一種建立黃精快繁殖體系的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種建立黃精快繁系統(tǒng)的方法，將黃精的頂芽或塊莖播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)發(fā)芽，然后將黃精小芽轉(zhuǎn)先后移至繼代培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，得到黃精生根組培苗，即可移栽至苗床中進(jìn)行煉苗。本發(fā)明的組織培養(yǎng)方法簡(jiǎn)便，步驟簡(jiǎn)單，操作方便，所得黃精種苗植株健壯，生長(zhǎng)能力強(qiáng)，適于規(guī)模化生產(chǎn)，同時(shí)還有效縮短了培養(yǎng)時(shí)間，降低了生產(chǎn)成本。
【專利說(shuō)明】一種建立黃精快繁殖體系的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物快速繁殖方法，特別是一種建立黃精快速繁殖體系的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 滇黃精（PolygonatumkingianumColl,etHemsl.)是百合科黃金屬植物滇黃精 的地下根狀莖莖，是藥典收載品種，又收載在國(guó)家藥監(jiān)局制定的藥食兩用的名單之中。性 甘，平。補(bǔ)氣養(yǎng)陰，健脾，潤(rùn)肺，益腎。用于脾胃虛弱，體倦乏力，□干食少，肺虛燥咳，精血不 足，內(nèi)熱消渴。歷代醫(yī)書多推崇，【蒙藥】功用同多花黃精《蒙藥》?！矩羲帯课鞲衲茫焊o治肺 結(jié)核，干咳無(wú)痰，久病津干口干，倦怠乏力，糖尿病，高血壓《滇藥錄》?！景姿帯看罂缺认矗汗?用同佤族《滇藥錄》?！緣阉帯靠煤軄啠囚[：根莖治久病身體虛弱，腰痛，干咳，虛汗，目赤《桂 藥編》。
[0003] 黃精性味甘甜，食用爽口。其肉質(zhì)根狀莖肥厚，含有大量淀粉、糖分、脂肪、蛋白質(zhì)、 胡蘿卜素、維生素和多種其他營(yíng)養(yǎng)成分，生食、燉服既能充饑，又有健身之用，可令人氣力倍 增、肌肉充盈、骨髓堅(jiān)強(qiáng)，對(duì)身體十分有益。黃精根狀莖形狀有如山芋，山區(qū)老百姓常把它當(dāng) 作蔬菜食用。由于有良好的藥效，加之現(xiàn)在用黃精做原料的中成藥以及保健品日益眾多，隨 著生活水平的提高，人民保健意識(shí)與日俱增，造成野生滇黃精的量急劇減少，現(xiàn)在野生的較 大的黃精已經(jīng)較少能找到，價(jià)格隨之水漲床高，現(xiàn)在干片價(jià)格已經(jīng)從兩年前的不足20元/ kg，上漲到現(xiàn)在的60元/kg，這又刺激了藥農(nóng)采挖的積極性，更加嚴(yán)重的影響到黃精的生存 環(huán)境。因此對(duì)黃精進(jìn)行育苗研宄，勢(shì)在必行，也是對(duì)資源的一種保護(hù)。植物組織培養(yǎng)技術(shù)， 有其不可比擬的優(yōu)勢(shì)，其不受外界自然因素的影響，可以不間斷的工廠化生產(chǎn)組培苗，可以 大規(guī)模的擴(kuò)大種苗繁殖，獲得大量的優(yōu)質(zhì)的黃精種苗，滿足種植的需要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是為了提供一種建立黃精快繁的方法，有效促進(jìn)了黃精的生長(zhǎng)速 度，并大大提高了黃精苗種的質(zhì)量，獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)的黃精組培苗，本發(fā)明有效避免了因不斷 重復(fù)繼代造成的組培苗變異，提高了組培苗在后期煉苗過(guò)程中的成活率。
[0005] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：
[0006] -種建立黃精快繁體系的方法，包括以下步驟：
