專利名稱：抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種水稻新品種的選育方法，特別是一種抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法。
背景技術：
中國的糯稻市場發(fā)展較成熟，較為集中，主要分布于安徽沿淮一帶與湖北部分地區(qū)。其中安徽市場糯稻種子用量每年800萬公斤以上，所用品種較為單一，老化。糯稻市場時常緊俏，以次充好，商品糯稻當種子事故時有發(fā)生，另外糯稻品種容易混雜退化，加劇了假劣糯稻種子的危害。另外糯稻在集中種植區(qū)已大部分直播，草害抬頭，目前水稻直播田無特效除草劑，常用除草劑二氯喹膦酸存在殘留，連續(xù)使用存在明顯藥害?，F(xiàn)有技術中的水稻品種選育方法主要有
1、隱性基因回交轉育方法，遺傳學中經典方法是隔代回交法，但轉育速度慢，育種周期長。2、水稻糯性品種一般由粘型與糯型品種雜交，用系譜選擇法育種，此法需要群體大，后代穩(wěn)定慢，育種周期長。3、分子標記選擇法可以實現(xiàn)快速回交轉育，但實驗室條件要求高，且成本高、檢測時間長。4、糯稻品種直播技術，無論是旱直播還是水直播，均存在草害難題。5、糯稻品種保純技術，傳統(tǒng)的方法是株系法，后來發(fā)展到株系循環(huán)法，但均存在糯稻品種易混雜問題，特別是大田用種不純時，商品糧價值低。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種新的、方法更為合理、可操作性強的抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法。本發(fā)明所要解決的技術問題是通過以下的技術方案來實現(xiàn)的。本發(fā)明是一種抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法，其特點是將水稻中抗草銨膦基因(以下簡稱Bar基因) 與水稻糯質基因(以下簡稱wx基因)通過雜交選育的方法融合，選育抗除草劑草銨膦常規(guī)糯稻品種；以抗草銨膦的糯稻品種為親本再與普通水稻品種雜交或回交，選育新的抗草銨膦的糯稻品種。本發(fā)明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現(xiàn)以上所述的抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法，其特點是，其具體步驟如下
(1)選擇一優(yōu)秀糯型品種，作為輪回親本，選擇抗草銨膦的品系作抗草銨膦基因Bar基因的供體親本；輪回親本作母本與供體親本雜交，收獲雜種一代種子F1,同時收獲輪回親本種子；
(2)種植雜種一代與輪回親本種子；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；以輪回親本為母本，與雜種一代抗性株雜交，收獲回交一代BC1 F1與輪回親本種子；
(3)種植回交一代BC1F1與輪回親本種子；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200 克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；選擇抗性株為父本與輪回親本再雜交，收獲回交二代雜種BC2 F1與輪回親本種子；
(4)種植回交二代雜種BC2F1與輪回親本種子?；亟欢s種在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株。選擇抗性株為父本與輪回親本再雜交，收獲回交三代雜種BC3 F1與輪回親本種子，如此重復操作，直到收獲回交η代雜種，同時收獲回交η代雜種BCn F1與輪回親本；η取值依回交目的及回交后代與輪回親本相似程度決定；
(5)種植回交η代雜種BCnF1與輪回親本；回交η代雜種在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株， 三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；選擇極似輪回親本抗性單株，按株單收成回交η代雜種二代(BCn F2)種子；
