一種發(fā)酵高溫豆粕產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種發(fā)酵高溫豆粕產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，它涉及農(nóng)產(chǎn)品生物加工【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明利用一株從江西傳統(tǒng)發(fā)酵食品中篩選出的高產(chǎn)蛋白酶枯草芽孢桿菌配合釀酒酵母和植物乳桿菌對高溫豆粕進行混合固態(tài)發(fā)酵，經(jīng)斜面活化和液體擴大培養(yǎng)，單菌接種需氧發(fā)酵，混合接種厭氧發(fā)酵，然后60℃下干燥，即得到蛋白質(zhì)營養(yǎng)成分豐富，抗營養(yǎng)因子幾乎鈍化，適口性大幅提升和生物活性較高的發(fā)酵豆粕飼料產(chǎn)品。本發(fā)明的優(yōu)點是進一步改善了高溫豆粕發(fā)酵產(chǎn)品的蛋白質(zhì)和抗營養(yǎng)因子的組成，提高發(fā)酵產(chǎn)品的適口性，發(fā)酵產(chǎn)品具有營養(yǎng)豐富、低抗和適口的特點。
【專利說明】一種發(fā)酵高溫豆粕產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及的是農(nóng)產(chǎn)品生物加工【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法。
【背景技術(shù)】
[0002]當前飼用豆柏主要是高溫豆柏，高溫豆柏由于其在加工過程中經(jīng)過高溫脫溶處理，其中的蛋白質(zhì)變性程度較大，溶解性低，同時還含有一些抗營養(yǎng)因子，動物對其中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收率較低。發(fā)酵豆柏是一種綠色、高效的豆柏處理技術(shù)。近年來不少對發(fā)酵豆柏工藝的改進，如申請?zhí)枮?00810219198.7的中國專利采用3株枯草芽孢桿菌，啤酒酵母菌和乳酸菌對豆柏進行發(fā)酵，一定程度上降解了豆柏中的蛋白質(zhì)，提升了其營養(yǎng)價值，但粗蛋白質(zhì)含量提升的幅度不高。劉曉艷等采用枯草芽孢桿菌、米曲霉和釀酒酵母混合發(fā)酵高溫豆柏，使最終發(fā)酵產(chǎn)物中多肽得率達54.89%，發(fā)酵產(chǎn)物中多肽含量為21.47% (干基)，比原料增加了 4.1倍，具有較佳的營養(yǎng)價值，但該法接種量為25%，發(fā)酵原料需加入麩皮和糖蜜調(diào)整培養(yǎng)基的碳氮比，成本較大，發(fā)酵豆柏產(chǎn)品的風(fēng)味雖有改善，但是不具有酸香風(fēng)味，喂飼前仍然需要酸化處理，適口性仍然有提升的空間(劉曉艷，楊國力，國立東.混菌固態(tài)發(fā)酵法生產(chǎn)大豆多肽飼料的研究[J].飼料工業(yè)，2012.33(6):51-56)?？偟膩碚f，目前高溫豆柏發(fā)酵工藝仍存在成本較高、產(chǎn)品營養(yǎng)價值不高、適口性較低等問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]針對現(xiàn)有技術(shù)上存在的不足，本發(fā)明目的是在于提供一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，具有成本低廉、產(chǎn)品營養(yǎng)豐富，適口性良好的特點。能進一步促進高溫豆柏中蛋白質(zhì)資源的高效利用。
[0004]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過如下的技術(shù)方案來實現(xiàn):一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，其制備步驟為:(I)從原始菌株枯草芽孢桿菌、釀酒酵母和植物乳桿菌中分別取一環(huán)到牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基、YPD斜面培養(yǎng)基和MRS斜面培養(yǎng)基上，于30°C -37°C下培養(yǎng)18h-24h，直到斜面上長出明顯菌落，即完成菌種活化；
