本發(fā)明涉及植物保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種新型三七種苗根系生物包衣劑及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

三七(Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen)為五加科人參屬植物，主產(chǎn)于云南文山，是我國(guó)名貴的傳統(tǒng)中藥，也是云南省重要的特色植物藥。上世紀(jì)80年代以來(lái)，隨著三七有效成分和藥理作用的不斷闡明，三七產(chǎn)品不斷開(kāi)發(fā)，市場(chǎng)需求日益增加。近年來(lái)，隨著三七產(chǎn)業(yè)規(guī)模的擴(kuò)大，三七種植業(yè)中連作障礙問(wèn)題非常突出。連作引起三七根部病害大面積爆發(fā)，導(dǎo)致三七植株燒須，爛根，致使地上部分死亡，常年損失5％～20％，嚴(yán)重者達(dá)70％以上，甚至絕苗，全園絕收，使三七的種植地不得不向外擴(kuò)張，導(dǎo)致三七道地藥材無(wú)地可種的尷尬局面，嚴(yán)重阻礙了三七相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

克服三七連作障礙，是確保三七資源可持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵問(wèn)題。研究發(fā)現(xiàn)三七2～3年的連作生長(zhǎng)，造成土壤微生物區(qū)系發(fā)生變化，有益微生物減少，病原菌數(shù)量及豐度增加，導(dǎo)致植物病蟲(chóng)害加重，是造成三七連作障礙的主要原因。要從根本上解決或減輕三七生產(chǎn)中的連作障礙問(wèn)題，就必須從壯苗移栽及改善土壤微生態(tài)環(huán)境入手。

迄今，現(xiàn)有技術(shù)未見(jiàn)有本發(fā)明的一種新型三七種苗根系生物包衣劑的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種新型三七種苗根系生物包衣劑及其制備方法與應(yīng)用。移栽前在三七種苗的表面加上一層帶有一定量活菌體的生物保護(hù)膜，這層膜既能保護(hù)三七種苗在運(yùn)輸和移栽過(guò)程中不受機(jī)械損傷，又能減少須根的水分喪失，更重要的是該膜中的有益微生物能夠改變?nèi)叻N苗周圍土壤的微生物群落，改善微生態(tài)環(huán)境，使之更有利于三七的生長(zhǎng)發(fā)育，提高三七幼苗的成活率、存苗率及提高三七的產(chǎn)量和質(zhì)量。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

一種三七種苗根系生物包衣劑，其是用水溶性成膜材料、植物益生菌、生長(zhǎng)素制成的水溶性凝膠，在三七種苗的根部表面形成一層攜帶有益菌株的生物膜，由下述方法制備而得：稱取適量水溶性成膜材料，用熱水溶解成5％～10％的水溶液，冷卻至28～30℃時(shí)，將等體積的水溶性成膜材料與含有一定植物益生菌真菌、放線菌和細(xì)菌的水溶液混合，在混合液中加入根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑，混合均勻得含有益生菌菌體的三七種苗根系生物包衣劑。

如所述的一種三七種苗根系生物包衣劑，其中所述的成膜材料為聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、羥甲基殼聚糖、阿拉伯膠、明膠、羥甲基纖維素、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸衍生物及多元醇聚合物中的一種或多種復(fù)配；所述的益生菌為球毛殼菌、角毛殼菌、米修鏈霉菌、擬無(wú)枝酸桿菌的一種或多種組合，益生菌真菌濃度為1.0х10⁵～2.5х10⁵個(gè)孢子/mL，放線菌和細(xì)菌濃度為1.0х10⁵～2.5х10⁵CFU/mL范圍；所述的根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑為萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸，將萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸先用少量乙醇溶解后加水稀釋，添加到三七種苗根系生物包衣劑中，使根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑最終濃度為三七種苗包衣劑的0.01-0.03％。

本發(fā)明同時(shí)提供了另一種三七種苗根系生物包衣劑，其由下述方法制備而得：精密稱取聚乙烯吡咯烷酮90g，加熱水1000mL，攪拌使其充分溶解；將球毛殼菌和角毛殼菌用常規(guī)固體培養(yǎng)方法在PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)18天，所述PDA培養(yǎng)基配方為：土豆200g去皮，切成1cm³小塊，煮沸20‐30min，過(guò)濾，濾液加入葡萄糖10g，瓊脂20g，用純凈水定容到1L，pH自然；待培養(yǎng)皿上部長(zhǎng)滿孢子，用結(jié)晶刀取出，分別將兩種真菌配制成濃度為2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液各500mL；精密稱取三七根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑吲哚乙酸IAA 300mg,用少量乙醇溶解后加水定容到200mL，配成濃度為1.5mg/mL的IAA母液；然后，待聚乙烯吡咯烷酮水溶液冷卻至28～30℃時(shí)，將上述配制的9％聚乙烯吡咯烷酮水溶液1000mL、球毛殼菌2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液400mL、角毛殼菌2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液400mL和濃度為1.5mg/mL的IAA 200mL混合，充分?jǐn)嚢瑁蛊浠旌暇鶆颉?/p>