(6)種植BCnF2各株系；回交η代F2在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測無Bar基因株與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株，抗性株單收建抗性株系；重復本步驟中的Bar基因檢測程序，選擇抗性不分離的抗性株系，分系與輪回親本進行小區(qū)對比，經系統(tǒng)鑒定，決選優(yōu)系，推薦參加品種比較試驗或作抗草銨膦新糯稻品種選育的核心親本。本發(fā)明方法與現(xiàn)有技術相比，具有更小的育種群體，更快的育種進度，育成的品系可以直接在主要推廣區(qū)應用。所育成品種系可以作為進一步選育新的抗草銨膦糯稻品種的基礎材料，也可以作為抗草銨膦糯稻恢復系的選育的供體材料。上述方法實現(xiàn)了常規(guī)品種的選育，但抗草銨膦雜交糯稻的選育較為復雜?？共蒌@膦糯稻雜交種選育要求不育系為糯質，恢復系也為糯質，且抗草銨膦?；謴拖档倪x育應用抗草銨膦糯稻常規(guī)品種作抗草銨基因及糯質基因的供體，應用生產上優(yōu)異的恢復系作受體，進行回交轉育。回交轉育成果可以用來進一步選育新的抗草銨膦恢復系。本發(fā)明還提供了抗草銨膦糯稻恢復系回交轉育方法，其具體步驟如下
(1)選擇一種配合力優(yōu)良，綜合農藝性狀優(yōu)良的三系或兩系恢復系作輪回親本，始終作母本，以攜帶Bar基因的同亞種糯性材料為供體材料，雜交獲得雜種Fl ；
(2)種植雜交種Fl與輪回親本；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；以輪回親本為母本，與雜種一代抗性株雜交，收獲回交一代BC1 F1與輪回親本種子；
(3)種植回交一代種BC1F1與輪回親本；BC1 F1在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/ 升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株。以0. 2克碘I2與2克碘化鉀KI，加IOOml蒸餾水，完全溶解，配成花粉染色液；選擇回交一代群體中長相似輪回親本的抗性單株10株，取剛出穗1/2-1/3的穗，帶回室內鏡檢；每穗取上中下各2朵穎花，取出其中花藥，置載玻片上，加花粉染色液一滴，搗破花藥，制片置100倍放大倍數(shù)的顯微鏡下檢查；當視野中花粉染色明顯呈深淺分離時，則說明該單株為糯性基因雜合型，以輪回親本為母本，與回交一代有抗性且含有糯質基因株雜交，收獲回交一代BC2 F1與輪回親本種子；
(4)種植回交二代種BC2F1與輪回親本；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，以輪回親本為母本，與回交二代有抗性且含有糯質基因株雜交，收獲回交三代BC3 F1與輪回親本種子；如此重復操作，直到回交η代，同時收獲回交η代雜種BCn F1與輪回親本，η 取值決定于回交目的及回交后代與輪回親本的相似程度；
(5)種植回交η代雜種BCnF1與輪回親本；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，選擇含有糯質基因的抗性株，分株收獲成回交η代BCn F2各株系；
(6)種植BCnF2各株系；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，糯質抗性株單收建抗性株系。再采用步驟(3)中Bar基因檢測程序，選擇抗性不分離的抗性株系，分系與輪回親本進行小區(qū)對比，經系統(tǒng)鑒定，決選優(yōu)系，用于配制抗草銨膦除草劑的雜交糯稻或作抗草銨膦新糯稻恢復系選育的核心親本。抗草銨膦糯稻恢復系選育完成后，可與糯稻不育系進行配組，可以實現(xiàn)抗草銨膦糯稻雜交種選育的不育系、恢復系配套。本發(fā)明方法具有以下優(yōu)點與效果
1、育種速度加快可以利用海南島冬季加代的條件，實現(xiàn)一年多季回交，粳型品種一年可以種植三季，若有人工控光條件，可以實現(xiàn)一年四季回交，所以本方法最大的優(yōu)點是快速。一般3-4年就能定型優(yōu)良恢復系的抗草銨膦糯型等基因系，可以較快的實現(xiàn)抗草銨膦糯稻品種的應用。2、育成品種容易應用本法選育雜交糯稻品種或抗草銨膦雜交糯稻品種均以輪回親本細胞核為主要遺傳背景，只要輪回親本是高產、綜合性狀好的品種，目標品種就能選育成功。3、實施成本低本方法不用分子標記檢測，可以省略分子遺傳實驗室與其相關技術人員，只要配備顯微鏡及相關配套儀器與藥劑，操作簡單，成本低，檢測速度快，準確，且可以防止基因沉默現(xiàn)象中斷育種過程。4、目標市場明確可以針對目標市場中的適應品種進行定向改良，育種目標明確， 可操作性強，育成品種可以快速推廣。5、抗草銨膦糯稻品種的育成，可以減輕直播造成的草害，簡化治草環(huán)節(jié)，同時可有效防止品種混雜對糯稻商品糧商品性的影響，在一定程度上減輕了不法種子經營的危害。


