)/天。

在本發(fā)明的其中一個(gè)實(shí)施例中，作為優(yōu)選，所述步驟二中，MS分化培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳30～40mg/L，0.1-0.4mg/L ZT，0.2～1mg/L 6-BA，0.2-0.8mg/L NAA，納米活性炭顆粒1～2g/L，25-30g/L蔗糖和4.8-5.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

在本發(fā)明的其中一個(gè)實(shí)施例中，作為優(yōu)選，所述步驟三中，MS壯苗培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳40～50mg/L，0.3-1.0mg/L 6-BA、0.2-0.8mg/L IAA，納米活性炭顆粒1～2g/L，25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

在本發(fā)明的其中一個(gè)實(shí)施例中，作為優(yōu)選，所述步驟三中，MS生根培養(yǎng)基包含：1/2MS，椰子乳50～60mg/L，1.0-2.0mg/L NAA，納米活性炭顆粒1～2g/L，25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

在本發(fā)明的其中一個(gè)實(shí)施例中，作為優(yōu)選，在所述步驟四之后還進(jìn)行步驟五，所述步驟五包括：煉苗和移栽：先將步驟四中得到的帶根的木鱉植株在溫度25℃下煉苗2-4天，之后再移栽到沙土壤中生長(zhǎng)45天，然后再移栽至大田生長(zhǎng)，其中，大田的生長(zhǎng)條件為：溫度為20-28℃，相對(duì)濕度為75-80％，遮陽(yáng)率為70％。

在本發(fā)明的其中一個(gè)實(shí)施例中，作為優(yōu)選，所述椰子乳為椰子經(jīng)100目紗布過(guò)濾之后得到的液體。

實(shí)施例1

椰子乳為椰子經(jīng)100目紗布過(guò)濾之后得到的液體。

本發(fā)明提供一種荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法，包括：

步驟一、荔枝外植體獲取：在荔枝花芽萌發(fā)期，取荔枝花芽作為外植體，首先將荔枝花芽使用體積百分比9％的酒精溶液浸泡5min，之后使用自來(lái)水沖洗10min，然后用質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.1％的次氯酸鈉溶液消毒8min，最后用無(wú)菌水沖洗3次，除去表面水分得到荔枝外植體；

步驟二、分化培養(yǎng)：將步驟一中得到的荔枝外植體接種于MS分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)25天直至荔枝外植體的側(cè)芽分化長(zhǎng)出叢生芽，其中，分化培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23℃，光照強(qiáng)度為2000lux，光照周期為10小時(shí)/天；MS分化培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳30mg/L，0.1mg/L ZT，0.2mg/L 6-BA，0.2mg/L NAA，納米活性炭顆粒1g/L，25g/L蔗糖和4.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟三、壯苗培養(yǎng)：將步驟二中經(jīng)過(guò)分化培養(yǎng)的荔枝外植體在MS壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)35天得到荔枝健壯植株，其中，壯苗培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23℃，光照強(qiáng)度為2000lux，光照周期為10小時(shí)/天；MS壯苗培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳40mg/L，0.3mg/L 6-BA、0.2mg/L IAA，納米活性炭顆粒1g/L，25g/L蔗糖和3.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟四、生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟三中得到的荔枝健壯植株置于MS生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)45天得到帶根的荔枝樹(shù)苗，其中，生根培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為23℃，光照強(qiáng)度為2000lux，光照周期為10小時(shí)/天。MS生根培養(yǎng)基包含：1/2MS，椰子乳50mg/L，1.0mg/L NAA，納米活性炭顆粒1g/L，25g/L蔗糖和3.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟五：煉苗和移栽：先將步驟四中得到的帶根的木鱉植株在溫度25℃下煉苗2天，之后再移栽到沙土壤中生長(zhǎng)45天，然后再移栽至大田生長(zhǎng)，其中，大田的生長(zhǎng)條件為：溫度為20℃，相對(duì)濕度為75％，遮陽(yáng)率為70％。

實(shí)施例2

椰子乳為椰子經(jīng)100目紗布過(guò)濾之后得到的液體。

本發(fā)明提供一種荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法，包括：

步驟一、荔枝外植體獲?。涸诶笾ㄑ棵劝l(fā)期，取荔枝花芽作為外植體，首先將荔枝花芽使用體積百分比9％的酒精溶液浸泡15min，之后使用自來(lái)水沖洗20min，然后用質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.1％的次氯酸鈉溶液消毒10min，最后用無(wú)菌水沖洗5次，除去表面水分得到荔枝外植體；

