本發(fā)明涉及中藥材技術領域,具體涉及一種藥用水飛薊栽培技術及水飛薊素提取方法。
背景技術:
水飛薊系菊科草本藥用植物,別名:水飛堆、老鼠勒。水飛薊種子經(jīng)過加工提取出水飛薊素、水飛薊寧,具有改善肝功能、保護肝細胞的作用,為保肝藥用植物,用于治療急、慢性肝炎、肝硬變等肝病有特殊的療效,與此同時,水飛薊種子經(jīng)過深加工后獲得的次級產(chǎn)物——水飛薊素,具有“五抗一降”的作用,即抗自由基活性、抗脂質過氧化、抗脂氧酶、抗“gsh”排空、抗腫瘤和降血脂作用。水飛薊種子的質量直接關系到水飛薊提取素的產(chǎn)率和醫(yī)用價值,現(xiàn)有的水飛薊種植技術,產(chǎn)量低、品質差,獲得水飛薊素產(chǎn)率低,藥用價值大大降低,使得水飛薊素的藥用價值遠不能滿足醫(yī)用市場的發(fā)展需求。
基于上述分析,對現(xiàn)有水飛薊種植技術及基于水飛薊種子的水飛薊素的提取方法進行技術改進,設計一種藥用水飛薊栽培技術及水飛薊素提取方法,實現(xiàn)水飛薊的高產(chǎn)、精確化種植管理,提高水飛薊素的產(chǎn)率和水飛薊素的醫(yī)用品質,最大限度發(fā)揮水飛薊素的藥用價值,顯得尤為重要。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明提供一種藥用水飛薊栽培技術及水飛薊素提取方法,實現(xiàn)水飛薊的高產(chǎn)、精確化種植管理,提高水飛薊素的產(chǎn)率和水飛薊素的醫(yī)用品質,最大限度發(fā)揮水飛薊素的藥用價值,滿足醫(yī)藥市場對于水飛薊素的需求。
為了實現(xiàn)本發(fā)明的目的,擬采用以下技術:
一種藥用水飛薊栽培技術,包括以下步驟:
(1)選地
選擇土層深厚、土質疏松、土壤肥沃、排水良好、向陽干燥的微酸性砂質壤土,反復耙細耙平;
(2)土壤處理
播前施入底肥,每畝施基肥1500~2000千克、過磷酸鈣45~60千克,耕深24~32厘米,耙細整平起壟,壟寬1.8米,壟間距40cm,每壟種植3行,每畝施用7~10kg3%的米樂爾顆粒劑,混細干土40~50kg,均勻地撤在地表、深耙20cm,淺覆土后再定植;
(3)種子處理
用種子播種時,取儲藏的種子用紗布包好,25℃溫水浸泡2h;種子消毒:用2000倍多菌靈溶液浸泡12h,隨后用清水洗凈種子;清洗干凈的種子,于25℃條件下置于引發(fā)劑溶液中浸泡時間8~16h,取出后用蒸餾水沖洗2min,用吸水紙吸干后備用;將引發(fā)處理后的種子置于恒溫光照箱中的改良泥炭土上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度25~26℃,光強4000lx,光暗周期10h-14h;每天定時噴灑適量蒸餾水,種子經(jīng)6~10天萌發(fā),萌發(fā)率達95%以上;
(4)適時播種
用種子播種時,可以直播和育苗,當5厘米地溫穩(wěn)定通過10℃時,按行距70~90厘米開溝種植,種植后腹膜,根系間鋪設滴灌帶,相鄰行之間的種植穴采用交叉錯位種植,株距50~62厘米栽植;
(5)田間管理
在出苗前后都要保持土壤濕潤,齊苗后要適當通風,苗高1厘米時,逐漸把塑料膜去掉,結合拔草間剔除過密的苗,苗高1.5~2厘米時,按行距70~90厘米,株距50~62厘米定植大田;在苗高5~7cm時,要結合間苗及時進行中耕除草;在水飛薊生長的中期,通過掐尖之技術措施,掐尖,去其頂端生長優(yōu)勢,促其側腋芽優(yōu)勢,促進快分枝、多分枝,以增加光合葉面積,積累人量的光合產(chǎn)物;
(6)病蟲害防治