圖1為抗草銨膦糯稻常規(guī)種回交育種程序圖2為抗草銨膦糯稻恢復系的回交育種程序圖，以上圖中BCnFm表示第η次回交雜種m代。
具體實施例方式以下參照附圖，進一步描述本發(fā)明的具體技術方案，以便于本領域的技術人員進一步地理解本發(fā)明，而不構成對其權利的限制。實施例1，一種抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法將水稻中抗草銨膦基因即 Bar基因與水稻糯質基因即wx基因通過雜交選育的方法融合，選育抗除草劑草銨膦糯稻品種；以選育的抗草銨膦的糯稻品種為親本再與普通水稻品種雜交或回交，選育新的抗草銨膦的糯稻品種。實施例2，參照圖1，實施例1所述的抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法，其具體步驟如下
(1)選擇一優(yōu)秀糯型品種，作為輪回親本，選擇抗草銨膦的品系作抗草銨膦基因Bar基因的供體親本；輪回親本作母本與供體親本雜交，收獲雜種一代種子F1，同時收獲輪回親本種子；
(2)種植雜種一代與輪回親本種子；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；以輪回親本為母本，與雜種一代抗性株雜交，收獲回交一代BC1 F1與輪回親本種子；
(3)種植回交一代BC1F1與輪回親本種子；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200 克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；選擇抗性株為父本與輪回親本再雜交，收獲回交二代雜種BC2 F1與輪回親本種子；
(4)種植回交二代雜種BC2F1與輪回親本種子；回交二代雜種在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；選擇抗性株為父本與輪回親本再雜交，收獲回交三代雜種BC3 F1與輪回親本種子，如此重復操作，直到收獲回交η代雜種，同時收獲回交η代雜種BCn F1與輪回親本；η取值依回交目的及回交后代與輪回親本相似程度決定；
(5)種植回交η代雜種BCnF1與輪回親本；回交η代雜種在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株， 三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；選擇極似輪回親本抗性單株，按株單收成回交η代雜種二代BCn F2種子;
(6)種植BCnF2各株系；回交η代F2在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測無Bar基因株與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株，抗性株單收建抗性株系；重復本步驟中的Bar基因檢測程序，選擇抗性不分離的抗性株系，分系與輪回親本進行小區(qū)對比，經系統(tǒng)鑒定，決選優(yōu)系，推薦參加品種比較試驗或作抗草銨膦新糯稻品種選育的核心親本。實施例3，參照圖2，實施例所述的抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法，其具體步驟如下
(1)選擇一種配合力優(yōu)良，綜合農藝性狀優(yōu)良的三系或兩系恢復系作輪回親本，始終作母本，以攜帶Bar基因的同亞種糯性材料為供體材料，雜交獲得雜種Fl ；
(2)種植雜交種Fl與輪回親本；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；以輪回親本為母本，與雜種一代抗性株雜交，收獲回交一代BC1 F1與輪回親本種子；