[0007] 步驟一、將黃精根狀莖上的頂芽或帶芽的塊莖播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述誘導(dǎo)培 養(yǎng)基為：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入2.0-4.Omg/L6-芐基腺嘌呤、0. 1-1.Omg/L萘乙酸、 0? 5-3.Omg/L赤霉素、0? 2-2.Omg/L噻苯隆、L0-4. 0mg/L2,4_ 二氯苯氧乙酸、25_40g/L鹿糖 及3. 0-6.Og/L瓊脂，調(diào)整誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH為5. 8-6. 2 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照強(qiáng)度為 2500-30001ux，光照時(shí)間為13-15h/d的條件下培養(yǎng)7-15天后，得到黃精小芽；
[0008] 步驟二、將黃精小芽至于繼代培養(yǎng)基中，所述繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基 本培養(yǎng)基，加入3. 0-5. 0mg/L玉米素、2. 0-4. 0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、0? 5-2. 0mg/L萘乙 酸、0. 5-3. 0mg/L噻苯隆3. 0-5. 0g/L蔗糖及3. 0-6. 0g/L瓊脂，并調(diào)整繼代培養(yǎng)基的pH值為 5. 8-6. 3 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照強(qiáng)度為2500-30001ux，培養(yǎng)時(shí)間為13-15h/d，25-30 天獲得黃精組培分化苗；
[0009] 步驟三、將黃精組培分化苗移栽至生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為 基本培養(yǎng)基，加入5-20 %香蕉、0. 1-2.Og/L吲哚丁酸、0. 5-2.Omg/L萘乙酸、2-5 %蔗糖及 0. 2-0. 5%活性炭，并調(diào)整生根培養(yǎng)基的pH為5. 8-6. 3 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照強(qiáng)度 2500-30001ux，光照時(shí)間為13-15h/d的條件下培養(yǎng)30-40天后，把組培苗移到自然光下培 養(yǎng)，20-30天后得到黃精生根組培苗；
[0010] 步驟四、將黃精生根組培苗移栽至苗床，待黃精小苗生長(zhǎng)穩(wěn)定后即可移栽至大田。
[0011] 優(yōu)選的是，所述建立黃精快繁體系的方法中，步驟一所述的將黃精根狀莖上的頂 芽或帶芽的塊莖播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基之前，先將黃精根狀莖上的頂芽或帶芽的塊莖清洗干 凈，并用80-85%的乙醇溶液浸泡40-60秒，升汞消毒30-45分鐘，最后用無(wú)菌水反復(fù)清洗。
[0012] 優(yōu)選的是，所述建立黃精快繁體系的方法中，步驟四所述的苗床基質(zhì)包含以下重 量份的組分：20-30樹皮、10-20雜木、20-30蛭石及10-15珍珠巖。
[0013] 本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明中建立黃精快繁體系的方法，黃精小芽的發(fā)芽率 達(dá)95 %，經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng)后的成苗率96 %，轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中，黃精生根組培苗的生根率 為95%，最后移入大棚煉苗的成活率為99%，大大提高了黃精的組織培養(yǎng)效率；同時(shí)本發(fā) 明中經(jīng)過(guò)試驗(yàn)成功配制出去適合用于黃精組培的培養(yǎng)基，有效縮短了種苗的培育時(shí)間和成 本，提高了快繁的速度。每種植物都需要根據(jù)特性來(lái)定外植體的不同，黃精屬于百合科植 物，種子量小，而且不易滅菌，相反取根狀莖上的頂芽或在節(jié)間分開(kāi)獲得帶芽的塊莖作為外 植體來(lái)說(shuō)，可以從每個(gè)植株上獲得多個(gè)外植體，滅菌后容易獲得繼代苗，快速擴(kuò)大生產(chǎn)，降 低了原料成本，建立黃精快繁體系的方法具有很到的經(jīng)濟(jì)效益。

【具體實(shí)施方式】
