本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥技術領域，具體涉及利用萎縮芽孢桿菌BA-7防治十字花科根腫病的方法。
背景技術：
近年來，根腫病對于十字花科作物的危害日益受到人們的重視，并積極對其防治方法進行了不斷的研究摸索。其中，生防菌的研發(fā)是其中的研究熱點之一。
然而，現(xiàn)有技術中，對于十字花科作物具有良好防治效果的菌株太少且過于單一，主要集中在枯草芽孢桿菌(如枯草芽孢桿菌XF-1和枯草芽孢桿菌M3)和解淀粉芽孢桿菌(如解淀粉芽孢桿菌Bam22)。
因此，尋求其它可高效防治十字花科作物根腫病的生防菌并找到合適的使用方法，成為本領域亟待解決的技術問題。
技術實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術的缺點，本發(fā)明的目的在于提供一種利用萎縮芽孢桿菌BA-7防治十字花科根腫病的方法，該方法包括步驟：
方法一：將萎縮芽孢桿菌BA-7菌液，以每次每株80-100ml的量對十字花科作物進行灌根處理，至少處理三次，處理時間為播種后的第1天、第7天、第15天；
方法二：將萎縮芽孢桿菌BA-7菌液，以每平米150-200ml的量對十字花科作物進行噴霧處理，至少處理三次，處理時間為播種后 的第1天、第7天、第14天；
所述十字花科作物包括油菜、白菜、青花菜；
所述萎縮芽孢桿菌的分類命名為Bacillus atrophaeus BA-7，于2015年12月21日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為武漢市武昌珞珈山中國典型培養(yǎng)物保藏中心(武漢大學)，保藏號為CCTCC NO：M 2015765。
如本發(fā)明實施例所示，將本發(fā)明菌株培養(yǎng)24小時之后，并利用本發(fā)明方法，1000倍的稀釋液具有高達88.5％(5組平行實驗平均值)的油菜根腫病防治效果。
實現(xiàn)上述效果的機制在于，本發(fā)明菌株本身對于病原菌具有很好的抑制和滅殺作用，使得油菜根腫病的發(fā)生率大為降低。另外，如實驗例1所示，本發(fā)明菌株對于農(nóng)地中的秸稈或其它作物廢棄物具有很好的腐熟作用，施用本發(fā)明菌株培養(yǎng)稀釋液后，可在常溫下有效分解秸稈或其它作物廢棄物，并將藏身其中的病原菌釋放出來，通過病原菌和萎縮芽孢桿菌的直接接觸進一步實現(xiàn)本發(fā)明菌株對土壤中病原菌的全面作用。同時，分解后的秸稈或其他作物廢棄物還能為下一季作物的生長提供更多的有機質，促進農(nóng)作物的健康生長。
一般而言，農(nóng)作物秸稈的腐熟發(fā)酵多采用厭氧方式進行堆漚發(fā)酵，不僅費時費力，而且容易對周邊環(huán)境造成污染。本發(fā)明菌株可在有氧條件下，對秸稈進行腐熟，無需將收割后的秸稈進行集中收集和進行堆漚，僅需將本發(fā)明發(fā)酵菌液撒施入農(nóng)田中，讓菌液接觸農(nóng)作物秸稈便可實現(xiàn)對秸稈的腐熟及其后續(xù)利用。同時，當施用外源秸稈時，即使外源秸稈中帶有病原菌，根據(jù)上述說明，可以理解，本發(fā)明同樣能 實現(xiàn)很好的防治效果。
因此，本領域人員不難理解，本發(fā)明菌株不僅具有很好的對病原菌的抑制殺滅作用，同時還可以在有氧條件下實現(xiàn)對秸稈的快速腐熟，使得下一季油菜大幅度免于病原菌的再次侵染并促進油菜的生長。
在上述基礎下，本發(fā)明研究了利用本發(fā)明菌株對農(nóng)地進行處理的方法，可以實現(xiàn)對十字花科作物農(nóng)地進行處理以顯著提高作物的防病效果。
值得指出的是，對于其它十字花科根腫病的防治效果也十分優(yōu)秀。
現(xiàn)有技術中被公眾熟知的生防菌株枯草芽孢桿菌XF-1的施用濃度十分高，且一旦施用濃度過低，其防治效果將大為降低，極大的限制了其實際應用。