(3)種植回交一代種BC1F1與輪回親本；BC1 F1在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/ 升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株。以0. 2克碘I2與2克碘化鉀KI，加IOOml蒸餾水，完全溶解，配成花粉染色液；選擇回交一代群體中長相似輪回親本的抗性單株10株，取剛出穗1/2-1/3的穗，帶回室內鏡檢；每穗取上中下各2朵穎花，取出其中花藥，置載玻片上，加花粉染色液一滴，搗破花藥，制片置100倍放大倍數(shù)的顯微鏡下檢查；當視野中花粉染色明顯呈深淺分離時，則說明該單株為糯性基因雜合型，以輪回親本為母本，與回交一代有抗性且含有糯質基因株雜交，收獲回交一代BC2 F1與輪回親本種子；
(4)種植回交二代種BC2F1與輪回親本；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，以輪回親本為母本，與回交二代有抗性且含有糯質基因株雜交，收獲回交三代BC3 F1與輪回親本種子；如此重復操作，直到回交η代，同時收獲回交η代雜種BCn F1與輪回親本，η 取值決定于回交目的及回交后代與輪回親本的相似程度；
(5)種植回交η代雜種BCnF1與輪回親本；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，選擇含有糯質基因的抗性株，分株收獲成回交η代BCn F2各株系；
(6)種植BCnF2各株系；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，糯質抗性株單收建抗性株系；再采用步驟(3)中Bar基因檢測程序，選擇抗性不分離的抗性株系，分系與輪回親本進行小區(qū)對比，經系統(tǒng)鑒定，決選優(yōu)系，用于配制抗草銨膦除草劑的雜交糯稻或作抗草銨膦新糯稻恢復系選育的核心親本。實施例4，實施例3所述的抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法中選擇應用糯稻三系或兩系不育系與抗草銨膦糯稻恢復系，配制雜交組合。實施例5，參照圖1，回交選育抗滅生性除草劑常規(guī)糯稻品種方法實驗，其步驟如下
(1)選擇一優(yōu)秀糯型品種揚輻糯4號，作輪回親本，選擇抗草作抗草銨膦基因Bar基因的供體親本；揚輻糯4號作母本與供體親本雜交，收獲雜種一代種子F1,同時收獲揚輻糯4 號種子；
(2)種植雜種一代與揚輻糯4號種子。雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/ 升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株， 其余為抗性株。以揚輻糯4號為母本，與雜種一代抗性株雜交，收獲回交一代BC1 F1與揚輻糯4號種子；
(3)種植回交一代BC1&與揚輻糯4號種子。雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的 200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株。選擇抗性株為父本與揚輻糯4號再雜交，收獲回交二代雜種BC2 F1與揚輻糯4號種子；
(4)種植回交二代雜種BC2F1與揚輻糯4號種子?；亟欢s種在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株。選擇抗性株為父本與揚輻糯4號再雜交，收獲回交三代雜種BC3 F1與揚輻糯4號種子，如此重復操作，直到收獲回交η代雜種，同時收獲回交六代雜種BCn F1與揚輻糯4號。η取值依回交目的及回交后代與揚輻糯4號相似程度決定；
(5)種植回交η代雜種BCn&與揚輻糯4號?；亟沪谴s種在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株。選擇極似揚輻糯4號抗性單株，按株單收成回交η代雜種二代(BCn F2)種子；
(6)種植BCnF2各株系?；亟沪谴鶩2在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測無Bar基因株與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株，抗性株單收建抗性株系。重復本步驟中的Bar基因檢測程序，選擇抗性不分離的抗性株系，分系與揚輻糯4號進行小區(qū)對比，經系統(tǒng)鑒定，決選優(yōu)系，對推薦參加品種比較試驗或作抗草銨膦新糯稻品種選育的核心親本。 實施例6，參考圖2，抗滅生性除草劑雜交糯稻恢復系育種方法實驗，其步驟如下