步驟二、分化培養(yǎng)：將步驟一中得到的荔枝外植體接種于MS分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)35天直至荔枝外植體的側(cè)芽分化長(zhǎng)出叢生芽，其中，分化培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為27℃，光照強(qiáng)度為2500lux，光照周期為15小時(shí)/天；MS分化培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳40mg/L，0.4mg/L ZT，1mg/L 6-BA，0.2-0.8mg/L NAA，納米活性炭顆粒2g/L，30g/L蔗糖和5.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟三、壯苗培養(yǎng)：將步驟二中經(jīng)過(guò)分化培養(yǎng)的荔枝外植體在MS壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)45天得到荔枝健壯植株，其中，壯苗培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為27℃，光照強(qiáng)度為2500lux，光照周期為15小時(shí)/天；MS壯苗培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳50mg/L，1.0mg/L 6-BA、0.8mg/L IAA，納米活性炭顆粒2g/L，30g/L蔗糖和4.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟四、生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟三中得到的荔枝健壯植株置于MS生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)55天得到帶根的荔枝樹(shù)苗，其中，生根培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為27℃，光照強(qiáng)度為2500lux，光照周期為15小時(shí)/天。MS生根培養(yǎng)基包含：1/2MS，椰子乳60mg/L，2.0mg/L NAA，納米活性炭顆粒2g/L，30g/L蔗糖和4.8g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟五：煉苗和移栽：先將步驟四中得到的帶根的木鱉植株在溫度25℃下煉苗2-4天，之后再移栽到沙土壤中生長(zhǎng)45天，然后再移栽至大田生長(zhǎng)，其中，大田的生長(zhǎng)條件為：溫度為28℃，相對(duì)濕度為80％，遮陽(yáng)率為70％。

實(shí)施例3

椰子乳為椰子經(jīng)100目紗布過(guò)濾之后得到的液體。

本發(fā)明提供一種荔枝樹(shù)苗的培養(yǎng)方法，包括：

步驟一、荔枝外植體獲取：在荔枝花芽萌發(fā)期，取荔枝花芽作為外植體，首先將荔枝花芽使用體積百分比9％的酒精溶液浸泡10min，之后使用自來(lái)水沖洗15min，然后用質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.1％的次氯酸鈉溶液消毒9min，最后用無(wú)菌水沖洗4次，除去表面水分得到荔枝外植體；

步驟二、分化培養(yǎng)：將步驟一中得到的荔枝外植體接種于MS分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)30天直至荔枝外植體的側(cè)芽分化長(zhǎng)出叢生芽，其中，分化培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為25℃，光照強(qiáng)度為2250lux，光照周期為12.5小時(shí)/天；MS分化培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳35mg/L，0.25mg/L ZT，0.6mg/L 6-BA，0.5mg/L NAA，納米活性炭顆粒1.5g/L，27.5g/L蔗糖和5.3g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟三、壯苗培養(yǎng)：將步驟二中經(jīng)過(guò)分化培養(yǎng)的荔枝外植體在MS壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)30天得到荔枝健壯植株，其中，壯苗培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為25℃，光照強(qiáng)度為2250lux，光照周期為12.5小時(shí)/天；MS壯苗培養(yǎng)基包含：MS，椰子乳45mg/L，0.65mg/L 6-BA、0.5mg/L IAA，納米活性炭顆粒1.5g/L，27.5g/L蔗糖和4g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟四、生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟三中得到的荔枝健壯植株置于MS生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)50天得到帶根的荔枝樹(shù)苗，其中，生根培養(yǎng)中的培養(yǎng)溫度為25℃，光照強(qiáng)度為2250lux，光照周期為12.5小時(shí)/天。MS生根培養(yǎng)基包含：1/2MS，椰子乳55mg/L，1.5mg/L NAA，納米活性炭顆粒1.5g/L，28g/L蔗糖和4g/L瓊脂，并調(diào)節(jié)初始pH值為5.8。

步驟五：煉苗和移栽：先將步驟四中得到的帶根的木鱉植株在溫度25℃下煉苗3天，之后再移栽到沙土壤中生長(zhǎng)45天，然后再移栽至大田生長(zhǎng)，其中，大田的生長(zhǎng)條件為：溫度為24℃，相對(duì)濕度為80％，遮陽(yáng)率為70％。

盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開(kāi)如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書(shū)和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出的實(shí)施例。