專(zhuān)利名稱(chēng)：一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及無(wú)性繁殖技術(shù)，尤其是涉及一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法。
背景技術(shù)：
衫ifXCunninghamia為杉科常綠喬木,在我國(guó)有一千多年的栽培史，在林業(yè)發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，堪稱(chēng)中國(guó)南方“木中之王”。杉木作為我國(guó)南方的主要造林樹(shù)種，栽培面積大，用途廣泛，備受廣大群眾的親睞，因此，大力發(fā)展杉木育苗技術(shù)，滿(mǎn)足市場(chǎng)對(duì)優(yōu)質(zhì)苗木的需求是目前面臨的重要問(wèn)題之一。組織培養(yǎng)技術(shù)是一種快速無(wú)性繁殖技術(shù)，采用組織培養(yǎng)手段繁育杉木苗木，是加速杉木良種推廣使用的重要手段，是促進(jìn)我國(guó)杉木快速發(fā)展的有效途徑。生根誘導(dǎo)是杉木組織培養(yǎng)過(guò)程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，據(jù)報(bào)道，一些學(xué)者采用瓶外生根的方法解決杉木組培苗生根問(wèn)題，取得了一定的成效。中國(guó)專(zhuān)利CN102217539A的一種杉木無(wú)性系離體生根培養(yǎng)方法。具體操作如下:
(I)選取杉木優(yōu)良無(wú)性系原株的樹(shù)干的基部萌條為組織培養(yǎng)材料，接入繼代增殖培養(yǎng)基進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)，誘導(dǎo)分化出不定芽，然后將不定芽轉(zhuǎn)入MS培養(yǎng)基上進(jìn)行伸長(zhǎng)培養(yǎng):其中繼代增殖培養(yǎng)基配方為3/4 MS + 6BA 0.3 mg/L +蔗糖3 %; (2)步驟(I)的不定芽伸長(zhǎng)到2-3 cm時(shí)，轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基培養(yǎng)，得生根試管苗:誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基以1/2 MS或1/4 MS為基本培養(yǎng)基，在其中添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和2 %蔗糖；植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為IBA 0.05-0.4mg/L,NAA 0.05-0.4 mg/L,IAA 0.1-1.0 mg/L、或IBA 0.05-0.4 mg/L和NM 0.05-0.4 mg/L混合；(3)移栽生根試管苗，選用黃土、泥炭土 3: I比例混合后用作移栽基質(zhì)。該方法雖然能在一定程度上提高了杉木苗的生根率，但是仍不能解決杉木苗生根不整齊、根系不粗壯的問(wèn)題。中國(guó)專(zhuān)利CN101 480166提供一種杉木組織培養(yǎng)生根方法，切取杉木增殖繼代小苗，接種于杉木生根培養(yǎng)基進(jìn)行組織培養(yǎng)生根。杉木生根培養(yǎng)基由改良MS培養(yǎng)基、ABT1#0.4-0.8 mg/L、IBA 0.1-0.5 mg/L和根太陽(yáng)稀釋液2-6 mg/L組成。采用該方法進(jìn)行杉木生根培養(yǎng)后，能縮短杉木的生根時(shí)間,提高杉木的生根率,但仍舊不能解決杉木苗生根不統(tǒng)一，根系數(shù)量少以及根系不粗壯的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于改進(jìn)現(xiàn)有的生根誘導(dǎo)技術(shù)，提供一種能提高杉木試管苗的生根率，根系數(shù)量以及根系萌發(fā)整齊度，提供更多優(yōu)質(zhì)帶根試管苗供生產(chǎn)應(yīng)用的杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，選取增殖繼代小苗，先進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，獲得帶根試管苗，具體操作步驟如下:
(I)預(yù)生根培養(yǎng):切取1-2 Cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)；(2)生根培養(yǎng):待步驟(I)中增殖繼代小苗經(jīng)過(guò)15-25天預(yù)生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)。以上所述的預(yù)生根培養(yǎng)基以1/2MS-MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.02-0.08 mg/L、蔗糖2.5 %和瓊脂0.7 %。以上所述的生根培養(yǎng)基由改良1/2 MS為基本培養(yǎng)基、還包括IBA 0.10-0.25 mg/L 和 IAA 0.05-0.08 mg/L、蔗糖 2.5 % 和瓊脂 0.7 %。以上所述的改良1/2 MS基本培養(yǎng)基中NH4NO3含量為660 mg/L, FeSO4.7H20含量為 27.8-32.4 mg/L ο以上所述的培養(yǎng)條件為溫度23±2 °C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX，光照時(shí)間為13 h、濕度 40-45 %。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及積極效果如下:
1.本杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，在生根誘導(dǎo)前采用低濃度NAA對(duì)小苗進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，可使試管苗發(fā)根統(tǒng)一，發(fā)根速度快，根系粗壯且數(shù)量較多。2.本杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，增殖繼代小苗經(jīng)過(guò)15-25天時(shí)間預(yù)生根培養(yǎng)后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，即可達(dá)到預(yù)生根培養(yǎng)效果，又避免了小苗在預(yù)生根培養(yǎng)階段長(zhǎng)出根系而使后期生根培養(yǎng)發(fā)根不整齊。3.本杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，調(diào)整生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基FeSO4.7H20含量，可有效促進(jìn)試管苗根系的萌發(fā)和增加根 系數(shù)量。4.本杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，生根培養(yǎng)基蔗糖濃度為2.5%，瓊脂濃度為0.7%，培養(yǎng)基滲透壓較低，有利于根系生長(zhǎng)。5.本杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，有利于根系的萌發(fā)。6.本杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，預(yù)生根培養(yǎng)和生根培養(yǎng)均在較強(qiáng)光照強(qiáng)度下進(jìn)行，有利于根系萌發(fā)。