水飛薊生長過程中主要病害有白粉病、葉枯病和根腐病,發(fā)病時,對于白粉病和葉枯病采用表面施藥的方式進行預防和治療,對于根腐病利用滴灌帶進行滴管施藥;對白粉病的防治方法,應加強田間管理,注意田間通風透光,發(fā)病初期可用50%代森銨或50%多菌靈800~1000倍液或70%甲基托布津800~1000倍液或25%的粉銹寧500倍液噴施防治;對葉枯病的防治方法,冬季應處理病殘株,消滅越冬菌原,發(fā)病初期用50%多菌靈可濕粉劑1000倍液或1:1:120波爾多液噴霧,每7~10天1次,連續(xù)2~3次;對根腐病的防治方法,每畝用藥1~1.5kg,70%甲基托布津或50%多菌靈,拌50~70kg的細土,均勻撒入定植穴內或撒在地表,翻耕使藥劑與土壤充分混勻,出現(xiàn)病株時,每株用250毫升70%甲基托布津可濕性粉劑80倍液灌根,7天內連用兩次;
(7)采果收球,水飛薊種子成熟后及時收獲,風選后干燥儲藏。
一種水飛薊素提取方法,包括以下步驟:
(1)獲得水飛薊種子除雜提純后,利用榨油機榨去油脂獲得水飛薊餅;
(2)將步驟(1)獲得的水飛薊餅裝入提取罐中,在提取罐中加入堿水乙醇溶液,加溫至65℃~70℃后保持恒溫4~6小時,恒溫處理后加入乙酸乙酯溶液進行深度提取,連續(xù)提取3~5次制得水飛薊提取液;水飛薊餅與堿水乙醇溶液的重量比為1:(10-12);該堿水乙醇由乙醇溶液和naoh混合而成,其乙醇溶液的重量百分濃度為60%~75%,naoh與乙醇溶液的重量比為1:(40~55),乙酸乙酯溶液為堿水乙醇溶液的3倍體積;
(3)將步驟(2)中獲得的水飛薊素提取液真空濃縮至比重0.94~0.96g/ml,得到濃縮液,真空濃縮的真空度為0.03~0.05mpa,溫度為40~45℃,濃縮液中加入濃縮液體積10~12倍體積的75%的乙醇溶液進行分散,分散時間1~1.5h,溫度45~50℃,分散結束后離心分離得水飛薊素粗品沉淀,離心轉速為4000~6000rpm,離心時間20~30min;
(4)將步驟(3)獲得的水飛薊素粗品沉淀用98~99%乙醇溶液溶解,乙醇溶液用量為水飛薊素粗品沉淀質量的2~4倍,溶解溫度45~55℃,溶解完畢后離心去雜得上清液,離心轉速為4000~6000rpm,離心時間20~30min,上清液過纖維素柱進行吸附;
(5)采用98~99%的乙醇溶液洗脫吸附在纖維素柱上的水飛薊索得水飛薊索洗脫液,乙醇溶液用量為為加入上清液體積的4倍。
(6)水飛薊素洗脫液離心濃縮,濃縮液真空干燥得水飛薊素成品。
本發(fā)明提供了一種藥用水飛薊栽培技術及水飛薊素提取方法,與現(xiàn)有技術相比,有益效果在于:
1、本發(fā)明設計的藥用水飛薊栽培技術,采用精準化種植栽培及管理技術,實現(xiàn)了水飛薊的規(guī)?;N植和高產(chǎn),獲得水飛薊種子顆粒豐滿,產(chǎn)量高,為獲得高產(chǎn)率的水飛薊素奠定了原料基礎。
2、本發(fā)明設計的水飛薊素提取方法操作條件溫和,操作簡單,易于工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn);制備方法可靠性好,產(chǎn)品質量穩(wěn)定,雜質含量低,水飛薊素純度高;減少了中間環(huán)節(jié)導致的有效成份損失和污染,避免了有效成份受熱時間過長所造成的品質下降;提高和最大限度地保留了水飛薊素中的水飛薊賓成份,水飛薊賓含量的提高,又大大增強了水飛薊素的藥物效果和成品品質。
具體實施方式
一種藥用水飛薊栽培技術,包括以下步驟:
(1)選地
選擇土層深厚、土質疏松、土壤肥沃、排水良好、向陽干燥的微酸性砂質壤土,反復耙細耙平;
(2)土壤處理
播前施入底肥,每畝施基肥1500~2000千克、過磷酸鈣45~60千克,耕深24~32厘米,耙細整平起壟,壟寬1.8米,壟間距40cm,每壟種植3行,每畝施用7~10kg3%的米樂爾顆粒劑,混細干土40~50kg,均勻地撤在地表、深耙20cm,淺覆土后再定植;
