專利名稱：一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用耳石微量元素判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，屬于魚類生態(tài)學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
棘頭梅童魚是近海小型經(jīng)濟(jì)魚類,主要分布于中西太平洋區(qū)的南海、東海和黃渤海，是我國(guó)、菲律賓、印尼、日本和朝鮮等國(guó)家沿海、河口水域重要的漁業(yè)資源和主要的經(jīng)濟(jì)魚類之一。近年來由于過度捕撈和環(huán)境污染等因素的影響，棘頭梅童魚的年平均資源密度在大幅下降，資源開發(fā)率過高。其魚卵仔魚資源補(bǔ)充量已受到衰竭的威脅，而全人工育苗技術(shù)至今尚未成熟。近些年來由于價(jià)格不斷攀升，棘頭梅童魚已經(jīng)成為一種高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的水產(chǎn)品。毫無(wú)疑問，準(zhǔn)確了解棘頭梅童魚的資源動(dòng)態(tài)及其與環(huán)境因子的關(guān)系，對(duì)揭示棘頭梅童魚生活史過程所需環(huán)境條件、生境規(guī)律，加強(qiáng)保護(hù)和優(yōu)化全人工繁殖的環(huán)境技術(shù)等具有非 常重要的意義。迄今，通過漁獲調(diào)查法對(duì)棘頭梅童魚的生境及活動(dòng)規(guī)律已經(jīng)有了認(rèn)識(shí)。它的分布區(qū)一般在河口(如長(zhǎng)江、飛云江、閩江、珠江)，有在深淺水間洄游的現(xiàn)象。資源密度的變化存在季節(jié)性且隨鹽度增加而降低。產(chǎn)卵多在大潮水的幾天里。卵的浮性及個(gè)體發(fā)育依賴海水的鹽度等條件。然而，由于研究技術(shù)的限制，要確切而直觀地把握棘頭梅童魚從孵化到幼魚直至成魚全生活史過程中的洄游、生境差異，群體組成規(guī)律，以及不同河口水域棘頭梅童魚種群特征及相關(guān)性等尚有很大的難度。研究發(fā)現(xiàn)，由于不同水環(huán)境之間的元素成分會(huì)有很大的差異，魚類從水環(huán)境中吸收的元素可以在硬組織如耳石中沉積并長(zhǎng)期保存。因此，伴隨著不同的生活和洄游履歷，硬組織中元素的積累可留下棲息水環(huán)境中元素特征的“指紋”。相應(yīng)地如果能利用諸如元素衍射電子探針分析(EPMA)等較為先進(jìn)的技術(shù)對(duì)這些“指紋”進(jìn)行歸納總結(jié)，就有可能恢復(fù)、重現(xiàn)和掌握大量洄游性魚類生態(tài)學(xué)、生理學(xué)等方面的信息及其時(shí)空變化過程。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新的利用耳石微量元素判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和洄游生活史的方法，通過將耳石分離、磨拋等前處理以及元素衍射電子探針分析操作等一系列步驟，測(cè)定棘頭梅童魚耳石中Sr、Ca元素的濃度值，并將這些濃度值歸納出不同生境的微量元素地理“指紋”特征，并利用這些特征來進(jìn)行棘頭梅童魚產(chǎn)地和洄游生活史判別。鍶含量/鈣含量X IO3的比值連續(xù)出現(xiàn)三次及以上大于7時(shí)可判定為高鹽度生活階段；比值在3 7之間時(shí)為半咸水生活階段；比值在O 3之間時(shí)為低鹽度或淡水生活階段。該方法所取得的結(jié)果穩(wěn)定性好，可重復(fù)性高、系統(tǒng)誤差小，可判別性強(qiáng)，顯示出了其快速的優(yōu)勢(shì)。按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，采用以下工藝步驟