以及，另一種三七種苗根系生物包衣劑，其由下述方法制備而得：精密稱取羥丙基甲基纖維素70g，加熱水1000mL,攪拌使其充分溶解；米修鏈霉菌和擬無(wú)枝酸桿菌用常規(guī)固體培養(yǎng)方法分別在海藻糖‐脯氨酸S₂固體培養(yǎng)基和LB固體培養(yǎng)基中增殖培養(yǎng)48h，所述海藻糖‐脯氨酸S₂固體培養(yǎng)基配方為：海藻糖5g，脯氨酸1g，(NH4)₂SO₄ 1g，NaCl 1g，CaCl₂ 2g，K₂HPO₄ 1g，MgSO₄.7H₂O 1g，復(fù)合維生素：核黃素1mg、煙酸1mg、泛酸鈣1mg、肌醇1mg、生物素1mg、P‐氨基苯甲酸1mg、VB₁ 1mg、VB₆ 1mg，瓊脂20g，補(bǔ)水到1000mL，pH 7.2；所述LB固體培養(yǎng)基配方為：酵母粉5g，胰蛋白胨8g，NaCl 4g，瓊脂15g，pH 6.8；待菌落布滿整個(gè)培養(yǎng)皿，用結(jié)晶刀取出，分別將米修鏈霉菌和擬無(wú)枝酸桿菌配制成濃度為1.5х10⁵CFU/mL的菌懸液各400mL；精密稱取三七根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑吲哚乙酸IAA 300mg,用少量乙醇溶解后加水定容到200mL，配成濃度為1.5mg/mL的IAA母液；然后，待羥丙基甲基纖維素水溶液冷卻至28～30℃時(shí)，將上述配制的7％羥丙基甲基纖維素水溶液1000mL、米修鏈霉菌1.5х10⁵CFU/mL的菌懸浮液400mL、擬無(wú)枝酸桿菌1.5х10⁵CFU/mL的菌懸浮液400mL和濃度為1.5mg/mL的IAA200mL混合，充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻?/p>

及，另一種三七種苗根系生物包衣劑，其由下述方法制備而得：精密稱取海藻酸鈉80g，加熱水1000mL,攪拌使其充分溶解；球毛殼菌、角毛殼菌用常規(guī)固體培養(yǎng)方法分別在PDA培養(yǎng)基中增殖培養(yǎng)18天，所述PDA培養(yǎng)基配方為：土豆200g去皮，切成1cm³小塊，煮沸20‐30min，過(guò)濾，濾液加入葡萄糖10g，瓊脂20g，用純凈水定容到1L，pH自然；待培養(yǎng)皿上部長(zhǎng)滿孢子，用結(jié)晶刀取出，分別將兩種真菌配制成濃度為2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液各500mL；擬無(wú)枝酸桿菌在LB固體培養(yǎng)基中增殖培養(yǎng)48h，所述LB固體培養(yǎng)基配方為：酵母粉5g，胰蛋白胨8g，NaCl 4g，瓊脂15g，pH 6.8；待菌落布滿整個(gè)培養(yǎng)皿，用結(jié)晶刀取出，將擬無(wú)枝酸桿菌配制成濃度為1.5х10⁵CFU/mL的菌懸液400mL；精密稱取三七根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑吲哚乙酸IAA 200mg,用少量乙醇溶解后加水定容到200mL，配成濃度為1mg/mL的IAA母液；然后，待海藻酸鈉水溶液冷卻至28～30℃時(shí)，將上述配制的8％海藻酸鈉水溶液1000mL、球毛殼菌2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液300mL、角毛殼菌2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液200mL和擬無(wú)枝酸桿菌1.5х10⁵CFU/mL的菌懸浮液300mL及濃度為1mg/mL的IAA200mL混合，充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻?/p>

