本發(fā)明涉及魚(yú)類育苗技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種循環(huán)水掛網(wǎng)片孵化海水青鳉受精卵的方法。
背景技術(shù)：
海水青鳉(Oryzias melastigma)隸屬輻鰭亞綱(Actinopterygii)、頜針魚(yú)目(Beloniformes)、怪頜鳉科(Adrianichthyidae)、青鳉屬(Oryzias)。由于其個(gè)體小，繁殖力強(qiáng)，產(chǎn)卵量高，世代周期短，鹽度適應(yīng)范圍廣、適合實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖等特點(diǎn)，海水青鳉被作為海洋模式生物種，廣泛的應(yīng)用于海洋生態(tài)毒理的研究。
海水青鳉產(chǎn)多油球、沉性受精卵，卵表面有大量的短絨毛和二十多條較長(zhǎng)的纖維絲，因此使得受精卵具有粘性。容易卵與卵之間相互粘結(jié)，或易粘附其他纖維物品的表面。海水青鳉的受精卵孵化時(shí)間較長(zhǎng)，在26～28℃條件下，約13～14d才能孵化，受精卵孵化多采用靜水孵化或者微充氣。但是在孵化的過(guò)程中，由于受精卵之間相互粘結(jié)成團(tuán)，容易缺氧，孵化至2～3d，大多胚胎變白死亡。如果人工將粘結(jié)成團(tuán)的受精卵剝離，工作量巨大；如果在孵化的容器里充氧氣，由于受精卵屬沉性，會(huì)加重受精卵之間的粘結(jié)。因此，極大的降低受精卵的發(fā)育孵化率，給人工繁殖海水青鳉帶來(lái)困難。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種循環(huán)水掛網(wǎng)片孵化海水青鳉受精卵的方法，本發(fā)明根據(jù)海水青鳉受精卵的物理特性來(lái)提高卵的孵化率，避免了循環(huán)水孵化過(guò)程中受精卵隨水流動(dòng)，被循環(huán)泵吸入及孵化過(guò)程中溶氧不足等問(wèn)題，本發(fā)明方法減少了人工操作同時(shí)提高了孵化率。
本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的
一種循環(huán)水掛網(wǎng)片孵化海水青鳉受精卵的方法，包括海水青鳉受精卵收集、受精卵掛網(wǎng)片、循環(huán)水孵化、受靜水孵化和苗種收集培養(yǎng)；
所述受精卵掛網(wǎng)片：將已經(jīng)設(shè)計(jì)好大小的方形網(wǎng)片，平鋪水中，將收集好的受精卵均勻的撒于網(wǎng)片上；輕輕抖動(dòng)網(wǎng)片，使受精卵充分的粘附于網(wǎng)片之上；再于水中反復(fù)的沖洗，將沒(méi)有粘附的受精卵沖洗掉，整個(gè)過(guò)程動(dòng)作要輕慢；
所述的循環(huán)水孵化：將粘附好受精卵的網(wǎng)片，固定于循環(huán)水孵化缸中，使粘附受精卵的網(wǎng)面正對(duì)水流，水流不易太大，以免將受精卵沖落；
所述的靜水孵化：受精卵于循環(huán)水中孵化10～12d后，將粘附受精卵的網(wǎng)片移入靜水孵化缸中，等待受精卵孵化出膜；
所述苗種收集培養(yǎng)，將靜水孵化出的仔魚(yú)收集于培養(yǎng)缸內(nèi)，自初孵仔魚(yú)移入培養(yǎng)缸時(shí)計(jì)2h后投喂小球藻強(qiáng)化的褶皺臂尾輪蟲(chóng)，仔魚(yú)孵化10d后，開(kāi)始投喂小球藻強(qiáng)化的鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體+褶皺臂尾輪蟲(chóng)，之后逐漸減少褶皺臂尾輪蟲(chóng)的投喂量，孵化15d后，停止褶皺臂尾輪蟲(chóng)的投喂，以鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體為主。
進(jìn)一步，所述的受精卵收集，海水青鳉受精卵在下午5：30-6:30進(jìn)行收集。
進(jìn)一步，所述的網(wǎng)片為纖維材料質(zhì)；網(wǎng)片的網(wǎng)孔為5～10目，孵化時(shí)網(wǎng)片的底端懸掛重物，防止網(wǎng)片漂浮水面。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果：