(3)種子處理
用種子播種時,取儲藏的種子用紗布包好,25℃溫水浸泡2h;種子消毒:用2000倍多菌靈溶液浸泡12h,隨后用清水洗凈種子;清洗干凈的種子,于25℃條件下置于引發(fā)劑溶液中浸泡時間8~16h,取出后用蒸餾水沖洗2min,用吸水紙吸干后備用;將引發(fā)處理后的種子置于恒溫光照箱中的改良泥炭土上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度25~26℃,光強4000lx,光暗周期10h-14h;每天定時噴灑適量蒸餾水,種子經(jīng)6~10天萌發(fā),萌發(fā)率達95%以上;
(4)適時播種
用種子播種時,可以直播和育苗,當5厘米地溫穩(wěn)定通過10℃時,按行距70~90厘米開溝種植,種植后腹膜,根系間鋪設滴灌帶,相鄰行之間的種植穴采用交叉錯位種植,株距50~62厘米栽植;
(5)田間管理
在出苗前后都要保持土壤濕潤,齊苗后要適當通風,苗高1厘米時,逐漸把塑料膜去掉,結合拔草間剔除過密的苗,苗高1.5~2厘米時,按行距70~90厘米,株距50~62厘米定植大田;在苗高5~7cm時,要結合間苗及時進行中耕除草;在水飛薊生長的中期,通過掐尖之技術措施,掐尖,去其頂端生長優(yōu)勢,促其側腋芽優(yōu)勢,促進快分枝、多分枝,以增加光合葉面積,積累人量的光合產(chǎn)物;
(6)病蟲害防治
水飛薊生長過程中主要病害有白粉病、葉枯病和根腐病,發(fā)病時,對于白粉病和葉枯病采用表面施藥的方式進行預防和治療,對于根腐病利用滴灌帶進行滴管施藥;對白粉病的防治方法,應加強田間管理,注意田間通風透光,發(fā)病初期可用50%代森銨或50%多菌靈800~1000倍液或70%甲基托布津800~1000倍液或25%的粉銹寧500倍液噴施防治;對葉枯病的防治方法,冬季應處理病殘株,消滅越冬菌原,發(fā)病初期用50%多菌靈可濕粉劑1000倍液或1:1:120波爾多液噴霧,每7~10天1次,連續(xù)2~3次;對根腐病的防治方法,每畝用藥1~1.5kg,70%甲基托布津或50%多菌靈,拌50~70kg的細土,均勻撒入定植穴內或撒在地表,翻耕使藥劑與土壤充分混勻,出現(xiàn)病株時,每株用250毫升70%甲基托布津可濕性粉劑80倍液灌根,7天內連用兩次;
(7)采果收球,水飛薊種子成熟后及時收獲,風選后干燥儲藏。
本發(fā)明設計的藥用水飛薊栽培技術,采用精準化種植栽培及管理技術,實現(xiàn)了水飛薊的規(guī)?;N植和高產(chǎn),獲得水飛薊種子顆粒豐滿,產(chǎn)量高,為獲得高產(chǎn)率的水飛薊素奠定了原料基礎。
一種水飛薊素提取方法,包括以下步驟:
(1)獲得水飛薊種子除雜提純后,利用榨油機榨去油脂獲得水飛薊餅;
(2)將步驟(1)獲得的水飛薊餅裝入提取罐中,在提取罐中加入堿水乙醇溶液,加溫至65℃~70℃后保持恒溫4~6小時,恒溫處理后加入乙酸乙酯溶液進行深度提取,連續(xù)提取3~5次制得水飛薊提取液;水飛薊餅與堿水乙醇溶液的重量比為1:(10-12);該堿水乙醇由乙醇溶液和naoh混合而成,其乙醇溶液的重量百分濃度為60%~75%,naoh與乙醇溶液的重量比為1:(40~55),乙酸乙酯溶液為堿水乙醇溶液的3倍體積;
(3)將步驟(2)中獲得的水飛薊素提取液真空濃縮至比重0.94~0.96g/ml,得到濃縮液,真空濃縮的真空度為0.03~0.05mpa,溫度為40~45℃,濃縮液中加入濃縮液體積10~12倍體積的75%的乙醇溶液進行分散,分散時間1~1.5h,溫度45~50℃,分散結束后離心分離得水飛薊素粗品沉淀,離心轉速為4000~6000rpm,離心時間20~30min;
