一種防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】一種防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基,其屬于植物生物學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】。包括改良MS培養(yǎng)基+30g/L蔗糖,pH值為5.8;改良MS培養(yǎng)基中硼酸的含量增加原來含量的1/3,改良MS培養(yǎng)基中硝酸銨含量降低原來含量的1/5,并加入植物生長調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明通過選擇改良MS培養(yǎng)基,簡單易行,效果明顯且持久。只需通過改變MS培養(yǎng)基中微量物質(zhì)硼酸的含量和大量物質(zhì)中硝酸銨的含量,來優(yōu)化MS基本培養(yǎng)基,即可達(dá)到克服黃化的目的,試管苗增殖繼代和生根過程中,始終保持綠色健壯。
【專利說明】一種防止蒙古黃苗試管苗黃化的培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基,其屬于植物生物學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]黃化是植物組織培養(yǎng)的三大難題之一。在蒙古黃芪的組培過程中,黃化現(xiàn)象嚴(yán)重。采用傳統(tǒng)的MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基,添加不同種類和濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑,仍無法克服黃化現(xiàn)象,最終無法成苗??朔M培苗黃化的傳統(tǒng)方法有:改善瓶內(nèi)通氣狀況、增加糖的用量、增加光照、調(diào)節(jié)激素比例等等,而生產(chǎn)上普遍使用的封口膜或瓶蓋往往要兼顧隔離內(nèi)外環(huán)境、適當(dāng)透氣和成本低三個(gè)條件,因此其瓶內(nèi)通氣狀況一般是固定不變的;用糖量的增加會(huì)增加污染的危險(xiǎn)并提高生產(chǎn)成本;在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境中,很難針對(duì)各種植物的喜光性來調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度和光照時(shí)間;因此,只有通過優(yōu)化基本培養(yǎng)基MS,再適當(dāng)添加常用激素,才能徹底解決蒙古黃芪的黃化問題。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明的目的在于提供一種防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基,并且提高增殖系數(shù)和生根率的培養(yǎng)效果。
[0004]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:
一種防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基,包括改良MS培養(yǎng)基+30g/L蔗糖,pH值為
5.8 ;改良MS培養(yǎng)基包括大量物質(zhì)、微量物質(zhì)、鐵鹽和有機(jī)物;
大量物質(zhì)的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下:
硝酸銨1320 mg/L ;
硝酸鉀1900 mg/L ;
磷酸二氫鉀170 mg/L ;
七水硫酸鎂370 mg/L ;
二水氯化鈣440mg/L ;
微量物質(zhì)的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下:
四水硫酸錳22.3mg/L ;
七水硫酸鋅8.6 mg/L ;
硼酸8.3 mg/L ;
碘化鉀0.83 mg/L ;
二水鑰酸鈉0.25 mg/L ;
五水硫酸銅0.025 mg/L ;
六水氯化鈷0.025 mg/L ;
鐵鹽的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下:
七水硫酸亞鐵27.8 mg/L ;乙二胺四乙酸二鈉37.3 mg/L ;
有機(jī)物的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下:
甘氨酸2.0 mg/L ;
鹽酸硫胺素0.1 mg/L ;
鹽酸批卩多醇0.5 mg/L ;
煙酸0.5 mg/L ;
肌醇100 mg/L o
[0005]培養(yǎng)基還包括植物生長調(diào)節(jié)劑,其種類和其對(duì)應(yīng)的濃度為6-BA0.2g/L+IBA0.05g/L0
[0006]培養(yǎng)基還包括植物生長調(diào)節(jié)劑,其種類和其對(duì)應(yīng)的濃度為IBA2.0g/L+NAA2.0 g/L0
[0007]硼酸中的硼是植物細(xì)胞分裂和蛋白質(zhì)形成的必需因素,有利于細(xì)胞壁的形成,影響植物體內(nèi)的氮代謝,最終影響到植物的生長發(fā)育。缺硼或氮含量不合理均可能會(huì)導(dǎo)致試管苗枯梢甚至黃化。合理的硼酸的含量和硝酸銨的含量是克服黃化的有效措施。
[0008]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明通過選擇改良MS培養(yǎng)基,簡單易行,效果明顯且持久。只需通過改變MS培養(yǎng)基中微量物質(zhì)硼酸的含量和大量物質(zhì)中硝酸銨的含量,來優(yōu)化MS基本培養(yǎng)基,即可達(dá)到克服黃化的目的,試管苗增殖繼代和生根過程中,始終保持綠色健壯。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0009]圖1是采用防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基和傳統(tǒng)的MS營養(yǎng)基對(duì)比圖;
圖2是采用防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基的增殖效果圖;
圖3是采用防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基的生根效果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0010]下面將結(jié)合具體實(shí)施例,詳細(xì)說明本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1
