一種淡水貝類背角無齒蚌幼蚌適口餌料藻的優(yōu)選方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種淡水貝類背角無齒蚌幼蚌適口餌料藻的優(yōu)選方法，包括以下步驟：（1）原位背角無齒蚌幼蚌消化道內(nèi)食性組成；（2）餌料藻的實驗室無菌純種培養(yǎng)；（3）標準化背角無齒蚌幼蚌的實驗室獲?。唬?）幼蚌的餌料投喂驗證；以投喂組幼蚌成活率高、生長速度快為依據(jù)優(yōu)選出背角無齒蚌幼蚌的適口餌料藻。本發(fā)明成功提取幼蚌消化道內(nèi)容物并掌握了其關鍵餌料藻；并經(jīng)過實驗室純化培養(yǎng)獲得大量餌料藻，繼而在實驗室對標準化繁育獲取生長周期同步、規(guī)格一致的幼蚌進行投喂驗證，成功優(yōu)選出了幼蚌的適口餌料藻；有效建立人工繁育種群及擴大其養(yǎng)殖規(guī)模提供科學依據(jù)，為其它淡水貝類及珍稀魚類的人工繁育及增殖放流資源群體的培育提供餌料藻類方面的借鑒和參考。
【專利說明】一種淡水貝類背角無齒蚌幼蚌適口餌料藻的優(yōu)選方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，屬于背角無齒蛘幼蛘養(yǎng)殖【技術領域】。

【背景技術】
[0002]近年來，由于生境的破壞、水體污染等原因，漁業(yè)資源衰退趨勢明顯，瀕危物種數(shù)目持續(xù)增加。2006年，農(nóng)業(yè)部會同有關部門和單位制定的《中國水生生物資源養(yǎng)護行動綱要》明確指出:要養(yǎng)護和合理利用水生生物資源，實現(xiàn)漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展，維護水生生物多樣性。然而太湖流域包括刀鱭、貝類在內(nèi)的許多水生生物的野外種群狀況令人堪憂，為保護太湖流域珍稀生物包括刀鱭、貝類等水生生物，對珍稀物種進行人工增養(yǎng)殖放流已成為恢復其自然資源的重要途徑。而在人工繁育中，水生生物的幼苗個體低成活率受到合適的生物餌料的限制。然而由于水生生物的幼體(尤其是較早生活史階段的個體)采集難度大，解剖調查難度高，對幼體適口餌料的研究方法是個亟需攻克難題。
[0003]國際上，美國已經(jīng)成功研發(fā)出海洋貝類的適口餌料，并投入批量生產(chǎn)商品化。美國去年再度提供5.3億歐元資金，以便在接下來的十年內(nèi)保證美國境內(nèi)的貝類生產(chǎn)質量。然而美國的餌料商品中主要為一些海產(chǎn)藻類，并不適合淡水貝類。淡水貝類中，背角無齒蛘于2003年被本研究室選為“淡水貝類觀察監(jiān)測體系”的實驗生物，目前該研究也進入建立“實驗室動物種群”這個步驟、這同樣受到了人工繁育過程中幼蛘個體成活率低的限制。因此本研究室以背角無齒蛘為例，開創(chuàng)性的探索一種篩選出背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的研究方法，優(yōu)選出背角無齒蛘幼蛘的適口餌料是本發(fā)明的關鍵所在，也將會為其他水產(chǎn)品動物適口餌料篩選技術的開發(fā)提供科學基礎和借鑒參考。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，克服了傳統(tǒng)淡水貝類食性調查中野外難以獲取處于各生活史階段的蛘樣、蛘所生活水體中藻類背景復雜缺乏對比性、野外蛘樣研究連續(xù)性差、餌料藻很難進行后續(xù)投喂驗證等傳統(tǒng)研究方法的不足；提供了一種基于原位采集背角無齒蛘幼蛘，克服幼蛘消化道解剖難度高的技術難題，成功提取幼蛘消化道內(nèi)容物并掌握了其關鍵餌料藻；并經(jīng)過實驗室純化培養(yǎng)獲得大量餌料藻，繼而在實驗室利用標準化繁育所獲得同一生長周期、背景值一致的幼蛘來進行投喂驗證，從而成功優(yōu)選出了幼蛘的適口餌料藻；一方面為提高本研究室“標準化蛘”幼蛘繁育的成活率，為有效建立人工繁育種群及擴大其養(yǎng)殖規(guī)模提供科學依據(jù)；另一方面，亦為其它淡水貝類及其他水產(chǎn)品生物的培育提供餌料藻類方面的借鑒和參考。
[0005]按照本發(fā)明提供的技術方案，一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，包括以下步驟:
1、原位背角無齒蛘幼蛘消化道內(nèi)食性組成