(4)將步驟(3)獲得的水飛薊素粗品沉淀用98~99%乙醇溶液溶解,乙醇溶液用量為水飛薊素粗品沉淀質量的2~4倍,溶解溫度45~55℃,溶解完畢后離心去雜得上清液,離心轉速為4000~6000rpm,離心時間20~30min,上清液過纖維素柱進行吸附;
(5)采用98~99%的乙醇溶液洗脫吸附在纖維素柱上的水飛薊索得水飛薊索洗脫液,乙醇溶液用量為為加入上清液體積的4倍。
(6)水飛薊素洗脫液離心濃縮,濃縮液真空干燥得水飛薊素成品。
本發(fā)明設計的水飛薊素提取方法操作條件溫和,操作簡單,易于工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn);制備方法可靠性好,產(chǎn)品質量穩(wěn)定,雜質含量低,水飛薊素純度高;減少了中間環(huán)節(jié)導致的有效成份損失和污染,避免了有效成份受熱時間過長所造成的品質下降;提高和最大限度地保留了水飛薊素中的水飛薊賓成份,水飛薊賓含量的提高,又大大增強了水飛薊素的藥物效果和成品品質。
以下結合具體實施方式,對本發(fā)明做進一步具體說明:
實施例1:
一種藥用水飛薊栽培技術,包括以下步驟:
(1)選地
選擇土層深厚、土質疏松、土壤肥沃、排水良好、向陽干燥的微酸性砂質壤土,反復耙細耙平;
(2)土壤處理
播前施入底肥,每畝施基肥1500千克、過磷酸鈣45千克,耕深24厘米,耙細整平起壟,壟寬1.8米,壟間距40cm,每壟種植3行,每畝施用7kg3%的米樂爾顆粒劑,混細干土40kg,均勻地撤在地表、深耙20cm,淺覆土后再定植;
(3)種子處理
用種子播種時,取儲藏的種子用紗布包好,25℃溫水浸泡2h;種子消毒:用2000倍多菌靈溶液浸泡12h,隨后用清水洗凈種子;清洗干凈的種子,于25℃條件下置于引發(fā)劑溶液中浸泡時間8h,取出后用蒸餾水沖洗2min,用吸水紙吸干后備用;將引發(fā)處理后的種子置于恒溫光照箱中的改良泥炭土上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度25℃,光強4000lx,光暗周期10h;每天定時噴灑適量蒸餾水,種子經(jīng)6天萌發(fā),萌發(fā)率達95%以上;
(4)適時播種
用種子播種時,可以直播和育苗,當5厘米地溫穩(wěn)定通過10℃時,按行距70厘米開溝種植,種植后腹膜,根系間鋪設滴灌帶,相鄰行之間的種植穴采用交叉錯位種植,株距50厘米栽植;
(5)田間管理
在出苗前后都要保持土壤濕潤,齊苗后要適當通風,苗高1厘米時,逐漸把塑料膜去掉,結合拔草間剔除過密的苗,苗高1.5厘米時,按行距70厘米,株距50厘米定植大田;在苗高5cm時,要結合間苗及時進行中耕除草;在水飛薊生長的中期,通過掐尖之技術措施,掐尖,去其頂端生長優(yōu)勢,促其側腋芽優(yōu)勢,促進快分枝、多分枝,以增加光合葉面積,積累人量的光合產(chǎn)物;
(6)病蟲害防治
水飛薊生長過程中主要病害有白粉病、葉枯病和根腐病,發(fā)病時,對于白粉病和葉枯病采用表面施藥的方式進行預防和治療,對于根腐病利用滴灌帶進行滴管施藥;對白粉病的防治方法,應加強田間管理,注意田間通風透光,發(fā)病初期可用50%代森銨或50%多菌靈800倍液或70%甲基托布津800倍液或25%的粉銹寧500倍液噴施防治;對葉枯病的防治方法,冬季應處理病殘株,消滅越冬菌原,發(fā)病初期用50%多菌靈可濕粉劑1000倍液或1:1:120波爾多液噴霧,每7天1次,連續(xù)2次;對根腐病的防治方法,每畝用藥1kg,0%甲基托布津或50%多菌靈,拌50kg的細土,均勻撒入定植穴內或撒在地表,翻耕使藥劑與土壤充分混勻,出現(xiàn)病株時,每株用250毫升70%甲基托布津可濕性粉劑80倍液灌根,7天內連用兩次;
