專利名稱：一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)及鑒定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食用菌領(lǐng)域，特別是一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)及鑒定方法。
背景技術(shù)：
木耳是一種味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，可素可葷的食用菌，不僅能為中國(guó)菜肴大添風(fēng)采，而且能養(yǎng)血駐顏，令人肌膚紅潤(rùn)，容光煥發(fā)，可防治缺鐵性貧血，還具有其他藥用功效。 毛木耳生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)一種白色變異菌種，而現(xiàn)有技術(shù)不能很好地鑒定此菌種且不能使此菌種穩(wěn)定遺傳下去。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的即在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確地對(duì)白色毛木耳變異菌株的菌種進(jìn)行分離培養(yǎng)及鑒定的方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)及鑒定方法，它包括菌種分離培養(yǎng)和菌種鑒定兩個(gè)步驟，其中，所述的菌種分離培養(yǎng)包括以下步驟
(1)配制加富PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯15 25，麥麩5 7，葡萄糖1 3，瓊脂1 3，水90 110 ；
(2)白色耳片獲取從栽培的毛木耳“琥珀木耳”品種中挑選白色耳片；
(3)分離培養(yǎng)將挑選出的白色耳片去除表皮，并切取耳片內(nèi)部組織塊放在加富PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為22 ，菌絲體生長(zhǎng)長(zhǎng)度達(dá)到2 3cm時(shí)，選擇無(wú)雜菌感染的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，取前端菌絲體進(jìn)行培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后即為菌種，編號(hào)為APW2010， 并將其放入冷藏裝置內(nèi)4 6°C下保藏；
所述的菌種鑒定包括以下拮抗鑒定步驟
拮抗鑒定將APW2010與“琥珀木耳”菌種同時(shí)接種在PDA平板培養(yǎng)基上，相距2 3cm， 在25 條件下培養(yǎng)8 10天，再在光照強(qiáng)度300 500Lx環(huán)境下培養(yǎng)5 7天，與 “琥珀木耳”菌種接觸部位出現(xiàn)隆起拮抗線的菌種即可判為白色變異菌種。所述的菌種鑒定還包括以下出耳鑒定步驟
(1)培養(yǎng)基配制與菌種培養(yǎng)培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制棉籽殼觀 35，麩皮 2 5，水6(Γ70，菌種培養(yǎng)方法是將裝有上述培養(yǎng)基的培養(yǎng)器經(jīng)高壓滅菌或者常壓滅菌后， 接種培養(yǎng)，在22 25°C下培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行出耳鑒定；
(2)出耳鑒定將菌種瓶或者菌種袋的口上覆蓋物去除，溫度20 25°C，空氣相對(duì)濕度為90 95%，光照強(qiáng)度100 300Lx，耳片仍為白色的菌種即可判為白色變異菌種。所述的冷藏裝置包括冰箱；所述的培養(yǎng)器為750mL的玻璃瓶或折徑為17cm、長(zhǎng)度為33cm的塑料袋。本發(fā)明的有益效果是能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)白色毛木耳變異菌株的菌種進(jìn)行分離培養(yǎng)及鑒定，具有簡(jiǎn)便、實(shí)用等特點(diǎn)。本發(fā)明生物材料樣品保藏單位名稱為中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏單位地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏日期為2011年04月08 日，保藏編號(hào)為CGMCCNo. 4715，分類命名為毛木耳Auricularia Polytricha0
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述 實(shí)施例1
一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)與鑒定方法，它包括菌種分離培養(yǎng)和菌種鑒定兩個(gè)步驟，其中，所述的菌種分離培養(yǎng)包括以下步驟
(1)配制加富PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯15，麥麩5，葡萄糖 1，瓊脂1，水110 ；
(2)白色耳片獲取從栽培的毛木耳“琥珀木耳”品種中挑選白色耳片；