采集同一批繁育處于不同月齡的背角無齒蛘幼蛘，體長0.5cm-lcm，帶回實驗室處理，對消化道內(nèi)容物進行采集，加入1-2 mL體積比為4%的甲醛，鏡檢其藻類組成，通過計算優(yōu)勢度確定背角無齒蛘幼蛘可攝食的餌料藻類為四角藻和小球藻；
2、餌料藻的實驗室無菌純種培養(yǎng)
通過步驟(I)掌握了背角無齒蛘幼蛘消化系統(tǒng)中的餌料藻類，在實驗室內(nèi)對餌料藻類:四角藻和小球藻分別進行無菌純化培養(yǎng)，分別采用BGll培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；小球藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為1.0-107-2.0X 107個/L至IL BGll培養(yǎng)基中；四角藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為L 0-106-5.0X 106f/LM500mL BGll培養(yǎng)基中；培養(yǎng)溫度為:25°C,光照為2000-3000LX,培養(yǎng)2-3月，獲取到1-5L小球藻，細胞密度為3 X 109_3 X 101°個/I,1-5L四角藻，細胞密度為3X 108-3X 109個/L，為后續(xù)投喂驗證提供餌料生物；
3、“標準化”背角無齒蛘幼蛘的實驗室獲取
篩選健康的3-4齡,殼長90-110mm的背角無齒蛘母蛘帶回實驗室,用塑料吸管吸水把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有1-2L曝氣3天的自來水容器中，放入準備好的黃顙魚(性成熟，規(guī)格100-200g)，2-3尾，以30-40 r.mirT1的速率沿盆壁順時針方向攪動，15_20min后將黃顙魚撈出，移入培育水池網(wǎng)箱中，每隔48h換水一次，經(jīng)過3天脫落期后，將黃顙魚及網(wǎng)箱從培育水池取出，用吸管虹吸采集培育池底部的幼蛘；
4、幼蛘的餌料投喂驗證
將培養(yǎng)皿經(jīng)泡酸、去離子水清洗干凈，每個培養(yǎng)皿中加入10mL已曝氣3天的自來水，每組設置3個培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中放入10個幼蛘，分別設置不同投餌組作為對照，投餌組分別投喂步驟(2)中經(jīng)培養(yǎng)的四角藻和小球藻，四角藻和小球藻分別以細胞密度為
1.2 X 16個/L-6.0 X 18個/L對脫落3天的幼蛘進行投喂；而后放入25°C光照培養(yǎng)箱，光照度600LX，每隔48h進行一次換水、鏡檢記錄其成活率，測量規(guī)格大??；培養(yǎng)3-30天后；對照組幼蛘成活率低、生長速度慢；以投喂組幼蛘成活率高、生長速度快為依據(jù)優(yōu)選出背角無齒蛘的適口餌料藻。
[0006]作為本發(fā)明的進一步改進，所述步驟(I)中不同月齡的背角無齒蛘幼蛘為2月齡、5月齡、8月齡和11月齡，同月齡的背角無齒蛘幼蛘為一個組，每組5個。
[0007]作為本發(fā)明的進一步改進，所述步驟(4)中泡酸的酸液含5-10%鹽酸的溶液30L，酸液內(nèi)泡24h-48h。
[0008]作為本發(fā)明的進一步改進，所述步驟(4)中幼蛘投喂密度為:1-15天幼蛘:小球藻投喂密度:3- 6 X 17個/L ; 15-30天幼蛘:小球藻投喂密度:6X 17個/L_2.4X 18個/L0
[0009]本發(fā)明與已有技術相比具有以下優(yōu)點:
本發(fā)明解決了之前傳統(tǒng)研究方法中淡水貝類食性調查中野外難以獲取幼蛘、所采蛘樣大小不一、水體中藻類背景復雜等不足。本發(fā)明創(chuàng)新性的利用一種基于原位采集發(fā)育周期同步、背景值一致的背角無齒蛘幼蛘作為實驗生物，并克服了幼蛘消化道解剖難度高的技術難題，成功提取幼蛘消化道內(nèi)容物并掌握了其關鍵餌料藻。并經(jīng)過實驗室純化培養(yǎng)獲得大量餌料藻，繼而在實驗室對標準化繁育獲取生長周期同步、規(guī)格一致的幼蛘進行投喂驗證，成功優(yōu)選出了幼蛘的適口餌料藻。上述這些探索了一種篩選出背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的研究方法，為有效建立人工繁育種群及擴大其養(yǎng)殖規(guī)模提供科學依據(jù)，為其它淡水貝類及珍稀魚類的人工繁育及增殖放流資源群體的培育提供餌料藻類方面的借鑒和參考， 是本發(fā)明的關鍵所在。

