一種包含蛋白酶的液體復(fù)合酶制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種酶穩(wěn)定劑，包含甘露糖醇、海藻糖、胰蛋白胨、黃原膠、氯化鈣和山梨酸鉀。所述穩(wěn)定劑可明顯抑制蛋白酶對其他組分酶的降解作用，使各組分酶之間相互依存、無拮抗作用，并且酶活不受影響。添加穩(wěn)定劑的復(fù)合酶在37℃條件下儲存6個(gè)月后，各組分酶的酶活殘留率均高于80%。因此，通過添加本發(fā)明所述穩(wěn)定劑，能夠生產(chǎn)出合格的含蛋白酶的復(fù)合酶產(chǎn)品，從而滿足市場的需求。本發(fā)明還提供了一種飼用液體復(fù)合酶，不僅儲存期限長，而且能顯著提高飼料利用率，提高養(yǎng)殖動(dòng)物的生產(chǎn)性能，方便飼料企業(yè)使用。
【專利說明】【技術(shù)領(lǐng)域】
[〇〇〇1] 本發(fā)明涉及酶穩(wěn)定劑【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種穩(wěn)定的包含蛋白酶的液體復(fù)合酶制 劑。 一種包含蛋白酶的液體復(fù)合酶制劑 【背景技術(shù)】
[0002] 隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，酶制劑在飼料工業(yè)中的應(yīng)用越來越廣泛，從最早的植 酸酶到現(xiàn)在的蛋白酶，脂肪酶，木聚糖酶，纖維素酶等。飼料在制粒后進(jìn)入冷卻系統(tǒng)前，飼料 的溫度較高，可達(dá)90°C，這樣的高溫會(huì)導(dǎo)致飼料自身的內(nèi)源酶和外添加酶的活性受到不同 程度的損失。加酶飼料制粒后酶活性的損失程度與不同酶的特性、酶制劑的劑型、制粒時(shí)的 溫度有關(guān)。為避免飼料制粒時(shí)酶活性的損失，可采用酶的穩(wěn)定化技術(shù)和后噴涂酶技術(shù)，穩(wěn)定 化技術(shù)主要是采用物理包被、化學(xué)修飾的方式來提高酶的耐熱性，采用這種技術(shù)會(huì)極大提 高飼用酶的成本；后噴涂液體酶技術(shù)，使用液體酶通過噴霧系統(tǒng)，將酶均勻涂布到顆粒飼料 表面，利用余熱使水分蒸發(fā)，該工藝的用酶成本相對較低。液體酶噴涂技術(shù)作為一項(xiàng)新型的 飼料加工后噴涂工藝，可有效保護(hù)飼料中熱敏性組分的有效性，達(dá)到加酶飼料的最佳效果， 提高飼料品質(zhì)。因此，液體酶噴涂技術(shù)具有很好的推廣應(yīng)用價(jià)值。目前國外許多大型飼料 廠已廣泛地采用這一工藝。
[0003] 飼用液體復(fù)合酶的生產(chǎn)大多是單一菌種液體發(fā)酵得到各種單一酶種的液體酶，通 過簡單的物理混合復(fù)配而成，這種通過復(fù)配方式生產(chǎn)的液體酶，由于各種酶的生產(chǎn)工藝、條 件、所用菌種等均有差異，復(fù)配后難免會(huì)因條件的不同而對其組分酶的活性產(chǎn)生影響。特別 是對于含有蛋白酶組分的液體酶制劑，由于酶本身就是蛋白質(zhì)，在液體狀態(tài)下，蛋白酶活性 較高，不僅存在自分解的情況，同時(shí)也能夠降解其他酶組分，造成酶活性顯著下降。
[0004] 由于上述的蛋白酶對其他酶蛋白的降解，目前市場上絕大多數(shù)液體復(fù)合酶產(chǎn)品 中，不含有蛋白酶組分，通過后噴涂設(shè)備增加一個(gè)或多個(gè)噴頭的方式，來實(shí)現(xiàn)液體復(fù)合酶及 蛋白酶后噴涂工藝，但是很多飼料廠由于廠房規(guī)模的限制，后噴涂設(shè)備無法增加噴頭，造成 了液體酶制劑中蛋白酶的應(yīng)用受到限制。但是很多飼料廠由于廠房規(guī)模的限制，后噴涂設(shè) 備無法增加噴頭，造成了液體酶制劑中蛋白酶的應(yīng)用受到限制。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供了一種包含蛋白酶的液體復(fù)合酶制劑。通 過在復(fù)合酶制劑中添加多種穩(wěn)定劑成分，使復(fù)合酶中各組分酶之間相互依存、無拮抗作用， 并且酶活不受影響，方便飼料企業(yè)使用。
[0006] 本發(fā)明一方面提供了一種酶穩(wěn)定劑，包含甘露糖醇、海藻糖、胰蛋白胨、黃原膠、氯 化鈣和山梨酸鉀。
[0007] 所述穩(wěn)定劑，其各組分及重量份數(shù)分別為： 甘露糖醇 10-20份 海藻糖 10-25份 胰蛋白胨 3-6份 黃原膠 0. 1-1. 0份 氯化鈣 0. 1-0. 5份 山梨酸鉀 0. 2-0. 5份。
[0008] 所述穩(wěn)定劑，其各組分及重量份數(shù)分別優(yōu)選為： 甘露糖醇 15份 海藻糖 20份 胰蛋白胨 4份 黃原膠 〇. 8份 氯化鈣 〇. 1份 山梨酸鉀 0.4份。
[0009] 本發(fā)明一方面提供了上述穩(wěn)定劑在酶制劑中的應(yīng)用。
[〇〇1〇] 本發(fā)明另一方面提供了一種復(fù)合酶制劑，包含植酸酶、纖維素酶、木聚糖酶、甘露 聚糖酶、酸性蛋白酶和上述穩(wěn)定劑。