(7)采果收球,水飛薊種子成熟后及時收獲,風選后干燥儲藏。
基于上述栽培技術,水飛薊的畝產(chǎn)量可達1200kg。
一種基于上述水飛薊種子的水飛薊素提取方法,包括以下步驟:
(1)獲得水飛薊種子除雜提純后,利用榨油機榨去油脂獲得水飛薊餅;
(2)將步驟(1)獲得的水飛薊餅裝入提取罐中,在提取罐中加入堿水乙醇溶液,加溫至65℃保持恒溫4小時,恒溫處理后加入乙酸乙酯溶液進行深度提取,連續(xù)提取3次制得水飛薊提取液;水飛薊餅與堿水乙醇溶液的重量比為1:10;該堿水乙醇由乙醇溶液和naoh混合而成,其乙醇溶液的重量百分濃度為60%,naoh與乙醇溶液的重量比為1:40,乙酸乙酯溶液為堿水乙醇溶液的3倍體積;
(3)將步驟(2)中獲得的水飛薊素提取液真空濃縮至比重0.94g/ml,得到濃縮液,真空濃縮的真空度為0.03mpa,溫度為40℃,濃縮液中加入濃縮液體積10倍體積的75%的乙醇溶液進行分散,分散時間1h,溫度45℃,分散結束后離心分離得水飛薊素粗品沉淀,離心轉速為4000rpm,離心時間20min;
(4)將步驟(3)獲得的水飛薊素粗品沉淀用98%乙醇溶液溶解,乙醇溶液用量為水飛薊素粗品沉淀質量的2倍,溶解溫度45℃,溶解完畢后離心去雜得上清液,離心轉速為4000rpm,離心時間20min,上清液過纖維素柱進行吸附;
(5)采用98%的乙醇溶液洗脫吸附在纖維素柱上的水飛薊索得水飛薊索洗脫液,乙醇溶液用量為為加入上清液體積的4倍。
(6)水飛薊素洗脫液離心濃縮,濃縮液真空干燥得水飛薊素成品。
基于上述提取方法獲得的水飛薊素產(chǎn)率可達3%,純度高達91%。
實施例2:
一種藥用水飛薊栽培技術,包括以下步驟:
(1)選地
選擇土層深厚、土質疏松、土壤肥沃、排水良好、向陽干燥的微酸性砂質壤土,反復耙細耙平;
(2)土壤處理
播前施入底肥,每畝施基肥2000千克、過磷酸鈣60千克,耕深32厘米,耙細整平起壟,壟寬1.8米,壟間距40cm,每壟種植3行,每畝施用10kg3%的米樂爾顆粒劑,混細干土50kg,均勻地撤在地表、深耙20cm,淺覆土后再定植;
(3)種子處理
用種子播種時,取儲藏的種子用紗布包好,25℃溫水浸泡2h;種子消毒:用2000倍多菌靈溶液浸泡12h,隨后用清水洗凈種子;清洗干凈的種子,于25℃條件下置于引發(fā)劑溶液中浸泡時間16h,取出后用蒸餾水沖洗2min,用吸水紙吸干后備用;將引發(fā)處理后的種子置于恒溫光照箱中的改良泥炭土上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度26℃,光強4000lx,光暗周期14h;每天定時噴灑適量蒸餾水,種子經(jīng)10天萌發(fā),萌發(fā)率達95%以上;
(4)適時播種
用種子播種時,可以直播和育苗,當5厘米地溫穩(wěn)定通過10℃時,按行距70~90厘米開溝種植,種植后腹膜,根系間鋪設滴灌帶,相鄰行之間的種植穴采用交叉錯位種植,株距50~62厘米栽植;
(5)田間管理
在出苗前后都要保持土壤濕潤,齊苗后要適當通風,苗高1厘米時,逐漸把塑料膜去掉,結合拔草間剔除過密的苗,苗高2厘米時,按行距90厘米,株距62厘米定植大田;在苗高7cm時,要結合間苗及時進行中耕除草;在水飛薊生長的中期,通過掐尖之技術措施,掐尖,去其頂端生長優(yōu)勢,促其側腋芽優(yōu)勢,促進快分枝、多分枝,以增加光合葉面積,積累人量的光合產(chǎn)物;
(6)病蟲害防治