【具體實施方式】
[0010]下面本發(fā)明將結合實施例作進一步描述:
實施例一:根據(jù)本發(fā)明提供的“一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法”，優(yōu)選重要餌料藻類對剛脫落的幼蛘進行投喂:
根據(jù)本發(fā)明提供的一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，研究背角無齒蛘幼蛘的適口餌料，步驟如下:
1、原位背角無齒蛘幼蛘消化道內(nèi)食性組成
采集同一批繁育處于不同月齡(2月齡、5月齡、8月齡、11月齡)的背角無齒蛘幼蛘(每組5個)，體長0.5cm-lcm，帶回實驗室處理，對消化道內(nèi)容物進行采集，加入1-2 mL體積比為4%的甲醛，鏡檢其藻類組成，通過計算優(yōu)勢度確定背角無齒蛘幼蛘可攝食的餌料藻類為四角藻和小球藻；
2、餌料藻的實驗室無菌純種培養(yǎng)
通過步驟(I)掌握了背角無齒蛘幼蛘消化系統(tǒng)中的餌料藻類，在實驗室內(nèi)對餌料藻類:四角藻和小球藻分別進行無菌純化培養(yǎng)，分別采用BGll培養(yǎng)基(購于中國科學院淡水藻種庫FACHB-collect1n)進行培養(yǎng)；小球藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為1.0-107-2.0X 17個/L至IL BGll培養(yǎng)基中；四角藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為1.0_106_5.0X 16個/L至500mL BGll培養(yǎng)基中；培養(yǎng)溫度為:25°C，光照為2000-3000LX，培養(yǎng)2_3月，獲取到1-5L小球藻，細胞密度為3X109-3X101Q個/L，1-5L四角藻，細胞密度為3 X 108_3 X 19個/L，為后續(xù)投喂驗證提供餌料生物；
3、“標準化”背角無齒蛘幼蛘的實驗室獲取
篩選健康的3-4齡,殼長90-110mm的背角無齒蛘母蛘帶回實驗室,用塑料吸管吸水把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有1-2L曝氣3天的自來水容器中，放入性成熟的黃顙魚，所述黃顙魚規(guī)格100-200g，2-3尾，以30-40 r -min^1的速率沿盆壁順時針方向攪動，15_20min后將黃顙魚撈出，移入培育水池網(wǎng)箱中，每隔48h換水一次，經(jīng)過3天脫落期后，將黃顙魚及網(wǎng)箱從培育水池取出，用吸管虹吸采集培育池底部的幼蛘；
4、幼蛘的餌料投喂驗證
將培養(yǎng)皿經(jīng)泡酸(含5-10%鹽酸的溶液30L內(nèi)24h-48h)、去離子水清洗干凈，每個培養(yǎng)皿中加入10mL已曝氣3天的自來水，每組設置3個培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中放入10個幼蛘，分別設置不同投餌組作為對照，投餌組分別投喂步驟(2)中經(jīng)培養(yǎng)的四角藻和小球藻，四角藻以較低細胞密度為1.2X 16個/L，6.0 X 17個/L，小球藻以細胞密度為1.2X 17個/L，6.0 X 17個/L對脫落3天的幼蛘進行投喂；而后放入25°C光照培養(yǎng)箱，光照度600LX，每隔48h進行一次換水、鏡檢記錄其成活率，測量規(guī)格大?。慌囵B(yǎng)14天后，統(tǒng)計各組別幼蛘成活率，對照組成活率直線下降，培養(yǎng)第14天成活率為4.4%，規(guī)格為:高268 μ m，長245 μ m ;投喂四角藻的幼蛘組成活率下降較平穩(wěn)，培養(yǎng)第14天四角藻1.2X 16個/L組成活率為6.7%，規(guī)格為:高279 μ m，長245 μ m，6.0 X 17個/L組成活率為15.6%，規(guī)格為:高299 μ m，長279 μ m ;投喂小球藻1.2 X 17個/L組成活率為33.3%，規(guī)格為:高297 μ m，長292 μ m，6.0 X 17個/L組成活率為24.4%，規(guī)格為:高298 μ m，長292 μ m ;說明本發(fā)明方法成功優(yōu)選出了背角無齒蛘幼蛘的適口餌料，能夠明顯提高背角無齒蛘繁育中剛脫落幼蛘的成活率。