本發(fā)明同時(shí)提供了一種三七種苗根系生物包衣劑的制備方法，該方法包括如下步驟：取水溶性成膜材料，用熱水溶解成5～10％的水溶液，冷卻至28～30℃時(shí)，將等體積的水溶性成膜材料與含有一定益生菌濃度的水溶液混合，在混合液中加入根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑，混合均勻即得含有益生菌菌體的三七種苗根系生物包衣劑。

如所述的一種三七種苗根系生物包衣劑的制備方法，所述方法中成膜材料為聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、羥甲基殼聚糖、阿拉伯膠、明膠、羥甲基纖維素、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸衍生物及多元醇聚合物中的一種或多種復(fù)配；所述的益生菌為球毛殼菌、角毛殼菌、米修鏈霉菌、擬無(wú)枝酸桿菌的一種或多種組合，所述的益生菌真菌濃度為1.0х10⁵～2.5х10⁵個(gè)孢子/mL，放線菌和細(xì)菌的濃度為1.0х10⁵～2.5х10⁵CFU/mL范圍；所述的根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑為萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸，將萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸先用少量乙醇溶解后加水稀釋，添加到三七種苗根系生物包衣劑中，其最終濃度為三七種苗包衣劑的0.01-0.03％。

如所述的一種三七種苗根系生物包衣劑的制備方法，該方法分別稱取成膜材料聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、羥甲基殼聚糖、阿拉伯膠、明膠、羥甲基纖維素、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸衍生物及多元醇聚合物中的一種或多種復(fù)配，用熱水溶解成5～10％的水溶液，冷卻至28～30℃時(shí)，將等體積的水溶性成膜材料與含有1.0х10⁵～2.5х10⁵個(gè)孢子/mL或1.0х10⁵～2.5х10⁵CFU/mL濃度的活菌體球毛殼菌、角毛殼菌、米修鏈霉菌、擬無(wú)枝酸桿菌的一種或多種組合的懸浮液充分混合均勻，在混合液中加入根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑萘乙酸、吲哚乙酸和吲哚丁酸，使其在三七種苗根系生物包衣劑中的濃度為0.01‐0.03％，混合均勻得三七種苗根系生物包衣劑。

本發(fā)明還提供了所述的一種三七種苗根系生物包衣劑在三七種植中的應(yīng)用，其特征在于將一年生三七種苗采挖出土，抖去根部泥土，蘸取三七種苗根系生物包衣劑后，于通風(fēng)、陰涼處攤晾2h，使包衣劑成膜，之后整齊地放入運(yùn)輸框中，次日種植于大田中。

以及，所述的一種三七種苗根系生物包衣劑在三七種植中的應(yīng)用，其特征在于將一年生三七種苗采挖出土，抖去根部泥土，蘸取三七種苗根系生物包衣劑后，于通風(fēng)、陰涼處攤晾2h，使包衣劑成膜，之后整齊地放入運(yùn)輸框中，次日種植于大田中，增加三七種苗的出苗率，降低立枯病和根腐病的發(fā)病率，增加二年生三七的存苗率，增加三七頭子的干重。

本發(fā)明的有益微生物包括球毛殼菌(Chaetomiumglobosum)、角毛殼菌(Chaetomiumcupreum)、米修鏈霉菌(Streptomyces misionensis)、擬無(wú)枝酸桿菌(Amycolatopsisvancoresmycina)的一種或多種組合。根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑包括萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)等生長(zhǎng)素。上述所述生長(zhǎng)素的使用濃度及配制方法是指將生長(zhǎng)素先用少量乙醇溶解后加水稀釋并添加到三七種苗根系生物包衣劑中，使其最終濃度為所配制三七種苗包衣劑的0.01-0.03％。

本發(fā)明的制備方法得到的三七種苗根系生物包衣劑不僅能保護(hù)三七種苗在運(yùn)輸和移栽過(guò)程中不受機(jī)械損傷，又能減少須根的水分喪失，更重要的是該膜中的有益微生物能夠改變?nèi)叻N苗周圍土壤的微生物群落，改善微生態(tài)環(huán)境，使之更有利于三七的生長(zhǎng)發(fā)育，提高三七幼苗的成活率、存苗率及提高三七的產(chǎn)量和質(zhì)量。