[0014] 下面結(jié)合對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書文字能 夠據(jù)以實(shí)施。
[0015] -種建立黃精快繁體系的方法，包括以下步驟：
[0016] 步驟一、將多年生的黃精根狀莖上的頂芽或在節(jié)間分開(kāi)獲得帶芽的塊莖清洗干 凈，用80-85%的乙醇溶液浸泡40-60秒，升汞消毒30-45分鐘，最后用無(wú)菌水反復(fù)清洗，接 著切去黃精根狀莖上的頂芽或帶芽的塊莖的邊緣，然后播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述誘導(dǎo)培 養(yǎng)基為：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入2.0-4.Omg/L6-芐基腺嘌呤、0. 1-1.Omg/L萘乙酸、 0? 5-3.Omg/L赤霉素、0? 2-2.Omg/L噻苯隆、L0-4.Omg/L2,4-二氯苯氧乙酸、25_40g/L鹿 糖及3. 0-6. 0g/L瓊脂，調(diào)整誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH為5. 8-6. 2 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照強(qiáng) 度為2500-30001uX，光照時(shí)間為13-15h/d的條件下培養(yǎng)7-15天后，得到黃精小芽；培養(yǎng)基 中6-芐氨基嘌呤有效加快植物細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育，誘導(dǎo)黃精小芽的分化，促進(jìn) 側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)；萘乙酸為廣譜型植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，能有效促進(jìn)細(xì)胞分裂與擴(kuò)大，誘導(dǎo)形成不 定根；赤霉素為一種廣泛存在的植物激素，有效刺激葉和芽的生長(zhǎng)；_苯隆是一種新型尚 效的細(xì)胞分裂素，能很好的促進(jìn)黃精的芽組織分化；2,4-二氯苯氧乙酸是一種具有代表性 的合成植物生長(zhǎng)素；蔗糖為能源物質(zhì)，為植物組織培養(yǎng)提供碳源和能源，還能很好的維持培 養(yǎng)基內(nèi)的低滲環(huán)境，同時(shí)在一定程度上還能減少微生物的污染，提高黃精的無(wú)菌環(huán)境質(zhì)量； 采用的誘導(dǎo)培養(yǎng)基大大提高了黃精的愈傷組織分化能力。黃精的發(fā)芽率為95%。
[0017] 步驟二、將黃精小芽至于繼代培養(yǎng)基中，所述繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為 基本培養(yǎng)基，加入3. 0-5.Omg/L玉米素、2. 0-4.Omg/L2,4-二氯苯氧乙酸、0? 5-2.Omg/L萘 乙酸、0. 5-3.Omg/L噻苯隆、3. 0-5.Og/L蔗糖及3. 0-6.Og/L瓊脂，并調(diào)整繼代培養(yǎng)基的pH 值為5. 8-6. 3 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照強(qiáng)度為2500-30001ux，培養(yǎng)時(shí)間為13-15h/d， 25-30天獲得2-4cm高度的黃精組培分化苗；培養(yǎng)基中玉米素為天然的細(xì)胞分裂素，能有 效促進(jìn)愈傷組織發(fā)芽，促進(jìn)黃精小芽生長(zhǎng)；2,4-二氯苯氧乙酸是一種苯氧類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié) 劑，具有與生長(zhǎng)素類似的生理效應(yīng)，有效促進(jìn)黃精小芽繁殖和生長(zhǎng)；萘乙酸為廣譜型植物生 長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，能有效促進(jìn)細(xì)胞分裂與擴(kuò)大，誘導(dǎo)形成不定根；噻苯隆是一種新型高效的細(xì)胞分 裂素，能很好的促進(jìn)黃精的芽組織分化；蔗糖為能源物質(zhì)，為植物組織培養(yǎng)提供碳源和能 源，還能很好的維持培養(yǎng)基內(nèi)的低滲環(huán)境，同時(shí)在一定程度上還能減少微生物的污染，提高 黃精的無(wú)菌環(huán)境質(zhì)量；繼代培養(yǎng)基中添加多種有效促進(jìn)黃精小芽生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為黃精 小芽提供充足的營(yíng)養(yǎng)成分，有效減少或避免多次重復(fù)繼代，大大降低了黃精小芽變異的發(fā) 生。本方法所得黃精組培分化苗的成苗率為96%。