圖1為杉木試管苗生根效果圖。圖2為杉木試管苗根系生長(zhǎng)情況效果圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1:
一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，將小苗接種于以1/2MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.02mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂
0.7%的預(yù)生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400LX，光照時(shí)間為13h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)15天預(yù)生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入由NH4NO3含量為660 mg/L,FeSO4.7Η20含量為27.8 mg/L的改良1/2 MS基本培養(yǎng)基，還包括IBA 0.10 mg/L、IAA 0.05 mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400LX，光照時(shí)間為13h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。試管苗的生根率為88.9%，平均根數(shù)/條為4.98，不定根形成能力為4.42。實(shí)施例2:
一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，將小苗接種于以1/2MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.06mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂
0.7%的預(yù)生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400LX，光照時(shí)間為13h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)20天預(yù)生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入由NH4NO3含量為660 mg/L，F(xiàn)eSO4.7Η20含量為27.8 mg/L的改良1/2 MS基本培養(yǎng)基，還包括IBA 0.15 mg/L、IAA 0.05 mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%瓊脂組成的生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400LX，光照時(shí)間為13h、濕度 40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。試管苗的生根率為90.1%，平均根數(shù)/條為
5.02，不定根形成能力為4.52。實(shí)施例3:
一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，將小團(tuán)愈傷組織接種于以1/2MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預(yù)生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400LX，光照時(shí)間為13h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)20天預(yù)生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入由NH4NO3含量為660 mg/L，F(xiàn)eSO4.7Η20含量為30.9 mg/L的改良1/2 MS基本培養(yǎng)基，還包括IBA 0.20 mg/L、IAA 0.06 mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX,光照時(shí)間為13h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。試管苗的生根率為93.1%，平均根數(shù)/條為5.89，不定根形成能力為5.48。實(shí)施例4:
一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，將小團(tuán)愈傷組織接種于以1/2MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預(yù)生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX,光照時(shí)間為13h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)25天預(yù)生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入由NH4NO3含量為660 mg/L, FeSO4.7H20含量為32.4 mg/L的改良1/2 MS基本培養(yǎng)基，還包括IBA 0.25mg/L、IAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX,光照時(shí)間為13h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。試管苗的生根率為93.6%，平均根數(shù)/條為5.76，不定根形成能力為5.39。實(shí)施例5:
一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，將小團(tuán)愈傷組織接種于以3/4MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.06mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預(yù)生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX,光照時(shí)間為13 h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)15天預(yù)生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入由NH4NO3含量為660 mg/L,FeSO4.7Η20含量為27.8 mg/L的改良1/2 MS的基本培養(yǎng)基，還包括IBA 0.20mg/L、IAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX,光照時(shí)間為13 h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。試管苗的生根率為93.3%，平均根數(shù)/條為5.45，不定根形成能力為5.08。實(shí)施例6:
一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，將小團(tuán)愈傷組織接種于以MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.06mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預(yù)生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX，光照時(shí)間為13h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)20天預(yù)生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入由NH4NO3含量為660 mg/L, FeSO4.7H20含量為30.9 mg/L的改良1/2 MS基本培養(yǎng)基，還包括IBA 0.15mg/L、IAA 0.08mg/L、蔗糖
2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX,光照時(shí)間為13 h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。試管苗的生根率為96.7%，平均根數(shù)/條為6.17，不定根形成能力為5.96。實(shí)施例7:
一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，將小團(tuán)愈傷組織接種于以MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預(yù)生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX，光照時(shí)間為13h、濕度40%-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)25天 預(yù) 生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入由NH4NO3含量為660 mg/L, FeSO4.7H20含量為32.4mg/L的改良1/2 MS基本培養(yǎng)基，還包括ΙΒΑ0.25 mg/L、IAA 0.10 mg/L、蔗糖
2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養(yǎng)基中。置于溫度23±2°C、光照強(qiáng)度2200-2400 LX,光照時(shí)間為13 h、濕度40-45%的環(huán)境中培養(yǎng)。試管苗的生根率為96.7%，平均根數(shù)/條為5.68，不定根形成能力為5.49。
權(quán)利要求
1.一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，其特征在于:選取增殖繼代小苗，先進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，獲得帶根試管苗，具體操作步驟如下: (1)預(yù)生根培養(yǎng):切取1-2Cm的增殖繼代小苗，切取小苗時(shí)保留一小團(tuán)愈傷組織，接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)； (2)生根培養(yǎng):待步驟(I)中增殖繼代小苗經(jīng)過(guò)15-25天預(yù)生根培養(yǎng)后，將小苗轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，其特征在于:所述的預(yù)生根培養(yǎng)基以1/2MS-MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA 0.02-0.08 mg/L、蔗糖2.5 %和瓊脂0.7 %。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，其特征在于:所述的生根培養(yǎng)基由改良1/2 MS為基本培養(yǎng)基、還包括IBA 0.10-0.25 mg/L和IAA 0.05-0.08 mg/L、蔗糖2.5 %和瓊脂0.7 %的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，其特征在于:所述的改良1/2MS 基本培養(yǎng)基中 NH4N03 含量為 660 mg/L, FeS04.7H20 含量為 27.8-32.4 mg/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，其特征在于:所述的培養(yǎng)條件為溫度23±2 °C、光照強(qiáng) 度2200-2400 LX，光照時(shí)間為13 h、濕度40_45%。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法，先切取1-2cm的增殖繼代小苗，接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，預(yù)生根培養(yǎng)基以1/2MS-MS為基本培養(yǎng)基，還包括NAA0.02-0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%。經(jīng)過(guò)15-25天預(yù)生根培養(yǎng)后，再進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基以改良1/2MS為基本培養(yǎng)基、還包括IBA0.10-0.25mg/L和IAA0.05-0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%，然后置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，獲得帶根試管苗。采用該方法進(jìn)行杉木生根培養(yǎng)后，能提高杉木試管苗的生根率，根系數(shù)量以及根系萌發(fā)整齊度，提供更多優(yōu)質(zhì)帶根試管苗供生產(chǎn)應(yīng)用，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
文檔編號(hào)A01H4/00GK103229723SQ20131019519
公開(kāi)日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2013年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月23日
發(fā)明者黃開(kāi)勇, 郝海坤, 陳琴, 藍(lán)肖, 唐慶蘭, 戴俊, 張照遠(yuǎn) 申請(qǐng)人:廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院