與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明的優(yōu)異性在于：

本發(fā)明中加入的水溶性成膜材料有效的避免及減少三七種苗在運(yùn)輸及移栽過(guò)程中造成的表皮破損，減輕三七種苗根系失水，提高移栽成活率。本發(fā)明中選用的三七根系生長(zhǎng)促進(jìn)物質(zhì)萘乙酸、吲哚乙酸和吲哚丁酸具有很好的促生根作用，既能增加須根的數(shù)量又可以增強(qiáng)根系活力和適應(yīng)能力，保證了三七幼苗的健康生長(zhǎng)。更重要的是，本發(fā)明中添加的益生菌球毛殼菌(C.globosum)、角毛殼菌(C.cupreum)、米修鏈霉菌(S.misionensis)和擬無(wú)枝酸桿菌(A.vancoresmycina)在三七種苗移栽后即能萌發(fā)生長(zhǎng)，并逐步形成三七根際環(huán)境中的優(yōu)勢(shì)微生物種群，有效抑制三七病原菌的生長(zhǎng)和發(fā)育，從根本上預(yù)防和減輕三七栽培中頻發(fā)的立枯病和根腐病等病害。

本發(fā)明提供了一種新型三七種苗根系生物包衣劑及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明是用水溶性成膜材料、三七益生菌、生長(zhǎng)素制成的水溶性凝膠，在三七種苗的根部表面形成一層攜帶有益菌株的生物膜。本發(fā)明提供的三七種苗根系包衣劑具有良好的成膜性、透氣性、并攜帶適量具有快速增殖能力的有益微生物，不僅能夠保證三七種苗的存活還能改善三七后期生長(zhǎng)的微生態(tài)環(huán)境，最終達(dá)到三七增產(chǎn)的目的。使用本發(fā)明制備方法得到的三七種苗根系保護(hù)膜既能減小由于三七種苗運(yùn)輸和移栽過(guò)程中造成機(jī)械損傷，進(jìn)而造成的有害微生物的侵染。同時(shí)，該帶有大量益生菌的生物膜能很好的溶解于三七種苗栽培土壤的自由水中，增加有益菌群的綜合優(yōu)勢(shì)比，有效改善了三七種苗根際的微生態(tài)環(huán)境，使三七益生菌成為三七根際微生物的優(yōu)勢(shì)菌群，抑制了有害微生物的繁殖和增長(zhǎng)。有效降低由三七土傳病菌侵染引發(fā)的立枯病和根腐病的發(fā)病幾率和病情指數(shù)，提高三七種苗的發(fā)芽率、存苗率及增加單株產(chǎn)量。

具體實(shí)施方式：

下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說(shuō)明。本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不以此為限。

實(shí)施例1：

精密稱取聚乙烯吡咯烷酮(PVP)90g，加熱水1000mL，攪拌使其充分溶解；對(duì)菌種進(jìn)行活化后(菌種活化系指將低溫保存的菌株置于常溫條件下復(fù)蘇，之后接種在固體培養(yǎng)基中，于25～28℃條件下進(jìn)行繼代培養(yǎng)2-3次，獲得生長(zhǎng)良好的菌落)的球毛殼菌(C.globosum)和角毛殼菌(C.cupreum)用常規(guī)固體培養(yǎng)方法在PDA培養(yǎng)基(土豆200g去皮，切成1cm³小塊，煮沸20‐30min，過(guò)濾，濾液加入葡萄糖10g，瓊脂20g，用純凈水定容到1L，pH自然)中培養(yǎng)18天，待培養(yǎng)皿上部長(zhǎng)滿孢子，用結(jié)晶刀取出，分別將兩種真菌配制成濃度為2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液各500mL；精密稱取三七根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑吲哚乙酸IAA 300mg，用少量乙醇溶解后加水定容到200mL，配成濃度為1.5mg/mL的IAA母液，備用。

待聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水溶液冷卻至28～30℃時(shí)，將上述配制的9％PVP水溶液1000mL、球毛殼菌(C.globosum)2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液400mL、角毛殼菌(C.cupreum)2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液400mL和200mL濃度為1.5mg/mL的IAA混合，充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻，即得新型三七種苗根系生物包衣劑。