[〇〇11] 所述復(fù)合酶制劑，其各組分及其含量分別為： 植酸酶 10000u/ml 纖維素酶 l〇〇〇u/ml 木聚糖酶 20000u/ml 甘露聚糖酶1500u/ml 酸性蛋白酶3000u/ml 甘露糖醇 15% (w/v) 海藻糖 20% (w/v) 胰蛋白胨 4% (w/v) 黃原膠 0.8% (w/v) 氯化?丐 0. 1% (w/v) 山梨酸鉀0.4% (w/v)。
[0012] 本發(fā)明還提供了上述復(fù)合酶制劑在飼料中的應(yīng)用。
[0013] 本發(fā)明提供的酶穩(wěn)定劑可明顯抑制蛋白酶對其他組分酶的降解作用，使各組分酶 之間相互依存、無拮抗作用，并且酶活不受影響。添加穩(wěn)定劑的復(fù)合酶在37°C條件下儲存6 個(gè)月后，各組分酶的酶活殘留率均高于80%。因此，通過添加本發(fā)明所述穩(wěn)定劑，能夠生產(chǎn)出 合格的含蛋白酶的復(fù)合酶產(chǎn)品，從而滿足市場的需求。本發(fā)明還提供了一種飼用液體復(fù)合 酶，不僅儲存期限長，而且能顯著提高飼料利用率，提高養(yǎng)殖動(dòng)物的生產(chǎn)性能，方便飼料企 業(yè)使用。 【具體實(shí)施方式】
[0014] 下面將結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明所述技術(shù)方案作進(jìn)一步的說明。
[0015] 實(shí)施例1 一種酶穩(wěn)定劑，其各組分及重量份數(shù)分別為： 甘露糖醇 10份 海藻糖 10份 胰蛋白胨 6份 黃原膠 〇. 1份 氯化鈣 〇. 5份 山梨酸鉀 〇. 5份。
[0016] 實(shí)施例2 一種酶穩(wěn)定劑，其各組分及重量份數(shù)分別為： 甘露糖醇 15份 海藻糖 20份 胰蛋白胨 4份 黃原膠 1份 氯化鈣 〇. 1份 山梨酸鉀 0.4份 實(shí)施例3 一種酶穩(wěn)定劑，其各組分及重量份數(shù)分別為： 甘露糖醇 20份 海藻糖 25份 胰蛋白胨 3份 黃原膠 〇. 8份 氯化鈣 〇. 2份 山梨酸鉀 〇. 2份。
[0017] 實(shí)施例4 一種液體復(fù)合酶，其中各組分酶及其酶活分別為：植酸酶l〇〇〇〇u/ml ;纖維素酶lOOOu/ ml ;木聚糖酶20000u/ml ;甘露聚糖酶1500u/ml ;酸性蛋白酶3000u/ml。
[0018] 將實(shí)施例1-3所述的酶穩(wěn)定劑按40. 5g/mL的比例分別添加到上述液體復(fù)合酶中， 然后將復(fù)合酶置于37°C培養(yǎng)箱內(nèi)，保存6個(gè)月，每個(gè)月檢測復(fù)合酶中各組分酶的殘留酶活， 計(jì)算酶活殘留率(酶活殘留率=(初始酶活-殘留酶活）/初始酶活X 1〇〇%)，以未加穩(wěn)定劑 的復(fù)合酶作為對照，具體結(jié)果見表1-4。
[0019] 表1未添加穩(wěn)定劑的復(fù)合酶(對照組）酶活殘留率
【權(quán)利要求】
1. 一種穩(wěn)定劑，包含甘露糖醇、海藻糖、胰蛋白胨、黃原膠、氯化鈣和山梨酸鉀。
2. 如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定劑，其各組分及重量份數(shù)分別為： 甘露糖醇 10-20份 海藻糖 10-25份 胰蛋白胨 3-6份 黃原膠 0. 1-1. 0份 氯化鈣 0. 1-0. 5份 山梨酸鉀 0. 2-0. 5份。
3. 如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定劑，其各組分及重量份數(shù)分別為： 甘露糖醇 15份 海藻糖 20份 胰蛋白胨 4份 黃原膠 〇. 8份 氯化鈣 〇. 1份 山梨酸鉀 0.4份。
4. 權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定劑在酶制劑中的應(yīng)用。
5. -種復(fù)合酶制劑，包含植酸酶、纖維素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、酸性蛋白酶和權(quán)利 要求1所述穩(wěn)定劑。
6. 如權(quán)利要求5所述的復(fù)合酶制劑，其各組分及其含量分別為： 植酸酶 10000u/ml 纖維素酶 l〇〇〇u/ml 木聚糖酶 20000u/ml 甘露聚糖酶1500u/ml 酸性蛋白酶3000u/ml 甘露糖醇 15% (w/v) 海藻糖 20% (w/v) 胰蛋白胨 4% (w/v) 黃原膠 0.8% (w/v) 氯化?丐 0. 1% (w/v) 山梨酸鉀0.4% (w/v)。
7. 權(quán)利要求5所述的復(fù)合酶制劑在飼料中的應(yīng)用。
【文檔編號】A23K1/165GK104095150SQ201410274437
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年6月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月19日
【發(fā)明者】王鳳超, 王海, 徐雪梅, 占志平 申請人:青島蔚藍(lán)生物集團(tuán)有限公司