(3)分離培養(yǎng)將挑選出的白色耳片去除表皮，并切取耳片內(nèi)部組織塊放在加富PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為22°C，菌絲體生長(zhǎng)長(zhǎng)度達(dá)到2cm時(shí)，選擇無(wú)雜菌感染的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，取前端菌絲體進(jìn)行培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后即為菌種，編號(hào)為APW2010，并將其放入冰箱內(nèi)4°C下保藏；
所述的菌種鑒定包括一個(gè)拮抗鑒定步驟
拮抗鑒定將APW2010與“琥珀木耳”菌種同時(shí)接種在PDA平板培養(yǎng)基上，相距2cm，在 25°C條件下培養(yǎng)8天，再在光照強(qiáng)度300Lx環(huán)境下培養(yǎng)5天，與“琥珀木耳”菌種接觸部位出現(xiàn)隆起拮抗線的菌種即可判為白色變異菌種。所述的菌種鑒定還包括以下出耳鑒定步驟
(1)培養(yǎng)基配制與菌種培養(yǎng)培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制棉籽殼觀，麩皮2，水 70，菌種培養(yǎng)方法是用750mL玻璃瓶或者折徑為17cm、長(zhǎng)度為33cm的塑料袋作為培養(yǎng)器裝培養(yǎng)基，經(jīng)高壓滅菌或者常壓滅菌后，接種培養(yǎng)，在22°C下培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行出耳鑒定；
(2)出耳鑒定將菌種瓶或者菌種袋的口上覆蓋物去除，溫度20°C，空氣相對(duì)濕度為 90%，光照強(qiáng)度lOOLx，耳片仍為白色的菌種即可判為白色變異菌種。實(shí)施例2:
一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)與鑒定方法，它包括菌種分離培養(yǎng)和菌種鑒定兩個(gè)步驟，其中，所述的菌種分離培養(yǎng)包括以下步驟
(1)配制加富PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯20，麥麩6，葡萄糖 2，瓊脂2，水100 ；
(2)白色耳片獲取從栽培的毛木耳“琥珀木耳”品種中挑選白色耳片；
(3)分離培養(yǎng)將挑選出的白色耳片去除表皮，并切取耳片內(nèi)部組織塊放在加富PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為^°C，菌絲體生長(zhǎng)長(zhǎng)度達(dá)到3cm時(shí)，選擇無(wú)雜菌感染的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，取前端菌絲體進(jìn)行培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后即為菌種，編號(hào)為APW2010，并將其放入冰箱內(nèi)6°C下保藏；
所述的菌種鑒定包括一個(gè)拮抗鑒定步驟拮抗鑒定將APW2010與“琥珀木耳”菌種同時(shí)接種在PDA平板培養(yǎng)基上，相距3cm，在條件下培養(yǎng)10天，再在光照強(qiáng)度500Lx環(huán)境下培養(yǎng)7天，與“琥珀木耳”菌種接觸部位出現(xiàn)隆起拮抗線的菌種即可判為白色變異菌種。所述的菌種鑒定還包括以下出耳鑒定步驟
(1)培養(yǎng)基配制與菌種培養(yǎng)培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制棉籽殼35，麩皮5，水 60，菌種培養(yǎng)方法是用750mL玻璃瓶或者折徑為17cm、長(zhǎng)度為33cm的塑料袋作為培養(yǎng)器裝培養(yǎng)基，經(jīng)高壓滅菌或者常壓滅菌后，接種培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行出耳鑒定；
(2)出耳鑒定將菌種瓶或者菌種袋的口上覆蓋物去除，溫度25°C，空氣相對(duì)濕度為 95%，光照強(qiáng)度300Lx，耳片仍為白色的菌種即可判為白色變異菌種。實(shí)施例3:
一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)與鑒定方法，它包括菌種分離培養(yǎng)和菌種鑒定兩個(gè)步驟，其中，所述的菌種分離培養(yǎng)包括以下步驟
(1)配制加富PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯25，麥麩7，葡萄糖 3，瓊脂3，水90 ；
(2)白色耳片獲取從栽培的毛木耳“琥珀木耳”品種中挑選白色耳片；
(3)分離培養(yǎng)將挑選出的白色耳片去除表皮，并切取耳片內(nèi)部組織塊放在加富PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25°C，菌絲體生長(zhǎng)長(zhǎng)度達(dá)到2. 5cm時(shí)，選擇無(wú)雜菌感染的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，取前端菌絲體進(jìn)行培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后即為菌種，編號(hào)為APW2010，并將其放入冰箱內(nèi)5°C下保藏；
所述的菌種鑒定包括一個(gè)拮抗鑒定步驟