將一年生三七種苗采挖出土，小心抖去根部泥土，蘸取上述配制所得的三七種苗根系生物包衣劑，再于通風(fēng)、陰涼處攤晾2h，使包衣劑成膜，之后整齊地放入運(yùn)輸框中，次日種植于大田中。同時(shí)，于傳統(tǒng)處理三七種苗方法，即：三七種苗采挖后用甲基硫菌靈100g，殺毒礬100g，菌核凈80g，生根粉100g混勻，均勻撒在三七種苗的根系表面(藥粉；種苗1：400)，進(jìn)行大田移栽為對(duì)照進(jìn)行觀測(cè)和統(tǒng)計(jì)。各處理方式的實(shí)驗(yàn)種植面積分別為200m²，其他水肥等管理措施完全一致，結(jié)果如表1所示。(其中，對(duì)照組Ⅰ系指首次栽培三七的新地中按傳統(tǒng)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；包衣組Ⅰ系指首次栽培三七的新地中用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑對(duì)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；對(duì)照組Ⅱ系指栽種過(guò)兩年三七后輪作3年玉米的輪作地中按傳統(tǒng)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；包衣組Ⅱ系指栽種過(guò)兩年三七后輪作3年玉米的輪作地中用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑對(duì)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培。

表1 不同處理三七種苗種植1年后的生長(zhǎng)狀況調(diào)查

從上述結(jié)果可以看出，采用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑，可以顯著增加三七種苗的出苗率；顯著降低立枯病和根腐病的發(fā)病率；顯著增加二年生三七的存苗率，并增加三七頭子的干重，有利于提高三七的產(chǎn)量和質(zhì)量。

實(shí)施例2：

精密稱取羥丙基甲基纖維素(HPMC)70g，加熱水1000mL,攪拌使其充分溶解；活化后(菌種活化系指將低溫保存的菌株置于常溫條件下復(fù)蘇，之后接種在固體培養(yǎng)基中，于25～28℃條件下進(jìn)行繼代培養(yǎng)2-3次，獲得生長(zhǎng)良好的菌落)的米修鏈霉菌(S.misionensis)和擬無(wú)枝酸桿菌(A.vancoresmycina)用常規(guī)固體培養(yǎng)方法分別在海藻糖‐脯氨酸(S₂)固體培養(yǎng)基(海藻糖5g，脯氨酸1g，(NH4)₂SO₄ 1g，NaCl 1g，CaCl₂ 2g，K₂HPO₄ 1g，MgSO₄.7H₂O 1g，復(fù)合維生素：核黃素1mg、煙酸1mg、泛酸鈣1mg、肌醇1mg、生物素1mg、P‐氨基苯甲酸1mg、VB₁1mg、VB₆ 1mg，瓊脂20g，補(bǔ)水到1000mL，pH 7.2)和LB固體培養(yǎng)基(酵母粉5g，胰蛋白胨8g，NaCl4g，瓊脂15g，pH 6.8)中增殖培養(yǎng)48h，待菌落布滿整個(gè)培養(yǎng)皿，用結(jié)晶刀取出，分別將米修鏈霉菌(S.misionensis)和擬無(wú)枝酸桿菌(A.vancoresmycina)配制成濃度為1.5х10⁵CFU/mL的菌懸液各400mL；精密稱取三七根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑吲哚乙酸IAA 300mg,用少量乙醇溶解后加水定容到200mL，配成濃度為1.5mg/mL的IAA母液，備用。

待HPMC水溶液冷卻至28～30℃時(shí)，將上述配制的7％HPMC水溶液1000mL、米修鏈霉菌(S.misionensis)1.5х10⁵CFU/mL的菌懸浮液400mL和擬無(wú)枝酸桿菌(A.vancoresmycina)1.5х10⁵CFU/mL的菌懸浮液400mL和200mL濃度為1.5mg/mL的IAA混合，充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻，即得新型三七種苗根系生物包衣劑。

將一年生三七種苗采挖出土，小心抖去根部泥土，蘸取上述配制所得的三七種苗根系生物包衣劑，再于通風(fēng)、陰涼處攤晾2h，使包衣劑成膜，之后整齊地放入運(yùn)輸框中，次日種植于大田中。同時(shí)，于傳統(tǒng)處理三七種苗方法，即：三七種苗采挖后用甲基硫菌靈100g，殺毒礬100g，菌核凈80g，生根粉100g混勻，均勻撒在三七種苗的根系表面(藥粉；種苗1：400)，進(jìn)行大田移栽為對(duì)照進(jìn)行觀測(cè)和統(tǒng)計(jì)。各處理方式的實(shí)驗(yàn)種植面積分別為200m²，其他水肥等管理措施完全一致，結(jié)果如表2所示。(其中，對(duì)照組Ⅰ系指首次栽培三七的新地中按傳統(tǒng)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；包衣組Ⅰ系指首次栽培三七的新地中用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑對(duì)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；對(duì)照組Ⅱ系指栽種過(guò)兩年三七后輪作3年玉米的輪作地中按傳統(tǒng)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；包衣組Ⅱ系指栽種過(guò)兩年三七后輪作3年玉米的輪作地中用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑對(duì)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培。