水飛薊生長過程中主要病害有白粉病、葉枯病和根腐病,發(fā)病時,對于白粉病和葉枯病采用表面施藥的方式進行預防和治療,對于根腐病利用滴灌帶進行滴管施藥;對白粉病的防治方法,應加強田間管理,注意田間通風透光,發(fā)病初期可用50%代森銨或50%多菌靈1000倍液或70%甲基托布津1000倍液或25%的粉銹寧500倍液噴施防治;對葉枯病的防治方法,冬季應處理病殘株,消滅越冬菌原,發(fā)病初期用50%多菌靈可濕粉劑1000倍液或1:1:120波爾多液噴霧,每10天1次,連續(xù)3次;對根腐病的防治方法,每畝用藥1.5kg,70%甲基托布津或50%多菌靈,拌70kg的細土,均勻撒入定植穴內或撒在地表,翻耕使藥劑與土壤充分混勻,出現(xiàn)病株時,每株用250毫升70%甲基托布津可濕性粉劑80倍液灌根,7天內連用兩次;
(7)采果收球,水飛薊種子成熟后及時收獲,風選后干燥儲藏。
基于上述栽培技術,水飛薊的畝產(chǎn)量可達1310kg。
一種基于上述水飛薊種子的水飛薊素提取方法,包括以下步驟:
(1)獲得水飛薊種子除雜提純后,利用榨油機榨去油脂獲得水飛薊餅;
(2)將步驟(1)獲得的水飛薊餅裝入提取罐中,在提取罐中加入堿水乙醇溶液,加溫至65℃保持恒溫4小時,恒溫處理后加入乙酸乙酯溶液進行深度提取,連續(xù)提取3次制得水飛薊提取液;水飛薊餅與堿水乙醇溶液的重量比為1:10;該堿水乙醇由乙醇溶液和naoh混合而成,其乙醇溶液的重量百分濃度為60%,naoh與乙醇溶液的重量比為1:40,乙酸乙酯溶液為堿水乙醇溶液的3倍體積;
(3)將步驟(2)中獲得的水飛薊素提取液真空濃縮至比重0.94g/ml,得到濃縮液,真空濃縮的真空度為0.03mpa,溫度為40℃,濃縮液中加入濃縮液體積10倍體積的75%的乙醇溶液進行分散,分散時間1h,溫度45℃,分散結束后離心分離得水飛薊素粗品沉淀,離心轉速為4000rpm,離心時間20min;
(4)將步驟(3)獲得的水飛薊素粗品沉淀用98%乙醇溶液溶解,乙醇溶液用量為水飛薊素粗品沉淀質量的2倍,溶解溫度45℃,溶解完畢后離心去雜得上清液,離心轉速為4000rpm,離心時間20min,上清液過纖維素柱進行吸附;
(5)采用98%的乙醇溶液洗脫吸附在纖維素柱上的水飛薊索得水飛薊索洗脫液,乙醇溶液用量為為加入上清液體積的4倍。
(6)水飛薊素洗脫液離心濃縮,濃縮液真空干燥得水飛薊素成品。
基于上述提取方法獲得的水飛薊素產(chǎn)率可達3.1%,純度高達90.2%。
實施例3:
一種藥用水飛薊栽培技術,包括以下步驟:
(1)選地
選擇土層深厚、土質疏松、土壤肥沃、排水良好、向陽干燥的微酸性砂質壤土,反復耙細耙平;
(2)土壤處理
播前施入底肥,每畝施基肥2000千克、過磷酸鈣60千克,耕深32厘米,耙細整平起壟,壟寬1.8米,壟間距40cm,每壟種植3行,每畝施用10kg3%的米樂爾顆粒劑,混細干土50kg,均勻地撤在地表、深耙20cm,淺覆土后再定植;
(3)種子處理
用種子播種時,取儲藏的種子用紗布包好,25℃溫水浸泡2h;種子消毒:用2000倍多菌靈溶液浸泡12h,隨后用清水洗凈種子;清洗干凈的種子,于25℃條件下置于引發(fā)劑溶液中浸泡時間16h,取出后用蒸餾水沖洗2min,用吸水紙吸干后備用;將引發(fā)處理后的種子置于恒溫光照箱中的改良泥炭土上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度26℃,光強4000lx,光暗周期14h;每天定時噴灑適量蒸餾水,種子經(jīng)10天萌發(fā),萌發(fā)率達95%以上;
(4)適時播種
用種子播種時,可以直播和育苗,當5厘米地溫穩(wěn)定通過10℃時,按行距70~90厘米開溝種植,種植后腹膜,根系間鋪設滴灌帶,相鄰行之間的種植穴采用交叉錯位種植,株距50~62厘米栽植;
(5)田間管理