[0018] 步驟三、將黃精組培分化苗移栽至生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為 基本培養(yǎng)基，加入5-20 %打碎的香蕉、0. 1-2. 0g/L吲哚丁酸、0. 5-2. 0mg/L萘乙酸、2-5 %蔗 糖及0. 2-0. 5%活性炭，并調(diào)整生根培養(yǎng)基的pH為5. 8-6. 3 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照 強(qiáng)度2500-30001ux，光照時(shí)間為13-15h/d的條件下培養(yǎng)30-40天后，把組培苗移到自然光 下培養(yǎng)，20-30天后得到3-4條根的黃精生根組培苗；其中生根培養(yǎng)基中，加入打碎的香蕉， 有利于促進(jìn)黃精組培分化苗的生根，同時(shí)為其提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；剛哚丁酸主要用于插條生根， 可以誘導(dǎo)根原體的形成，促進(jìn)細(xì)胞分化和分裂，有利于新根生成和維管束系統(tǒng)的分化，促進(jìn) 不定根的形成；萘乙酸為廣譜型植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，能有效促進(jìn)細(xì)胞分裂與擴(kuò)大，誘導(dǎo)形成不 定根；活性炭的加入有助于吸附一些有害的代謝物質(zhì)，同時(shí)活性炭的加入使得生根培養(yǎng)基 變黑，可模仿黑暗條件，有利于組培分化苗的生根；黃精組培分化苗生根后放在自然光下照 射，為組培分化苗提供與戶外環(huán)境相似的培養(yǎng)環(huán)境，提高了黃精組培分化苗在后期煉苗過(guò) 程中的成活率，其成活率達(dá)95%。
[0019] 步驟四、將完整帶根的黃精生根組培苗植株根部上的培養(yǎng)基清洗干凈，晾干水汽， 然后再移栽至苗床上，所述的苗床基質(zhì)包含以下重量份的組分：20-30樹皮、10-20雜木、 20-30蛭石及10-15珍珠巖；待黃精小苗生長(zhǎng)穩(wěn)定，長(zhǎng)出新的根和芽即可移栽至大田，在大 田栽培期間要適當(dāng)遮陰，控制遮陰度為75%，間隔澆水，溫度為28°C，超過(guò)28°C要水簾降 溫，防止根腐病發(fā)生。
[0020] 實(shí)施例1
[0021] -種建立黃精快繁體系的方法，包括以下步驟：
[0022] 步驟一、將多年生的黃精根狀莖上的頂芽或在節(jié)間分開(kāi)獲得帶芽的塊莖清洗干 凈，用85 %的乙醇溶液浸泡40秒，升汞消毒35分鐘，最后用無(wú)菌水反復(fù)清洗5遍，接著切 去黃精根狀莖上的頂芽或帶芽的塊莖的邊緣，然后播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基 為：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入2. 0mg/L6-芐基腺嘌呤、0.lmg/L萘乙酸、3. 0mg/L赤霉素、 2. 0mg/L噻苯隆、I. 0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L蔗糖及3. 0g/L瓊脂，調(diào)整誘導(dǎo)培養(yǎng)基的 pH為5. 9 ;在培養(yǎng)溫度為29°C，光照強(qiáng)度為26001uX，光照時(shí)間為14h/d的條件下培養(yǎng)10天 后，得到黃精小芽；