拮抗鑒定將APW2010與“琥珀木耳”菌種同時(shí)接種在PDA平板培養(yǎng)基上，相距2. 5cm, 在27°C條件下培養(yǎng)9天，再在光照強(qiáng)度400Lx環(huán)境下培養(yǎng)6天，與“琥珀木耳”菌種接觸部位出現(xiàn)隆起拮抗線的菌種即可判為白色變異菌種。所述的菌種鑒定還包括以下出耳鑒定步驟
(1)培養(yǎng)基配制與菌種培養(yǎng)培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制棉籽殼31.5，麩皮3. 5， 水65，菌種培養(yǎng)方法是用750mL玻璃瓶或者折徑為17cm、長(zhǎng)度為33cm的塑料袋作為培養(yǎng)器裝培養(yǎng)基，經(jīng)高壓滅菌或者常壓滅菌后，接種培養(yǎng)，在下培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后， 進(jìn)行出耳鑒定；
(2)出耳鑒定將菌種瓶或者菌種袋的口上覆蓋物去除，溫度23°C，空氣相對(duì)濕度為 93%，光照強(qiáng)度200Lx，耳片仍為白色的菌種即可判為白色變異菌種。
權(quán)利要求
1.一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)與鑒定方法，其特征在于它包括菌種分離培養(yǎng)和菌種鑒定兩個(gè)步驟，其中，所述的菌種分離培養(yǎng)包括以下步驟(1)配制加富PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制馬鈴薯15 25，麥麩5 7，葡萄糖1 3，瓊脂1 3，水90 110 ；(2)白色耳片獲取從栽培的毛木耳“琥珀木耳”品種中挑選白色耳片；(3)分離培養(yǎng)將挑選出的白色耳片去除表皮，并切取耳片內(nèi)部組織塊放在加富PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為22 ，菌絲體生長(zhǎng)長(zhǎng)度達(dá)到2 3cm時(shí)，選擇無(wú)雜菌感染的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，取前端菌絲體進(jìn)行培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后即為菌種，編號(hào)為APW2010， 并將其放入冷藏裝置內(nèi)4 6°C下保藏；所述的菌種鑒定包括以下拮抗鑒定步驟拮抗鑒定將APW2010與“琥珀木耳”菌種同時(shí)接種在PDA平板培養(yǎng)基上，相距2 3cm， 在25 條件下培養(yǎng)8 10天，再在光照強(qiáng)度300 500Lx環(huán)境下培養(yǎng)5 7天，與 “琥珀木耳”菌種接觸部位出現(xiàn)隆起拮抗線的菌種即可判為白色變異菌種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)與鑒定方法，其特征在于所述的菌種鑒定還包括以下出耳鑒定步驟(1)培養(yǎng)基配制與菌種培養(yǎng)培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制棉籽殼觀 35，麩皮 2 5，水6(Γ70，菌種培養(yǎng)方法是將裝有上述培養(yǎng)基的培養(yǎng)器經(jīng)高壓滅菌或者常壓滅菌后， 接種培養(yǎng)，在22 25°C下培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行出耳鑒定；(2)出耳鑒定將菌種瓶或者菌種袋的口上覆蓋物去除，溫度20 25°C，空氣相對(duì)濕度為90 95%，光照強(qiáng)度100 300Lx，耳片仍為白色的菌種即可判為白色變異菌種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)與鑒定方法，其特征在于所述的冷藏裝置包括冰箱。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)與鑒定方法，其特征在于所述的培養(yǎng)器為750mL的玻璃瓶。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)與鑒定方法，其特征在于所述的培養(yǎng)器為折徑為17cm、長(zhǎng)度為33cm的塑料袋。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種白色毛木耳變異菌株的菌種分離培養(yǎng)及鑒定方法，它包括菌種分離培養(yǎng)和菌種鑒定兩個(gè)步驟，其中，菌種分離培養(yǎng)包括以下步驟(1)配制加富PDA培養(yǎng)基；(2)白色耳片獲取；(3)分離培養(yǎng)，所述的菌種鑒定包括拮抗鑒定和出耳鑒定兩種方法。本發(fā)明能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)白色毛木耳變異菌株的菌種進(jìn)行分離培養(yǎng)及鑒定，具有簡(jiǎn)便、實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A01G1/04GK102293124SQ201110216060
公開(kāi)日2011年12月28日 申請(qǐng)日期2011年7月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月30日
發(fā)明者王波, 甘炳成, 鮮靈, 黃忠乾 申請(qǐng)人:四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所