(1)選擇一種配合力優(yōu)良，綜合農藝性狀優(yōu)良的恢復系9311作輪回親本，始終作母本， 以抗滅生性除草劑品系Bar揚輻糯4號為供體材料，雜交獲得雜種Fl ；
(2)種植雜交種Fl與9311；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株。以9311為母本，與雜種一代抗性株雜交，收獲回交一代BC1 F1與9311種子；
(3)種植回交一代種BC1F1與9311 ^C1 F1在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株。以0. 2克碘I2與2克碘化鉀KI，加IOOml蒸餾水，完全溶解，配成花粉染色液；選擇回交一代群體中長相似9311的抗性單株10株，取剛出穗 1/2-1/3的穗，帶回室內鏡檢；每穗取上中下各2朵穎花，取出其中花藥，置載玻片上，加花粉染色液一滴，搗破花藥，制片置100倍放大倍數(shù)的顯微鏡下檢查；當視野中花粉染色明顯呈深淺分離時，則說明該單株為糯性基因雜合型，以9311為母本，與回交一代有抗性且含有糯質基因株雜交，收獲回交一代BC2 F1與9311種子；
(4)種植回交二代種BC2F1與9311 ；采用步驟3中Bar基因與糯質基因檢測程序，以 9311為母本，與回交二代有抗性且含有糯質基因株雜交，收獲回交三代BC3 &與9311種子； 如此重復操作，直到回交η代，同時收獲回交η代雜種BCn F1與9311，η取值決定于回交目的及回交后代與9311的相似程度；
(5)種植回交η代雜種BCnF1與9311 ；采用步驟3中Bar基因與糯質基因檢測程序，選擇含有糯質基因的抗性株，分株收獲成回交η代BCn F2各株系
第六步種植BCn F2各株系；采用步驟3中Bar基因與糯質基因檢測程序，糯質抗性株單收建抗性株系。再采用步驟3中Bar基因檢測程序，選擇抗性不分離的抗性株系，分系與 9311進行小區(qū)對比，經系統(tǒng)鑒定，決選優(yōu)系，用于配制抗草銨膦除草劑的雜交糯稻或作抗草銨膦新糯稻恢復系選育的核心親本。
權利要求
1.一種抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法，其特征在于將水稻中抗草銨膦基因即 Bar基因與水稻糯質基因即wx基因通過雜交選育的方法融合，選育抗除草劑草銨膦糯稻品種；以選育的抗草銨膦的糯稻品種為親本再與普通水稻品種雜交或回交，選育新的抗草銨膦的糯稻品種。
2.根據(jù)權利要求1所述的抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法，其特征在于，其具體步驟如下(1)選擇一優(yōu)秀糯型品種，作為輪回親本，選擇抗草銨膦的品系作抗草銨膦基因Bar基因的供體親本；輪回親本作母本與供體親本雜交，收獲雜種一代種子F1，同時收獲輪回親本種子；(2)種植雜種一代與輪回親本種子；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；以輪回親本為母本，與雜種一代抗性株雜交，收獲回交一代BC1 F1與輪回親本種子；(3)種植回交一代BC1F1與輪回親本種子；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200 克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；選擇抗性株為父本與輪回親本再雜交，收獲回交二代雜種BC2 F1與輪回親本種子；(4)種植回交二代雜種BC2F1與輪回親本種子；回交二代雜種在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；選擇抗性株為父本與輪回親本再雜交，收獲回交三代雜種BC3 F1與輪回親本種子，如此重復操作，直到收獲回交η代雜種，同時收獲回交η代雜種BCn F1與輪回親本；η取值依回交目的及回交后代與輪回親本相似程度決定；(5)種植回交η代雜種BCnF1與輪回親本；回交η代雜種在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株， 