[0023] 步驟二、將黃精小芽至于繼代培養(yǎng)基中，所述繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基 本培養(yǎng)基，加入4.Omg/L玉米素、4.Omg/L2,4-二氯苯氧乙酸、2.Omg/L萘乙酸、2.Omg/L噻 苯隆、5.Og/L蔗糖及3.Og/L瓊脂，并調(diào)整繼代培養(yǎng)基的pH值為6. 0 ;在培養(yǎng)溫度為30°C， 光照強(qiáng)度為26001ux，培養(yǎng)時(shí)間為14h/d，28天獲得2-4cm高度的黃精組培分化苗；
[0024] 步驟三、將黃精組培分化苗移栽至生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為 基本培養(yǎng)基，加入15 %香蕉、I. 5g/L吲哚丁酸、0. 5mg/L萘乙酸、5 %蔗糖及0. 3%活性炭， 并調(diào)整生根培養(yǎng)基的pH為6. 0 ;在培養(yǎng)溫度為30°C，光照強(qiáng)度26001UX，光照時(shí)間為14h/d 的條件下培養(yǎng)30天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，20天后得到3-4條根的黃精生根組培 苗；
[0025] 步驟四、將完整帶根的黃精生根組培苗植株根部上的培養(yǎng)基清洗干凈，晾干水汽， 然后再移栽至苗床上，所述的苗床基質(zhì)包含以下重量份的組分：20g樹皮、20g雜木、30g蛭 石及IOg珍珠巖；待黃精小苗生長(zhǎng)穩(wěn)定，長(zhǎng)出新的根和芽即可移栽至大田，在大田栽培期間 要適當(dāng)遮陰，控制遮陰度為75%，間隔澆水，溫度為28°C，超過(guò)28°C要水簾降溫，防止根腐 病發(fā)生。
[0026] 實(shí)施例2
[0027] -種建立黃精快繁體系的方法，包括以下步驟：
[0028] 步驟一、將多年生的黃精根狀莖上的頂芽或在節(jié)間分開(kāi)獲得帶芽的塊莖清洗干 凈，用80 %的乙醇溶液浸泡60秒，升汞消毒45分鐘，最后用無(wú)菌水反復(fù)清洗6遍，接著切 去黃精根狀莖上的頂芽或帶芽的塊莖的邊緣，然后播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基 為：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入3. 0mg/L6-芐基腺嘌呤、0. 5mg/L萘乙酸、2. 0mg/L赤霉素、 0. 5mg/L噻苯隆、3. 0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L鹿糖及4. 0g/L瓊脂，調(diào)整誘導(dǎo)培養(yǎng)基的 pH為6. 3 ;在培養(yǎng)溫度為28°C，光照強(qiáng)度為28001UX，光照時(shí)間為15h/d的條件下培養(yǎng)14天 后，得到黃精小芽；
[0029] 步驟二、將黃精小芽至于繼代培養(yǎng)基中，所述繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基 本培養(yǎng)基，加入4. 0mg/L玉米素、4. 0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、I. 0mg/L萘乙酸、I. 0mg/L噻 苯隆、3. 0g/L蔗糖及5. 0g/L瓊脂，并調(diào)整繼代培養(yǎng)基的pH值為6. 2 ;在培養(yǎng)溫度為30°C， 光照強(qiáng)度為28001ux，培養(yǎng)時(shí)間為15h/d，25天獲得2-4cm高度的黃精組培分化苗；
[0030] 步驟三、將黃精組培分化苗移栽至生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為 基本培養(yǎng)基，加入15%香蕉、0. 8g/L吲哚丁酸、I. 0mg/L萘乙酸、3%蔗糖及0. 4%活性炭， 并調(diào)整生根培養(yǎng)基的pH為5. 9 ;在培養(yǎng)溫度為30°C，光照強(qiáng)度28001uX，光照時(shí)間為15h/d 的條件下培養(yǎng)30天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，30天后得到3-4條根的黃精生根組培 苗；