其它常見的生防菌株也多為枯草芽孢桿菌。雖然本發(fā)明的發(fā)明人此前發(fā)現(xiàn)了一株對十字花科作物根腫病具有很好防治效果的解淀粉芽孢桿菌Bam22，拓寬了該領域十字花科生防菌株的菌種范圍，然而在本發(fā)明前，現(xiàn)有技術還未出現(xiàn)可從萎縮芽孢桿菌中尋求高效防治十字花科作物根腫病的菌株的報道和相應的指示。
另外，如本發(fā)明的實施例和對比例所示，本發(fā)明方法可以促進本發(fā)明菌株防治效果的發(fā)揮。
優(yōu)選的，所述萎縮芽孢桿菌BA-7菌液的菌液濃度為6-8×106cfu/ml。
具體實施方式：
下面通過實施例對本發(fā)明進行具體描述，有必要在此指出的是以 下實施例只是用于對本發(fā)明進行進一步的說明，不能理解為對本發(fā)明保護范圍的限制，該領域的技術熟練人員根據(jù)上述發(fā)明內(nèi)容所做出的一些非本質的改進和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護范圍。
實施例1
(1)菌株的培養(yǎng)
將萎縮芽孢桿菌BA-7在固體培養(yǎng)基培養(yǎng)之后，挑取單菌落，置于液體培養(yǎng)基中，于30-32℃震蕩培12小時，轉速為220rpm，作為種子液；所述液體培養(yǎng)基的成分按質量百分數(shù)計包括：酵母提取物0.3％、牛肉浸膏0.2％、蛋白胨0.8％、NaCl 0.3-0.6％、余量為水，pH＝7.0-7.2；
將步驟1)所得物置入發(fā)酵罐中進行發(fā)酵24小時，罐溫為30℃，發(fā)酵罐攪拌速度為250rpm；發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基的成分按質量百分數(shù)計包括：豆粉4.5％、蛋白胨0.12％、葡萄糖0.6％、淀粉2.5％、硫酸錳0.1％、硫酸亞鐵0.06％、磷酸氫二鉀0.2％、碳酸鈣0.1％、消泡劑0.01％、余量為水，pH＝7.0-7.4。
(2)生防效果實驗
將由上述方法所得萎縮芽孢桿菌BA-7菌液稀釋1000倍，以每次每株80的量對十字花科作物進行灌根處理，處理三次，處理時間為播種后的第1天、第7天、第15天。注：未稀釋菌液的濃度約為6-8×109cfu/ml。受試作物為油菜、白菜和青花菜。各實驗組設5個平行組，取平均值。
病情分級：
0級：根部無腫瘤，根系發(fā)育正常；
1級：1-30％的根著少許腫瘤，有小的結節(jié)狀腫塊，相互不連接；
2級：31-60％的根著生腫瘤，有大的結節(jié)狀或球狀腫塊，相互連接；
3級：61-100％的根著生腫瘤，膨大到形成紡錘形瘤，大的瘤塊一直延伸到下胚軸，植株矮小，停止生長。
病情指數(shù)＝[∑(各級病株數(shù)×相對級數(shù)值)/最高級別×調(diào)查總株數(shù)]×100。
相對防效＝(對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))×100/對照病情指數(shù)。
實驗結果如表1所示。
表1
注：清水對照的病情指數(shù)為64％。
實施例2
除防治方法為將萎縮芽孢桿菌BA-7菌液，以每平米150-200ml的量對十字花科作物進行噴霧處理，至少處理三次，處理時間為播種后的第1天、第7天、第14天；其余與實施例1一致。所得防治效果，與實施例1所得的相比，最大偏差不超過3％。
對比例
除灌根方法為：移栽時對每株作物澆100ml，隔7天澆一次，隔 14天再澆一次。其余與實施例1一致。
實驗結果如表2所示。
表2
注：清水對照的病情指數(shù)為62％。
實驗例1
農(nóng)田：油菜田；
在秸稈收割機上安裝一排菌劑噴灑裝置，用于在收割秸稈的同時將菌劑噴灑至農(nóng)田。
收割粉碎農(nóng)田中的秸稈，并向農(nóng)田施用萎縮芽孢桿菌BA-7菌劑，施用量為20000億個細菌/畝。所述菌劑為萎縮芽孢桿菌BA-7發(fā)酵液，菌液濃度為6-9×109cfu/ml。
處理45天之后，進行秸稈失重率(全稱為秸稈生物量失重率)的檢測，失重率為61.3％。