I、捕撈不同水域的棘頭梅童魚，立刻放入清潔的塑料自封袋中并在O 4°C保存，在此溫度條件下盡快運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室保存；2、野外采集并運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室保存的棘頭梅童魚完整個(gè)體樣本轉(zhuǎn)移于-18 _20°C冰箱內(nèi)保存，待用；3、棘頭梅童魚耳石樣本前處理方法(I)、取出左或右側(cè)矢耳石，經(jīng)超純水洗清除表面的有機(jī)質(zhì)，清洗干凈后，室溫下晾干、干燥保存作為分析的材料待用；(2)、用上海艾立熱熔膠棒廠生產(chǎn)含重量百分含量的聚氨酯膠成分>25%的熱熔膠將其較平滑的面固定在載玻片上，等熱熔膠冷卻10 15分鐘變硬后先將耳石在500目水砂紙上進(jìn)行粗磨，并隨時(shí)在正置金相顯微鏡上用透反射光觀察表面狀況，待首次觀察到輪紋時(shí)換用1200目水砂紙細(xì)磨2 5分鐘使表面平滑，然后用酒精燈將熱熔膠熔化后取出耳 石；(3)、將未磨過的光面耳石用雙面膠將其固定在鑲樣模內(nèi)，做好樣本標(biāo)簽，將冷鑲嵌用透明的環(huán)氧樹脂和硬化劑(司特爾公司，哥本哈根，丹麥)按照5:1的比例調(diào)勻后，往每個(gè)鑲樣模內(nèi)注入3 4ml混合樹脂，將耳石包埋于其中。放入40°C 45°C的干燥箱中烘12小時(shí) 15小時(shí)至完全固化；(4)、取出鑲樣模內(nèi)包埋有耳石的固化樹脂塊，選用500目水砂紙對(duì)未磨過的光面耳石進(jìn)行粗磨，待粘在耳石上的雙面膠全部磨掉后換用1200目水砂紙進(jìn)行精磨，期間隨時(shí)在金相顯微鏡上觀察表面狀況，用透反射光確認(rèn)磨至核心后，將樹脂塊洗凈待用；(5)、使用金剛石拋光液和MD拋光布以120 150rpm的轉(zhuǎn)速在拋光機(jī)上(司特爾公司，哥本哈根，丹麥)拋光3 5分鐘至耳石表面無(wú)刮痕為止。將所有拋光的樹脂塊放入超純水(美國(guó)密理博公司，Milliprore-Simplicity個(gè)人型超純水系統(tǒng)，出水電阻率18. 2ΜΩ. cm)中進(jìn)行超聲清洗3 5分鐘后自然晾干24小時(shí)。4、棘頭梅童魚耳石樣本微區(qū)分析(I)、將耳石樣本置于JEE-420型真空鍍膜機(jī)(JEOL Ltd，Tokyo，Japan)中，在真空度達(dá)到含2x1 O^4Pa,電流達(dá)到35A 36A時(shí)，鍍碳薄膜20 25秒；(2)、從耳石核心順著最長(zhǎng)橫軸向邊緣用電子探針顯微分析儀(日本電子公司，東京，日本，簡(jiǎn)稱ΕΡΜΑ)進(jìn)行耳石樣本的定量線分析。在測(cè)Sr、Ca元素的濃度值之前先做機(jī)器狀態(tài)校驗(yàn)和標(biāo)準(zhǔn)分析，利用碳酸鈣(CaC03)、碳酸鍶(SrCO3)或鈦酸鍶(SrTiO3)等作為檢驗(yàn)定量測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。EPMA分析時(shí)的加速電壓參數(shù)為15KV，電子束電流為I. 2X 10_8 2.0X10_8A，速斑直徑為5μm，每點(diǎn)駐留時(shí)間為15秒，每間隔10 15 μ m測(cè)量下一點(diǎn)；(3)、由上述電子探針顯微分析儀沿耳石樣本矢狀面所獲各點(diǎn)定量線分析數(shù)據(jù)用Sr和Ca含量的比率值表示。每個(gè)測(cè)定點(diǎn)到耳石核心的距離被稱為“耳石徑”，統(tǒng)一使用鍶含量/鈣含量X IO3的比值表示，簡(jiǎn)稱Sr/C a比值。耳石不同區(qū)域Sr:Ca的含量比值數(shù)據(jù)用平均值土標(biāo)準(zhǔn)差。統(tǒng)計(jì)分析使用美國(guó)SAS公司的StatView 5. O軟件。差異的顯著水平判定用曼-惠特尼(Mann-Whitney)U測(cè)驗(yàn)進(jìn)行。根據(jù)Sr:C a含量比值的顯著性差異水平，區(qū)別棘頭梅童魚的產(chǎn)地和不同的生活史。