[0031] 步驟四、將完整帶根的黃精生根組培苗植株根部上的培養(yǎng)基清洗干凈，晾干水汽， 然后再移栽至苗床上，所述的苗床基質(zhì)包含以下重量份的組分：20g樹皮、15g雜木、25g蛭 石及IOg珍珠巖；待黃精小苗生長(zhǎng)穩(wěn)定，長(zhǎng)出新的根和芽即可移栽至大田，在大田栽培期間 要適當(dāng)遮陰，控制遮陰度為75%，間隔澆水，溫度為28°C，超過(guò)28°C要水簾降溫，防止根腐 病發(fā)生。
[0032] 實(shí)施例3
[0033] -種建立黃精快繁體系的方法，包括以下步驟：
[0034] 步驟一、將多年生的黃精根狀莖上的頂芽或在節(jié)間分開(kāi)獲得帶芽的塊莖清洗干 凈，用85 %的乙醇溶液浸泡60秒，升汞消毒45分鐘，最后用無(wú)菌水反復(fù)清洗7遍，接著切 去黃精根狀莖上的頂芽或帶芽的塊莖的邊緣，然后播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基 為：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入4. 0mg/L6-芐基腺嘌呤、0.lmg/L萘乙酸、3.Omg/L赤霉素、 I.Omg/L噻苯隆、I. 0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、30g/L鹿糖及5.Og/L瓊脂，調(diào)整誘導(dǎo)培養(yǎng)基的 pH為6. 0 ;在培養(yǎng)溫度為30°C，光照強(qiáng)度為30001ux，光照時(shí)間為13h/d的條件下培養(yǎng)7-15 天后，得到黃精小芽；
[0035] 步驟二、將黃精小芽至于繼代培養(yǎng)基中，所述繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基 本培養(yǎng)基，加入5.Omg/L玉米素、3.Omg/L2,4-二氯苯氧乙酸、I.Omg/L萘乙酸、3.Omg/L噻 苯隆、5. 0g/L蔗糖及5. 0g/L瓊脂，并調(diào)整繼代培養(yǎng)基的pH值為6. 2 ;在培養(yǎng)溫度為32°C， 光照強(qiáng)度為30001ux，培養(yǎng)時(shí)間為14h/d，25天獲得2-4cm高度的黃精組培分化苗；
[0036] 步驟三、將黃精組培分化苗移栽至生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為 基本培養(yǎng)基，加入20%打碎的香蕉、2. 0g/L吲哚丁酸、2. 0mg/L萘乙酸、3%蔗糖及0. 5%活 性炭，并調(diào)整生根培養(yǎng)基的pH為6. 3 ;在培養(yǎng)溫度為32°C，光照強(qiáng)度30001uX，光照時(shí)間為 13h/d的條件下培養(yǎng)30天后，把組培苗移到自然光下培養(yǎng)，20天后得到3-4條根的黃精生 根組培苗；
[0037] 步驟四、將完整帶根的黃精生根組培苗植株根部上的培養(yǎng)基清洗干凈，晾干水汽， 然后再移栽至苗床上，所述的苗床基質(zhì)包含以下重量份的組分：30g樹皮、15g雜木、25g蛭 石及15g珍珠巖；待黃精小苗生長(zhǎng)穩(wěn)定，長(zhǎng)出新的根和芽即可移栽至大田，在大田栽培期間 要適當(dāng)遮陰，控制遮陰度為75%，間隔澆水，溫度為28°C，超過(guò)28°C要水簾降溫，防止根腐 病發(fā)生。
[0038] 試驗(yàn)比較
[0039] 采用黃精根狀莖上的頂芽或在節(jié)間分開(kāi)獲得帶芽的塊莖作為組培材料，均是在培 養(yǎng)條件為：在培養(yǎng)溫度為30°C，光照強(qiáng)度為28001UX，光照時(shí)間為14h/d，pH為6. 2的條件下 進(jìn)行培養(yǎng)，其中，
[0040] (1)組1為本發(fā)明所述建立黃精快繁體系的方法，培養(yǎng)基分別為：
[0041] 誘導(dǎo)培養(yǎng)基：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入4. 0mg/L6-芐基腺嘌呤、I. 0mg/L萘乙 酸、3. 0mg/L赤霉素、2. 0mg/L噻苯隆、3. 0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L鹿糖及6. 0g/L瓊 脂；