[0011]實施例二:利用“一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法”優(yōu)選餌料藻類對脫落10天的幼蛘進行投喂
根據(jù)本發(fā)明提供的一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，研究背角無齒蛘幼蛘的適口餌料，步驟如下:
1、原位背角無齒蛘幼蛘消化道內(nèi)食性組成
采集同一批繁育處于不同月齡(2月齡、5月齡、8月齡、11月齡)的背角無齒蛘幼蛘(每組5個)，體長0.5cm-lcm，帶回實驗室處理，對消化道內(nèi)容物進行采集，加入1-2 mL體積比為4%的甲醛，鏡檢其藻類組成，通過計算優(yōu)勢度確定背角無齒蛘幼蛘可攝食的餌料藻類為四角藻和小球藻；
2、餌料藻的實驗室無菌純種培養(yǎng)
通過步驟(I)掌握了背角無齒蛘幼蛘消化系統(tǒng)中的餌料藻類，在實驗室內(nèi)對餌料藻類:四角藻和小球藻分別進行無菌純化培養(yǎng)，分別采用BGll培養(yǎng)基(購于中國科學院淡水藻種庫FACHB-collect1n)進行培養(yǎng)；小球藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為1.0-107-2.0X 17個/L至IL BGll培養(yǎng)基中；四角藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為1.0_106_5.0X 16個/L至500mL BGll培養(yǎng)基中；培養(yǎng)溫度為:25°C，光照為2000-3000LX，培養(yǎng)2_3月，獲取到1-5L小球藻，細胞密度為3X109-3X101Q個/L，1-5L四角藻，細胞密度為3 X 108_3 X 19個/L，為后續(xù)投喂驗證提供餌料生物；
3、“標準化”背角無齒蛘幼蛘的實驗室獲取
篩選健康的3-4齡,殼長90-110mm的背角無齒蛘母蛘帶回實驗室,用塑料吸管吸水把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有1-2L曝氣3天的自來水容器中，放入性成熟的黃顙魚，所述黃顙魚規(guī)格100-200g，2-3尾，以30-40 r -min^1的速率沿盆壁順時針方向攪動，15_20min后將黃顙魚撈出，移入培育水池網(wǎng)箱中，每隔48h換水一次，經(jīng)過3天脫落期后，將黃顙魚及網(wǎng)箱從培育水池取出，用吸管虹吸采集培育池底部的幼蛘；
4、幼蛘的餌料投喂驗證
將培養(yǎng)皿經(jīng)泡酸(含5-10%鹽酸的溶液30L內(nèi)24h-48h)、去離子水清洗干凈，每個培養(yǎng)皿中加入10mL已曝氣3天的自來水，每組設置3個培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中放入10個幼蛘，設置不投餌組作為對照，投餌組為投喂步驟(2)中經(jīng)培養(yǎng)的小球藻，以中高投餌密度
1.2 X 18個/L和6.0X 18個/L進行投喂。而后放入25°C光照培養(yǎng)箱，光照度600LX，每隔48h進行一次換水、鏡檢記錄其成活率，測量規(guī)格大小；投喂14天后，不投餌對照組幼蛘成活率為6.7%，規(guī)格為:高268 μ m，長245 μ m ; 1.2 X 18個/L小球藻投餌組成活率為53.3%，規(guī)格為高288 μ m，長285 μ m ；6.0XlO8個/L小球藻投餌組成活率為42.2%，規(guī)格為高301 μ m，長288 μ m。證明本發(fā)明所優(yōu)選出的小球藻是背角無齒蛘幼蛘的重要適口餌料，投喂餌料藻情況下幼蛘成活率較高，生長規(guī)格明顯大于不投餌組。
[0012]實施例三:利用“一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法”優(yōu)選的餌料藻類對脫落10天的幼蛘進行投喂
根據(jù)本發(fā)明提供的一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，研究背角無齒蛘幼蛘的適口餌料，步驟如下: 1、原位背角無齒蛘幼蛘消化道內(nèi)食性組成
