茶皂素在防治大豆孢囊線蟲病害上的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及茶皂素在防治大豆孢囊線蟲病害上的應(yīng)用，屬于生物防治領(lǐng)域。茶皂素(Tea?saponin)作為主要有效成分，對(duì)大豆孢囊線蟲(Heterodera?glycines)有強(qiáng)毒殺活性，能有效用于大豆孢囊線蟲病害防治。
【專利說明】茶皂素在防治大豆孢囊線蟲病害上的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物防治領(lǐng)域，特別是涉及茶皂素(Tea saponin)防治大豆孢囊線蟲病害的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]植物線蟲是植物重要病原生物之一，隨著農(nóng)田流轉(zhuǎn)，現(xiàn)代農(nóng)業(yè)向產(chǎn)業(yè)化，基地化發(fā)展，長(zhǎng)期大面積種植單一農(nóng)作物，以及常年連作及土地重復(fù)利用率的提高，線蟲在土壤中的數(shù)量迅速累積，線蟲病害問題日益突出。我國的小麥孢囊線蟲(Heterodera.avenae, Heterodera.filipjevi)、大豆抱囊線蟲(Heterodera glycines)普遍發(fā)生且危害嚴(yán)重，對(duì)我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成重大損失和影響(彭德良等，1993，2008，2012 ;馮志新，2001)。孢囊線蟲是一類寄主范圍比較窄的寄生線蟲，雌蟲成熟后卵大多數(shù)留在體內(nèi)，雌蟲表皮加厚形成孢囊以保護(hù)體內(nèi)的卵，植物收獲后，孢囊掉落在土壤中，可以在土壤中存活幾年甚至十幾年，因此與根結(jié)線蟲及其它線蟲相比是一類更加難以防治的線蟲(馮志新，2001)。殺線劑是目前防治線蟲病害的有效措施之一，但當(dāng)前的化學(xué)殺線劑均為高毒高殘留農(nóng)藥，極易造成對(duì)農(nóng)作物及生態(tài)環(huán)境的污染，而目前毒性較低的生物農(nóng)藥阿維菌素也在生產(chǎn)上出現(xiàn)了抗藥性問題。因此尋求新的生物防治殺線劑，是目前防治農(nóng)作物線蟲病害的研究熱點(diǎn)之一。
[0003]植物是生物活性化合物的的天然寶庫，直接將天然產(chǎn)物(如植物的全株或某部分)加工成制劑用以控制害蟲(如魚藤酮，印楝素)，或在充分研究植物天然殺蟲活性成分、構(gòu)效關(guān)系、毒殺機(jī)理的基礎(chǔ)上，1旲擬合成新的聞效低毒殺蟲劑，這在植物殺蟲劑方面已經(jīng)有很成功的先例，與此相比，植物源殺線劑的研究相對(duì)落后，直到20世紀(jì)80年代以后，從植物中尋找天然殺線蟲活性物質(zhì)的研究才開始受到關(guān)注，申請(qǐng)?zhí)枮镃N201210050127.5的中國發(fā)明專利公開了茶皂素對(duì)蔬菜根結(jié)線蟲的防治方法，吳慧平，李麗麗，王龍平等先后報(bào)道茶皂素對(duì)松材線蟲，水稻潛根線蟲，根結(jié)線蟲及小麥孢囊線蟲有很好的毒殺活性及防治效果(吳慧平等，2007 ;李麗麗，2012 ;王龍平等，2013a，2013b);申請(qǐng)?zhí)枮?009101162680的發(fā)明名稱為“茶皂素殺線蟲顆粒劑及其制備方法”專利公開了茶皂素對(duì)水稻潛根線蟲、山芋莖線蟲，南方根結(jié)線蟲、松材線蟲有防治作用，而對(duì)小桿線蟲無致死活性，表明茶皂素并非對(duì)所有的線蟲種類有致死活性。而且目前還未有茶皂素對(duì)大豆孢囊線蟲病害的研究報(bào)道及專利申請(qǐng)。
[0004]茶皂素(Tea saponin)是一種天然的非離子型表面活性劑，從山茶科的茶籽樹種子、莖和葉提取得到，由親水性的糖基和疏水性的苷元以及有機(jī)酸構(gòu)成，于1931年被日本學(xué)者青山次郎首次提取得到。茶阜素是一種五環(huán)三職阜苷(Pentacyclic Triterpenoid),從碳骨架結(jié)構(gòu)來看它屬于齊墩果烷(Oleanane)類，由皂苷元、糖基和有機(jī)酸組成，平均化學(xué)分子式為=C57H9tlO2615茶皂素具有溶血、抗菌殺蟲及魚毒等多種生物活性作用，在我國目前主要作為分散劑、懸浮劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑應(yīng)用于農(nóng)藥加工上，能極大地提高原藥的濕潤(rùn)分散能力，降低藥液表面張力，增強(qiáng)濕展性；在洗滌方面的應(yīng)用國內(nèi)已開發(fā)出了各種織物特種洗滌劑(周昊等，2009 ;夏春華等，2000)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對(duì)上述領(lǐng)域中的空白，提供一種茶皂素在防治大豆孢囊線蟲病害上的新應(yīng)用，其濃度達(dá)8mg/mL時(shí)，對(duì)大豆孢囊線蟲致死活性非常高，可作為農(nóng)藥使用。