本發(fā)明與已有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)洄游性魚類在不同的生活史階段棲息環(huán)境可能截然不同，而準(zhǔn)確了解這些魚類生活史過程中的生境變化非常困難，因?yàn)椴还苁莻鹘y(tǒng)的捕撈調(diào)查法，還是現(xiàn)在的生物遙測(cè)(biotelemetry)法均無(wú)法解決“多種類泛用”、“非負(fù)荷”、“全生活史監(jiān)測(cè)”這三大難題。本發(fā)明選用江蘇省長(zhǎng)江口相同采樣地不同年份和廣東省珠江口產(chǎn)棘頭梅童魚耳石作為判別對(duì)象，經(jīng)一系列標(biāo)準(zhǔn)化的前處理方法，獲得清晰的磨至核心的耳石樹脂塊再鍍上碳薄膜后，即可運(yùn)用大型精密分析儀器電子探針顯微分析儀(簡(jiǎn)稱EPMA)，利用碳酸鈣、碳酸鍶或鈦酸鍶作為定量分析的標(biāo)準(zhǔn)樣品，完成標(biāo)準(zhǔn)分析之后，即可精確地測(cè)定耳石中目標(biāo)元素Sr和Ca的濃度，根據(jù)Sr:Ca含量比值的顯著性差異水平，可較為快速地區(qū)分不同階段和不同水域棘頭梅童魚的洄游規(guī)律和生活史特征。該方法所取得的結(jié)果穩(wěn)定性好，可重復(fù)性高、系統(tǒng)誤差小，可判別性強(qiáng)，不僅克服了捕撈調(diào)查法、生物遙測(cè)法等方法無(wú)法判別的局限，而且具有快速檢測(cè)、精確判定的優(yōu)勢(shì)，可有效區(qū)別不同產(chǎn)地和不同生活史的棘頭梅童魚。


圖I為本發(fā)明珠江口十五涌水域棘頭梅童魚耳石樣本沿耳石矢狀面從核心(Oym)到邊緣定量線分析記錄到的Sr:C a含量比率變化。
圖2為本發(fā)明2010年夏季長(zhǎng)江口崇明水域棘頭梅童魚耳石樣本沿耳石矢狀面從核心(Ομπι)到邊緣定量線分析記錄到的Sr:Ca含量比率變化。圖3為本發(fā)明2010年春季長(zhǎng)江口崇明水域棘頭梅童魚耳石樣本沿耳石矢狀面從核心(Ομπι)到邊緣定量線分析記錄到的Sr:Ca含量比率變化。
具體實(shí)施例方式下面本發(fā)明將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步描述實(shí)施例一一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，采用以下工藝步驟(I) ,2011年11月采自珠江口十五涌水域棘頭梅童魚的樣本先放入清潔的塑料自封袋中并在O 4 C保存并盡快運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室；(2)、取體長(zhǎng)規(guī)格接近的樣本分類放于_20°C冰箱內(nèi)保存隨用。解凍后取體長(zhǎng)大于13厘米樣本的右側(cè)矢耳石，超純水洗清除耳石表面的有機(jī)質(zhì)并自然晾干24小時(shí)后作為分析的材料待用；(3)、用上海艾立熱熔膠棒廠產(chǎn)熱熔膠將其較平滑的面固定在載玻片上，等熱熔膠冷卻10分鐘變硬后先將耳石在500目水砂紙上進(jìn)行粗磨，并隨時(shí)在C2030B正置金相顯微鏡(上海精密儀器儀表有限公司)上用透反射光觀察表面狀況，待首次觀察到輪紋時(shí)換用1200目水砂紙細(xì)磨2分鐘使表面平滑，然后用酒精燈將熱熔膠熔化后取出耳石；(4)、將未磨過的光面耳石用雙面膠將其固定在鑲樣模(25mm直徑)內(nèi)，做好樣本標(biāo)簽，將將冷鑲嵌用透明的環(huán)氧樹脂和硬化劑(司特爾公司，哥本哈根，丹麥)按照5:1的比例調(diào)勻后，往每個(gè)鑲樣模內(nèi)注入3ml混合樹脂，將耳石包埋于其中。