[0042] 繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，加入5. 0mg/L玉米素、4. 0mg/L2， 4-二氯苯氧乙酸、2. 0mg/L萘乙酸、3. 0mg/L噻苯隆、5. 0g/L鹿糖及6. 0g/L瓊脂；
[0043] 生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為基本培養(yǎng)基，加入20%香蕉、2. 0g/L吲哚丁酸、I.Omg/ L萘乙酸、3%蔗糖及0. 5%活性炭；
[0044] (2)組2的培養(yǎng)基分別為：
[0045] 誘導(dǎo)培養(yǎng)基：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入4. 0mg/L6.芐基腺嘌呤、I. 0mg/L萘乙 酸、3.〇11^/1赤霉素、3.〇11^/12,4-二氯苯氧乙酸、4(^/1鹿糖及6.(^/1瓊旨 ；
[0046] 繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，加入5. 0mg/L玉米素、4. 0mg/L2， 4-二氯苯氧乙酸、2. 0mg/L萘乙酸、5. 0g/L蔗糖及6. 0g/L瓊脂；
[0047] 生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為基本培養(yǎng)基，加入20%香蕉、2.Og/L吲哚丁酸、I.Omg/ L萘乙酸、3%蔗糖及0. 5%活性炭；
[0048] (3)組3的培養(yǎng)基分別為：
[0049] 誘導(dǎo)培養(yǎng)基：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入4.Omg/L6-芐基腺嘌呤、I.Omg/L萘乙 酸、3.Omg/L赤霉素、2.Omg/L噻苯隆、40g/L鹿糖及6.Og/L瓊脂；
[0050] 繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，加入5. 0mg/L玉米素、、2. 0mg/L萘 乙酸、3. 0mg/L噻苯隆、5. 0g/L蔗糖及6. 0g/L瓊脂；
[0051] 生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為基本培養(yǎng)基，20%香蕉、2. 0g/L吲哚丁酸、I. 0mg/L萘乙 酸、3%蔗糖及0.5%活性炭；
[0052] (4)組4的培養(yǎng)基分別為：
[0053] 誘導(dǎo)培養(yǎng)基：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入4. 0mg/L6-芐基腺嘌呤、3. 0mg/L赤霉 素、2. 0mg/L噻苯隆、3. 0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L鹿糖及6. 0g/L瓊脂；
[0054] 繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，加入5. 0mg/L玉米素、4. 0mg/L2， 4-二氯苯氧乙酸、3. 0mg/L噻苯隆、5. 0g/L鹿糖及6. 0g/L瓊脂；
[0055] 生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為基本培養(yǎng)基，加入20%香蕉、2. 0g/L吲哚丁酸、3%蔗糖 及0.5 %活性炭；
[0056] (5)組5的培養(yǎng)基分別為：
[0057] 以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入I. 0mg/L萘乙酸、3. 0mg/L赤霉素、2. 0mg/L噻苯隆、 3. 0mg/L2,4_二氯苯氧乙酸、40g/L鹿糖及6. 0g/L瓊脂；
[0058] 繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，加入4. 0mg/L2,4_二氯苯氧乙酸、 2. 0mg/L萘乙酸、3. 0mg/L噻苯隆、5. 0g/L蔗糖及6. 0g/L瓊脂；
[0059] 生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為基本培養(yǎng)基，加入2. 0g/L吲哚丁酸、I. 0mg/L萘乙酸、 3 %蔗糖及0.5 %活性炭；
[0060] (6)組6的培養(yǎng)基分別為：