三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；選擇極似輪回親本抗性單株，按株單收成回交η代雜種二代BCn F2種子；(6)種植BCnF2各株系；回交η代F2在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測無Bar基因株與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株，抗性株單收建抗性株系；重復本步驟中的Bar基因檢測程序，選擇抗性不分離的抗性株系，分系與輪回親本進行小區(qū)對比，經系統(tǒng)鑒定，決選優(yōu)系，推薦參加品種比較試驗或作抗草銨膦新糯稻品種選育的核心親本。
3.根據(jù)權利要求1所述的抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法，其特征在于，其具體步驟如下(1)選擇一種配合力優(yōu)良，綜合農藝性狀優(yōu)良的三系或兩系恢復系作輪回親本，始終作母本，以攜帶Bar基因的同亞種糯性材料為供體材料，雜交獲得雜種Fl ；(2)種植雜交種Fl與輪回親本；雜種一代在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；以輪回親本為母本，與雜種一代抗性株雜交，收獲回交一代BC1 F1與輪回親本種子；(3)種植回交一代種BC1F1與輪回親本；BC1 F1在孕穗期，噴施1%體積分數(shù)的200克/ 升劑型的草銨膦藥液水溶液，檢測假雜種、無Bar基因的真雜種與基因沉默株，三天后割除葉片明顯發(fā)黃的單株，其余為抗性株；以0. 2克碘I2與2克碘化鉀KI，加IOOml蒸餾水，完全溶解，配成花粉染色液；選擇回交一代群體中長相似輪回親本的抗性單株10株，取剛出穗1/2-1/3的穗，帶回室內鏡檢；每穗取上中下各2朵穎花，取出其中花藥，置載玻片上，加花粉染色液一滴，搗破花藥，制片置 100倍放大倍數(shù)的顯微鏡下檢查；當視野中花粉染色明顯呈深淺分離時，則說明該單株為糯性基因雜合型，以輪回親本為母本，與回交一代有抗性且含有糯質基因株雜交，收獲回交一代BC2 F1與輪回親本種子；(4)種植回交二代種BC2F1與輪回親本；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，以輪回親本為母本，與回交二代有抗性且含有糯質基因株雜交，收獲回交三代BC3 F1與輪回親本種子；如此重復操作，直到回交η代，同時收獲回交η代雜種BCn F1與輪回親本，η 取值決定于回交目的及回交后代與輪回親本的相似程度；(5)種植回交η代雜種BCnF1與輪回親本；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，選擇含有糯質基因的抗性株，分株收獲成回交η代BCn F2各株系；(6)種植BCnF2各株系；采用步驟(3)中Bar基因與糯質基因檢測程序，糯質抗性株單收建抗性株系；再采用步驟(3)中Bar基因檢測程序，選擇抗性不分離的抗性株系，分系與輪回親本進行小區(qū)對比，經系統(tǒng)鑒定，決選優(yōu)系，用于配制抗草銨膦除草劑的雜交糯稻或作抗草銨膦新糯稻恢復系選育的核心親本。
4.根據(jù)權利要求3所述的抗滅生性除草劑糯稻品種快速選育法，其特征在于選擇應用糯稻三系或兩系不育系與抗草銨膦糯稻恢復系，配制雜交組合。
全文摘要
本發(fā)明是一種抗滅生性除草劑糯稻品種的選育方法，其特征在于它以回交手段將抗滅生性除草劑草銨膦基因與糯質基因融合，選育適于直播，易除草、除雜的糯型常規(guī)水稻品種。本發(fā)明還進一步公開了水稻糯型抗滅生性除草劑恢復系的育種方法，以選育雜交糯稻組合。以回交方法育成材料可作為親本進一步選育新的抗滅性除草劑糯稻新品種或雜交組合。應用本發(fā)明系列方法可以快速選育目標市場中可推廣的抗滅生性除草劑糯稻品種或組合，它可適應水稻直播要求；有效防止糯稻品種混雜事故；簡化水稻田間除草技術；保證種子質量。
文檔編號A01H1/02GK102396415SQ20111026028
公開日2012年4月4日 申請日期2011年9月5日 優(yōu)先權日2011年9月5日
發(fā)明者劉耀鴻, 劉艷, 劉金波, 徐大勇, 方兆偉, 樊繼偉, 潘啟民, 王寶祥, 秦德榮, 陳庭木 申請人:連云港市農業(yè)科學院