表2 不同處理三七種苗種植1年后的生長(zhǎng)狀況調(diào)查

從上述結(jié)果可以看出，采用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑，可以顯著增加三七種苗的出苗率；顯著降低立枯病和根腐病的發(fā)病率；顯著增加二年生三七的存苗率，并增加三七頭子的干重，有利于提高三七的產(chǎn)量和質(zhì)量。

實(shí)施例3：

精密稱取海藻酸鈉80g，加熱水1000mL，攪拌使其充分溶解；活化后(菌種活化系指將低溫保存的菌株置于常溫條件下復(fù)蘇，之后接種在固體培養(yǎng)基中，于25～28℃條件下進(jìn)行繼代培養(yǎng)2-3次，獲得生長(zhǎng)良好的菌落)的球毛殼菌(C.globosum)、角毛殼菌(C.cupreum)用常規(guī)固體培養(yǎng)方法分別在PDA培養(yǎng)基(土豆200g去皮，切成1cm³小塊，煮沸20‐30min，過(guò)濾，濾液加入葡萄糖10g，瓊脂20g，用純凈水定容到1L，pH自然)中增殖培養(yǎng)18天待培養(yǎng)皿上部長(zhǎng)滿孢子，用結(jié)晶刀取出，分別將兩種真菌配制成濃度為2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液各500mL；擬無(wú)枝酸桿菌(A.vancoresmycina)在LB固體培養(yǎng)基(酵母粉5g，胰蛋白胨8g，NaCl 4g，瓊脂15g，pH 6.8)中增殖培養(yǎng)48h，待菌落布滿整個(gè)培養(yǎng)皿，用結(jié)晶刀取出，將擬無(wú)枝酸桿菌(A.vancoresmycina)配制成濃度為1.5х10⁵CFU/mL的菌懸液各400mL；精密稱取三七根系生長(zhǎng)促進(jìn)劑吲哚乙酸IAA 200mg,用少量乙醇溶解后加水定容到200mL，配成濃度為1mg/mL的IAA母液，備用。

待海藻酸鈉水溶液冷卻至28～30℃時(shí)，將上述配制的8％海藻酸鈉水溶液1000mL、球毛殼菌(C.globosum)2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液300mL、角毛殼菌(C.cupreum)2.0х10⁵個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液200mL和擬無(wú)枝酸桿菌(A.vancoresmycina)1.5х10⁵CFU/mL的菌懸浮液300mL及200mL濃度為1mg/mL的IAA混合，充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻，即得新型三七種苗根系生物包衣劑。

將一年生三七種苗采挖出土，小心抖去根部泥土，蘸取上述配制所得的三七種苗根系生物包衣劑，于通風(fēng)、陰涼處攤晾2h，使包衣劑成膜，之后整齊地放入運(yùn)輸框中，次日種植于大田中。同時(shí)，于傳統(tǒng)處理三七種苗方法，即：三七種苗采挖后用甲基硫菌靈100g，殺毒礬100g，菌核凈80g，生根粉100g混勻，均勻撒在三七種苗的根系表面(藥粉；種苗1：400)，進(jìn)行大田移栽為對(duì)照進(jìn)行觀測(cè)和統(tǒng)計(jì)。各處理方式的實(shí)驗(yàn)種植面積分別為200m²，其他水肥等管理措施完全一致，結(jié)果如表3所示。(其中，對(duì)照組Ⅰ系指首次栽培三七的新地中按傳統(tǒng)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；包衣組Ⅰ系指首次栽培三七的新地中用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑對(duì)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；對(duì)照組Ⅱ系指栽種過(guò)兩年三七后輪作3年玉米的輪作地中按傳統(tǒng)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培；包衣組Ⅱ系指栽種過(guò)兩年三七后輪作3年玉米的輪作地中用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑對(duì)三七種苗處理方式進(jìn)行栽培。

表3 不同處理三七種苗種植1年后的生長(zhǎng)狀況調(diào)查

從上述結(jié)果可以看出，采用本發(fā)明的三七種苗生物包衣劑，可以顯著增加三七種苗的出苗率；顯著降低立枯病和根腐病的發(fā)病率；顯著增加二年生三七的存苗率，并增加三七頭子的干重，有利于提高三七的產(chǎn)量和質(zhì)量。