本發(fā)明提供了循環(huán)水掛網(wǎng)片孵化海水青鳉受精卵的方法，海水青鳉的受精卵為沉性，且受精卵表面的絨毛和纖維絲易于卵之間相互粘結(jié)或粘附于其他物體，收集受精卵，均勻的粘附于網(wǎng)片上，在循環(huán)水中進(jìn)行孵化，以提供充足的溶氧，在受精卵發(fā)育至將要孵化出膜時(shí)；由于初孵仔魚(yú)游動(dòng)能力較差，為避免初孵仔魚(yú)被循環(huán)泵吸入，因此將受精卵移至靜水孵化。
本發(fā)明方法能夠均勻的使受精卵分布于網(wǎng)片上，且不易被循環(huán)水沖掉；解決具有粘性且沉降性的受精卵孵化問(wèn)題，節(jié)省了大量的人力，提高了孵化率和胚胎質(zhì)量。通過(guò)本發(fā)明獲得靜水孵化前的發(fā)育良好的受精卵約為77.3％，靜水孵化至同一時(shí)期發(fā)育良好的受精卵約為45.5％，本發(fā)明方法孵化效果顯著提高。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案做進(jìn)一步詳細(xì)描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受實(shí)施例任何形式上的限制。
實(shí)施例1
一種循環(huán)水掛網(wǎng)片孵化海水青鳉受精卵的方法，包括受精卵收集、受精卵掛網(wǎng)片、受精卵循環(huán)水孵化、受精卵靜水孵化和苗種收集培養(yǎng)；
步驟一：所述的受精卵收集，海水青鳉親魚(yú)一般于上午7:00～11:00產(chǎn)卵，受精卵由長(zhǎng)纖維絲掛于親魚(yú)的泄殖腔，進(jìn)行受精；受精后0.1～6d，受精卵會(huì)自然脫落于水缸底部。收集受精卵最好在下午6:00左右進(jìn)行，保證所有產(chǎn)卵親魚(yú)受精卵能自然脫落；虹吸法收集玻璃缸底的受精卵，用清水緩慢反復(fù)的沖洗，以去除受精卵表面及摻雜在內(nèi)的雜質(zhì)。
步驟二：受精卵掛網(wǎng)片：將已經(jīng)設(shè)計(jì)好大小的方形網(wǎng)片，平鋪水中，網(wǎng)片的網(wǎng)孔為5～10目，將收集好的受精卵均勻的分散于水中，受精卵沉降并粘附于網(wǎng)片上；輕輕抖動(dòng)網(wǎng)片，使受精卵充分的粘附在網(wǎng)片；再于水中反復(fù)的沖洗，將沒(méi)有粘附的受精卵沖洗掉，整個(gè)過(guò)程動(dòng)作要輕慢。
步驟三：受精卵循環(huán)水孵化：將粘附好受精卵的網(wǎng)片，固定于循環(huán)水水族箱中，使粘附受精卵的網(wǎng)面正對(duì)水流，水流不易太大，以免將受精卵沖落，網(wǎng)片的底端懸掛重物，防止網(wǎng)片漂浮水面。
步驟四：受精卵靜水孵化：受精卵于循環(huán)水孵化10～12d后，將網(wǎng)片移入靜水孵化缸中，待受精卵孵化出膜。
步驟五：苗種收集培養(yǎng)，及時(shí)收集孵化靜水孵化出的仔魚(yú)于培養(yǎng)缸內(nèi)。自初孵仔魚(yú)移入培養(yǎng)缸時(shí)起2h后投喂小球藻強(qiáng)化的褶皺臂尾輪蟲(chóng)，仔魚(yú)孵化10d后，開(kāi)始投喂小球藻強(qiáng)化的鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體+褶皺臂尾輪蟲(chóng)，之后逐漸減少褶皺臂尾輪蟲(chóng)的投喂量，孵化15d后，停止投喂褶皺臂尾輪蟲(chóng)，以鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體為主。
2016年7月7日，在山東省海洋生物研究院，運(yùn)用上述方法進(jìn)行海水青鳉受精卵孵化。收集自然脫落的受精卵，沖洗干凈后，平均分為A、B兩組，A組運(yùn)用上述方法，掛網(wǎng)片與循環(huán)水養(yǎng)殖缸內(nèi)，B組與燒杯內(nèi)靜水孵化。7月18日，對(duì)發(fā)育11天的受精卵進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分離發(fā)育良好的受精卵：A組發(fā)育良好的受精卵為156枚，約占總卵數(shù)的77.3％；B組發(fā)育良好的受精卵92枚，約占總數(shù)的45.5％，且粘結(jié)在一起的受精卵發(fā)育至第3日，變白濁死亡。
以上所述，僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何不經(jīng)過(guò)創(chuàng)造性勞動(dòng)想到的變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書(shū)所限定的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。