在出苗前后都要保持土壤濕潤,齊苗后要適當通風,苗高1厘米時,逐漸把塑料膜去掉,結合拔草間剔除過密的苗,苗高2厘米時,按行距90厘米,株距62厘米定植大田;在苗高7cm時,要結合間苗及時進行中耕除草;在水飛薊生長的中期,通過掐尖之技術措施,掐尖,去其頂端生長優(yōu)勢,促其側腋芽優(yōu)勢,促進快分枝、多分枝,以增加光合葉面積,積累人量的光合產(chǎn)物;
(6)病蟲害防治
水飛薊生長過程中主要病害有白粉病、葉枯病和根腐病,發(fā)病時,對于白粉病和葉枯病采用表面施藥的方式進行預防和治療,對于根腐病利用滴灌帶進行滴管施藥;對白粉病的防治方法,應加強田間管理,注意田間通風透光,發(fā)病初期可用50%代森銨或50%多菌靈1000倍液或70%甲基托布津1000倍液或25%的粉銹寧500倍液噴施防治;對葉枯病的防治方法,冬季應處理病殘株,消滅越冬菌原,發(fā)病初期用50%多菌靈可濕粉劑1000倍液或1:1:120波爾多液噴霧,每10天1次,連續(xù)3次;對根腐病的防治方法,每畝用藥1.5kg,70%甲基托布津或50%多菌靈,拌70kg的細土,均勻撒入定植穴內或撒在地表,翻耕使藥劑與土壤充分混勻,出現(xiàn)病株時,每株用250毫升70%甲基托布津可濕性粉劑80倍液灌根,7天內連用兩次;
(7)采果收球,水飛薊種子成熟后及時收獲,風選后干燥儲藏。
基于上述栽培技術,水飛薊的畝產(chǎn)量可達1360kg。
一種基于栽培技術獲得藥用水飛薊種子的水飛薊素提取方法,包括以下步驟:
(1)獲得水飛薊種子除雜提純后,利用榨油機榨去油脂獲得水飛薊餅;
(2)將步驟(1)獲得的水飛薊餅裝入提取罐中,在提取罐中加入堿水乙醇溶液,加溫至70℃后保持恒溫6小時,恒溫處理后加入乙酸乙酯溶液進行深度提取,連續(xù)提取5次制得水飛薊提取液;水飛薊餅與堿水乙醇溶液的重量比為1:12;該堿水乙醇由乙醇溶液和naoh混合而成,其乙醇溶液的重量百分濃度為75%,naoh與乙醇溶液的重量比為1:55,乙酸乙酯溶液為堿水乙醇溶液的3倍體積;
(3)將步驟(2)中獲得的水飛薊素提取液真空濃縮至比重0.96g/ml,得到濃縮液,真空濃縮的真空度為0.05mpa,溫度為45℃,濃縮液中加入濃縮液體積12倍體積的75%的乙醇溶液進行分散,分散時間1.5h,溫度50℃,分散結束后離心分離得水飛薊素粗品沉淀,離心轉速為6000rpm,離心時間30min;
(4)將步驟(3)獲得的水飛薊素粗品沉淀用99%乙醇溶液溶解,乙醇溶液用量為水飛薊素粗品沉淀質量的4倍,溶解溫度55℃,溶解完畢后離心去雜得上清液,離心轉速為6000rpm,離心時間30min,上清液過纖維素柱進行吸附;
(5)采用99%的乙醇溶液洗脫吸附在纖維素柱上的水飛薊索得水飛薊索洗脫液,乙醇溶液用量為為加入上清液體積的4倍。
(6)水飛薊素洗脫液離心濃縮,濃縮液真空干燥得水飛薊素成品。
基于上述提取方法獲得的水飛薊素產(chǎn)率可達3.3%,純度高達93.4%。
實施例4:
一種藥用水飛薊栽培技術,包括以下步驟:
(1)選地
選擇土層深厚、土質疏松、土壤肥沃、排水良好、向陽干燥的微酸性砂質壤土,反復耙細耙平;
(2)土壤處理
播前施入底肥,每畝施基肥1500千克、過磷酸鈣45千克,耕深24厘米,耙細整平起壟,壟寬1.8米,壟間距40cm,每壟種植3行,每畝施用7kg3%的米樂爾顆粒劑,混細干土40kg,均勻地撤在地表、深耙20cm,淺覆土后再定植;
(3)種子處理
用種子播種時,取儲藏的種子用紗布包好,25℃溫水浸泡2h;種子消毒:用2000倍多菌靈溶液浸泡12h,隨后用清水洗凈種子;清洗干凈的種子,于25℃條件下置于引發(fā)劑溶液中浸泡時間8h,取出后用蒸餾水沖洗2min,用吸水紙吸干后備用;將引發(fā)處理后的種子置于恒溫光照箱中的改良泥炭土上培養(yǎng),培養(yǎng)溫度25℃,光強4000lx,光暗周期10h;每天定時噴灑適量蒸餾水,種子經(jīng)6天萌發(fā),萌發(fā)率達95%以上;