[0005](2)從活化后菌株枯草芽孢桿菌和釀酒酵母中挑取一環(huán)，分別接種到牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基和YPD液體培養(yǎng)基中，于30°C _37°C溫度下，搖床培養(yǎng)18h-48h，直到培養(yǎng)液中微生物的濃度達到106CFU/mL-108CFU/mL，停止培養(yǎng)，種子液即制備成功。從活化后菌株植物乳桿菌中挑取一環(huán)，接種到MRS液體培養(yǎng)基中，于30°C -37°C溫度下，靜置培養(yǎng)24h_48h，使種子液中菌體濃度達到107CFU/mL-108CFU/mL，即制成種子液；
[0006](3)對豆柏進行混料，按料水比1: 0.6-1: 1.2進行混料，豆柏初始發(fā)酵pH為6.0-7.0，然后以3%-6%的接種量(按與水混合前干豆柏質(zhì)量)接入步驟(2)中枯草芽孢桿菌種子液，混勻后，需氧發(fā)酵24h-48h。經(jīng)過需氧發(fā)酵后，以1% -3%的接種量接入步驟
(2)中釀酒酵母和植物乳桿菌的種子液，進行密封厭氧發(fā)酵48-72h ；
[0007](4)發(fā)酵后樣品于60°C下干燥，粉碎，最后對發(fā)酵前后豆柏進行營養(yǎng)成分分析。[0008]上述方案中，所述的步驟(I)中所述的枯草芽孢桿菌斜面培養(yǎng)基按重量比含有0.3% -0.5%的氯化鈉、0.5% -1.0%的蛋白胨、0.1% -0.3%的牛肉膏和1.8% -2.0%的瓊脂粉，Yro斜面培養(yǎng)基按重量比含有0.8% -1.0%的蛋白胨、0.3% -0.5%的酵母提取物、1.5% -2.0%的葡萄糖和1.8% -2.0%的瓊脂粉，MRS斜面培養(yǎng)基按重量比含有
0.8% -1.0%的蛋白胨、0.5% -0.8%的牛肉膏、0.1% -0.4%的酵母提取物、1.5% -2.0%的葡萄糖，0.1% -0.2%的磷酸氫二鉀，0.03% -0.06%的七水合硫酸鎂、0.01% -0.03%的一水合硫酸錳和1.8% -2.0%的瓊脂粉，同時含有按體積比的0.05% -0.1 %的吐溫80。所述的步驟(2)中所述的液體活化培養(yǎng)基均為為在斜面培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上不添加瓊脂粉的培養(yǎng)基。
[0009]本發(fā)明采用多菌株混合固態(tài)發(fā)酵高溫豆柏，使豆柏的營養(yǎng)特性得到了顯著改善，粗蛋白質(zhì)含量提高了 25.7%，蛋白質(zhì)降解較為明顯，氮溶解指數(shù)提高了 4.02倍，酸溶蛋白含量提高了 4.89倍，揮發(fā)性鹽基氮較枯草芽孢桿菌單菌種發(fā)酵降低了 57.2%，胰蛋白酶抑制劑活力相對原料豆柏降低了 95.6%，同時還含有3.86%的有機酸及3.25X 108CFU/g的活性益生菌。本發(fā)明產(chǎn)品經(jīng)畜禽幼仔的養(yǎng)殖試驗證明，該產(chǎn)品能很好代替豆柏或部分代替魚粉，提高動物生長性能，提升飼料的利用率，具有顯著的經(jīng)濟效益。
【具體實施方式】
[0010]為使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合【具體實施方式】，進一步闡述本發(fā)明。
[0011]實施例1:本【具體實施方式】的實施例采用以下技術(shù)方案:一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，其制備步驟為:(I)從原始菌株枯草芽孢桿菌、釀酒酵母和植物乳桿菌中分別取一環(huán)到牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基、YPD斜面培養(yǎng)基和MRS斜面培養(yǎng)基上，于30°C -37°C下培養(yǎng)18h-24h，直到斜面上長出明顯菌落，即完成菌種活化；
[0012](2)從活化后菌株枯草芽孢桿菌和釀酒酵母中挑取一環(huán)，分別接種到牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基和YPD液體培養(yǎng)基中，于30°C _37°C溫度下，搖床培養(yǎng)18h-48h，直到培養(yǎng)液中微生物的濃度達到106CFU/mL-108CFU/mL，停止培養(yǎng)，種子液即制備成功。從活化后菌株植物乳桿菌中挑取一環(huán)，接種到MRS液體培養(yǎng)基中，于30°C -37°C溫度下，靜置培養(yǎng)24h_48h，使種子液中菌體濃度達到107CFU/mL-108CFU/mL，即制成種子液；
[0013](3)對豆柏進行混料，按料水比1: 0.6-1: 1.2進行混料，豆柏初始發(fā)酵pH為
6.0-7.0，然后以3%-6%的接種量(按與水混合前干豆柏質(zhì)量)接入步驟(2)中枯草芽孢桿菌種子液，混勻后，需氧發(fā)酵24h-48h。經(jīng)過需氧發(fā)酵后，以1%-3%的接種量接入步驟