放入45°C的干燥箱中烘12小時(shí)至完全固化；(5)、取出鑲樣模內(nèi)包埋有耳石的固化樹脂塊，選用500目水砂紙對(duì)未磨過的光面耳石進(jìn)行粗磨，待粘在耳石上的雙面膠全部磨掉后換用1200目水砂紙進(jìn)行精磨，期間隨時(shí)在金相顯微鏡上觀察表面狀況，用透反射光確認(rèn)磨至核心后，將樹脂塊洗凈待用；(6)、使用金剛石拋光液和MD拋光布以150rpm的轉(zhuǎn)速在Roto Pol_35型(司特爾公司，哥本哈根，丹麥)拋光機(jī)上拋光3分鐘至耳石表面無(wú)刮痕為止。將所有拋光的樹脂塊放入超純水(美國(guó)密理博公司，Milliprore-Simplicity個(gè)人型超純水系統(tǒng)，出水電阻率18. 2ΜΩ. cm)中進(jìn)行超聲清洗5分鐘后自然晾干24小時(shí)；(7)、將耳石樣本置于JEE-420型真空鍍膜機(jī)(JEOL Ltd，Tokyo，Japan)中，在真空度達(dá)到蘭2x1 O^4Pa,電流達(dá)到35A時(shí)，鍍碳薄膜20秒；(8)、從耳石核心順著最長(zhǎng)橫軸向邊緣用電子探針顯微分析儀JXA-8100型(日本電子公司，東京，日本)進(jìn)行耳石樣本的定量線分析。在測(cè)Sr、Ca元素的濃度值之前先做機(jī)器狀態(tài)校驗(yàn)和標(biāo)準(zhǔn)分析，利用碳酸鈣(CaCO3)和鈦酸鍶(SrTiO3)作為檢驗(yàn)定量測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。EPMA分析時(shí)的加速電壓參數(shù)為15KV，電子束電流范圍為2. OX 10_8A，速斑直徑為5 μ m，每點(diǎn)駐留時(shí)間為15秒，每間隔10 μ m測(cè)量下一點(diǎn)；將上述電子探針顯微分析儀沿耳石標(biāo)本矢狀面所獲各點(diǎn)定量線分析數(shù)據(jù)整理成圖I、表I和表3，標(biāo)本號(hào)為GZCL1、GZCL4、GZCL5和GZCL6。由圖I可知珠江口水域棘頭梅 童魚耳石絕大部分Sr :CaX IO3的比值在3_7之間窄幅波動(dòng)，核心區(qū)沒有出現(xiàn)驟降現(xiàn)象，生活史階段劃分不明顯；表1顯示耳石核心(Oym)到邊緣定量線分析Sr:Ca含量比率的平均值，雖然個(gè)體之間的洄游方式略有差異，即平均值有高有低，但并未出現(xiàn)長(zhǎng)江崇明口水域棘頭梅童魚耳石兩階段鍶(Sr):鈣(Ca) X IO3值的現(xiàn)象；表3的曼-惠特尼U測(cè)驗(yàn)表面廣州珠江口十五涌水域棘頭梅童魚耳石的鍶(Sr):鈣(Ca) X IO3值與長(zhǎng)江口崇明水域的差異水平極其顯著。因此利用本發(fā)明所獲得數(shù)據(jù)可以較客觀地區(qū)別不同產(chǎn)地的棘頭梅童魚群體和其生活史階段劃分，判別效果良好。實(shí)施例二 一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，采用以下工藝步驟(I)、2010年夏季采自長(zhǎng)江口崇明水域棘頭梅童魚的樣本先放入清潔的塑料自封袋中并在O 4°C保存并盡快運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室；(2) (8)同實(shí)施例一樣本前處理及測(cè)試步驟，因耳石較大，每間隔15 μ m測(cè)量下一點(diǎn)。將上述分析數(shù)據(jù)整理成圖2、表2和表3，樣本號(hào)為SCLl和SCL2。由圖2可知長(zhǎng)江口崇明水域夏季棘頭梅童魚耳石明顯可分為2個(gè)階段，即耳石核心部的Sr:CaX IO3比均很高，之后直到捕獲，SriCaXlO3的比值絕大部分在3_7之間窄幅波動(dòng)，在孵化階段轉(zhuǎn)向發(fā)育和生長(zhǎng)階段時(shí)，SriCaXlO3的比值出現(xiàn)驟降現(xiàn)象，群體的生活史階段劃分明顯，個(gè)體之間的洄游方式大致相同；表2亦顯示耳石核心(Ομπι)到邊緣定量線分析Sr:Ca含量比率的值出現(xiàn)兩階段現(xiàn)象；表3的曼-惠特尼U測(cè)驗(yàn)表明夏季長(zhǎng)江口崇明水域棘頭梅童魚耳石鍶(Sr):鈣(Ca) X IO3值與廣州珠江口十五涌水域的差異水平極其顯著。