專利名稱：一種北冬蟲夏草菌種液體擴(kuò)增技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
生物技術(shù)
背景技術(shù)：
據(jù)報(bào)道，現(xiàn)階段北冬蟲夏草的栽培都是通過固體菌絲擴(kuò)增，利用固體菌種進(jìn)行再培養(yǎng)。如北冬蟲夏草高產(chǎn)栽培與蟲草新產(chǎn)品加工技術(shù)(申請(qǐng)(專利)號(hào) 01128033. 6)；北冬蟲夏草人工培育的新工藝(申請(qǐng)(專利)號(hào)92109225.幻中所提栽培方法都為固體菌種栽培法；一種北冬蟲夏草液體菌種的生產(chǎn)方法(申請(qǐng)(專利)號(hào) 200910103625. X)報(bào)道了北冬蟲夏草液體菌種生產(chǎn)方法，但其局限在于實(shí)驗(yàn)程序繁多易于交叉感染，并且其對(duì)于生產(chǎn)出的菌種質(zhì)量缺乏檢驗(yàn)步驟，無法保證菌種質(zhì)量。本技術(shù)發(fā)明了北冬蟲夏草菌種液體擴(kuò)增技術(shù)，做到菌種循環(huán)利用，不僅有效降低傳統(tǒng)菌種培養(yǎng)法所發(fā)生的交叉感染，而且增加了菌種質(zhì)量檢測(cè)步驟，保證了擴(kuò)增后的菌種質(zhì)量，為子實(shí)體的培養(yǎng)打好基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
1、本發(fā)明目的表述發(fā)明北冬蟲夏草菌種液體擴(kuò)增技術(shù)，減少北冬蟲夏草栽培污染率，縮短北冬蟲夏草栽培周期。2、本發(fā)明的詳細(xì)描述第一步配置菌種液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基配方磷酸二氫鉀2. 5g，七水硫酸鎂3g，蛋白胨10g，葡萄糖300g，可溶性淀粉30g(白面、大米或馬鈴薯)維生素Bl (VB1)IOmg,蒸餾水1050ml.培養(yǎng)基配置方法1)取 1050ml 水，煮開；2)待沸水溫度降到30°C以下后，分別將可溶性藥物加人到煮開的沸水中；3)將調(diào)成糊狀的可溶性淀粉徐徐加人到上述液體中；4)用5 %的鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6 ；5)將上述配置好的液體分裝在玻璃瓶或者實(shí)驗(yàn)瓶中；6)將分裝好的液體進(jìn)行滅菌，滅菌條件為121°C，1. 5P的壓力下15分鐘。第二步接種1)用配置好的75%的酒精進(jìn)行噴灑超凈工作臺(tái)，然后打開超凈工作臺(tái)紫外燈進(jìn)行滅菌。2)等超凈工作臺(tái)里的紫外燈打開15分鐘后，將超凈工作臺(tái)里的滅菌爐打開；3)將配置好的液體培養(yǎng)基和北冬蟲夏草固體菌種以及所用工具放置到滅過菌的超凈工作臺(tái)臺(tái)面上，并進(jìn)行酒精噴灑消毒。4)用鑷子將固體菌種菌絲挑到液體培養(yǎng)基表面，蓋好瓶蓋即可。第三步培養(yǎng)環(huán)境1)將接種好的培養(yǎng)基放置到搖床上，設(shè)置搖床轉(zhuǎn)速為120-140r/s。2)調(diào)節(jié)環(huán)境溫度到20-25°C，濕度到80-90%3)進(jìn)行暗培養(yǎng)5-6天，當(dāng)看到培養(yǎng)基絮狀時(shí)即可終止培養(yǎng)。第四步菌種檢測(cè)選擇性地挑幾瓶于散射光下放置。如果3 — 7d氣生菌絲轉(zhuǎn)為金黃色，這表明此菌種種性優(yōu)良、結(jié)實(shí)能力很強(qiáng)，可以放心使用，否則應(yīng)慎用。第五步擴(kuò)增1)將優(yōu)良菌種按照1 100再次接種到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。幻重復(fù)本步準(zhǔn)第四項(xiàng)，將挑選出的優(yōu)良菌種按1 50與無菌水對(duì)匯，即可接種固體培養(yǎng)基上進(jìn)行實(shí)體培養(yǎng)。3、本發(fā)明有益的效果本發(fā)明不僅縮短了北冬蟲夏草三分之一的培養(yǎng)周期，而且有效避免了北冬蟲夏草栽培過程中所發(fā)生的交叉感染，提高北冬蟲夏草的栽培效率的同時(shí)有利于技術(shù)的推廣應(yīng)用。
具體實(shí)施例方式1、挑選優(yōu)良固體菌種。2、利用北冬蟲夏草固體菌種進(jìn)行液體擴(kuò)增。3、帥選優(yōu)良的液體菌種。4、對(duì)優(yōu)良液體菌種進(jìn)行擴(kuò)增。5、對(duì)擴(kuò)增后的菌種進(jìn)行帥選。6、將優(yōu)良液體菌種和無菌水1 50對(duì)匯，即可接種培養(yǎng)子實(shí)體。
權(quán)利要求
1.北冬蟲夏草菌種液體培養(yǎng)基配方。
2.北冬蟲夏草菌種液體培養(yǎng)基配置方法。
3.北冬蟲夏草菌種液體擴(kuò)增技術(shù)培養(yǎng)環(huán)境。
4.北冬蟲夏草液體菌種檢測(cè)技術(shù)。
全文摘要
一種北冬蟲夏草菌種液體擴(kuò)增技術(shù)，屬生物技術(shù)領(lǐng)域，本技術(shù)解決了北冬蟲夏草菌種傳統(tǒng)生產(chǎn)技術(shù)周期長(zhǎng)、易交叉污染的缺點(diǎn)，而且發(fā)明了北冬蟲夏草液體菌種檢測(cè)技術(shù)，保證擴(kuò)增出的菌種質(zhì)量。包括如下步驟(1)北冬蟲夏草固體菌種接種于專用液體菌種培養(yǎng)基中在特點(diǎn)條件下進(jìn)行培養(yǎng)；(2)對(duì)步驟(1)培養(yǎng)的菌液進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)；(3)對(duì)優(yōu)良菌種進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)；(4)對(duì)擴(kuò)增的菌種進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)；(5)將優(yōu)良菌種與無菌水按1∶100對(duì)匯，即得北冬蟲夏草液體菌種，用于接種栽培北冬蟲夏草子實(shí)體。
文檔編號(hào)A01G1/04GK102523908SQ20101057837
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2010年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月8日
發(fā)明者解竣文 申請(qǐng)人:解竣文