改良MS培養(yǎng)基+30g/L蔗糖;pH值調(diào)為5.8,改良MS培養(yǎng)基的大量物質(zhì)的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下:
硝酸銨1320 mg/L ;
硝酸鉀1900 mg/L ;
磷酸二氫鉀170 mg/L ;
七水硫酸鎂370 mg/L ;
二水氯化鈣440 mg/L ;
微量物質(zhì)的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下:
四水硫酸錳22.3 mg/L ;
七水硫酸鋅8.6 mg/L ;
硼酸8.3 mg/L ;
碘化鉀0.83 mg/L ;二水鑰酸鈉0.25 mg/L ;
五水硫酸銅0.025 mg/L ;
六水氯化鈷0.15 mg/L ;
鐵鹽的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下:
七水硫酸亞鐵27.8 mg/L ;
乙二胺四乙酸二鈉37.3 mg/L ;
有機(jī)物的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下:
甘氨酸2.0 mg/L ;
鹽酸硫胺素0.1 mg/L ;
鹽酸批卩多醇0.5 mg/L ;
煙酸0.5 mg/L ;
肌醇100 mg/L o
[0011]工藝流程:
1)取蒙古黃芪試管苗;
2)剪除基部新茬;
3)接種在上述培養(yǎng)基;
4)光照強(qiáng)度20001UX,光周期12h/d;
結(jié)果為:40天后即可形成綠色的苗叢,效果穩(wěn)定,且不會(huì)再恢復(fù)到黃化狀態(tài)。
[0012]實(shí)施例2
改良MS培養(yǎng)基+30g/L蔗糖,再加入植物生長調(diào)節(jié)劑,其種類和其對(duì)應(yīng)的濃度為6-BA0.2g/L+IBA0.05g/L。
[0013]除培養(yǎng)基不同外,其余采用與實(shí)施例1相同的工藝流程。
[0014]結(jié)果為:40天后即可形成綠色的苗叢,其增殖系數(shù)高達(dá)5.5,試管苗生長健壯。
[0015]實(shí)施例3
改良MS培養(yǎng)基+30g/L蔗糖,再加入植物生長調(diào)節(jié)劑,其種類和其對(duì)應(yīng)的濃度為IBA2.0g/L+NAA2.0 g/L。
[0016]除培養(yǎng)基不同外,其余采用與實(shí)施例1相同的工藝流程。
[0017]結(jié)果為:生根率較高,成苗率高,在篩選的生根培養(yǎng)基上生根率達(dá)到85%。
[0018]本發(fā)明通過通過改變MS培養(yǎng)基中微量物質(zhì)硼酸的含量和大量物質(zhì)中硝酸銨的含量來優(yōu)化MS基本培養(yǎng)基,即可達(dá)到克服黃化的目的,MS培養(yǎng)基中除硼酸的含量和硝酸銨含量之外,其它成分含量不變,蔗糖用量采用常規(guī)的30g/L。
[0019]I) MS培養(yǎng)基中硼酸的含量增加原來含量的1/3。
[0020]2) MS培養(yǎng)基中硝酸銨含量降低原來含量的1/5。
[0021]3)試管苗增殖配方中植物生長調(diào)節(jié)劑的種類和含量為6-BA0.2g/L+IBA0.05g/L。
[0022]4)試管苗生根配方中植物生長調(diào)節(jié)劑的種類和含量為IBA2.0g/L+NAA2.0 g/L。
[0023]本發(fā)明應(yīng)用在黃化的蒙古黃芪上,40天后即可形成綠色的苗叢,其增殖系數(shù)高達(dá)5.5,試管苗生長健壯,始終保持綠色的狀態(tài),不會(huì)再恢復(fù)到黃化狀態(tài),在篩選的生根培養(yǎng)基上生根率達(dá)到85%,能夠最終成苗。用硼酸的含量和硝酸銨含量改變的優(yōu)化MS基本培養(yǎng)基,相對(duì)于其它可能減輕黃化現(xiàn)象的方法來說,具有可操作性強(qiáng)、簡單易行的優(yōu)點(diǎn)。[0024]以上已以較佳實(shí)施例公開了本發(fā)明,然其并非用以限制本發(fā)明,凡采用等同替換或者等效變換 方式所獲得的技術(shù)方案,均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基,其特征在于:包括改良MS培養(yǎng)基+30g/L蔗糖,PH值為5.8 ;改良MS培養(yǎng)基包括大量物質(zhì)、微量物質(zhì)、鐵鹽和有機(jī)物; 大量物質(zhì)的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下: 硝酸銨1320 mg/L ; 硝酸鉀1900 mg/L ; 無水磷酸二氫鉀170 mg/L ; 七水硫酸鎂370 mg/L ; 二水氯化鈣440mg/L ; 微量物質(zhì)的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下: 四水硫酸錳22.3mg/L ; 七水硫酸鋅8.6 mg/L ; 硼酸8.3 mg/L ; 碘化鉀0.83 mg/L ; 二水鑰酸鈉0.25 mg/L ; 五水硫酸銅0.025 mg/L ; 六水氯化鈷0.025 mg/L ; 鐵鹽的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下: 七水硫酸亞鐵27.8 mg/L ; 乙二胺四乙酸二鈉37.3 mg/L ; 有機(jī)物的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下: 甘氨酸2.0 mg/L ; 鹽酸硫胺素0.1 mg/L ; 鹽酸批卩多醇0.5 mg/L ; 煙酸0.5 mg/L ; 肌醇100 mg/L o
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基,其特征在于:還包括植物生長調(diào)節(jié)劑,其種類和其對(duì)應(yīng)的濃度為6-BA0.2g/L+IBA0.05g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防止蒙古黃芪試管苗黃化的培養(yǎng)基,其特征在于:還包括植物生長調(diào)節(jié)劑,其種類和其對(duì)應(yīng)的濃度為IBA2.0g/L+NAA2.0 g/L。
【文檔編號(hào)】C05G3/00GK103641543SQ201310593212
【公開日】2014年3月19日 申請(qǐng)日期:2013年11月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月23日
【發(fā)明者】于亞軍, 趙東利 申請(qǐng)人:大連大學(xué)