同樣證明了利用本發(fā)明所獲得數(shù)據(jù)可以較客觀地區(qū)別不同產(chǎn)地的棘頭梅童魚群體和其生活史階段劃分，判別效果良好。實(shí)施例三本發(fā)明一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，采用以下工藝步驟(I)、2010年春季采自長(zhǎng)江口崇明水域棘頭梅童魚的樣本先放入清潔的塑料自封袋中并在O 4°C保存并盡快運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室；(2) (8)同實(shí)施例二樣本前處理及測(cè)試步驟。將上述分析數(shù)據(jù)整理成圖3、表2和表3，樣本號(hào)為CL2、CL3、CL4和C L10。由圖3可知長(zhǎng)江口崇明水域春季棘頭梅童魚耳石明顯可分為2個(gè)階段，即耳石核心部的Sr:CaX IO3比均很高，之后直到捕獲，Sr = CaXlO3的比值絕大部分在3_7之間窄幅波動(dòng)，在孵化階段轉(zhuǎn)向發(fā)育和生長(zhǎng)階段時(shí)，SriCaXlO3的比值出現(xiàn)驟降現(xiàn)象，群體的生活史階段劃分明顯，個(gè)體之間的洄游方式大致相同；表2亦顯示耳石核心(Ομπι)到邊緣定量線分析Sr:Ca含量比率的值出現(xiàn)兩階段現(xiàn)象；表3的曼-惠特尼U測(cè)驗(yàn)表明春季長(zhǎng)江口崇明水域棘頭梅童魚耳石鍶(Sr):鈣(Ca) X IO3值與廣州珠江口十五涌水域的差異水平極其顯著。同樣證明了利用本發(fā)明所獲得數(shù)據(jù)可以較客觀地區(qū)別不同產(chǎn)地的棘頭梅童魚群體和其生活史階段劃分，判別效果良好。表I廣州珠江口十五涌水域棘頭梅童魚耳石的鍶(Sr):鈣(Ca) X IO3值
權(quán)利要求
1.一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，其特征是采用以下工藝步驟 (1)、野外采集不同水域的棘頭梅童魚樣本先放入清潔的塑料自封袋中，并在O 4°C保存，在此溫度條件下盡快運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室保存； (2)、野外采集并運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室保存的棘頭梅童魚，取體長(zhǎng)規(guī)格接近的樣本轉(zhuǎn)移于-18 _20°C冰箱內(nèi)保存，待用； (3)、棘頭梅童魚耳石樣本前處理方法 (3-1)、取出樣本左或右側(cè)矢耳石解凍后，經(jīng)超純水清除表面的有機(jī)質(zhì)，清洗干凈后，室溫下晾干、干燥保存作為分析的材料待用； (3-2)、取含聚氨酯膠成分>25%的熱熔膠將耳石平滑的面固定在載玻片上，等熱熔膠冷卻10 15分鐘變硬后，先將耳石在500目水砂紙上進(jìn)行粗磨，并隨時(shí)在正置金相顯微鏡上用透反射光觀察表面狀況，待首次觀察到輪紋時(shí)換用1200目水砂紙細(xì)磨2 5分鐘使表面平滑，然后用酒精燈將熱熔膠熔化后取出耳石； (3-3)、將未磨過的光面耳石用雙面膠將其固定在鑲樣模內(nèi)，做好樣本標(biāo)簽，將冷鑲嵌用透明的環(huán)氧樹脂和硬化劑的質(zhì)量比為5:1的比例調(diào)勻后，往每個(gè)鑲樣模內(nèi)注入3 4 ml混合樹脂溶液，將耳石包埋于其中；放入40°C 45°C的干燥箱中烘12小時(shí) 15小時(shí)至完全固化； (3-4)、取出鑲樣模內(nèi)包埋有耳石的固化樹脂塊，選用500目水砂紙對(duì)未磨過的光面耳石進(jìn)行粗磨，待粘在耳石上的雙面膠全部磨掉后換用1200目水砂紙進(jìn)行精磨，期間隨時(shí)在金相顯微鏡上觀察表面狀況，用透反射光確認(rèn)磨至 核心后，將樹脂塊洗凈待用； (3-5)、使用金剛石拋光液和MD拋光布以120 150rpm的轉(zhuǎn)速在拋光機(jī)上拋光3 