1.一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于包括以下步驟:
a)將鐵皮石斛種子粉末收集到錐形瓶中,加吐溫溶液,攪拌制得種子懸濁液,靜置4h;
b)過(guò)濾,收集種子,并使用清水沖洗3~5次;
c)將步驟b)收集到的種子,投入裝有升汞溶液的錐形瓶中浸泡15min,進(jìn)行消毒;
d)過(guò)濾,得到消毒后的種子,并使用無(wú)菌水沖洗3~5次;
e)將步驟d)收集到的種子,撥到鐵皮石斛種子萌發(fā)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于,步驟a)和步驟c)采用的錐形瓶容量為50ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于,步驟c)所述升汞溶液濃度為1mg/ml,體積為45ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于,步驟b)和步驟d)采用150目銅網(wǎng)進(jìn)行過(guò)濾。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于,步驟d)所述銅網(wǎng)采用高溫高壓滅菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于,步驟c)~步驟e)均在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于,步驟c)所述錐形瓶采用高溫高壓滅菌。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于,步驟c)在浸泡到7min時(shí),進(jìn)行攪動(dòng)。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種鐵皮石斛蒴果開裂后種子的無(wú)菌播種方法,其特征在于,使用高溫高壓滅菌后的滴管進(jìn)行所述攪動(dòng)。