(2)中釀酒酵母和植物乳桿菌的種子液，進行密封厭氧發(fā)酵48-72h ；
[0014](4)發(fā)酵后樣品于60°C下干燥，粉碎，最后對發(fā)酵前后豆柏進行營養(yǎng)成分分析；分析如下:
[0015]檢測結(jié)果I
[0016]
【權(quán)利要求】
1.一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，其特征在于，其制備步驟為:(1)從原始菌株枯草芽孢桿菌、釀酒酵母和植物乳桿菌中分別取一環(huán)到牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基、Yro斜面培養(yǎng)基和MRS斜面培養(yǎng)基上，于30°C -37°c下培養(yǎng)18h_24h，直到斜面上長出明顯菌落，即完成菌種活化； (2)從活化后菌株枯草芽孢桿菌和釀酒酵母中挑取一環(huán)，分別接種到牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基和YPD液體培養(yǎng)基中，于30°C _37°C溫度下，搖床培養(yǎng)18h-48h，直到培養(yǎng)液中微生物的濃度達到106CFU/mL-108CFU/mL，停止培養(yǎng)，種子液即制備成功。從活化后菌株植物乳桿菌中挑取一環(huán)，接種到MRS液體培養(yǎng)基中，于30°C _37°C溫度下，靜置培養(yǎng)24h_48h，使種子液中菌體濃度達到107CFU/mL-108CFU/mL，即制成種子液； (3)對豆柏進行混料，按料水比1: 0.6-1: 1.2進行混料，豆柏初始發(fā)酵pH為6.0-7.0，然后以3%-6%的接種量(按與水混合前干豆柏質(zhì)量)接入步驟(2)中枯草芽孢桿菌種子液，混勻后，需氧發(fā)酵24h-48h。經(jīng)過需氧發(fā)酵后，以1%-3%的接種量接入步驟(2)中釀酒酵母和植物乳桿菌的種子液，進行密封厭氧發(fā)酵48-72h； (4)發(fā)酵后樣品于60°C下干燥，粉碎，最后對發(fā)酵前后豆柏進行營養(yǎng)成分分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，其特征在于，所述的步驟(I)中所述的枯草芽孢桿菌斜面培養(yǎng)基按重量比含有0.3% -0.5%的氯化鈉、0.5% -1.0%的蛋白胨、0.1% -0.3%的牛肉膏和1.8% -2.0%的瓊脂粉，YH)斜面培養(yǎng)基按重量比含有0.8% -1.0%的蛋白胨、0.3% -0.5%的酵母提取物、1.5% -2.0%的葡萄糖和1.8% -2.0%的瓊脂粉，MRS斜面培養(yǎng)基按重量比含有0.8% -1.0%的蛋白胨、0.5% -0.8%的牛肉膏、0.1% -0.4%的酵母提取物、1.5% -2.0%的葡萄糖，0.1 % -0.2%的磷酸氫二鉀，0.03% -0.06%的七水合硫酸鎂、0.01 % -0.03%的一水合硫酸錳和1.8% -2.0%的瓊脂粉，同時含有按體積比的0.05% -0.1%的吐溫80。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，其特征在于，所述的步驟(2)中所述的液體活化培養(yǎng)基均為為在斜面培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上不添加瓊脂粉的培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3所述的一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，其特征在于，發(fā)酵干燥后的豆柏即可作為豬、雞及魚類等的飼料。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵高溫豆柏產(chǎn)富肽富益生元飼料的制作方法，其特征在于，所述的菌種為枯草芽孢桿菌(Bacillus Subtilis) I株、釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae) I 株以及植物乳桿菌(Lactobacillus pi ant arum) I 株。
【文檔編號】A23K1/00GK103535511SQ201310469753
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2013年9月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月25日
【發(fā)明者】楊瑞金, 李舒宇, 徐張賢, 金妙仁, 張燕鵬, 鄭婷婷, 趙偉 申請人:江南大學(xué)