禽用高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種禽用高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑，由以下重量份數(shù)的原料制備而成：吐溫80：3-15份；豆油：4-10份；聚丙烯酸鈉：1-5份；水：80-95份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為106-12/ml。本發(fā)明可在禽類腸道體內(nèi)有效降解飼料中的蛋白質(zhì)，使其成為易于吸收小分子多肽和氨基酸，提高飼料利用率，大幅度提高禽類生長速度和肉料比，防止出現(xiàn)過料拉稀等現(xiàn)象，同時作為益生菌在腸道內(nèi)定居，可有效抑制有害菌群的生長繁殖，保護(hù)腸道健康。
【專利說明】禽用高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于獸藥制劑領(lǐng)域，尤其是一種促進(jìn)禽生長及腸道疾病預(yù)防的高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前中國禽類養(yǎng)殖業(yè)雖然已經(jīng)廣泛使用高營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)，禽類品種也已經(jīng)同國外接軌，但仍然普遍存在肉禽飼養(yǎng)成本高，肉料比低；長期使用飼料造成過料、拉稀等腸道疾病等不良現(xiàn)象。當(dāng)前解決這一現(xiàn)象主要有兩種方法，1、禽發(fā)生過了拉稀后使用抗生素治療，但此種方法很容易造成停藥反復(fù)的現(xiàn)象。同時治療過的禽生長發(fā)育明顯減慢，部分甚至形成“僵雞”、“僵鴨”。究其原因在于此種治療方法不能恢復(fù)和協(xié)調(diào)禽類腸道內(nèi)菌群平衡，而且抗生素的反復(fù)使用會進(jìn)一步破壞有益菌的生長，無法從根本上解決腸道內(nèi)營養(yǎng)消化吸收的問題。2、添加諸如酵母菌、枯草芽孢桿菌、乳酸菌等益生菌，提高禽類腸道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力。此種方法固然可以起到一定的效果，但是由于此類菌株胞外分泌的生物酶活低，動物每日攝入飼料中營養(yǎng)物質(zhì)過高，因此很難達(dá)到滿意的效果。
[0003]尋找胞外高表達(dá)生物活性酶的益生菌，在禽類腸道內(nèi)利用其高酶活性將營養(yǎng)大分子物質(zhì)降解為能夠易于吸收的小分子營養(yǎng)物質(zhì)。提高飼料的生物利用度，同時預(yù)防由于長期喂養(yǎng)飼料造成的消化不良、拉稀、腸炎等疾病具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種促進(jìn)禽生長及腸道疾病預(yù)防的高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑。
[0005]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種禽用高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑，其特征在于，由以下重量份數(shù)的原料制備而成:吐溫80:3-15份；豆油:4-10份；聚丙烯酸鈉:1-5份；水:80-95份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為106_12/ml ο
[0006]優(yōu)選的，枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑由以下重量份數(shù)的原料制備而成:吐溫80:10份；豆油:10份；聚丙烯酸鈉:2份；水:78份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為109/ml。
[0007]進(jìn)一步，所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌LH1403。
[0008]本發(fā)明的另一目的在于提供一種枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑的制備方法，包括如下步驟:(I)將吐溫80與水混合均勻；(2)加入提前以3倍量水泡制過夜的聚丙烯酸鈉溶液，混合均勻；(3)向溶液中加入枯草芽孢桿菌LH1403，混合成菌懸液；(4)加入豆油攪拌均勻；
(5)包裝即得產(chǎn)品。
[0009]本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是:本發(fā)明所使用的枯草芽孢桿菌LH1403為枯草芽孢桿菌中篩選的胞外高表達(dá)蛋白酶菌株。其發(fā)酵液中胞外蛋白酶活性可高達(dá)8000U/ml，是目前普通芽孢桿菌的10倍。可在禽類腸道體內(nèi)有效降解飼料中的蛋白質(zhì)，使其成為易于吸收小分子多肽和氨基酸，提高飼料利用率，大幅度提高禽類生長速度和肉料比，防止出現(xiàn)過料拉稀等現(xiàn)象。同時作為益生菌在腸道內(nèi)定居，可有效抑制有害菌群的生長繁殖，保護(hù)腸道健康。
【具體實(shí)施方式】
[0010]實(shí)施例1:一種高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌LH1403的篩選
[0011]斜面培養(yǎng)基:牛肉膏0.4、瓊脂1.8、蛋白胨1.2, NaCl0.4、pH7.2-7.5。
[0012]種子培養(yǎng)基:牛肉膏0.4、NaCll.8、蛋白胨 1.2、NaCl0.4、ρΗ7.2-7.5。
[0013]分離平皿培養(yǎng)基:牛肉膏0.4、瓊脂1.8、NaCl0.4、酪素1.0、ρΗ7_8。
[0014]液體培養(yǎng)基:1 %葡萄糖、玉米漿、0.1% Κ2ΗΡ04等。
[0015]初始菌種:天津大學(xué)化工學(xué)院生物工程系提供BR0802、BR0903、BR1016。
[0016]1、將3種菌活化、傳代后涂于分離平皿上，根據(jù)菌落水解圈選出20株，采用Folin酚法測定其活力，選出活力最大菌株作為供試菌株。
[0017]2、經(jīng)紫外燈誘變，照射時間分別為30，60，120，150分鐘，37度黑布包裹培養(yǎng)48小時。根據(jù)菌落與水解圈直徑比例選取所需10株菌。
[0018]3、接入種子培養(yǎng)基，搖瓶培養(yǎng)20小時，80r/min，37°C。Folin法測定酶活
[0019]4、選出5株高活性菌株，依照上述方法復(fù)篩選出活性最高菌株
[0020]實(shí)施例2:—種高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌LH1403微生態(tài)制劑
[0021](1)將吐溫80與水混合均勻；⑵加入提前以3倍量水泡制過夜的聚丙烯酸鈉溶液,混合均勻；(3)向溶液中加入枯草芽孢桿菌LH1403，混合成菌懸液；(4)加入豆油攪拌均勻(5)包裝即得產(chǎn)品。
[0022]試驗(yàn)例1:
[0023]取實(shí)施例2所得產(chǎn)品，喂養(yǎng)肉雞五萬、肉鴨兩萬只和鵝三萬只，全程連續(xù)喂養(yǎng)，試
驗(yàn)結(jié)果如下:
[0024]
【權(quán)利要求】
1.一種禽用高表達(dá)蛋白酶枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑，其特征在于，由以下重量份數(shù)的原料制備而成:吐溫80:3-15份；豆油:4-10份；聚丙烯酸鈉:1-5份；水:80-95份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為106_12/ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑，其特征在于，由以下重量份數(shù)的原料制備而成:吐溫80:10份；丑油:10份；聚丙稀酸納:2份；7_K:78份；枯早牙抱桿囷在上述溶液中的濃度為107ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑，其特征在于:所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌LH1403。
4.一種制備如權(quán)利要求4所述的枯草芽孢桿菌微生態(tài)制劑的方法，其特征在于，包括如下步驟:(I)將吐溫80與水混合均勻；(2)加入提前以3倍量水泡制過夜的聚丙烯酸鈉溶液,混合均勻；(3)向溶液中加入枯草芽孢桿菌LH1403，混合成菌懸液；(4)加入豆油攪拌均勻；(5)包裝即得產(chǎn)品 。
【文檔編號】A23K1/18GK104012756SQ201410267663
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】曲薈芬, 李琳, 桑慧霞, 陳麗, 董麗紅, 王志強(qiáng) 申請人:格特生物制藥（天津）有限公司