[0061] 誘導(dǎo)培養(yǎng)基：以MS-H為基本培養(yǎng)基，25-40g/L蔗糖及3. 0-6. 0g/L瓊脂；
[0062] 繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，加入3. 0-5. 0g/L蔗糖及 3. 0-6. 0g/L瓊脂；
[0063] 生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為基本培養(yǎng)基，加入2-5 %蔗糖；
[0064] 得到結(jié)果如表1所示：
[0065]

【權(quán)利要求】
1. 一種建立黃精快繁體系的方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟一、將黃精根狀莖上的頂芽或帶芽的塊莖播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng) 基為：以MS-H為基本培養(yǎng)基，加入2. 0-4. Omg/L 6-芐基腺嘌呤、0. 1-l.Omg/L萘乙酸、 0? 5-3. Omg/L 赤霉素、0? 2-2. Omg/L 噻苯隆、1. 0-4. 0mg/L2,4_ 二氯苯氧乙酸、25_40g/L 鹿糖 及3. 0-6. Og/L瓊脂，調(diào)整誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH為5. 8-6. 2 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照強(qiáng)度為 2500-30001ux，光照時(shí)間為13-15h/d的條件下培養(yǎng)7-15天后，得到黃精小芽； 步驟二、將黃精小芽至于繼代培養(yǎng)基中，所述繼代培養(yǎng)基為：以white培養(yǎng)基為基本培 養(yǎng)基，加入3. 0-5. Omg/L玉米素、2. 0-4. Omg/L 2,4_二氯苯氧乙酸、0? 5-2. Omg/L萘乙酸、 0? 5-3. 0mg/L噻苯隆、3. 0-5. 0g/L蔗糖及3. 0-6. 0g/L瓊脂，并調(diào)整繼代培養(yǎng)基的pH值為 5. 8-6. 3 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照強(qiáng)度為2500-30001ux，培養(yǎng)時(shí)間為13-15h/d，25-30 天獲得黃精組培分化苗； 步驟三、將黃精組培分化苗移栽至生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基為：以1/2MS為基 本培養(yǎng)基，加入5-20 %香蕉、0? 1-2. 0g/L吲哚丁酸、0? 5-2. 0mg/L萘乙酸、2-5 %蔗糖及 0. 2-0. 5%活性炭，并調(diào)整生根培養(yǎng)基的pH為5. 8-6. 3 ;在培養(yǎng)溫度為25-32°C，光照強(qiáng)度 2500-30001ux，光照時(shí)間為13-15h/d的條件下培養(yǎng)30-40天后，把組培苗移到自然光下培 養(yǎng)，20-30天后得到黃精生根組培苗； 步驟四、將黃精生根組培苗移栽至苗床，待黃精小苗生長(zhǎng)穩(wěn)定后即可移栽至大田。
2. 如權(quán)利要求1所述的建立黃精快繁體系的方法，其特征在于，步驟一所述的將黃精 根狀莖上的頂芽或帶芽的塊莖播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基之前，先將黃精根狀莖上的頂芽或帶芽的 塊莖清洗干凈，并用80-85 %的乙醇溶液浸泡40-60秒，升汞消毒30-45分鐘，最后用無(wú)菌水 反復(fù)清洗。
3. 如權(quán)利要求1所述的建立黃精快繁體系的方法，其特征在于，步驟四所述的苗床基 質(zhì)包含以下重量份的組分：20-30樹皮、10-20雜木、20-30蛭石及10-15珍珠巖。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104472353SQ201410674728
【公開(kāi)日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月21日
【發(fā)明者】霍麗妮, 陳睿, 蘇鈦, 李培源, 蘇煒, 王杰鵬 申請(qǐng)人:廣西中醫(yī)藥大學(xué)