專利名稱：一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物細胞工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種棕櫚科植物的資源離體保存方法，尤其是一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法。
背景技術(shù)：
檳榔(Areca catechu L.)屬棕櫚科檳榔屬植物,是我國熱帶地區(qū)主要的經(jīng)濟作物及熱帶園林綠化樹種，也是我國重要的南藥資源之一，被列為四大南藥之首，具有很高的經(jīng)濟價值。在亞州及太平洋地區(qū)，檳榔果主要用作當(dāng)?shù)厝罕姷木捉朗群闷?，檳榔栽培已逐漸向商品化、規(guī)?；l(fā)展。檳榔在我國主要分布在海南省，總產(chǎn)量占大陸檳榔產(chǎn)量的99%以 上。目前在海南的種植面積已達103萬畝，產(chǎn)量達14. 36萬噸，鮮果年產(chǎn)值20億元以上，力口工產(chǎn)值達50 60億元，是海南東部、中部和南部地區(qū)近200萬農(nóng)民主要的經(jīng)濟來源。組織培養(yǎng)是植物快速繁殖最有效的方法，胚培養(yǎng)作為種質(zhì)資源保存繁殖的重要手段已被廣泛應(yīng)用，利用胚培養(yǎng)獲得的胚培苗不僅運輸成本低，還可避免在種質(zhì)交換過程中的病蟲害傳播，利用胚或胚培苗作為種質(zhì)保存可以解決大田保存占地面積大、費用高等問題。檳榔為單桿棕櫚科植物，常規(guī)的營養(yǎng)繁殖方法如扦插、嫁接、高空壓條等不適用于檳榔繁殖，而主要靠種子繁殖，但該方法容易傳播病蟲害。至目前為止，在國內(nèi)外檳榔組織培養(yǎng)雖有報道，但尚未建立較為完善的培養(yǎng)體系，檳榔組織培養(yǎng)快繁技術(shù)研究還處于起步階段。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法，通過在保存培養(yǎng)基中提高糖用量可很好地延緩植株的生長速度，有利于國內(nèi)外種質(zhì)資源的交換，避免在種質(zhì)交換過程中發(fā)生病蟲害傳播，同時還可解決大田保存占地面積大、費用高等問題,為離體快繁技術(shù)提供理論支撐，對檳榔種質(zhì)資源收集保存以及種苗的工廠化生產(chǎn)提供一條有效途徑。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法，其步驟如下I、選取15年樹齡以上的種質(zhì)資源結(jié)果樹，采集7 8個月的檳榔種果，切除大部分果皮和胚乳，留取包裹著完整胚的胚乳塊；將胚乳塊洗凈后消毒，置于滅菌濾紙上吸干水分，然后取出胚。2、將胚置于預(yù)培養(yǎng)基中培養(yǎng)40 50天，待胚萌發(fā)形成芽和莖，生根培養(yǎng)形成完整植株，在植株生長至I. 5 2cm高度時即進行離體保存。所述預(yù)培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加AC lg/L、蔗糖50 g/L。3、將檳榔I. 5 2cm高的植株轉(zhuǎn)接入保存培養(yǎng)基中保存培養(yǎng)，即可實現(xiàn)檳榔種質(zhì)資源離體保存。所述保存培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加BA 2mg/L、NAAO. 5mg/L、鹿糖 120g/L、AC lg/L、瓊脂 8g/L。
本發(fā)明エ藝簡單，通過在保存培養(yǎng)基中提高糖用量可很好地延緩檳榔植株的生長速度，其生長期比未使用保存培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)接培養(yǎng)長6 8個月，有利于種質(zhì)資源的保存，有利于國內(nèi)外種質(zhì)資源的交換，避免在種質(zhì)交換過程中發(fā)生病蟲害傳播，同時還可解決大田保存占地面積大、費用高等問題，為離體快繁技術(shù)提供理論支撐，對檳榔種質(zhì)資源收集保存以及種苗的エ廠化生產(chǎn)提供一條有效途徑。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明的具體實施方式