采集同一批繁育處于不同月齡(2月齡、5月齡、8月齡、11月齡)的背角無齒蛘幼蛘(每組5個)，體長0.5cm-lcm，帶回實驗室處理，對消化道內(nèi)容物進行采集，加入1-2 mL體積比為4%的甲醛，鏡檢其藻類組成，通過計算優(yōu)勢度確定背角無齒蛘幼蛘可攝食的餌料藻類為四角藻和小球藻；
2、餌料藻的實驗室無菌純種培養(yǎng)
通過步驟(I)掌握了背角無齒蛘幼蛘消化系統(tǒng)中的餌料藻類，在實驗室內(nèi)對餌料藻類:四角藻和小球藻分別進行無菌純化培養(yǎng)，分別采用BGll培養(yǎng)基(購于中國科學院淡水藻種庫FACHB-collect1n)進行培養(yǎng)；小球藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為1.0-107-2.0X 17個/L至IL BGll培養(yǎng)基中；四角藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為1.0_106_5.0X 16個/L至500mL BGll培養(yǎng)基中；培養(yǎng)溫度為:25°C，光照為2000-3000LX，培養(yǎng)2_3月，獲取到
1-5L小球藻，細胞密度為3X109-3X101Q個/L，1-5L四角藻，細胞密度為3 X 108_3 X 19個/L，為后續(xù)投喂驗證提供餌料生物；
3、“標準化”背角無齒蛘幼蛘的實驗室獲取
篩選健康的3-4齡,殼長90-110mm的背角無齒蛘母蛘帶回實驗室,用塑料吸管吸水把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有1-2L曝氣3天的自來水容器中，放入性成熟的黃顙魚，所述黃顙魚規(guī)格100-200g，2-3尾，以30-40 r -min^1的速率沿盆壁順時針方向攪動，15_20min后將黃顙魚撈出，移入培育水池網(wǎng)箱中，每隔48h換水一次，經(jīng)過3天脫落期后，將黃顙魚及網(wǎng)箱從培育水池取出，用吸管虹吸采集培育池底部的幼蛘；
4、幼蛘的餌料投喂驗證
將培養(yǎng)皿經(jīng)泡酸(含5-10%鹽酸的溶液30L內(nèi)24h-48h)、去離子水清洗干凈，每個培養(yǎng)皿中加入10mL已曝氣3天的自來水，每組設置3個培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中放入10個幼蛘，設置不投餌組作為對照，投餌組為投喂步驟(2)中經(jīng)培養(yǎng)的小球藻，以中等投喂密度分別投喂小球藻6X107個/L，1.2X 18個/L，2.4X 18個/L ;培養(yǎng)20天后，幼蛘成長至I月齡。對照組幼蛘成活率為3.3%，規(guī)格為高348±58 Mm，長362±65 Mm ;投喂6 X 17個/L小球藻組幼蛘成活率為43.3%，規(guī)格為高405±33 Mm，長530±78 Mm ;投喂1.2 X 18個/L小球藻幼蛘成活率為50%規(guī)格為高508±82 Mm，長694±98 Mm。不投喂藻類的組別增長緩慢，幼蛘規(guī)格顯著小于投喂小球藻的幼蛘組，而投喂1.2X 18個/L小球藻組別增長最快。證明本發(fā)明所優(yōu)選出的小球藻是背角無齒蛘幼蛘重要適口餌料，且餌料藻越充足幼蛘生長發(fā)育越快。
[0013]綜合上述，本發(fā)明克服了傳統(tǒng)淡水貝類食性調查中野外難以獲取幼蛘、所采蛘樣水體中藻類背景復雜缺乏對比性、研究連續(xù)性差、缺乏后續(xù)投喂驗證等傳統(tǒng)研究方法的不足。提供了一種基于原位采集發(fā)育周期同步、背景值一致的背角無齒蛘幼蛘的方法體系，并克服了幼蛘消化道解剖難度高的技術難題，成功提取幼蛘消化道內(nèi)容物并掌握了其關鍵餌料藻。并經(jīng)過實驗室純化培養(yǎng)獲得大量餌料藻，繼而在實驗室對標準化繁育取得生長周期同步、規(guī)格一致的幼蛘進行投喂驗證，優(yōu)選出了背角無齒蛘幼蛘的重要適口餌料藻并成功應用。所上這些探索了一種篩選出背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的研究方法，為有效建立人工繁育種群及擴大其養(yǎng)殖規(guī)模提供科學依據(jù)，為其它淡水貝類及其他水產(chǎn)品動物的人工繁育及增殖放流資源群體的培育提供餌料藻類方面的借鑒和參考。