5分鐘至耳石表面無(wú)刮痕為止；將所有拋光的樹脂塊放入超純水環(huán)境中進(jìn)行超聲清洗3 5分鐘后，自然晾干24小時(shí)為耳石樣本； (4)、棘頭梅童魚耳石樣本微區(qū)分析 (4-1)、將耳石樣本置于真空鍍膜機(jī)中，在真空度達(dá)到=2x1 O^4Pa,電流達(dá)到35A 36A時(shí)，鍍碳薄膜20 25秒； (4-2)、從耳石樣本核心順著最長(zhǎng)橫軸向邊緣用電子探針顯微分析儀進(jìn)行耳石樣本的定量線EPMA分析；在測(cè)Sr、Ca元素的濃度值之前先做機(jī)器狀態(tài)校驗(yàn)和標(biāo)準(zhǔn)分析，利用碳酸鈣、碳酸鍶或鈦酸鍶作為檢驗(yàn)定量測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)； (4-3)、由上述電子探針顯微分析儀沿耳石樣本矢狀面所獲各點(diǎn)定量線分析數(shù)據(jù)用Sr和Ca含量的比率值表示；每個(gè)測(cè)定點(diǎn)到耳石核心的距離被稱為耳石徑，統(tǒng)一使用鍶含量/鈣含量X IO3的比值表示，簡(jiǎn)稱Sr/Ca比值；耳石不同區(qū)域Sr: Ca的含量比值數(shù)據(jù)用平均值土標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；差異的顯著水平判定用曼-惠特尼U測(cè)驗(yàn)進(jìn)行；根據(jù)Sr: Ca含量比值的顯著性差異水平，區(qū)別棘頭梅童魚的產(chǎn)地和不同的生活史。
2.如權(quán)利要求I所述的一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，其特征是所述步驟(3)中鑲樣模直徑為25mm。
3.如權(quán)利要求I所述的一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，其特征是所述步驟(3)中超純水系統(tǒng)出水電阻率18. 2ΜΩ. cm。
4.如權(quán)利要求I所述的一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，其特征是所述步驟(4)中EPMA分析時(shí)的加速電壓參數(shù)為15KV，電子束電流為I. 2X 10_8 2. OX 10_8Α，速斑 直徑為5 μ m,每點(diǎn)駐留時(shí)間為15秒，每間隔10 15 Mm測(cè)量下一點(diǎn)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種判別棘頭梅童魚產(chǎn)地和生活史的方法，特征是取樣本分類放于冰箱內(nèi)保存待用；標(biāo)本解凍后取左或右側(cè)矢耳石用水清除耳石表面的有機(jī)質(zhì)并自然晾干；先用熱熔膠固定耳石，再用混合樹脂調(diào)勻后包埋耳石，雙面磨制耳石；用透反射光確認(rèn)磨至核心后，經(jīng)拋光、清洗、鍍碳薄膜后方可用X射線電子探針微區(qū)分析儀進(jìn)行耳石樣品的定量線分析；以及分析時(shí)確定的各狀態(tài)參數(shù)都保證了所取得的結(jié)果穩(wěn)定性好，可重復(fù)性高、系統(tǒng)誤差小，可判別性強(qiáng)，克服了目視、遺傳學(xué)等方法無(wú)法判別的局限，亦可有效區(qū)別不同產(chǎn)地的棘頭梅童魚群體和其生活史階段劃分。該方法同樣為了解其它洄游魚類的生活史規(guī)律提供了便利。
文檔編號(hào)A01K61/00GK102792912SQ201210330300
公開日2012年11月28日 申請(qǐng)日期2012年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月7日
發(fā)明者楊健, 劉洪波, 姜濤 申請(qǐng)人:中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心