作進ー步詳細描述。以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實施例一I、胚的獲得及預(yù)培養(yǎng)選取15年樹齡以上的種質(zhì)資源結(jié)果樹進行跟蹤調(diào)查，確定目標(biāo)株后從雌花受粉 后開始到果實7-8個月時及時采收(檳榔胚的成熟度影響胚的萌發(fā)率，胚成熟度高則出苗率也高，檳榔種果一般成熟時間為12個月，但12個月的檳榔種果不利于種胚的獲取，由于在成熟時胚乳堅硬如石，不易取胚，一般在7-8個月時種胚容易獲取且易培養(yǎng))。收集后先把種果用流水沖洗，切除果皮后留有包被著胚的胚乳塊，大小約為2X2cm，留含胚的胚乳塊經(jīng)自來水洗凈后，再用70%的酒精表面消毒30S，再以O(shè). 1%的升汞溶液消毒8min，最后用無菌水沖洗3 5次。將洗凈的胚乳塊置滅菌濾紙上吸干水分，用解剖刀取出嫩種胚置于預(yù)培養(yǎng)基中培養(yǎng)40 50天，待胚萌發(fā)形成芽和莖，生根培養(yǎng)形成完整植株，在植株生長至I. 5 2cm高度時即進行離體保存，(先消毒再取胚可防止滅菌液直接接觸胚對胚體造成傷害，影響后期胚萌發(fā)及生長發(fā)育)。預(yù)培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加AC lg/L、鹿糖50 g/Lo2、保存培養(yǎng)2. I、保存培養(yǎng)基的設(shè)計首先采用三種可能延緩生長的方式降低溫度培養(yǎng)、添加矮壯素、提聞糖濃度水平；在初次的實驗中，通過對根、芽及莖基部等生長指標(biāo)的測定，確定其保存期，結(jié)果將表I。研究結(jié)果表明，提高糖濃度水平可明顯延緩檳榔胚苗的生長。表I不同處理方法對檳榔資源的保存影響
權(quán)利要求
1.一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法，其特征在于，其步驟如下 I )、選取15年樹齡以上的種質(zhì)資源結(jié)果樹，采集7 8個月的檳榔種果，切除大部分果皮和胚乳，留取包裹著完整胚的胚乳塊；將胚乳塊洗凈后消毒，置于滅菌濾紙上吸干水分，然后取出胚； 2)、將胚置于預(yù)培養(yǎng)基中培養(yǎng)40 50天，待胚萌發(fā)形成芽和莖，生根培養(yǎng)形成完整植株，在植株生長至I. 5 2cm高度時即進行離體保存；所述預(yù)培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加AC lg/L、蔗糖50 g/L ； 3)、將檳榔1.5 2cm高的植株轉(zhuǎn)接入保存培養(yǎng)基中保存培養(yǎng)，即可實現(xiàn)檳榔種質(zhì)資源離體保存；所述保存培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加BA 2mg/L、NAA0.5mg/L、鹿糖 120g/L、AC lg/L、瓊脂 8g/L。全文摘要
本發(fā)明屬于植物細胞工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法，是選取15年樹齡以上的種質(zhì)資源結(jié)果樹的檳榔種果，取出胚置于預(yù)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待胚萌發(fā)成完整植株，在植株生長至1.5～2cm高度時轉(zhuǎn)接入保存培養(yǎng)基中保存培養(yǎng)，即可實現(xiàn)檳榔種質(zhì)資源離體保存。本發(fā)明工藝簡單，可操作性強，通過在保存培養(yǎng)基中提高糖用量可很好地延緩檳榔植株的生長速度，有利于種質(zhì)資源的保存，有利于國內(nèi)外種質(zhì)資源的交換，避免在種質(zhì)交換過程中發(fā)生病蟲害傳播，同時還可解決大田保存占地面積大、費用高等問題，為離體快繁技術(shù)提供理論支撐，對檳榔種質(zhì)資源收集保存以及種苗的工廠化生產(chǎn)提供一條有效途徑。
文檔編號A01H4/00GK102726293SQ201210213429
公開日2012年10月17日 申請日期2012年6月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月27日
發(fā)明者劉立云, 周煥起, 李 杰, 范海闊, 黃麗云 申請人:中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所