[0006]茶皂素在防治大豆孢囊線蟲病害上的應(yīng)用。
[0007]所述防治為抑制大豆孢囊線蟲卵孵化，殺死二齡幼蟲。
[0008]所述茶皂素作為農(nóng)藥的藥物有效成分。
[0009]本發(fā)明中以茶皂素為藥物有效成分，添加到農(nóng)藥用載體或組合物中，制成農(nóng)藥，可以采用通常的農(nóng)藥劑型和使用方法，用于防治大豆孢囊線蟲病害。
[0010]本發(fā)明實(shí)驗(yàn)證明，茶阜素對(duì)大豆孢囊線蟲(Heterodera glycines)室內(nèi)生測(cè)表明，以2mg/mL、5mg/mL和8mg/mL濃度的茶阜素處理3d,對(duì)大豆孢囊線蟲卵孵化抑制率分別為43.12%,67.25%和75.36% ;同樣濃度處理5d，卵孵化抑制率分別為59.98%,76.31%和85.32% ;處理10d，卵孵化抑制率均達(dá)到了 71.57%以上。
[0011]茶阜素以2mg/mL、5mg/mL和8mg/mL濃度處理大豆孢囊線蟲二齡幼蟲72h,并用清水復(fù)蘇24h，校正死亡率分別為29.86%,59.92%和86.14%.
[0012]大田試驗(yàn)結(jié)果表明，茶皂素對(duì)大豆孢囊線蟲病有很好的防治效果，90%茶皂素以每小區(qū)(面積為15m2) 120g, 240g, 300g溝施處理，防治效果分別為43%，49.9%，65%，前兩個(gè)濃度處理的防效與殺線劑噻唑磷相當(dāng)，而300g每小區(qū)濃度處理的防效為65%，明顯優(yōu)于噻唑磷48.8%的防效。
[0013]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):
[0014]I)本發(fā)明所述的茶皂素來源于山茶科的茶籽樹種子、莖和葉提取得到，在茶葉中也有少量存在，證明是對(duì)人體比較安全的。
[0015]2)田間大豆孢囊線蟲病害防治試驗(yàn)表明，茶皂素對(duì)大豆孢囊線蟲病害的防治效果優(yōu)于目前常規(guī)化學(xué)殺線蟲劑噻唑磷。
[0016]3)本發(fā)明所述的茶皂素來源于天然植物中，在環(huán)境中易于降解，因此與化學(xué)殺線劑相比，具有低毒低殘留的特性，符合綠色植保和可持續(xù)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和發(fā)展的需要。

【具體實(shí)施方式】
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[0017]以下試驗(yàn)及操作是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，而不應(yīng)該當(dāng)做對(duì)本發(fā)明的限制。
[0018]本發(fā)明所用茶皂素是市售產(chǎn)品，來源于茶籽樹種子、莖和葉，含量98%。
[0019]實(shí)施例1:茶皂素對(duì)大豆孢囊線蟲卵孵化抑制活性測(cè)定
[0020]在解剖境下挑取色澤和大小較一致的成熟大豆孢囊線蟲，用I %次氯酸鈉消毒3-5min,再用無菌水沖洗幾遍，放入24孔板內(nèi)，每處理加入10個(gè)成熟的大豆孢囊線蟲，加入ImL供試茶皂素溶液，供試溶液以滅菌水配制，每處理設(shè)4次重復(fù)，以無菌水做對(duì)照，置25°C培養(yǎng)，分別于3d、5d、1d觀察記錄線蟲孵化數(shù)量，按以下公式計(jì)算線蟲卵孵化抑制率。
[0021]

【權(quán)利要求】
1.茶皂素在防治大豆孢囊線蟲病害上的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，所述防治為抑制大豆孢囊線蟲卵的孵化和殺死二齡幼蟲。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，所述茶皂素作為農(nóng)藥的藥物有效成分。
【文檔編號(hào)】A01P5/00GK104068020SQ201410332282
【公開日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2014年7月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月11日
【發(fā)明者】文艷華, 彭德良, 廖金鈴, 黃文坤 申請(qǐng)人:華南農(nóng)業(yè)大學(xué), 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所