【權利要求】
1.一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，其特征是:包括以下步驟: (I)、原位背角無齒蛘幼蛘消化道內(nèi)食性組成 選擇同一批繁育處于不同月齡的背角無齒蛘幼蛘，所述背角無齒蛘幼蛘體長為:0.5cm-lcm，帶回實驗室處理，對消化道內(nèi)容物進行采集，加入1-2 mL體積比為4%的甲醛，鏡檢其藻類組成，通過計算優(yōu)勢度確定背角無齒蛘幼蛘可攝食的餌料藻類為四角藻和小球藻； (2 )、餌料藻的實驗室無菌純種培養(yǎng) 通過步驟(I)掌握了背角無齒蛘幼蛘消化系統(tǒng)中的餌料藻類，在實驗室內(nèi)對餌料藻類:四角藻和小球藻分別進行無菌純化培養(yǎng)，分別采用BGll培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；小球藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為1.0-107-2.0X 107個/L至IL BGll培養(yǎng)基中；四角藻的培養(yǎng):取30-40 mL細胞密度為L 0-106-5.0X 106f/LM500mL BGll培養(yǎng)基中；培養(yǎng)溫度為:25°C,光照為2000-3000LX,培養(yǎng)2-3月，獲取到1-5L小球藻，細胞密度為3 X 109_3 X 101°個/I,1-5L四角藻，細胞密度為3X 108-3X 109個/L，為后續(xù)投喂驗證提供餌料生物； (3)、標準化背角無齒蛘幼蛘的實驗室獲取 篩選健康的3-4齡,殼長90-110mm的背角無齒蛘母蛘帶回實驗室,用塑料吸管吸水把外鰓中成熟的鉤介幼蟲沖入盛有1-2L曝氣3天的自來水容器中，放入性成熟的黃顙魚，所述黃顙魚規(guī)格100-200g，2-3尾，以30-40 r -min^1的速率沿盆壁順時針方向攪動，15_20min后將黃顙魚撈出，移入培育水池網(wǎng)箱中，每隔48h換水一次，經(jīng)過3天脫落期后，將黃顙魚及網(wǎng)箱從培育水池取出，用吸管虹吸采集培育池底部的幼蛘； (4)、幼蛘的餌料投喂驗證 將培養(yǎng)皿經(jīng)泡酸、去離子水清洗干凈，每個培養(yǎng)皿中加入10mL已曝氣3天的自來水，每組設置3個培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中放入10個幼蛘，分別設置不同投餌組作為對照，投餌組分別投喂步驟(2)中經(jīng)培養(yǎng)的四角藻和小球藻，四角藻和小球藻分別以細胞密度為1.2 X 16個/L-6.0 X 18個/L對脫落3天的幼蛘進行投喂；而后放入25°C光照培養(yǎng)箱，光照度600LX，每隔48h進行一次換水、鏡檢記錄其成活率，測量規(guī)格大??；培養(yǎng)3-30天后；對照組幼蛘成活率低、生長速度慢；以投喂組幼蛘成活率高、生長速度快為依據(jù)優(yōu)選出背角無齒蛘的適口餌料藻。
2.如權利要求1所述的一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，其特征是:所述步驟(I)中不同月齡的背角無齒蛘幼蛘為2月齡、5月齡、8月齡和11月齡，同月齡的背角無齒蛘幼蛘為一個組，每組5個。
3.如權利要求1所述的一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，其特征是:所述步驟(4)中泡酸的酸液含5-10%鹽酸的溶液30L，酸液內(nèi)泡24h-48h。
4.如權利要求1所述的一種淡水貝類背角無齒蛘幼蛘適口餌料藻的優(yōu)選方法，其特征是:所述步驟(4)中幼蛘投喂密度為:1-15天幼蛘:小球藻投喂密度:3- 6X107個/L;15-30天幼蛘:小球藻投喂密度:6X 17個/L-2.4X 18個/L。
【文檔編號】A23K1/14GK104322420SQ201410630233
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2014年11月11日 優(yōu)先權日:2014年11月11日
【發(fā)明者】蘇彥平, 楊健, 劉洪波, 陳修報 申請人:中國水產(chǎn)科學研究院淡水漁業(yè)研究中心