(4)適時播種
用種子播種時,可以直播和育苗,當5厘米地溫穩(wěn)定通過10℃時,按行距70厘米開溝種植,種植后腹膜,根系間鋪設滴灌帶,相鄰行之間的種植穴采用交叉錯位種植,株距50厘米栽植;
(5)田間管理
在出苗前后都要保持土壤濕潤,齊苗后要適當通風,苗高1厘米時,逐漸把塑料膜去掉,結合拔草間剔除過密的苗,苗高1.5厘米時,按行距70厘米,株距50厘米定植大田;在苗高5cm時,要結合間苗及時進行中耕除草;在水飛薊生長的中期,通過掐尖之技術措施,掐尖,去其頂端生長優(yōu)勢,促其側腋芽優(yōu)勢,促進快分枝、多分枝,以增加光合葉面積,積累人量的光合產(chǎn)物;
(6)病蟲害防治
水飛薊生長過程中主要病害有白粉病、葉枯病和根腐病,發(fā)病時,對于白粉病和葉枯病采用表面施藥的方式進行預防和治療,對于根腐病利用滴灌帶進行滴管施藥;對白粉病的防治方法,應加強田間管理,注意田間通風透光,發(fā)病初期可用50%代森銨或50%多菌靈800倍液或70%甲基托布津800倍液或25%的粉銹寧500倍液噴施防治;對葉枯病的防治方法,冬季應處理病殘株,消滅越冬菌原,發(fā)病初期用50%多菌靈可濕粉劑1000倍液或1:1:120波爾多液噴霧,每7天1次,連續(xù)2次;對根腐病的防治方法,每畝用藥1kg,0%甲基托布津或50%多菌靈,拌50kg的細土,均勻撒入定植穴內或撒在地表,翻耕使藥劑與土壤充分混勻,出現(xiàn)病株時,每株用250毫升70%甲基托布津可濕性粉劑80倍液灌根,7天內連用兩次;
(7)采果收球,水飛薊種子成熟后及時收獲,風選后干燥儲藏。
基于上述栽培技術,水飛薊的畝產(chǎn)量可達1250kg。
一種基于栽培技術獲得藥用水飛薊種子的水飛薊素提取方法,包括以下步驟:
(1)獲得水飛薊種子除雜提純后,利用榨油機榨去油脂獲得水飛薊餅;
(2)將步驟(1)獲得的水飛薊餅裝入提取罐中,在提取罐中加入堿水乙醇溶液,加溫至70℃后保持恒溫6小時,恒溫處理后加入乙酸乙酯溶液進行深度提取,連續(xù)提取5次制得水飛薊提取液;水飛薊餅與堿水乙醇溶液的重量比為1:12;該堿水乙醇由乙醇溶液和naoh混合而成,其乙醇溶液的重量百分濃度為75%,naoh與乙醇溶液的重量比為1:55,乙酸乙酯溶液為堿水乙醇溶液的3倍體積;
(3)將步驟(2)中獲得的水飛薊素提取液真空濃縮至比重0.96g/ml,得到濃縮液,真空濃縮的真空度為0.05mpa,溫度為45℃,濃縮液中加入濃縮液體積12倍體積的75%的乙醇溶液進行分散,分散時間1.5h,溫度50℃,分散結束后離心分離得水飛薊素粗品沉淀,離心轉速為6000rpm,離心時間30min;
(4)將步驟(3)獲得的水飛薊素粗品沉淀用99%乙醇溶液溶解,乙醇溶液用量為水飛薊素粗品沉淀質量的4倍,溶解溫度55℃,溶解完畢后離心去雜得上清液,離心轉速為6000rpm,離心時間30min,上清液過纖維素柱進行吸附;
(5)采用99%的乙醇溶液洗脫吸附在纖維素柱上的水飛薊索得水飛薊索洗脫液,乙醇溶液用量為為加入上清液體積的4倍。
(6)水飛薊素洗脫液離心濃縮,濃縮液真空干燥得水飛薊素成品。
基于上述提取方法獲得的水飛薊素產(chǎn)率可達2.9%,純度高達91.4%。
按照以上描述,即可對本發(fā)明進行應用。
以上所述,僅為本發(fā)明較佳的具體實施方式,但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此,任何熟悉本技術領域的技術人員在本發(fā)明揭露的技術范圍內,根據(jù)本發(fā)明的技術方案及其發(fā)明構思加以等同替換或改變,都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內。